全 文 ：文章编号:0490-6756(2001)06-0938-03
不同生长时期瑞香狼毒灭蚜活性的研究
侯太平 ,陆海荣 ,崔球
(四川大学生命科学学院·草原鼠虫病害生物防治国家专业实验室 ,成都 610064)
瑞香狼毒(Stel lera chamaejasme L .)是一种生长在草原上的有毒植物.主要分布于我国东北 、华北 、西南
及宁夏 、西藏等地 ,为多年生草本植物[ 1] .四川省瑞香狼毒主要生长于阿坝 、红原 、若尔盖等地海拔 2300 ～
4600m的山坡 、河谷 、丘陵石质坡地 、向阳草甸 、亚高山 、高山草甸 、河漫滩地的劣质草场中[ 2] .
瑞香狼毒始载于《神农本草经》 ,与大戟科植物狼毒大戟 、月腺大戟同作狼毒入药 ,其性味苦平 、有毒 ,有
逐水祛痰 、破积杀虫之功效[ 3] .近年来 ,狼毒在肿瘤 、结核病 、皮肤病方面的治疗作用已引起人们的重视.对
瑞香狼毒的化学成分亦有报道[ 4 ,5] .目前 ,从瑞香狼毒中可分离得 4类化合物 ,即黄酮类 、香豆素类 、木质体 、
二萜类化合物.其中黄酮类化合物是二氢黄酮的二聚体双氢双黄酮 ,从瑞香狼毒中获得的香豆素均为伞形花
内酯的衍生物.
由文[ 6]报道 ,狼毒根中含有高活性的灭蚜物质 ,对主要农作物蚜虫均具有很好的杀灭效果 ,实验结果表
明瑞香狼毒可作为一种植物源灭蚜剂的生产原料.我们为了确定最佳的采收期 ,分别考察了在高寒草原可能
采收期 4 ～ 8月的瑞香狼毒的灭蚜活性 ,为今后的大规模开发利用提供依据.
1　材料与仪器
1.1　材料
1.1.1　瑞香狼毒　采自四川若尔盖草原(时间:4月 ,6月 , 8月).
1.1.2　实验昆虫　用采用未经喷洒农药的田间棉花植叶上的蚜虫.
1.1.3　试剂　硅胶 GF254 ,硅胶 H(60型)由青岛海洋化工集体公司提供;其余试剂均为分析纯.
1.1.4　仪器　旋转薄膜蒸发仪ZX-91 ,中国科学院上海有机化学研究所制造;薄层自动铺板器 ,重庆南岸新
力实验电器厂;三用紫外线分析仪 ,上海顾村电光仪器厂;UVP Gel Documcltalion and Analysis System ,英国
UVP 公司制造.
1.2　实验方法
1.2.1　瑞香狼毒的采集　选择晴天 ,在上午 10点后(露水已干)采集 ,记录生长情况 、周围环境特征及气候
条件 ,确定采集目标为瑞香狼毒 ,瑞香科狼毒属.相似种大戟狼毒.采集地点在四川若尔盖的巴西农区.
1.2.2　预处理　将狼毒根茎洗净 ,切成碎片 ,放入鼓风式烘箱内 60℃下烘 2d.用粉粹机粉碎成绒毛状粉末.
1.2.3　灭蚜活性物质的提取与粗分离　对瑞香狼毒中灭蚜活性成分的提取与分离 ,按文[ 7]的方法进行.
1.2.4　生物活性测定　根据张宗炳介绍的方法[ 8] ,采用直接浸液法测定毒力.采集虫口密度大的叶片 ,修
剪成小叶块 ,剔除若蚜及有翅成蚜 ,留下 30 ～ 50 头健康无翅成蚜.取 1mL 样品 ,烘干 ,在分析天平上精确称
量 ,得出样品的百分含量.取 1mL样品与等量乳化剂混匀 、乳化 ,再用蒸馏水梯度稀释 1000 ,2000 , 3000倍.
以乳化剂作阴性对照.将修剪好的带虫叶片浸入各药液中 ,待叶片全部浸入药液 3s后 ,取出叶片 ,沥干 ,将带
虫面向上置于铺有滤纸的 15 培养皿中.待表面水挥发干后 ,合上皿盖防止蚜虫爬失 ,置温室(25℃)中于
24h及 48h后观察结果.
1.2.5　薄层层析检测　用薄层层析硅胶 GF254作吸附层析固定相 ,在薄层自动铺板器上按常规方法铺板.
玻板尺寸:10cm×20cm ,硅胶厚度:0.5mm.将铺好的板子放入烘箱中 ,105℃下烘 0.5h ,冷却后存放在干燥
收稿日期:2000-02-06
基金项目:国家自然科学基金(29902006)
2001年 12月
第 38卷第 6期
四川大学学报(自然科学版)
Journal of Sichuan Universi ty (Natural Science Edition)
Dec.2001
Vol.38　No.6
器中待用.用点样毛细管点样.以正己烷与乙酸乙酯 30∶1的混合溶剂作展开剂.展层后以 254nm 紫外分析
灯检测谱带 ,用 UVP Gel Documcnlation and Analysis System进行薄层照相.
2　结果与讨论
2.1　瑞香狼毒的提取及粗分离得率
瑞香狼毒根粉经乙醇浸提 、浓缩和正己烷萃取处理后 ,把乙醇浓缩液和正己烷浓缩液各取 1mL ,干燥 ,
称重 ,计算百分含量 ,结果如附表.
附表　乙醇浸提 、正己烷萃取得率
采集月份 处理液 样品溶液量(mL) 样品含量(g/m L) 百分含量(%)＊
4 月 乙醇　 150 0.5100 5.100正己烷 18 0.6850 0.822
6 月 乙醇　 270 0.297 5.378正己烷 22 0.5838 0.856
8 月 乙醇　 205 0.3994 5.458正己烷 26 0.4902 0.849
　　　　　　＊百分含量=样品重量/狼毒粉重量(1.5kg)×100%
由附表可知 ,8月份样品的乙醇浸提得率比 4月份样品多 6%、比 6月份样品多 2%,6 月份样品的正己
烷萃取得率比 8月份样品多 0.8%、比 4月份样品多 4%.
2.2　生物活性比较
测定不同时期瑞香狼毒提取样品的灭蚜活性 , 按以下公式计算校正死亡率:校正死亡率(%)=
处理死亡率(%)-对照死亡率(%)
100(%)-对照死亡率(%) ×100(%).结果如图 1所示.
图 1　不同月份样品的灭蚜活性
由图 1可知 ,8月份样品在稀释1000倍时的灭蚜活性比 4月份 、6月份样品均高15.2%,在稀释 2000倍
时的灭蚜活性比 4月份样品高 15.7%、比 6月份样品高 23.7%,在稀释 4000倍时的灭蚜活性比 4月份样品
高 34.8%、比 6月份高 43.8%.结果表明 ,8月份采集的瑞香狼毒所含灭蚜物质的活性较高.
2.3　薄层检测有效成分分析
对经过粗分离的样品 ,再进行 TLC分离 ,并与活性成分纯品比较 ,快速判定不同时期植物活性成分的相
对含量 ,结果如图 2所示.
　　由图 2可知 ,8月份的样品同样显示了较高的有效成分含量.因此 ,通过以上的研究分析 ,我们认为作为
灭蚜农药材料瑞香狼毒的最佳采收期为 8月.
939第 6期 侯太平等:不同生长时期瑞香狼毒灭蚜活性的研究
图 2　薄层层析检测图(展层剂　正己烷:乙酸乙酯 30∶1)
1道为 4月的样品 、2道为 6月的样品 、3道为 8月的样品
参考文献:
[ 1] 史志诚.中国草地重要有毒植物[ M].北京:中国农业出版社 , 1997
[ 2] 杨宝印 , 等.瑞香狼毒治疗恶性肿瘤 54 例[ J] .中西医结合杂志 , 1989 , 9(11):683
[ 3] 赵奎君 , 徐国均.狼毒类中药对结核杆菌抗菌作用的比较[ J] .中国药科大学学报 , 1995 , 26(2):122
[ 4] 黄文魁 , 等.瑞香科狼毒中的双二氢黄酮狼毒素(Chamacjasmine)的结构[ J] .兰州大学学报(自然科学版), 1977.3(4):50
[ 5] Niwa M.et al.Structure o f isochamaesmin from stellra chamaejasmc L.[ J] .Chem.Lett , 1984.32(3):539
[ 6] 刘世贵 , 侯太平 ,等.草原有毒植物瑞香狼毒的利用研究.第二届国际绿色化学学术讨论会文集 , 1999.5.
[ 7] 侯太平 , 崔球 ,等.从瑞香狼毒中提取灭蚜活性物质的研究[ J].四川大学学报(自然科学版), 2001 , 38(5):744.
[ 8] 张宗炳.杀虫药剂的毒力测定[ J] .北京:科学出版社 , 1988.
A STUDY ON APHID-KILLING COMPONENTSOF STELLERA
CHAMAEJASME L.GROWING IN DIFFERENT STAGES
HOU Tai-ping , LU Hai-rong , CUI Qiu
(College of Life Science·National Lab.of Grassland Biological Control , Sichuan University , Chengdu 610064 ,
China)
940 四川大学学报(自然科学版) 第 38卷