全 文 ：China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 3 中国药房 2011年第22卷第3期
白花败酱是败酱草的来源之一，为败酱科多年生草本植
物白花败酱Patrinia villosa Juss.的干燥带根全草。全国大部
分地区有产，主产于湖北、安徽、河南、江西等地。它具有清热
解毒、消痈排脓之功效，临床上常用于治疗肠痈（阑尾炎）、慢
性溃疡性结肠炎、肺痈（肺脓疡）、痈肿疮毒、产后瘀阻腹痛、妇
科炎症（盆腔炎、附件炎、宫颈炎等）、急性化脓性扁桃体炎、鼻
窦炎、胰腺炎、黄疸性肝炎和神经衰弱等症[1]。药理学研究表
明，败酱草具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、镇静和升高白血球等
作用，毒副作用极小[2]。目前，临床应用的败酱草品种较为混
乱，1977年之后的几版《中国药典》中均未收载败酱草，缺少国家
法定标准是其研究和应用中面临的严峻问题。中药指纹图谱技
术是公认的能够反映中药整体特征的质量控制方法[3]。笔者采
用高效液相色谱（HPLC）法建立不同产地的白花败酱指纹图
谱，以期为该药材的品种鉴别和质量评价提供参考依据。
1 仪器与试药
1100型HPLC仪，包括DAD检测器、Chem Station工作站
（美国 Agilent公司）；Sartorius CP124S电子天平、Sartorius
BT25S 电子天平（北京赛多利斯有限公司）；Branson
B3500S-DTH超声波清洗仪（必能信超声上海有限公司）。
异牡荆苷标准品（中药固体制剂制造技术国家工程研究
中心，批号：1429-070320）；异荭草素标准品（上海融禾医药科
技有限公司，批号：080916）；磷酸、乙腈均为色谱纯；水由
MILI-Q超纯水仪制备；白花败酱收集自全国各个地区的药材
市场（见表1），经笔者鉴定均为败酱科植物白花败酱P. villosa
Juss.）的干燥全草。
表1 白花败酱草的产地和批号
Tab 1 Habitat and batch number of P. villosa
样品编号
01
02
03
04
05
产地
安徽亳州
湖北襄樊
安徽太和
广西玉林
江西赣州
批号
20080210
20080805
20080901
20080911
20081001
样品编号
06
07
08
09
10
产地
湖北恩施
山东菏泽
四川南充
湖北武汉
河南确山
批号
20081030
20081101
20081120
20081130
20090201
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm，5 µm）；流动相：乙
腈-0.1％磷酸，梯度洗脱（0→5→15→25→35→45→49→60 min，
乙腈的体积百分含量为 12％→14％→19％→30％→45％→
60％→100％→100％）；进样量：5 μL；流速：0.8 mL·min-1；检测
波长：320 nm；柱温：25℃。
2.2 溶液的制备
2.2.1 标准品溶液 精密称取0.29 mg异牡荆苷，以1 mL甲醇
溶解，即得异牡荆苷标准品溶液；精密称取0.50 mg异荭草素，
以1 mL甲醇超声溶解，即得异荭草素标准品溶液。
2.2.2 供试品溶液 称取白花败酱粉末（过 40目筛）1.0 g，精
密称定，置于100 mL具塞锥形瓶中，加入50 mL甲醇，超声60
min（功率：140W，频率：42 kHz），放冷，抽滤，加入适量甲醇洗
涤残渣，滤液减压蒸干，加甲醇定量转入5 mL量瓶中，定容，摇
匀，过0.45微孔滤膜，即得。
3 方法学考察
3.1 精密度试验
Δ 上海高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金资助项目
（yyz-07002）
＊讲师，硕士。研究方向：中药鉴定与活性成分。电话：021-
33755125
白花败酱HPLC指纹图谱研究Δ
张一芳＊，周淑琴，吴国忠（上海医药高等专科学校药学系，上海市 201318）
中图分类号 R284.1；R927 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）03-0242-02
摘 要 目的：建立白花败酱高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，为白花败酱的品种鉴别和质量控制提供参考依据。方法：色谱柱为
Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相为乙腈-0.1％磷酸（梯度洗脱），流速为 0.8 mL·min-1，柱温为 25℃，检测波长为 320
nm。结果：确定由15个峰构成白花败酱的指纹特征，10批样品相似度较好。结论：本方法精密度、稳定性、重复性良好，可为白花
败酱的鉴别和质量评价提供参考。
关键词 白花败酱；指纹图谱；高效液相色谱法
Study on HPLC Fingerprints of Patrinia villosa
ZHANG Yi-fang，ZHOU Shu-qin，WU Guo-zhong（Dept. of Pharmacy，Shanghai Institute of Health Sciences，
Shanghai 201318，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish HPLC fingerprints of Patrinia villosa，and to provide reference for identification and
quality control of it. METHODS：The chromatographic column was Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm，5 µm）and the mobile phase
consisted of acetonitrile-0.1％ phosphoric acid at flow rate of 0.8 mL·min-1. The column temperature was 25 ℃ and the detection
wavelength was set at 320 nm. RESULTS：15 peaks were identified as the characteristic finger prints of P. villosa. 10 batches of
samples had high similarity. CONCLUSION：The method has a good precision，stability and repeatability. The established finger-
prints can be used for the quality control and species identification of P. villosa.
KEY WORDS Patrinia villosa；Fingerprints；HPLC
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中国药房 2011年第22卷第3期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 3
取01号药材样品粉末，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制
备供试品溶液，重复进样6次，记录指纹图谱。结果表明，各主
要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积无明显变化，其RSD
分别为0.02％～0.51％、0～1.50％，符合指纹图谱要求，精密度
良好。
3.2 重复性试验
取01号药材样品粉末，精密称定6份，分别按照“2.2.2”项下
方法制备供试品溶液，记录指纹图谱。结果表明，各主要色谱峰
的相对保留时间和相对峰面积无明显变化，其 RSD分别为
0.03％～0.53％、0～3.70％，符合指纹图谱要求，重复性良好。
3.3 稳定性试验
取01号药材样品粉末，精密称定，按照“2.2.2”项下方法制
备供试品溶液，分别于样品制备后 0、8、12、24 h检测指纹图
谱。结果表明，各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积
无明显变化，其RSD分别为0～1.32％、0～4.76％，符合指纹图
谱要求，24 h内稳定性良好。
4 指纹图谱的构建
4.1 共有峰的确定
按照上述试验方法和色谱条件对采自不同地点的10批白
花败酱药材进行测定，比较各样品的色谱图。结果发现，15个
峰为10批药材的共有峰（见图1），其中3号峰为异牡荆苷，2号
峰为异荭草素；保留时间8 min和12 min的2个峰峰面积较大，
但不是共有峰，故未编号。其中，3号峰占总峰面积的42％，较
稳定，故将该峰作为参照峰。10批不同产地样品的指纹图谱
见图2。由图2可得各产地的样品指纹图谱中主要峰群的整体
图貌基本一致，但各成分含量有一定差别。
4.2 相似度计算
应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（国家药典委
员会发布，2004年版）对白花败酱指纹图谱进行相似度计算[4]。
结果，来自不同产地/批号的10批白花败酱与相应对照图谱的
相似度均在0.78以上，符合指纹图谱技术指标的要求。其中，
2号药材的相似度最低，为0.782；1、3、4、6、10号药材的相似度
达到了0.900以上。10批药材的平均相似度为0.897。白花败
酱相似度评价结果见表2。
5 讨论
对白花败酱的研究主要集中在黄酮类成分，而其中的异
牡荆苷和异荭草素含量较高，分别为 2.16 mg·g-1和 1.22 mg·
g-1[5]；在预试验中也发现这2种成分含量高、分离度好，故将其
作为参照物。
在样品超声时间的选择上，分别考察了 30、60、90 min的
提取情况，发现 30 min响应值稍低，随着超声时间的增加，提
取率小幅增加，但整体轮廓变化不明显，经相似度软件分析，
相似度均在0.99以上，因此选择超声60 min，可以体现药材整
体色谱轮廓。
在提取溶剂的选择上，分别考察了甲醇、无水乙醇和乙酸
乙酯不同溶剂对白花败酱药材指纹图谱的影响，发现随着提
取溶剂极性的降低，色谱峰显著减少，响应值降低，表明对于
极性较大的成分提取率随着提取溶剂极性降低而降低。以甲
醇作为提取溶剂色谱峰最多，响应值最高，有利于指纹鉴别，
因此选择甲醇作为白花败酱的提取溶剂。
在选择流动相时，分别考察了甲醇-磷酸、乙腈-磷酸和乙
腈-水系统，发现甲醇系统色谱峰较少，分离度小于乙腈系统，
其中乙腈-磷酸系统最为理想。
本试验采用HPLC法对白花败酱进行分析，比较全国不同
产地白花败酱样品的指纹图谱数据，结果显示各特征峰的保
留时间差异很小，其 RSD均＜1％。但可能由于产地、采收时
间或是个体差异的关系，特征峰的相对含量有一定差异，但不
影响整体评价。本试验建立的指纹图谱方法重复性、稳定性
与精密度均较好，可作为白花败酱质量评价和品种鉴别的主
要依据之一。
参考文献
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8（4）：277.
[ 2 ] 何福江，杨建萍，田义杰.败酱属植物化学成分与药理研
究概况[J].甘肃医药，1993，12（3）：161.
[ 3 ] 杨东风，梁宗锁.中药指纹图谱研究进展[J].中国药房，
2007，18（6）：467.
[ 4 ] 国家食品药品监督管理局.中药注射剂指纹图谱研究的
技术要求[S].2004：4.
[ 5 ] 陈 燕.不同产地白花败酱草中异荭草苷和异牡荆苷的
含量测定[J].中国药业，2008，17（16）：24.
（收稿日期：2010-03-08 修回日期：2010-07-05）
232.28
174.14
115.99
57.85
-0.29
0.00 8.69 17.38 26.07 34.75 43.45 52.14 60.84
1
2
3
456 789101112 1314 15
图1 白花败酱指纹图谱的共有峰
Fig 1 Common peaks of fingerprints of P. villosa
表2 白花败酱相似度评价结果
Tab 2 Similarity of 10 batches of P. villosa
编号
01
02
03
04
05
06
07
08
09
10
S
01
1
0.652
0.799
0.990
0.840
0.989
0.814
0.725
0.679
0.855
0.976
02
0.652
1
0.905
0.675
0.746
0.688
0.824
0.969
0.974
0.846
0.782
03
0.799
0.905
1
0.836
0.681
0.849
0.949
0.942
0.920
0.968
0.900
04
0.990
0.675
0.836
1
0.804
0.998
0.860
0.752
0.701
0.902
0.986
05
0.840
0.746
0.681
0.804
1
0.812
0.639
0.774
0.771
0.683
0.846
06
0.989
0.688
0.849
0.998
0.812
1
0.867
0.770
0.721
0.909
0.989
07
0.814
0.824
0.949
0.860
0.639
0.867
1
0.861
0.822
0.967
0.903
08
0.725
0.969
0.942
0.752
0.774
0.770
0.861
1
0.994
0.897
0.845
09
0.679
0.974
0.920
0.701
0.771
0.721
0.822
0.994
1
0.857
0.805
10
0.855
0.846
0.968
0.902
0.683
0.909
0.967
0.897
0.857
1
0.940
S
0.976
0.782
0.900
0.986
0.846
0.989
0.903
0.845
0.805
0.940
1
175
150
125
100
75
50
25
0
10 20 30 40 50 60
图2 10批白花败酱的指纹图谱
Fig 2 Fingerprints of 10 batches of P. villosa
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