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不同产地鸡血藤药材高效液相指纹图谱及芒柄花素含量分析



全 文 :鸡 血 藤 为 豆 科 植 物 密 花 豆 Spatholobus
suberectus Dunn 的干燥藤茎 [1], 是我国的传统中
药, 具有补血、 活血、 通络之传统功效, 一般用于
治疗月经不调、 血虚萎黄、 麻木瘫痪、 风湿痹痛等
症[2]。 文献报道鸡血藤主要含黄酮类活性成分, 且
多为异黄酮苷元 [3-4], 其中芒柄花素是含量较高的一
种异黄酮苷元, 具有抗脂质过氧化、 抑制螺杆菌等
活性[5-6]。 中药色谱指纹图谱具有整体性、 模糊性
和可量化的特点, 能够全面地反映中药的整体质
量, 已成为国际上公认的控制中药质量的有效手段[7]。
本研究采用高效液相色谱法对 24 批不同产地鸡血
藤药材的指纹图谱进行研究, 并对芒柄花素的含量
进行测定, 以期为鸡血藤药材质量控制提供科学方
法, 现报道如下。
1 实验材料
1. 1 仪器 Thermo Ultimate 3000 (美国赛默飞世
尔科技公司): 四元泵、 二极管阵列检测器、 自动
进样器、 Chromelen 色谱工作站; AcclaimTM 120 C18
(4.6 mm × 250 mm, 5 μm) 和 Feini Gen Red Classical
AQ-C18 (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) 色谱柱; BS224S
电子天平 (德国 Sartorius 公司 , 万分之一 ) ;
XR205SM-DR 电子天平 (瑞士 Precisa 公司, 十万
分之一 ); 超声波发生器 (昆山超声 KQ-700DE
40KHz 280 W); Milli-Q超纯水系统 (美国Millipore
公司) DGX-9073 鼓风干燥箱 (上海福玛公司)。
1. 2 试剂及药材 原儿茶酸 (批号 : 110809-
200604)、 儿茶素 (批号: 110877-201102)、 表儿
茶素 (批号: 110878-200102)、 染料木素 (批号:
111704 -200501) 和大豆苷元 (批号 : 111502 -
200101) 均购自中国食品药品检定研究院; 异甘草
素 (批号: Ys-z131214) 购自上海谷研生物科技有
限公司 ; 樱黄素 (批号 : 101317267) 购自美国
Sigma 公司; 芒柄花素 (批号: 05-2012, 纯度≥
980 mg/g) 购自上海中药标准化研究中心; 试剂均
为分析纯; 乙腈为色谱纯 (德国 Merk公司); 水为屈
臣氏蒸馏水。 鸡血藤药材饮片经广州中医药大学中药
资源科学与工程研究中心詹若挺研究员鉴定为豆科植
物密花豆 Spatholobus suberectus Dunn 的干燥藤茎,
密封保存于阴凉干燥处, 批号及生产厂家见表 1。
不同产地鸡血藤药材高效液相指纹图谱及芒柄花素含量分析
陈红英 1, 严萍 2, 张敏 2, 刘翠婷 2, 韩正洲 1, 詹若挺 2
[1. 华润三九医药股份有限公司, 广东深圳 518110; 2. 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心, 教育部 (省部共建)
岭南中药资源科学重点实验室, 广东广州 510006]
收稿日期: 2015-04-13
作者简介: 陈红英 (1974-), 女, 高级工程师; E-mail: chy9988@mail.999.com
通讯作者: 詹若挺 (1970-), 男, 研究员; E-mail: ruotingzhan@vip.163.com
基金项目: 国家 “十二·五” 科技重大专项重大新药创制 (编号: 2013ZX09201022); 国家工信部中药材生产建设项目 (编号: 工信厅消费
函 [2014] 737 号); 广东省协同创新中心创新科研团队建设项目 (编号: A1-AFD01514A04)
摘要: 【目的】 建立鸡血藤药材的高效液相 (HPLC) 指纹图谱和芒柄花素含量测定的方法, 评价不同产地鸡血藤的质量。 【方
法】 采用反相高效液相色谱法 (RP-HPLC) 建立鸡血藤指纹图谱, 以 Feini Gen Red Classical AQ-C18 (4.6 mm × 250 mm, 5 μm)
为色谱柱, 乙腈—体积分数 0.1%冰醋酸溶液进行梯度洗脱, 检测波长 260 nm; 芒柄花素含量测定以 AcclaimTM 120-C18 柱
(4.6 mm × 250 mm, 5 μm) 为色谱柱, 乙腈—水等度洗脱, 检测波长为 254 nm, 流速 1.0 mL/min, 柱温 25℃。 【结果】对 24
批来自不同产地的鸡血藤色谱指纹图谱进行评价, 建立了鸡血藤标准指纹图谱, 以芒柄花素为参照峰, 确定了 13 个共有峰,
并应用高效液相色谱—二极管阵列检测器 (HPLC-DAD) 法测定样品中芒柄花素的含量。 不同产地鸡血藤药材指纹图谱相似
度和芒柄花素含量差异较大。 【结论】 本研究所建立的方法简便准确、 灵敏度高、 重复性好, 可作为鸡血藤的药材质量控制
方法。
关键词: 鸡血藤/化学; 指纹图谱; 芒柄花素/分析; 色谱法, 高压液相
中图分类号: R284.1 文献标志码: A 文章编号: 1007-3213 (2015) 05 - 0923 - 07
DOI: 10. 13359 / j. cnki. gzxbtcm. 2015. 05. 031
广州中医药大学学报
Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine
2015 年 9 月第 32 卷第 5 期
September 2015,Vol. 32,No. 5
·中药质量控制·
923
编号 产品批号
S1~S10 py120601~py120610
S11 gxlp
S24 scyp03
来源
广东南领药业种植基地
广西桂林荔浦县
广东华润三九公司
S12 gdxx 广东新兴县
S13 agycsc 广西安国药材市场
S14 gxjx 广西来宾金秀县
S15 gxla 广西南宁隆安县龙虎山
S16 gxtd 广西天等县
S17 gxra 广西融安县
S18 ync 越南产
S19 gxnn 广西南宁中药材产业协会
S20 gxwm 广西武鸣县
S21 gdpy 广东平远县
S22 scyp01 广东华润三九公司
S23 scyp02 广东华润三九公司
表 1 24 批鸡血藤批号及来源
Table 1 The habitats of 24 batches of Spatholobus
suberectus samples
2 方法与结果
2. 1 HPLC指纹图谱方法学考察
2. 1. 1 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Feini Gen
RedClassical AQ-C18 ( 4.6 mm × 250 mm, 5 μm) ,
流动相为乙腈(A)—体积分数 0.1%醋酸水(B); 梯
度洗脱 : 0 ~ 50 min, 10%~15% A; 50 ~ 70 min,
15% ~ 25% A; 70 ~ 105 min, 25% ~ 45% A; 105 ~
125 min, 45% ~ 65% A; 125 ~ 145 min, 65% ~
80% A; 140 ~ 150 min, 80% ~ 90% A; 150 ~ 160
min, 90% ~ 100% A。 进样量: 10 μL; 检测波长:
260 nm; 流速: 1.0 mL/min; 柱温: 25 ℃。
2. 1. 2 对照品溶液制备 取原儿茶酸、 儿茶素、
表儿茶素、 染料木素、 芒柄花素、 异甘草素、 樱黄
素和大豆苷元适量, 精密称定, 用甲醇配制成 1 mg/
mL的混合对照品溶液。
2. 1. 3 供试品溶液制备 取本品粉末 (过 4 号
筛) 约 2.0 g, 精密称定, 置于锥形瓶中精密加甲
醇 50 mL, 称定质量, 超声处理 30 min (功率 280
W, 频率 40 kHz); 置冷, 用甲醇补足质量, 滤过,
减压浓缩 ; 加水 20 mL, 用乙酸乙酯萃取 3 次
(30、 30、 20 mL); 减压浓缩, 甲醇溶解定容于 5
mL量瓶, 即得。
2. 1. 4 精密度试验 取同一供试品溶液 (批号:
gdpy), 连续进样 6 次, 记录色谱图并积分, 图谱
导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2012 版处
理, 得到各次进样的相似度。 结果表明: 6 次进样
所得指纹图谱的相似度均高于 0.955, 符合指纹图
谱测定要求, 精密度良好。
2. 1. 5 重复性试验 取同一批鸡血藤药材 (批
号: gdpy) 6 份, 按供试品溶液制备方法制备, 分
别进样, 记录色谱图并积分, 计算 6 份药材所得指
纹图谱的相似度。 结果表明: 6 份样品所得指纹图
谱的相似度均高于 0.918, 符合指纹图谱测定要求,
重复性良好。
2. 1. 6 稳定性试验 取同一份供试品溶液 (批
号 : gdpy), 在室温下放置 , 分别于 0、 6、 12、
24、 36、 48 h 进样, 记录色谱图并积分, 计算 48
h 内进样所得指纹图谱的相似度。 结果表明: 48 h
内进样所得指纹图谱的相似度均高于 0.949, 符合
指纹图谱测定要求, 稳定性良好。
2. 1. 7 共有模式的建立 将供试品溶液按选定的
色谱条件测定, 得到 24批样品的图谱, 根据中国药
典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统
软件 (2012 版), 以批号 gdpy 为参照图谱, 生成对
照图谱见图 1, 24批样品叠加后的图谱见图 2。
2. 1. 8 共有峰的标定 按选定的色谱条件分别将
对照品及 24 批供试品进样分析, 记录色谱图。 采
用中国药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度
评价系统软件 (2012 版 ) 处理图谱, 确定共有峰
13 个。 经用对照品定位和光谱图比较分析, 得知 1
号峰为原儿茶酸, 2 号峰是儿茶素, 3 号峰为表儿
1
2 3 4 5 6 7 8
9
10 11 12 13
0.00 23.18 46.36 69.55 92.73 115.91 139.09 162.28
00.60
-1.78
图 1 24 批鸡血藤样品对照图谱
Figure 1 Reference fingerprints of 24 batches of Spatholobus suberectus samples
t /min
m
AU
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷924
图 2 24 批样品叠加图谱
Figure 2 The overlapped fingerprints of 24 batches of Spatholobus suberectus samples
0.00 23.18 46.36 69.55 92.73 115.91 139.09 162.28
292.47
219.21
145.95
72.89
-0.57
t /min
m
AU
S24
S23
S22
S21
S20
S19
S18
S17
S16
S15
S14
S13
S12
S11
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
图 3 混合对照品 (A) 和供试品 gdpy (B) HPLC 图谱
Figure 3 HPLC fingerprints of mixed reference substance (A) and Spatholobus suberectus (B)
茶素, 8 号峰为染料木素, 9 号峰为芒柄花素, 11
号峰为樱黄素。 大豆苷元和异甘草素只能在部分样
品中找到, 且峰型较小, 故无法用作共有峰。 从特
征图谱可看出 9 号峰芒柄花素分离度及峰形较好,
因此选为参照峰。 对照品和具代表性的药材色谱图
见图 3。
2. 1. 9 指纹图谱的相似度评价 本研究采用中国
药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系
统软件 (2012 版) 对 24 批鸡血藤药材的指纹图谱
进行了相似度分析。 首先将各批次样品的测试数据
导入相似性评价系统软件中, 选定 2.1.8 项下的 13
个特征峰进行谱峰匹配, 建立其共有图谱标准模
板, 然后进行各样品的相似度评价, 相似度评价结
果见表 2。
a
0.00 23.18 46.36 69.55 92.73 115.91 139.09 162.28
138.31
68.28
-1.78
t /min
m
AU
b
c
d
e
f
g
h
a
b d e
f
g
h
0.00 23.18 46.36 69.55 92.73 115.91 139.09 162.28
m
AU 363.33
-2.50
t /min
a. 原儿茶酸; b. 儿茶素; c. 表儿茶素; d. 大豆苷元; e. 染料木素; f. 芒柄花素; g. 异甘草素; h. 樱黄素
A
B
陈红英, 等. 不同产地鸡血藤药材高效液相指纹图谱及芒柄花素含量分析第 5 期
c
925
m
AU
m
AU
2. 2 芒柄花素含量测定方法学考察
2. 2. 1 色谱条件 采用 AcclaimTM 120-C18 ( 4.6
mm × 250 mm, 5 μm) 色谱柱; 以乙腈—水 (体积
比为 35 : 65) 为流动相; 进样量: 10 μL; 检测波
长为 254 nm; 流速 1.0 mL/min, 室温 25℃检测 ,
柱温: 25℃。 HPLC色谱图见图 4。
2. 2. 2 对照品溶液的制备 精密称取芒柄花素对
照品0.008 94 g, 置 25 mL 容量瓶中, 加入甲醇使
溶解并稀释至刻度, 制得 0.357 6 mg/mL 的芒柄花
素溶液; 摇匀, 再从中吸取 1 mL 置 5 mL 容量瓶
中, 加入甲醇使溶解并稀释至刻度, 制得 0.071 52
mg/mL 的芒柄花素溶液; 再从中吸取 2 mL 置 10
mL 容量瓶中, 加入甲醇使溶解并稀释至刻度, 制
得 0.014 3 mg/mL 的芒柄花素溶液; 摇匀, 再从中
吸取 2 mL 置 5 mL 容量瓶中, 加入甲醇使溶解并
稀释至刻度, 制得 0.005 72 mg/mL 的芒柄花素溶
液; 摇匀, 从 0.014 3 mg/mL 溶液中吸取 1 mL 置
100 mL容量瓶中, 加入甲醇使溶解并稀释至刻度,
制得 0.000 143 mg/mL的芒柄花素溶液。
2. 2. 3 供试品溶液的制备 取本品粉末 (过 4 号
筛) 约 3.0 g, 精密称定, 置于具塞锥形瓶中, 精
密加入甲醇 ∶ 氯仿 (体积比为 1 ∶ 2) 50 mL, 称定
质量 , 超声处理 30 min (功率 280 W, 频率 40
kHz), 取出置冷; 用甲醇补足减失的质量, 滤过,
滤液蒸干, 残渣用甲醇溶解并转移至 5 mL 容量瓶
中; 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 滤过, 即得。
2. 2. 4 线性关系考察 取对照品溶液 0.000 143、
0.005 72、 0.014 304、 0.071 52、 0.357 6 mg/mL 分
别过 0.45 μm的微孔滤膜, 进样 10 μL, 进行高效
液相色谱分析。 以峰面积 (Y) 为纵坐标, 以所进
对照品的质量 (X) 为横坐标, 绘制标准曲线, 芒
柄花素的峰面积与进样量呈良好线性关系, 线性范
围分别为: 0.001 4 ~ 3.576 μg。 对应的回归方程分
编号
S13
S14
S15
S16
S17
S18
S19
S20
S21
S22
S23
S24
相似度
0.905
0.892
0.867
0.787
0.719
0.913
0.663
0.783
0.881
0.798
0.820
0.862
编号
S1
S2
S12
S3
S4
S5
S6
S7
S8
S9
S10
S11
相似度
0.968
0.912
0.913
0.952
0.982
0.903
0.965
0.954
0.967
0.973
0.778
0.727
表 2 24 批鸡血藤样品计算结果
Table 2 Similarity of HPLC fingerprints of 24 batches of
Spatholobus suberectus samples
图 4 鸡血藤样品和对照品 HPLC 色谱图
Figure 4 HPLC results for Spatholobus suberectus and reference substance
b.鸡血藤供试品
a. 对照品
t /min
t /min
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷926
别为: Y=23.577X-0.074 4, r>0.999 8。
2. 2. 5 精密度试验 精密吸取对照品溶液, 按照
2.2.1 项下的色谱条件连续进样 5 次, 记录峰面积,
计算相对标准偏差值 sR为 1.90% (N=5), 表明仪
器精密度良好。
2. 2. 6 稳定性试验 取 2.2.3 项下的供试品溶液,
室温放置, 分别于 0、 2、 4、 6、 8、 16、 24 h 后按
2.2.1 项下的色谱条件进行测定, 分别记录保留时
间与峰面积值, 结果显示: 24 h 内芒柄花素的保
留时间和峰面积相差较小 (峰面积 sR为 0.6%)。 表
明供试品溶液在 24 h内稳定。
2. 2. 7 重复性试验 精密称取同一批的(py120603)
鸡血藤样品 6 份, 每份 3.0 g, 依照 2.2.3 项下方法
制备供试品溶液, 2.2.1 项下的色谱条件进行分析。
结果显示: 平均含量为芒柄花素 0.006 2 mg/g; sR
为 2.54% (N=6), 结果表明本方法重现性良好。
2. 2. 8 加样回收率试验 取芒柄花素对照品
0.008 90 g, 用十万分之一天平精密称定 , 置于
100 mL 量瓶中, 加甲醇制成浓度为 0.089 mg/mL
的对照品母液, 再从中取 1 mL 置于 10 mL 量瓶中
并加甲醇定容, 制成 0.008 9 mg/mL 加样回收对照
品储备液。
取已知含量的鸡血藤粉末 (批号: py120603)
共 6 份, 水分为 111.8 mg/g, 分别置锥形瓶中, 精
密加入上述储备溶液 1.0 mL, 按供试品溶液的制
备方法制备并进行测定, 结果见表 3。 得到的芒柄
花素回收率在 100.32% ~ 101.67%之间, 平均回收
率 100.94%, sR为 0.68%, 说明样品制备方法和检
测方法均可行。
2. 2. 9 芒柄花素含量测定 按 2.2.3 项下方法制
备供试品溶液, 各进样 10 μL 取平均值计算含量,
取鸡血藤饮片粉末 24 批, 照上述确定方法测定芒
柄花素含量, 结果见表 4。
序号 m 生药量/g p回收/% p平均回收/% sR/%
1 1.500 1 101.32
100.94 0.68
2 1.500 6 100.32
6 1.500 7 100.41
3 1.500 4 101.67
4 1.500 3 100.25
5 1.500 6 101.66
m 样品含量/mg
0.008 3
0.008 3
0.008 3
0.008 3
0.008 3
0.008 3
m 加入量/mg
0.008 9
0.008 9
0.008 9
0.008 9
0.008 9
0.008 9
m 实测值/mg
0.017 3
0.017 2
0.017 3
0.017 2
0.017 3
0.017 2
表 3 芒柄花素的加样回收率 (N=6)
Table 3 Results of average recovery of formononetin
序号
agycsc
gxjx
gxla
gxtd
gxra
ync
gxnn
gxwm
gdpy-1
scyp01
scyp02
scyp03
序号
py120601
py120602
gdxx
py120603
py120604
py120605
py120606
py120607
py120608
py120609
py120610
gxlp
w芒柄花素 / (mg·g-1)
0.006 2
0.007 4
0.006 3
0.005 2
0.005 9
0.004 9
0.005 2
0.004 8
0.006 2
0.004 7
0.032 3
0.031 1
sR
2.55
1.89
2.45
1.47
2.97
1.43
1.60
2.79
2.69
2.95
2.16
1.08
w芒柄花素 / (mg·g-1)
0.165 2
0.043 8
0.113 5
0.037 6
0.049 7
0.160 2
0.021 7
0.026 1
0.226 1
0.172 8
0.094 5
0.188 7
sR
2.51
0.84
1.12
1.70
0.50
1.46
2.32
2.70
1.15
1.85
2.76
1.96
表 4 24 批鸡血藤样品计算结果
Table 4 Determination of formonetin of 24 batches of Spatholobus suberectus samples
陈红英, 等. 不同产地鸡血藤药材高效液相指纹图谱及芒柄花素含量分析第 5 期 927
3 讨论
3. 1 色谱条件和提取方法考察 鸡血藤所含成分
复杂, 且极性范围跨度比较大, 故本研究考察了不
同流动相和不同洗脱梯度, 结果发现选择乙腈—体
积分数 0.1%醋酸水作为流动相, 采用本研究洗脱
程序所得到的色谱峰信息较多, 分离度较高, 基线
较平稳。 本研究以原儿茶酸、 儿茶素、 表儿茶素、
芒柄花素等的峰面积以及整体峰形为评价指标, 分
别考察回流提取、 超声提取、 微波萃取以及冷浸过
夜提取 4种提取方法, 结果表明: 微波萃取提取效
率最低, 超声提取效率最高, 故选用超声提取。 考
察了不同比例的甲醇对提取效率的影响, 结果表
明: 用体积分数 100%甲醇提取时各个指标性成分
含量较高, 故确定以甲醇作为提取溶液。 比较了超
声 15、 30、 45 min 和萃取 1、 2、 3 次含量测定结
果, 确定提取时间为 30 min、 萃取次数为 3 次。
此外, 加热易使儿茶素向表儿茶素发生差向异构
化, 故大多文献采用减压浓缩的方法提取儿茶素类
成分, 因此本研究比较了水浴蒸干和减压浓缩 2种
浓缩方法。 结果表明: 减压浓缩后原儿茶酸等的含
量较水溶蒸干法高, 故采用减压浓缩作为浓缩方
法。 芒柄花素的提取则参考 《广西地方标准》 (征
求意见稿), 考察甲醇、 甲醇 ∶氯仿 (体积比 1∶2)、
甲醇 ∶氯仿 (体积比 1∶4) 的提取效果, 结果显示甲
醇 ∶氯仿 (1∶2) 的提取效率较高, 故选用该溶剂。
3. 2 芒柄花素含量结果分析 不同产地的鸡血藤
药材中芒柄花素含量差别较大。 其中, 产地为南领
种植基地 1 ~ 10 批的鸡血藤药材中芒柄花素含量
均偏低, 产地为广东平远的最高。 本课题组也对 2
年生、 6 年生、 8 年生的鸡血藤进行了指纹图谱分
析, 发现儿茶素类成分含量随着生长年限的增加而
增加, 而芒柄花素含量增加却不明显。 儿茶素类成
分在鸡血藤中含量较高[8-9], 且具有较好的生物活
性[10-11], 因此增加儿茶素类成分的含量测定可作为
鸡血藤药材质量的评价方法之一。
3. 3 HPLC 指纹图谱结果分析 不同产地药材中
主要的色谱峰基本一致, 但各峰的峰面积有差异,
这说明不同产地鸡血藤药材其成分的组成基本上是
一致的, 但成分的含量存在差异。 不同产地鸡血藤
药材相似度有一定差异, 南领基地的药材与来自广
东的野生药材相似度在 0.727 ~ 0.862 之间, 与来
自广西的野生药材相似度在 0.664 ~ 0.905 之间 ,
各成分相对量的差异造成了指纹图谱相似度的差
异, 这与丁平等[12]的研究结果是相一致的。
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【责任编辑: 黄玲】
(英文摘要见第 936页)
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷928
Analysis of Fingerprints and Formononetin Content of Caulis Spatholobi from
Different Habitats by High Performance Liquid Chromatography
CHEN Hongying1, YAN Ping2, ZHANG Min2, LIU Cuiting 2,
HAN Zhengzhou1, ZHAN Ruoting2
(1. China Resources Sanjiu Medical and Pharmaceutical Co. Ltd., Shenzhen 518110 Guangdong, China; 2. Research Center of
Chinese Herbal Resource Science and Engineering, Guangzhou University of Chinese Medicine, Key Laboratory of Chinese
Medicinal Resource from Lingnan, Ministry of Education, Guangzhou 510006 Guangdong, China)
Abstract: Objective To establish the fingerprints and formononetin content determination method for Caulis
Spatholobi from different habitats by high performance liquid chromatography ( HPLC) , thus to control the
quality of Caulis Spatholobi. Methods Reversed phase-high performance liquid chromatography (RP-HPLC) for
fingerprint was performed on Feini Gen RedClassical AQ -C18 column ( 4.6 mm × 250 mm, 5 μm) with
acetonitrile-0.1% acetic acid solution as the mobile phase by gradient elution, and the detection wavelength was
260 nm. High performance liquid chromatography-diode array detector (HPLC-DAD) for the determination of
formononetin content was performed on AcclaimTM 120 -C18 column ( 4.6 mm × 250 mm, 5 μm) with
acetonitrile-water solution by isocratic elution, the detection wavelength was 254 nm, the flow rate was 1.0 mL/
min and the column temperature was 25℃ . Results The standard fingerprint of Caulis Spatholobi was set up
through the evaluation of the fingerprints of 24 batches of Caulis Spatholobi samples from different habitats.
Thirteen common peaks were identified with reference to formononetin peak, and the content of formononetin
was determined by HPLC-DAD method. The similarity of the fingerprints of Caulis Spatholobi from different
habitats and their formononetin content had great differences. Conclusion The established method is simple,
accurate, highly sensitive, and repeatable, and can be applied for the quality control of Caulis Spatholobi.
Key words: Caulis Spatholobi/chemistry; Fingerprints;
Formononetin/analysis;
Chromatography, high performance liquid
听其倾诉, 善于抓住症结所在, 循循善诱, 巧妙化
解患者心结, 为其树立信心, 增添勇气。 他常言:
“治病先治人, 治人先调心, 心调病自半, 却病又
延年”。 经夏师诊治后的患者, 常说 “只要一见到
夏老, 心就立刻安定下来”, 饱含着对夏师的信任
和感激。 夏师对心肾相关理论的理解及对女性生殖
障碍疾病的深刻剖析, 对 POF 的治疗开辟了新的
思路。
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【责任编辑: 贺小英】
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷
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