全 文 ：北方园艺 2009(8):121 ～ 123 ·研究简报 ·
第一作者简介:庾韦花(1977-), 女, 广西永福人 , 硕士, 助理研究
员,现主要从事生物技术育种工作。 E-mail:yuweihua-nn@126.
com。
收稿日期:2009-03-25
白花败酱组织培养及快速繁殖研究
庾韦 花 , 张 向军 , 蒙 　平 , 蒋 慧萍 , 陈少 珍
(广西农业科学院 ,广西南宁 530007)
　　摘　要:选取长势较好 、无病害野生白花败酱植株的茎尖及茎段作为外植体进行组织培养 ,
以MS为基本培养基 ,设计不同激素浓度配比试验 ,筛选最佳培养基配方。结果表明:采用 0.1%
HgCl2对外植体进行消毒 ,茎尖最佳消毒时间为 10 min ,茎段为 15 min;最佳诱导培养基配方是
MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/ L ,诱导率100%,增殖培养基 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA
0.2 mg/L ,增殖倍数 7.8;生根壮苗培养基是MS+NAA 1 mg/ L+马铃薯5%。
关键词:白花败酱;茎尖;茎段;诱导;生根
中图分类号:S 647.03.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2009)08-0121-03
　　白花败酱别名苦菜 、鹿肠等 ,为败酱科多年生草本
植物 ,是一种药食两用的野生蔬菜[ 1] ,全草均可入药 ,具
有清热利湿 ,解毒排脓等功效 ,常用于治疗阑尾炎 、肝
炎、扁桃体炎等症[ 2] 。以嫩茎叶作蔬菜 ,其味甘甜 ,凉拌 、
热炒或作汤为佳。白花败酱营养价值很高 ,含有丰富的
蛋白质 、氨基酸 、维生素及微量元素[ 3] ,目前白花败酱虽
然分布广 ,野生资源颇为丰富 ,但在开发利用时应本着
可持续发展的原则 ,避免对自然资源和生态环境造成破
坏 ,提倡人工栽培白花败酱 ,达到永续利用的目的 ,为了
提高繁殖速度 ,选择优良的野生白花败酱植株 ,取其茎
段进行组织培养。广西农业科学院生物研究室于 2007
年开始对野生白花败酱植株进行组织培养 ,筛选最佳消
毒时间与培养基配方 ,掌握整套组培快繁技术 ,对开发
利用天然植物资源及扩大种植等方面有重要意义。
1　材料与方法
1.1　研究材料
来源于广西全州的野生白花败酱 ,现由广西农业科
学院生物所采集在大棚种植。
1.2　培养条件
培养室温度 28 ～ 30℃,每天光照时间10 h ,光照强
度1 500 lx左右 ,25 ～ 30 d继代 1次 ,至第 6代进行生
根、练苗及移栽。
1.3　方法
1.3.1　消毒　选取长势较好 、无病害优良植株茎尖及中
间茎段 ,剪掉叶片后用洗衣粉清洗掉表层的污泥 ,清水
冲洗 3 ～ 4次 ,用 75%酒精消毒 10 s ,无菌水冲洗 2 ～ 3
次 ,再用 0.1%HgCl2进行消毒 ,分为 10 、13 、15 min 3种
处理 ,消毒后立即用无菌水清洗 3 ～ 4次即可接入培养
基中。
1.3.2　接种　茎尖与茎段分开消毒 、接种 ,每瓶培养基
接 2 ～ 3个外植体 ,每条茎段留 1个节 ,每个处理接 15
瓶 ,每隔10 d观察 1次结果 ,筛选最佳培养基配方。
1.3.3　筛选诱导与增殖的培养基　1 ～ 10号培养基分
别进行诱导与增殖培养试验 ,各培养基加 3%蔗糖和
0.47%琼脂 ,pH 5.8。
　　表 1 诱导丛生芽的培养基
MS 处理 激素配比/mg·L-1
NAA 6-BA
1 0.1 0.5
2 0.1 1
3 0.1 2
4 0.1 3
5 0.2 0.5
6 0.2 1
7 0.2 2
8 0.2 3
9 0.5 1
10 0.5 2
1.3.4　诱导生根壮苗的培养基　将高度长至 3 ～ 5 cm
的植株切下转入生根壮苗培养基 ,各培养基加 3%蔗糖
和 0.47%琼脂 ,pH 5.8。
　　表 2 诱导生根壮苗的培养基
MS 处理 激素浓度/ mg·L-1
NAA
附加物
1 0.5 无
2 1 无
3 2 无
4 1 5%马铃薯
5 2 5%马铃薯
1.3.5　计算　污染率=(污染外植体个数/外植体总个
数)×100%;萌动率=(萌动外植体个数/外植体总个
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·研究简报· 北方园艺 2009(8):121～ 123
数-污染外植体个数)×100%;芽诱导率=(产生丛生芽
外植体个数/外植体总个数)×100%。
2　结果与分析
2.1　不同消毒时间对不同外植体的消毒效果
从表 3可以看出 ,在 10 min处理中 ,茎尖污染率为
10%,萌动率达到 98%,13 min和 15 min 2个处理污染
率分别为 8%、2%,但其萌动率均低于 85%;茎段在10 、
13 、15 min 3个处理中 ,萌动率均达到 90%以上 ,但前 2
个处理的污染率较高 ,分别为 22%和 12%,因此茎尖最
佳消毒时间为 10 min ,茎段最佳消毒时间为 15 min。
　　表 3　不同消毒时间对不同外植体的消毒效果
外植体
类型
10 min 13 min 15 min
污染率/ % 萌动率/ % 污染率/ % 萌动率/ % 污染率/ %萌动率/ %
茎尖 10 98 8 82 2 66
茎段 22 100 12 96 4 92
　　表 4 不同培养基对诱导丛生芽的影响
组别 外植体数/个 增殖倍数 芽诱导率/ % 有无玻璃化现象
1 18 0.9 61.1 无
2 21 1.4 90.5 有
3 22 3.6 95.5 有
4 23 4.5 100 有
5 20 1.9 85.0 无
6 20 5.1 90.0 有
7 18 7.8 98.0 有
8 20 2.6 95.0 有
9 17 2.9 76.5 有
10 23 3.9 82.6 有
2.2　诱导丛生芽培养基的筛选
从表 4可以看出 ,10种诱导培养基中 ,4号培养基
芽诱导率 100%,高于其它 9种培养基(见图 1);7号培
养基平均增殖倍数为 7.8 ,其次是 4号培养基与 6号培
养基 ,增殖倍数均达到 4.5以上 ,除了 1号和 5号培养
基 ,其它8种培养基所诱导的丛生芽均不同程度的发生
玻璃化现象。
2.3　继代生长过程
用 7 号培养基 MS +6-BA 2 mg/ L +NAA 0.2
mg/L 进行增殖效果最好 ,接种 10 d后茎尖或茎段基部
开始膨大 ,侧芽开始萌动生长;20 d左右 ,基部产生棉团
状的愈伤组织 ,部分愈伤组织逐渐分化出小苗;30 d后 ,
茎基部愈伤组织分化出大量小苗 ,增殖倍数多则达到
10 ～ 15倍(见图 2);40 d观察时 ,大部分幼苗已顶住瓶
盖 ,部分幼苗茎尖有萎蔫现象 ,因此每隔 25 ～ 30 d继代
一次最为合适。
2.4　生根壮苗培养基筛选
从表 5可以看出 ,加上马铃薯附加物的 5号培养基
生根壮苗效果最佳 ,生根速度较其它 4种培养基快 ,茎
增粗效果最为明显 ,有的茎粗达到原来的 2倍 ,无玻璃
化苗(见图3)。
　　表 5 不同培养基类型的筛选效果
组别 根数 材料生长状况
1 5 20 d开始长根,苗细长,茎不增粗 ,无玻璃化苗
2 7 18 d开始长根,苗细长,茎不增粗 ,产生玻璃化苗
3 8 15 d开始长根,少量苗出现玻璃化,茎不增粗
4 6 17 d开始长根,茎增粗,无玻璃化苗
5 10
15 d开始长根,30 d后平均生根数达到10条 ,
茎增粗明显 ,无玻璃化苗
图 1　诱导丛生芽培养基的筛选
图2 继代培养过程
图 3 生根壮苗
3　讨论
同一植物不同器官和不同着生部位 ,继代繁殖能力
不相同[ 4] 。在该试验中 ,野生苦菜茎尖比茎段容易诱导
丛生芽和愈伤组织 ,同时 ,茎尖也比茎段容易消毒彻底 ,
因此 ,在建立无菌培养体系时 ,选择生长健壮 ,带病菌少
的茎尖进行培养较好。
激素浓度是影响玻璃化现象发生的重要原因之一 ,
高浓度的细胞分裂素有利于芽的分化 ,也会使玻璃化发
生比例提高[ 5] 。诱导培养基筛选实验中 ,只有 1号与 5
号低浓度激素水平的培养基诱导的丛生芽未产生玻璃化
苗 ,大部分培养基不同程度产生玻璃化苗 ,可见玻璃化苗
的产生跟 6-BA 与 NAA 浓度的变化较为密切。随着
6-BA与NAA用量的增加 ,玻璃化现象愈加严重 ,当 BA
浓度超过3 mg/L 时 ,诱导的丛生芽几乎 100%玻璃化。
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北方园艺 2009(8):123 ～ 125 ·研究简报 ·
Al浓度对枝管藻中性游孢子附着及生长发育的影响
朱清 华
(德州学院 生物系,山东 德州 253023)
　　摘　要:研究了 Al浓度对枝管藻中性游孢子附着以及生长发育的影响。孢子附着量用盘状
体的数目表示 ,盘状体生长速度 、生长状况及直立藻丝出现与否用以衡量盘状体的生长发育状
况。结果表明:在不同 Al浓度 0、0.5 、1、2 、4 mg/L中 ,最适宜孢子附着及生长发育的浓度为 0.5
mg/ L ,其次为0 、1、2 mg/L;在 5 mg/ L条件下 ,孢子附着量少 ,盘状体发育不正常 ,附着不牢固 ,不
能发育为直立藻丝;高于 4 mg/L ,无孢子附着。另外 ,在低 Al浓度条件下0 、0.5、1 、2 mg/ L ,中性
游孢子可最终发育成直立藻丝。
关键词:冈村枝管藻;Al;盘状体;中性游孢子;孢子体
中图分类号:Q 178.53　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2009)08-0123-03
　　冈村枝管藻(Cladosiphon okamuranus)原产于日本
的冲绳和汤加等地 ,属褐藻纲(Phaeophyceae)、索藻目
(Chordariales)、索藻科(Chordariaceae)。藻体有大量分
枝 ,呈柔软的丝状 ,褐色或深褐色 ,有藻腥味。从该藻中提
作者简介:朱清华(1978-),女, 山东泰安人 ,博士 ,讲师 ,现从事藻
类研究工作。
基金项目:农业部引进国际先进农业科学技术计划(948 计划)
资助项目(2003-Z104);德州学院人才引进资助项目(06rc011)。
收稿日期:2009-03-25
取的多糖具有抗凝血 、抗肿瘤 、抗病毒等生物活性[ 1-2] ,在
日本是最畅销的保健食品之一。
　　自20世纪以来 ,国内外学者就冈村枝管藻的形态[ 3]
和生态[ 4-5] 方面进行了研究。近几年来 ,国内外学者对于
该藻的研究主要集中营养价值和药用价值上[ 1-2] 。特殊
条件下该藻的生长发育状态至今未见报道。有关Al对
植物的毒害作用的研究已有较多报道[ 6-9] ,但对枝管藻的
作用未见报道。该试验研究了实验室条件下 Al浓度对
枝管藻中性游孢子附着及生长发育的影响 ,以期为枝管
藻的栽培及引种提供理论依据。
因此 ,在野生苦菜的组织培养中 ,细胞分裂素用量需要
特别注意 ,尽可能控制在 3 mg/ L或以下。而在生根壮
苗培养基中 ,添加 5%马铃薯附加物 ,未出现玻璃化现
象 ,这可能是培养基中的各种营养成分均衡 ,对减少玻
璃化的发生 、促进培养物的生长和发育有积极的作用。
参考文献
[ 1] 　卢寅熹.败酱草的本草考证[ J] .时珍国药研究 ,1996 ,7(3):129-130.
[ 2] 　陈炳华.白花败酱食疗价值高[ J] .植物杂志 , 2002(6):15.
[ 3] 　赵喜元,田珍.败酱草的紫外光谱鉴定[ J] .中国中药杂志, 1992 , 17
(7):394-396.
[ 4] 　张东方.植物组织培养技术[ M] .哈尔滨:东北林业大学出版社,
2005.
[ 5] 　许继宏,马玉芳 ,陈锐平 ,等.药用植物组织培养技术[ J] .北京:中国
农业科学技术出版社, 2004.
Tissue Culture and Rapid Propagation of Patrinia villasa Juss
YU Wei-hua ,ZHANG Xiang-jun ,MENG Ping , JIANG Hui-ping , CHEN Shao-zhen
(Guangxi Academy of Ag ricultural Sciences , Nanning , Guangxi 530007 , China)
Abstract:Took the shoot tips of well-grown , virus-free wild Patrinia vil lasa Juss as explants , the micropropagation sys-
tem of Patrinia vi llasa Juss was established.The research showed that , the prefer able sterilized protocol was to take 15
min of shoot length as explants , and surface sterilized with 0.1%HgCl2 solution for 10 min.The most effective induc-
tion and subculture media were MS basal medium supplemented with 3.0 mg/L BA and 0.1 mg/ L NAA which got
100%induction frequency , with 2.0 mg/L BA and 0.2 mg/ L NAA which got 7.8 times of proliferation separately.The
better rooting medium was MS basal medium supplemented with 1.0 mg/L NAA and 5%(w/v)mashed potato.
Keywords:Patrinia vil lasa Juss ;Stem tip and shoot;Induction;Rooting
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