全 文 ：华西药学杂志W CJ· PS　2009, 24(3)：298 ～ 299 　　
作者简介:曲方圆(1985-),女 ,正攻读药理学专业的硕士学位。
＊通讯作者(Correspondentauthor), Email:yukai2037@sina.com
银莲花素 A在大鼠肝匀浆中的代谢产物
曲方圆 1 ,喻　凯 1＊ ,李　甫2 ,朱庆亚 1
(1.西南交通大学生命科学与工程学院 ,四川 成都 610031;2.中国科学院成都生物研究所 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　研究银莲花素 A在大鼠肝脏的代谢产物。方法　采用薄层色谱和质谱鉴别银莲花素 A在大鼠肝匀浆中的主要
代谢产物。结果　银莲花素 A在大鼠肝匀浆中主要得到水解产物 3 -O-[ β -D-吡喃葡萄糖 -(1※ 2)-α-L-吡喃阿拉
伯糖 ]齐墩果酸 、齐墩果酸;经苯巴比妥诱导后的肝中水解产物量减少 , 主要产物可能是水解产物经还原后与甘氨酸的结合产
物。结论　银莲花素 A在普通大鼠肝匀浆中主要发生水解反应 , 在经苯巴比妥诱导的肝匀浆中主要发生还原反应。
关键词:银莲花素 A;肝匀浆;薄层色谱;体外代谢
中图分类号:R917　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2009)03-0298-02
AnalysisofmetabolitesofraddeaninAinhomogenizedliverofrats
QUFang-yuan1 , YUKai1＊ , LIFu2 , ZHUQing-ya1
(1.ColegeofLifeSciencesandEngineering, SouthwestJiaotongUniversity, Chengdu, Sichuan, 610031P.R.China;2.ChengduInsti-
tuteofBiology, ChineseAcademyofSciences, Chengdu, Sichuan, 610041 P.R.China)
Abstract:OBJECTIVE　ToelucidatethemetabolismofraddeaninAinliverofrats.METHODS　Themainmetabolitesof
raddeaninAinhomogenizedliversamplesofratswereidentifiedbyTLCandMS.RESULTS　ThemainmetabolitesofraddeaninA
wereproducedbyhydrolysisinhomogenizedliversamples.Themainmetabolitesmightbeproducedbyreductionandfixationreactions
inhomogenizedliverinducedbyPhenobarbita.CONCLUSION　ThemainmetabolitesareofraddeaninAhydrolysatesinnormalho-
mogenizedliverwhiletheyarereductantproductsinhomogenizedliverinducedbyPhenobarbital.
Keywords:RaddeaninA;Homogenizedliver;TLC;Metabolisminvitro
CLCnumber:R917　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2009)03-0298-02
　　银莲花素 A即竹节香附素 A是从中药竹节香
附中分离出的三萜皂苷 ,结构为 3-O-[ α-L-吡
喃鼠李糖 -(1※ 2)-β -D-吡喃葡萄糖 -(1※
2)-α-L-吡喃阿拉伯糖 ]齐墩果酸 [ 1] 。其体内外
代谢的研究尚未见报道 ,因此 ,特对其在大鼠肝匀浆
中及在苯巴比妥诱导的肝中代谢情况进行了研究。
1　实验部分
1.1　试剂 、仪器与动物
银莲花素 A、 3-O-[ β -D-吡喃葡萄糖 -
(1※2)-α-L-吡喃阿拉伯糖 ]齐墩果酸 、齐墩果
酸对照品 (分别为 Ⅰ 、Ⅱ、Ⅲ ,中科院成都生物研究
所)的结构见图 1。中型高速冷冻离心机(Beckman
公司);高效硅胶 HF254薄层板(青岛海洋化工厂)。
♀ Wistar大鼠(四川大学华西医学部实验动物中
心), 200±20 g。
1.2　方法与结果
1.2.1　肝匀浆的制备　取 10只♀ Wistar大鼠 ,随
机分为 A、B两组 。将 A组 5只大鼠禁食 24h后处
死取肝 ,在冰浴中剪碎肝组织 ,用 0.15 mol·L-1 KCl
图 1　所用三萜化合物的结构式
Fig1　Structureformulasofthetriterpenoids
溶液冲洗至灰色 ,称重后按 3 ml(缓冲液)·g-1(肝组
织)加预冷 TMS缓冲液 (pH7.5、 0.05 mol·L-1
Tris-HCl、3 mmol·L-1MgCl2、0.2 mol·L-1蔗糖),于
冰浴中的匀浆机上匀浆后 ,在 4℃下 、以 1.3×104r·
min-1离心 20 min,取上清液保存。取 B组 5只大
鼠 ,经苯巴比妥诱导(60 mg·kg-1·d-1苯巴比妥 , ig,
连续 5 d),禁食 24h后处死 ,取肝脏 ,按前述方法制
备肝匀浆 。
1.2.2　体外孵育实验　将化合物 Ⅰ先溶于少量
DMSO中 ,再分别溶于 A、B两组肝匀浆中 ,充分振
荡 , 37℃孵育 。分别在 0、 1、 2、 3、 4时取样 , 高温
灭活 。
1.2.3　样品的检测与结果　取各样品用正丁醇萃
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2009.03.020
取 ,浓缩。分别取化合物Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ对照品 ,溶于正丁
醇中 ,作为对照液 。将对照液 、各供试液分别点于高
效硅胶 HF254薄层板上 ,以甲醇 -氯仿(1：5)(水饱
和)为展开剂 ,展开 ,取出 、晾干 ,喷以 5%硫酸乙醇
显色剂溶液 ,再于 105℃加热 3min后检视 。除原药
Ⅰ外 ,还有 3个新的代谢产物 ,分别为 Rx、Ⅱ和 Ⅲ
(图 2)。第 4、9组孵育 0 h时 ,即进行高温灭活 ,其
产物只有 1个 ,位置和化合物Ⅰ一致 ,说明 Ⅰ在高温
下未发生分解 ,具有高温稳定性 。
化合物 Ⅰ在未经苯巴比妥诱导的大鼠肝匀浆中
的代谢以水解产物为主。孵育 1、2 h的代谢产物主
要为 Ⅱ、Ⅲ ,且以前者居多 ,对应斑点颜色较深 。孵
育 3、4h的水解产物均转化为 Ⅲ。 Rf值位于 Ⅰ与 Ⅱ
之间的代谢物 Rx斑点颜色极浅 。
Ⅰ在苯巴比妥诱导的大鼠肝匀浆中 ,代谢产物
依然有 Ⅱ和 Ⅲ ,但斑点颜色明显浅于 A组 ,水解产
物量减少 ,而 Rx产量增多 ,经质谱分析(图 3)。推
测可能是Ⅰ经水解酶水解成双糖皂苷 。双糖皂苷的
苷元上的双键经还原酶还原加氢 ,苷元还原产物上
的 28位羧基再与甘氨酸发生结合反应所生成的产
物(图 4),但其准确结构还有待进一步检测确认。
图 2　样品的薄层鉴别图
Fig2　TLCofthesamples
图 3　代谢物 Rx的质谱图
Fig3　MassspectrumofmetaboliteRx
图 4　Rx可能的生成过程
Fig4　PossibleprocessprescriptionofRx
2　讨论
肝脏是药物代谢的重要器官 ,肝酶可催化氧化 、
还原 、水解 、结合等生物转化 ,直接影响药物的生物
利用度[ 2] 。苯巴比妥是肝脏药物代谢酶诱导剂 ,能
增加肝脏微粒体的 P450含量 [ 3] ,使氧化还原反应
能力增强 。因此 ,文中两组肝匀浆的代谢产物量明
显不同 , A组以水解产物为主 ,而 B组还原产物较
多。银莲花素 A在肝脏的代谢产物较复杂 ,已确定
的有水解产物 Ⅱ和 Ⅲ ,即 3-O-[ β -D-吡喃葡萄
糖 -(1※2)-α-L-吡喃阿拉伯糖 ]齐墩果酸和齐
墩果酸 ,尚有一个产物经质谱鉴定 ,推测可能是水解
后的双糖皂苷还原后与甘氨酸结合的产物 ,准确的
结构还需进一步确认。竹节香附中三萜类成分的抗
肿瘤活性研究表明 ,随着糖链的增长 ,活性降低 ,且
可能因存在协同作用 ,使混合物的活性总是比单一
化合物表现较强[ 4] 。鉴于此 ,银莲花素 A的代谢混
合物的抗肿瘤活性可能强于银莲花素 A单体 。
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收稿日期:2008-10
299第 3期 曲方圆 , 等。银莲花素 A在大鼠肝匀浆中的代谢产物