全 文 ：植物生理学通讯 产吸翻之产刃匆旅戒恻 。 朋洲切泊汉 ~一 9 9 5
.
3 1 ( 6 )
:
4 2 9一 4 3 5
芸苔丛生芽诱导和快速繁殖
高 翔 罗鸿源 (贵州省农业科学院生物技术研究所 , 贵阳 5 50 6 )
R o se t t e B u d I n d u e t i o n a n d R a P i d P r o P a g a t io n o f B r a s s 诬e a n a P u s
G A o x i a n g
,
L u o H o n g
一
Y u a n (枷理 a 而 i之孕护 介咧 “必 , 记寻川七加川 A。 汝如于刁 of A尹二诚 2扩之习 习。 翻砚策份 洲石甸创夕 5 5 0 0 0 6 )
1 植物名称 芸苔 (肠
~
an usP ) 新推广杂
交种黔杂 2号和沈阳市农科所育成的大 白菜
( 肠
~
释肠嫂赫 ) 细胞核基因互作雄性不育
系的杂交组合 5 6 0 A X B 一 2( 低芥 、 转优 ) 。
2 材料类别 种子萌发的无菌苗带子 叶的
茎端切段 。
3 培养 条件 ( l) 培养 无菌苗 的培 养基 :
M S
。
( 2) 诱导 丛生芽 培养基 : M , : M s + N A A
0
.
5 m g / L (单 位下 同 ) + 6一 B A Z ; M Z : M s +
N A A 0
.
5 + 6
一
B A Z + T D z ( T h id i a
z u r o n , N
一苯
基一 N ’ 一 l , 2 , 3一唾 二哇 一 5一脉 ) 0 . 0 4 ; M 3 : M s +
K T Z + 6
一
B A S ; M
、 :
M S + N A A I + 6
一
B A 0
.
5
。
(3 ) 生根培养基 : M S + N A A 0 . 1 。 上述培养基
均含蔗糖 3% , 琼脂 0 . 9% , p H 6 . 2 。 其 中 , ( l )
培育无菌苗的温度为 18 一 2 1心 , 每夭光照 8一
1 0 h
, 光照度为 8 0 0一 1 0 0 0 l x ; ( 2 ) 、 ( 3 )诱导丛
生芽和不定根的温度为 26 士 Z C , 每天光照 10
一 12 h ,光照度为 2 0 0 0 l x 。
4 生长与分化情况
4
、
l 无菌材料的获得 杂交种子和杂交组
合种子用肥皂水冲洗 , 滤干 ; 75 %酒精处理 30
s ,滤干 ; 0 · 1% H g C 12浸泡 1 5 m i n , 无菌水冲洗 3
次 ,滤干 。 消毒后 的种子接种于 M S 上 , 放在
上述培养基 ( 1) 的条件下培养 , 萌发 3一 s d 后
待用 。
4
.
2 丛生芽诱导及再生 从萌发 1周的较矮
壮无菌苗上切取适量带子 叶的茎端 , 接种在
M
」一 ,上 。在培养基 ( 2) 的条件下 , 7 d 可见主芽
伸长 , 以 M 、最长 ; 外植体下膨大 , 以 M Z最显
著 。 另见 M , 的每个子 叶节上有 4 一 5个 小芽
点 。 18 d 时 , M ,主芽健壮生长 , 每个子叶节上
着生 4一 6个较大侧芽 , 膨大端 产生长达 0 . 5
c m 的不定根 ; M Z上主芽也健壮生长 , 每个子
叶节上有 3一 5个长势好的芽 , 且主芽上 的第
一片真叶节上还生出成对 的小腋芽 , 在部分
膨大端生有 2一 5条长达 4一 6 c m 的不 定根 ;
M
3上主芽纤细 , 每个子叶节上着生 2一 3个健
壮 芽 ,在部分膨大端也生有 2一 4条 长达 1 c m
的不定根 ; M 、上主芽特别细长 , 部分 已枯萎 ,
每个子叶节上着生 2一 3个小芽 , 膨大端 生有
10 一 2 0条长达 l e m 的不定根 。 2 7 d 时 , M l上
主芽生长受到抑制 , 有坏死现象 ,子叶节处丛
生 8一 13 个健壮侧 芽 , 根少且弱 ; M Z上主侧 芽
均健壮生长 , 子叶节上侧芽数达 5 一 10 个 ,根
生长 良好 ; M 3上主芽健壮生长 , 在子叶节和真
叶节处生出健壮侧芽 ; M 刁上主芽特别细长且
有黄死现象 ,有些膨大端长出许多根 。在上述
诱导丛生芽的培养基中 , 以 M ;效 果最佳 , 其
次为 M Z 。 及时利用 M ,和 M Z , 能达到 快繁效
果 。
4
.
3 生根培养 将上述丛生芽适 时切割 出
来接 种于生根培养基 中 , 1 0 d 即可诱导 出 3
一 5条长达 1 . 2 c m 的不定根 。 此时 可进行移
栽 。
收稿 19 9 」一 12一 2 1
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1995. 06. 010
4
.
4 试管苗移栽 将带健壮根系的小苗移 5 意义与进展 采用本法可以培养出大量
栽到经 0 . 2 % K M n o , 消毒的珍珠 岩 : 蛙 石 : 腐 性状一致的再生苗 , 供生产和育种工作参考
殖土 ( 1 : l : l) 的混合基质中 , 注意保湿 ,成活 应用 。芸苔丛生芽诱导试验国内曾有报道 , 但
率达 95 %以上 。 3周后移栽到大 田中 , 能及时 本法优点是繁殖 时间较短 ,不到 2个 月 , 而一
满足育种和生产上的需要 。 般的至少需要 3个多月 。
金线莲的离体培养 `
范子南 范晓红 肖华山 苏伟毅 吴文珊 黄 飞 ( 福建师范大学生物工程学院 , 福州 3 50 0 7)
I n 饭 f r o C u l tu r e o f A 牡oe e t o e h 诬lu s r o x b u r g人诬诬
F A N 2 1
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尹口己 入、” 政赵 乙J
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威犷, 声被入刀才 3 5 0 0 0 7 )
l 植物 名称 花叶开唇兰 ( A~ `
义流沥 , aI -
俪妒动 , 又 名金线莲 。
2 材料类别 带芽的茎段 。
3 培养条件 自来水冲洗干净的外植体用
肥皂水振荡洗涤 Z m in ,再用无菌水振荡洗涤
后 , 在 0 . 1% H g cl Z溶液 中浸 泡 10 m in , 以无菌
水冲洗 5次 , 消毒滤纸吸干表面水分 , 于无菌
条件 下切除伤 口 部分约 0 . 5 c m , 再切成 1~ 2
c m 长的茎段 , 接入培养基 中 。基本培养基为
A r (改 良 M s : M s 中的 N H , N o 3改 为 10 0 0 m g /
L ; K H Z P o , 为 3 5 0 m g / L ; z n s o ; · 7 H Z o 为 15
m g / L )
。
( 飞) A r + I B A 0 . 5 m g / L (单位下同 ) +
6
一
B A 0
.
5一 1 ; ( 2 ) A r + I B A 0 . 5一 1 . 0 + N A A
0
.
4一 0 . 8 + 6一 B A I一 4 + K T 0 . 5 ’一 1 + A d s 。
琼脂为 7 . 0 9 L/ , p H 5 . 6 ~ 5 . 8 。培养温度为 25
士 1℃ ,光照 1 2 h / d ,光照度为 1 2 0 0 l x 。
4 生长与分化情况 离体培养中金线莲的
分化和生长需要较长的时间 。将表面消毒后
的带芽茎段接种到培养基 ( l) 上 。 一般 20 d
以上 肉眼方可观察出变化 。 刚长 出的小芽一
般为黄 白色 , 随着培养时间的延长逐渐转为
黄绿色 。芽丛在节四 周长出的初期 , 外围覆被
浓密的 白色毛状物 , 后期几乎每个茎节均长
出略带绿色的不定根 , 并伸长生长 。 另外 ,两
种培养基均未见到茎段 外植体形成愈 伤组
织 。 K T 和 6一B A 对继代培养中的金线莲芽诱
导过程均有 良好的作用 , 其 中以 K T 更 为显
著 。 6一 B A 4 m g / L 的 诱 导 率 比 对 照 提 高
5 2
.
3%
, 芽增殖率增加 3 . 2倍 , K T 3 m g / L 的
芽诱导率 比对照提高 64 . 5写 , 芽增殖率增加
4
.
8倍 。 金线莲对 6一 B A 有较高的忍受力 , 当培
养基中的 6一B A 浓度达到 7 m g / L 时 , 仍未 出现
畸型苗 。 在培养基 ( 2) 上培养 30 d 后 , 芽增殖
力达 9倍左右 。如果在芽诱导前期降低光照度
(如 5 0 0一 6 0 0 1、 ) ,芽增殖率可增至 1 1倍 。
低浓度的 N A A 和 BI A , 不仅能加速其生
长 ,还可诱导根 的发生 , 试管苗粗壮 , 有利于
提高移栽成活率 。 这在工 厂化 生产金线莲试
管苗 时既简化了培养工艺 又缩短 了繁殖周
期 。
2
,
4
一
D 使金线莲芽诱导率 明显 下降 , 在
较高浓度下 (如 2 m g / )L , 会引起褐变死亡 。这
在金线莲的组织培养中应予注意 。
收稿 19 9 5一 0 1一 1 7
l 福建省教委和林 业厅资助课题 。