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瑞香狼毒提取液防治烟草黄瓜花叶病药效试验



全 文 :瑞香狼毒提取液防治烟草黄瓜花叶病药效试验
薛小平 , 王茂胜 , 陈 懿 , 潘文杰 , 李继新* (贵州省烟草科学研究所 ,贵州贵阳 550003)
摘要 [目的]研究瑞香狼毒提取液防治烟草黄瓜花叶病的药效。[方法]在烟苗上喷洒不同浓度的瑞香狼毒提取液 ,观察烟草黄瓜花叶
病的发病情况及烟草体内病毒浓度的变化 ,确定防治效果。[结果] 瑞香狼毒提取液 1 500、1 875、2 250 ml/hm2药后 10 d对烟草黄瓜花叶
病的防治效果分别为 55.0%、59.0%、59.6%, 20%病毒A可湿性粉剂1 500g/hm2的防效为 56.9%,瑞香狼毒提取液处理与清水对照病情
指数差异极显著。喷施瑞香狼毒提取液后烟叶内的病毒浓度降低 ,药后 10 d病毒浓度下降 43.2%~ 45.9%。[结论]瑞香狼毒提取液对
烟草黄瓜花叶病毒具有明显的抑制作用 ,还可以防治其他病害 ,具有更广阔的推广前景。
关键词 瑞香狼毒;烟草;黄瓜花叶病毒
中图分类号 S481+.9  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2008)09-03761-02
Observation on the Control Efficacy of Stellera chamaejasme Extract on Cucumber Mosaic Disease of Tobacco
XUE Xiao-ping et al (Guizhou Institute of Tobacco Science, Guiyang , Guizhou 550003)
Abstract  [ Objective] The purposewas to study the control efficacy of Stellera chamaejasme extracts on cucumbermosaic disease of tobacco.[ Method]
The S.chamaejasme extracts with different concn.were sprayed on tobacco seedlings.The disease status of cucumber mosaic disease of tobacco and the
change of virus concn.in tobacco were observed so as to ascertain the control effect.[ Result] The control effects of spraying S.chamaejasme extracts at
1 500 , 1 875 and 2 250 ml/hm2 on cucumber mosaic disease of tobacco after 10 d were 55.0%, 59.0% and 59.6% respectively and that of spraying
20% virus A WP at 1 500 g/hm2was 56.9%.The difference on disease index between the treatment with S.chamaejasme extracts and CK(clearwater)
was extremely significant.The virus concn.in tobacco leaves sprayed S.chamaejasme extracts reduced by 43.2%~ 45.9% after 10 d.[ Conclusion] S.
chamaejasme extracts had significant inhibitory effect on cucumber mosaic virus of tobacco and also could control the other diseases and had wider popular-
ization prospects.
Key words Stellera chamaejasme;Tobacco;Cucumber mosaic virus
作者简介 薛小平(1981-),男 ,湖北松滋人 ,在读硕士 , 从事烟草栽
培方面的研究。 *通讯作者。
收稿日期 2007-12-18
  瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)俗称断肠草 、馒头花
等 ,为瑞香科狼毒属植物 ,其根入药 ,为中药“狼毒”3种原植
物之一。现代研究表明 ,瑞香狼毒具有抗菌 、抗病毒 、抗肿瘤
等功能;临床用于治疗肿瘤 、结核 、皮肤病 、妇科病 、坐骨神经
痛 、牛肉绦虫病和癫痫等[ 1] 。另有报道 ,将瑞香狼毒开发为
植物农药用于驱虫 、杀蝇 、灭蛆 ,防治农作物 、饲料牧草上的
害虫等[ 2-4] 。由于瑞香狼毒具有较强的抗病毒功能 ,笔者就
其对主要由黄瓜花叶病毒引起的烟草花叶病防治效果进行
试验观察 ,以期为烟草花叶病防治提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料 瑞香狼毒药材(采自四川阿坝州 ,按部颁藏
药标准《瑞香狼毒》测定 ,符合规定);20%病毒A可湿性粉剂
(AWP ,齐齐哈尔四友化工有限公司生产);黄瓜花叶病毒源
CMV(西北农业大学 1996年分离物);无病毒的枯斑三生烟
(Nicotiana tabacum var.sumsum.nc);所用水均为注射用水 ,其
他试剂均为分析纯。
1.2 试验方法
1.2.1 瑞香狼毒溶液的制备。取瑞香狼毒药材 ,加水浸泡 1
h ,按正交设计优选的最佳提取工艺 ,加热煎煮 30min ,取煎出
液 ,重复 3次 ,合并煎出液;浓缩后加乙醇沉淀 ,过滤分离;取
滤液 ,浓缩;加注射用水及其他赋形剂配制成浓度为 20%的
溶液 ,密封 ,灭菌备用。
1.2.2 试验设计。设 5个处理(表 1),分别为喷施 3种浓度
瑞香狼毒提取液(1 500、1 875、2 250 ml/hm2),喷施 20%病毒
A 可湿性粉剂(AWP ,1 500 g/hm2),喷施清水为空白对照。试
验重复 4次 ,每次 5盆烟。
1.3 调查内容与方法 在枯斑三生烟叶标准苗 3 ~ 5叶期 ,
表1 瑞香狼毒提取液防治烟草黄瓜花叶病药效试验方案
Table 1 The test design of drug effect of the extract of Stellera chamae-
jasme L.controlling cucumber mosaic disease of tobacco
组别
Group
用药
Drug
浓度∥ml/ hm2
Concentration
烟苗数∥盆
No.of tobacco
seedlings试验组Ⅰ 瑞香狼毒提取液 1 500 5
Test groupⅠ Extraction of
Stellera Chamaejasme L.
试验组Ⅱ 瑞香狼毒提取液 1 875 5
Test groupⅡ Extraction of
Stellera Chamaejasme L.
试验组Ⅲ 瑞香狼毒提取液 2 250 5
Test group Ⅲ Extraction of
Stellera Chamaejasme L.
阳性对照组 AWP 1 500 5
Positive control
阴性对照组 清水 1 500 5
Negative control water
 注:AWP 浓度单位为 g/hm2。
 Note:Concent ration unit of AWP in test is g/ hm2.
用CMV接种 ,24 h后 ,按表 1规定喷药。并于喷药后第 10和
20日调查叶片的发病率及病情指数。病情分级标准[ 5]如下 ,
0级:全株无病;1级:心叶叶脉透明并轻微花叶或少数叶面
花叶;3级:全株 1/2的叶片花叶 ,少数叶片变形或叶脉变黑;
5级:全株 2/3叶片花叶变形 ,或有小疮斑 ,或植株较健株矮
1/2左右;7级:全株叶片花叶 ,有大疮斑 ,或植株严重矮化 ,
仅有健株的 1/4 ~ 1/3高。计算病情指数和防治效果 。
  利用间接酶联免疫吸附法[ 6] 测定不同处理烟草叶片内
的病毒浓度。于喷药后 10 d采叶测定 。用 0.05mol/L 、pH值
9.6的碳酸包被缓冲液 ,封闭液为 0.1%牛血清蛋白(BSA),
CMV 抗血清工作浓度为 1∶1 500倍 ,用碱性磷酸酶标记A蛋
白[ 7] 检测 CMV与CMV抗血清的特异性免疫反应 ,以 4-硝基
苯磷酸作酶底物 ,在 25 ℃的培养箱放置 2 h ,显色后 ,在DG-
3022A酶联吸附仪记录 OD 值 ,以未接种健康烟草汁液缓冲
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008 , 36(9):3761-3762                  责任编辑 李晓玉 责任校对 李晓玉
液作空白对照排除假阳性反应。对所得结果进行方差分析 ,
新复极差用 Duncan 法检验所得数据的显著性[ 8] 。
2 结果与分析
2.1 瑞香狼毒提取液对烟草黄瓜花叶病的防治效果 由表
2可知 ,瑞香狼毒提取液 1 500 、1 875、2 250 ml/hm2 药后 10 d
防效分别为 59.6%、59.0%、55.0%;其中 ,1 500、1 875 ml/hm2
用量比 20%病毒A 可湿性粉剂 1 500 g/hm2 用量的防效略
高 ,2 250 ml/hm2 用量防效略低。药后 20 d各药剂处理防效
达 50%以上。方差分析表明 ,药后 10 d瑞香狼毒提取液 3个
处理的病情指数与 20%病毒A可湿性粉剂 1 500 g/hm2 之间
无显著差异;而与清水对照差异极显著 。
表 2 瑞香狼毒提取液对烟草黄瓜花叶病的防治效果
Table 2 The effect of the extract of Stellera chamaejasme L.controlling
cucumber mosaic disease of tobacco
组别
Group
药后10 d
10d after drug application
平均病指
Average
disease index
相对防效∥%
Relative
control effect
药后 20 d
20d af ter drug application
平均病指
Average
disease index
相对防效∥%
Relative
control effect
试验组Ⅰ 25.4 bB 59.6 31.7 50.9
Test groupⅠ
试验组Ⅱ 25.8 bB 59.0 30.4 52.9
Test groupⅡ
试验组Ⅲ 28.3 bB 55.0 32.1 50.3
Test group Ⅲ
阳性对照组 27.4 bB 56.9 32.1 50.3
Positive control
阴性对照组 62.9 aA 64.6
Negative control
2.2 瑞香狼毒提取液不同处理烟叶内病毒浓度变化 喷施
瑞香狼毒提取液后可使处理烟叶内病毒浓度降低 。使用瑞
香狼毒提取液 ,药后 10 d可使病毒浓度下降 43.2%~ 45.9%
(表 3)。
3 小结
试验结果表明 ,瑞香狼毒提取液对烟草黄瓜花叶病毒具
有明显的抑制作用 ,与防治病毒病专用药剂20%病毒A可湿
性粉剂效果相当;同时瑞香狼毒提取液还可防治其他真菌和
细菌性病害 ,因而在农业生产上具有广阔的推广前景 。
表 3 瑞香狼毒提取液处理药后10 d烟叶内病毒浓度变化
Table 3 The concentration of cucumber mosaic virus in the leaves after in-
sufflated the Stellera chamaejasme L.on the tobacco for 10 days
组别
Group
CMV浓度(OD值)
CMV concentration
病毒浓度下降率∥%
Decreasing rate of virus sconcentration
试验组Ⅰ 0.79     45.9
Test groupⅠ
试验组Ⅱ 0.80 45.2
Test group Ⅱ
试验组Ⅲ 0.83 43.2
Test groupⅢ
阳性对照组 0.78 46.6
Positive control
阴性对照组 1.46 0
Negative control
参考文献
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10.
(上接第 3760页)
2.2 5种中药水提取物对茄二十八星瓢虫成虫产卵的影响
 由表 2可知 , 5种中药水提取物对茄二十八星瓢虫成虫产
卵都有不同程度的影响。其中黄连提取物对茄二十八星瓢
虫成虫产卵影响最大 ,为(89.3±7.6)粒;其次为丹皮和野菊
花提取物 ,处理后茄二十八星瓢虫成虫产卵分别为(106.7±
12.1)和(110.3±11.2)粒;而百部和黄柏提取物处理后产卵
表 2 5种中药水提取物对茄二十八星瓢虫成虫产卵的影响
Table 2 Effects of water extracts of Chinese medicines on oviposition
of Henosepilachna vigintioctopunctata Fabricius
处理Treatments 产卵数∥粒 Eggs
黄连处理组(Coptis chinensis Franch group) 89.3±7.6 e
黄柏处理组(Phellodendron chinense Schneid group) 165.3±20.3 bc
丹皮处理组(Paeonia suffruticosa Sndr.group) 106.7±12.1 de
百部处理组(Sessile stemona Root group) 154.2±9.8 bcd
野菊花处理组(Indian dendranthema Flower group) 110.3±11.2 cde
CK 227.7±10.3 a
数分别为(154.2±9.8)和(165.3±20.3)粒 。由此可见 , 5种
中药水提取物对茄二十八星瓢虫成虫产卵影响大小依次是:
黄连提取物>丹皮提取物>野菊花提取物>百部提取物>
黄柏提取物。
3 小结与讨论
试验结果表明 , 5种中药水提取物对茄二十八星瓢虫的
卵孵化率 、成虫产卵均有不同程度影响。其中黄柏水提取物
对茄二十八星瓢虫卵孵化率影响最为显著 ,黄连水提取物对
茄二十八星瓢虫成虫产卵抑制作用最显著。此外 ,在试验过
程中还观察到 ,各提取物浓度对产卵前期有一定的影响 ,提
取物浓度越高 ,产卵前期越长 ,但差异不显著。中药作用成
分复杂 ,5种中药水提取物中究竟是哪些活性物质对茄二十
八星瓢虫有影响还有待于进一步研究。
参考文献
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