全 文 ：第３８卷第１期
２０１６年１月
湖北大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ）
Ｖｏｌ．３８　Ｎｏ．１　
Ｊａｎ．，２０１６　
收稿日期：２０１５－０４－２３
基金项目：国家烟草专卖局重点科技项目（１１０２０１３０２０１５）资助
作者简介：徐清辉（１９８８－），男，硕士生，Ｅ－ｍａｉｌ：４７６０１９１５８＠ｑｑ．ｃｏｍ；胡国元，通信作者，教授，Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｇｙ７０１＠１６３．ｃｏｍ；杨春雷，
通信作者，研究员，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｃｌ１９３７３７＠１６３．ｃｏｍ
文章编号：１０００－２３７５（２０１６）０１－００５０－０６
臭蒿水乳剂抗烟草黑胫病的作用
徐清辉１，胡国元１，杨春雷２，余君２，杨锦鹏２
（１．武汉工程大学化工与制药学院，湖北 武汉４３００７４；２．湖北省烟草科学研究院，湖北 武汉４３００３０）
摘要：采用菌丝生长速率法，测定臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长的毒力及其药效稳定性；采用菌丝块诱导孢子囊
产生法测定臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊抑制的毒力；最后对盆栽防效结果进行探讨．结果表明，低浓度臭蒿水乳剂对
烟草疫霉菌丝生长和孢子囊的产生均有明显抑制作用，对烟草疫霉菌丝生长抑制的ＥＣ５０和ＥＣ９０值分别为５．９３ｇ·Ｌ－１、
５２．５６ｇ·Ｌ－１，其对烟草疫霉菌丝生长的抑制作用具有良好的ｐＨ值稳定性、光稳定性、热稳定性以及贮藏稳定性；对烟
草疫霉孢子囊产生抑制的ＥＣ５０、ＥＣ９０值分别为６．５６ｇ·Ｌ－１，６５．２２ｇ·Ｌ－１．盆栽防效及对烟草幼苗生长影响实验表明，
２２ｄ其对烟草黑胫病的防效为５６．２％，且对烟草幼苗生长几乎没有影响．
关键词：臭蒿；烟草疫霉；毒力测定；稳定性；防效
中图分类号：Ｑ９３６　　文献标志码：Ａ　　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２３７５．２０１６．０１．０１０
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｈｅｄｉｎｉ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ
ａｇａｉｎｓｔ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｂｌａｃｋ　ｓｈａｎｋ　ｄｉｓｅａｓｅ
ＸＵ　Ｑｉｎｇｈｕｉ　１，ＨＵ　Ｇｕｏｙｕａｎ１，ＹＡＮＧ　Ｃｈｕｎｌｅｉ　２，ＹＵ　Ｊｕｎ２，ＹＡＮＧ　Ｊｉｎｐｅｎｇ２
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｗｕｈａｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　４３００７４，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｔｏｂａｃｃｏ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｈｕｂｅｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｗｕｈａｎ　４３００３０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｈｅｄｉｎｉｉ　Ｏｓｔｅｎｆ．ｅｔ　Ｐａｕｌｓ．ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ
ｗａｔｅｒ　ｔｏ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ａ．ｈｅｄｉｎｉｉ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｔｏ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ
ｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　ｓｐｏｒａｎｇｉａ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｔｔｅｄ　ｐｌａｎｔ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｌｏｗ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　Ａ．ｈｅｄｉｎｉｉ
ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｈａｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｔｏ　Ｐ．Ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＥＣ５０ａｎｄ　ＥＣ９０ｔｏ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｗｅｒｅ　５．９３ｇ·Ｌ－１　ａｎｄ
５２．５６ｇ·Ｌ－１．Ｔｈｅ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｆｒｏｍＡ．ｈｅｄｉｎｉｉ　ｈａｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｐＨ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｌｉｇｈｔ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ｔｈｅｒｍａｌ
ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｓｔｏｒａｇｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｐ．Ｐａｒａｓｉｔｉｃａ．Ｔｈｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ＥＣ５０
ａｎｄ　ＥＣ９０ｔｏ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｓｐｏｒａｎｇｉａ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｗｅｒｅ　６．５６ｇ·Ｌ－１　ａｎｄ　６５．２２ｇ·Ｌ－１．Ｔｈｅ
ｐｏｔｔｅｄ　ｐｌａｎｔ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ
ｗａｔｅｒ　ｆｒｏｍ　Ａ．ｈｅｄｉｎｉｉ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｔｏ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｗａｓ
５６．２％ｉｎ　２２ｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ｉｎ　ｗａｔｅｒ　ｆｒｏｍＡ．ｈｅｄｉｎｉ　ｈａｄ　ａｌｍｏｓｔ　ｎｏ　ｅｆｅｃｔ　ｔｏ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｈｅｄｉｎｉｉ　Ｏｓｔｅｎｆ．ｅｔ　Ｐａｕｌｓ．；Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ；ｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ；ｓｔａｂｉｌｉｔｙ；ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｅｃｔ
第１期 徐清辉，等：臭蒿水乳剂抗烟草黑胫病的作用 ５１　
０　引言
烟草黑胫病是烟草种植行业上一种毁灭性的真菌性病害，高温高湿环境，极易发病．发病时常常引
起“碎倒”症状，造成烟苗成片腐烂［１］．目前，植物源杀菌剂在烟草黑胫病上的防治利用报道比较多，印度
研究者发现兰香、桉树、蒌叶３种植物叶片抽提物的１０％水溶液对黑胫病菌的抑制率达到８４．４％～
８６．５％［２］；杨晓凡［３］等发现２种中草药的提取物对烟草黑胫病菌有明显的抑制效果；赖荣泉等［４］研究发
现大蒜的水提物和乙醇浸出物对烟草黑胫病菌的抑制率高达１００％．
臭蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｈｅｄｉｎｉｉ　Ｏｓｔｅｎｆ．ｅｔ　Ｐａｕｌｓ．）为一年生草本，植株有浓烈臭味．具有有清热、解毒、凉
血、消炎、除湿之效，有报道其对粘虫有杀虫作用［５］．张芊等［６］发现低浓度臭蒿醇提液对烟草黑胫病菌的
菌丝具有良好的抑制效果，本研究探索了臭蒿醇提液的适宜剂型，并对其抗烟草黑胫病的作用进行了初
步研究．
１　实验
１．１　实验材料、试剂及培养基　臭蒿，植物材料，选取地上部分，主要为叶和茎；鄂烟一号，供试植物；均
由湖北烟草科学研究院提供．烟草疫霉（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）由湖北省烟草科学研
究院提供．无水乙醇、吐温－８０、蔗糖、七水硫酸亚铁、四水氯化锰、七水硫酸锌，均为分析纯；琼脂
（０４００１０，日本）等．燕麦琼脂（ＯＡ）培养基［６］，用于烟草疫霉菌的活化与培养．
１．２　实验方法
１．２．１　臭蒿的提取以及水乳剂的研制
１．２．１．１　植物材料的预处理　将臭蒿的茎和叶４０℃烘干，粉碎过孔径为０．１５ｍｍ筛子（１００目），贮存
于棕色瓶中，置于干燥器中，备用．
１．２．１．２　植物材料的浸提　取预处理后的臭蒿２０ｇ于锥形瓶中，加入１００ｍＬ无水乙醇，密封后于恒
温（４０℃）摇床中震荡浸提３ｄ，经布氏漏斗加压抽提后，利用旋转蒸发仪４０℃减压浓缩［７－８］至２５ｍＬ．
１．２．１．３　水乳剂的研制　在浓缩液中加入２５ｍＬ蒸馏水和２ｍＬ吐温－８０，９０℃水浴下加热０．５ｈ使乙醇挥
发，同时剧烈振荡使之乳化［９］，补加蒸馏水至总体积为２５ｍＬ后，超声波处理５ｍｉｎ，制得含药浓度为
８００ｇ·Ｌ－１的臭蒿乙醇提取物水乳剂，贴上标签，注明药液名称、浓度和时间，密封保藏于冰箱（４℃）中，备用．
１．２．２　臭蒿水乳剂的毒力测定
１．２．２．１　菌丝生长速率法　向ＯＡ培养基内加入备用的臭蒿水乳剂，制成一定质量浓度的含药培养基
平板，每组设５个重复，对照组加同体积的乳化剂溶液．然后在培养皿中心接种直径７．６８ｍｍ的烟草疫
霉的菌饼．于恒温培养箱中２８℃恒温培养，在１４４ｈ后观察记录菌丝生长情况，十字交叉法测量菌落生
长直径．用下述公式计算菌丝生长抑制率［６］．
菌丝生长抑制率／％ ＝（对照菌落直径－处理菌落直径）／（对照菌落直径－菌饼直径）×１００．
１．２．２．２　菌丝块诱导烟草疫霉孢子囊产生法　采用菌丝块诱导孢子囊产生法［１０］，在超净台中，挑取生
长２８ｄ的烟草疫霉菌丝块（直径７．６８ｍｍ），放入灭菌培养皿中，每皿６块，菌丝面朝上，然后向皿中加
入备用的臭蒿水乳剂和０．１％ＫＮＯ３ 溶液，制成一定质量浓度的含药溶液，对照组只加０．１％ＫＮＯ３ 溶
液，实验组和对照组体积均为１０ｍＬ，置于２８℃恒温培养箱中培养．３ｄ后在显微镜（低倍镜：１０×１０）
下观察各组孢子囊产生情况［１０－１１］．
孢子囊抑制率／％＝（对照组孢子囊数量－处理孢子囊数量）／对照组孢子囊数量×１００．
１．２．２．３　臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长或孢子囊产生的毒力测定　根据倍比稀释法的原则，在一定
范围内设置５组药剂浓度梯度值，并采用菌丝生长速率法或菌丝块诱导孢子囊产生法测定每组对应的
抑制效果．利用浓度梯度值（Ｘ）和菌丝生长抑制率或孢子囊抑制率的机率值（Ｙ），用Ｅｘｃｅｌ２０１２软件拟
合直线毒力回归方程，并求出抑制率达到５０％和９０％时所对应臭蒿水乳剂的浓度值ＥＣ５０值和ＥＣ９０
值［１２］，以评价臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长或孢子囊产生的毒力大小．
５２　 湖北大学学报（自然科学版） 第３８卷
１．２．３　臭蒿水乳剂的稳定性
１．２．３．１　ｐＨ稳定性　将配制好的已灭菌的ＯＡ培养基置于微波炉中融化，待其冷却至６０℃左右，于
超净工作台中无菌操作，在培养基凝固前用１ｍｏｌ·Ｌ－１　ＨＣｌ或１ｍｏｌ·Ｌ－１　ＮａＯＨ调节４组的ｐＨ，使
ｐＨ值为６．０，７．０，８．０，９．０［１２－１３］．然后将配置好的臭蒿水乳剂（８００ｇ·Ｌ－１）加入培养基中，使其在培养
基中的浓度为２５ｇ·Ｌ－１．之后操作同１．２．２．１．
１．２．３．２　热稳定性　分别量取一定量的臭蒿水乳剂置于烘箱中，并调节温度为１００，１１０，１２０℃［１２－１３］，
不同温度处理２０ｍｉｎ后．然后将处理后的臭蒿水乳剂（８００ｇ·Ｌ－１）加入培养基中，使其在培养基中的
浓度为２５ｇ·Ｌ－１．之后操作同１．２．２．１．
１．２．３．３　光稳定性　分别量取一定量的臭蒿水乳剂置于超净工作台上，以功率为３０Ｗ 的紫外灯分别
处理１５，３０，４５ｍｉｎ，和６０ｍｉｎ，药液距紫外光源的距离约５０ｃｍ［１２，１３］．然后将处理后的臭蒿水乳剂（８００
ｇ·Ｌ－１）加入培养基中，使其在培养基中的浓度为２５ｇ·Ｌ－１．之后操作同１．２．２．１．
１．２．３．４　贮藏稳定性　分别量取一定量的臭蒿水乳剂置于室温（１８～２５℃）保存［１３］３０，６０，９０ｄ，和１２０
ｄ．然后将处理后的臭蒿水乳剂（８００ｇ·Ｌ－１）加入培养基中，使其在培养基中的浓度为２５ｇ·Ｌ－１．之后
操作同１．２．２．１．
１．３　盆栽防效实验　采用随机组合方案，实验共设４个处理：空白对照组１（无菌水）；溶剂对照组２
（吐温－８０溶液）；加药组３（臭蒿水乳剂）；阳性对照组４（农药甲霜灵５００倍稀释液）．供试烟草品种为：鄂
烟１号（烟龄为９０ｄ），实验地点为武汉工程大学．接种前２ｄ对各组施加相对应的药剂，５０ｍＬ／株，将已
配好的孢子悬液［１０］注射到烟株茎基部，注射１ｍＬ／株．在接种黑胫病孢子后，保持室内温度不低于２８
℃，相对湿度大于９０％，时间保持在３～５ｄ．接种后每隔４ｄ于当天下午对烟苗定时进行灌根施药和发
病情况的调查．参考ＧＢ／Ｔ　２３２２２－２００８烟草病虫害分级及调查方法［１４］，统计烟草黑胫病发病分级情况，
同时参考ＧＢ／Ｔ　２３２２３－２００８烟草病害药效实验方法计算药效［１５］．
药效计算方法：
１）病情指数＝［Σ（各级病株数或叶数×该病级值）］／（调查总株数或叶数×最高级值）×１００，
２）防效效果＝（空白对照区病指数－处理区病指数）／（空白对照区病指数）×１００％．
１．４　臭蒿水乳剂对烟草幼苗生长的影响实验　设置２组分别为实验组１和空白组０，实验组１施加浓
度为１００ｇ·Ｌ－１臭蒿水乳剂，空白组０施加无菌水为空白对照，约１０ｍＬ／株，每处理１０株．以鄂烟一号
为供试植物，当幼苗长至６～８叶期喷药处理，第一次喷药前测株高，每隔７ｄ喷药ｌ次，每次喷药前测量
株高，共测４次，分析株高和形态变化情况，以及各处理株高与对照组相比是否存在显著性差异等［１６］．
培养条件为：２８℃，光照时长１６ｈ／ｄ，光照强度６　０００　１ｘ，相对湿度８５％，于人工气候箱里培养，每
天浇适量的水并且每１０ｄ施一次 Ｈｏｎｇｌａｎｄｓ全营养液．
１．５　数据处理　采用Ｅｘｃｅｌ２０１２软件进行数据分析．
２　结果和分析
２．１　臭蒿水乳剂的毒力
２．１．１　臭蒿水乳剂对烟草疫疫霉菌丝生长的毒力　由表１和图１可知，随着臭蒿水乳剂浓度的提高，
其对烟草疫霉菌丝生长抑制作用也在增强．在１４４ｈ，臭蒿水乳剂浓度在６．２５ｇ·Ｌ－１以上，对烟草疫霉
菌丝生长抑制作用均保持在５０％以上．
表１　１４４ｈ不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长的毒力
浓度／ｇ·Ｌ－１ 培养时间／ｈ
菌落直径／ｍｍ
对照组 加药组
抑菌率／％
５０．０００　 １４４ｈ ７０．４２±０．８５　 １８．２３±０．３９　 ８３．１８
２５．０００　 １４４ｈ ７１．６３±０．７７　 ２４．４４±０．８６　 ７３．７９
１２．５００　 １４４ｈ ７３．００±０．６１　 ３３．４５±０．６０　 ６０．５５
６．２５０　 １４４ｈ ７１．５０±１．５６　 ３７．７８±０．９０　 ５２．８３
３．１２５　 １４４ｈ ７０．２１±１．３２　 ４６．８８±０．６５　 ３７．３１
第１期 徐清辉，等：臭蒿水乳剂抗烟草黑胫病的作用 ５３　
图１　不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长的毒力
１、２、３、４、５中ＣＨ水乳剂浓度分别为５０、２５、１２．５、６．２５、３．１２５ｇ·Ｌ－１
１、２、３、４、５中左图为实验组，右图为对照组
　
表２　不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊
数量产生的影响
水乳剂浓度／
（ｇ·Ｌ－１）
孢子囊数／个
对照组 实验组
孢子囊抑制率／
％
５　 ２７　 １６　 ４０．７４
１０　 ２７　 １３　 ５１．８５
２０　 ２７　 ９　 ６６．６７
４０　 ２７　 ６　 ７７．７８
８０　 ２７　 １　 ９６．２９
　　由表２可以得出，臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长
的毒力回归方程为Ｙ＝０．８５７　８Ｘ＋４４．９１２　０，相关系数ｒ
＝０．９１３　２，由毒力回归方程计算出来的ＥＣ５０值为５．９３
ｇ·Ｌ－１、ＥＣ９０值为５２．５６ｇ·Ｌ－１．
２．１．２　臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊产生的毒力　由
表２和图２可知，随着臭蒿水乳剂浓度的提高，其对烟草
疫霉菌孢子囊产生的抑制作用也在增强．根据表２可以
算出，不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊产生抑制
的毒力回归方程为Ｙ＝０．６８１　９　Ｘ＋４５．５２６　０，相关系数
ｒ＝０．９５６　０．由毒力回归方程计算出来的ＥＣ５０、ＥＣ９０分别
为６．５６、６５．２２ｇ·Ｌ－１．
图２　不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢子囊数量产生的影响
１、２、３、４、５、６浓度分别为０、５、１０、２０、４０、８０ｇ·Ｌ－１　
２．２　臭蒿水乳剂的稳定性测定
２．２．１　ｐＨ值的稳定性　结果如图３，臭蒿水乳剂浓度在２５ｇ·Ｌ－１时，在培养基ｐＨ 值为６～９范围
内，对烟草疫霉菌丝生长的抑制活性基本一致，均保持在７０％以上．
２．２．２　热稳定性　由图４可知，臭蒿水乳剂在温度１００、１１０、１２０℃的抑菌活性比较稳定，且经过１００
℃处理２０ｍｉｎ的抑菌活性略高于其他各组，其次抑菌活性最高的是未经处理的水乳剂．
图３　不同ｐＨ值臭蒿水乳剂
对烟草疫霉菌丝生长的影响
　
　　　　
图４　不同温度处理后的水乳剂
对烟草疫霉菌丝生长的影响
　
２．２．３　光稳定性　从图５可知，１２０ｈ，在紫外光照射０～６０ｍｉｎ范围内，各处理组和未经处理组抑菌
活性均保持在７５％左右可知，紫外光照射对水乳剂活性影响不大．在７２ｈ，浓度２５ｇ·Ｌ－１的水乳剂在
紫外光下分别处理１５、３０、４５、６０ｍｉｎ时，对烟草疫霉的抑制率分别为８３．３９％、８１．１２％、８０．４７％、
７８．２８％均略高于同浓度未经紫外光处理的水乳剂对烟草疫霉的抑制率７５．８３％．在１２０ｈ时，各组对烟
５４　 湖北大学学报（自然科学版） 第３８卷
草疫霉菌丝的抑菌率大致接近．
２．２．４　贮藏稳定性　由图６可知，随着时间的延长水乳剂的活性逐渐降低，保存３０、６０、９０ｄ的水乳剂
在１４４ｈ的抑菌率分别７８％，７４．０１％，６９．３１％．但水乳剂９０ｄ和１２０ｄ的抑菌率相差不大，抑菌活性基
本稳定．也就是说在０～９０ｄ之间可能部分抑菌活性物质不稳定或者分解，导致其活性降低，９０～１２０ｄ
的抑菌活性基本维持在７０％．
图５　不同紫外光照射时间的臭蒿水乳剂
对烟草疫霉菌丝生长的影响
　
　　　　
图６　室温不同贮藏时间臭蒿水乳剂
对烟草疫霉菌丝的生长的影响
　
２．３　臭蒿水乳剂的盆栽防效实验　由表３可知，试验中化学农药甲霜灵对烟草黑胫病的防治效果很
好，几乎对烟草黑胫病的防治达到１００％．臭蒿水乳剂对烟草黑胫具有防治的效果但低于甲霜灵的防治
效果，同时，从病指来看，对照组病情指数呈现上升趋势，而实验组病情指数出现下降趋势，同时也从侧
面说明该水乳剂对烟草黑胫病的病情具有抑制作用．实验中，发现实验组植株发病的病斑并无扩大趋势
和发病初期形成的病斑大小大致相同，这说明有部分植株已经痊愈，更深层反映该水乳剂对烟草黑胫病
可能有一定的治疗作用．
表３　不同时间各处理组对烟草黑胫病的防治效果
发病天数
不同组烟草黑胫病发生的病情指数
１　 ２　 ３　 ４
烟草黑胫防治效果
１　 ２　 ３
１０ｄ ６０．０　 ６８．０　 ４６．７　 ０　 ２２．２％ ３１．３％ １００％
１４ｄ ６４．４　 ７６．０　 ４６．７　 ０　 ４４．１％ ３８．５％ １００％
１８ｄ ７３．３　 ７６．０　 ４６．７　 ０　 ５０．９％ ３８．５％ １００％
２２ｄ ８２．２　 ７６．１　 ３６．０　 ０　 ５６．２％ ３８．５％ １００％
防效１为加药组３（水乳剂组）以组１（无菌水组）为对照的防效，防效２为加药组３（水乳剂组）以组
２（吐温－８０组）为对照防效，防效３为阳性对照组４（农药组）以组１（无菌水组）为对照的防效．
图７　不同施药时间臭蒿水乳剂对烟草幼苗生长状况的影响
０代表空白组、１代表臭蒿水乳剂组
　
２．４　臭蒿水乳剂对烟草幼苗的影响　由表４和图７可知，空白对照组烟苗和实验组烟苗平均增长率在
０～２１ｄ，大致相同，但空白对照烟苗株高平均增长率稍高于实验组．由图８可知，２１ｄ时，实验组烟叶有
稍许变黄，占总叶数的１０％以下，推测原因可能是施药浓度过大，也可能施药频率过高或者其他原因造
成．综合表４和图８，推测施加１００ｇ·Ｌ－１的臭蒿水乳剂对烟苗生长基本不造成危害．
第１期 徐清辉，等：臭蒿水乳剂抗烟草黑胫病的作用 ５５　
表４　不同施药时间臭蒿水乳剂对烟苗株高生长的影响
组别 喷药天数 株高平均值 增长率／％ 平均增长率／％
０
１
　０　 １０．２９　 ０
　７　 １１．５２　 １１．９４
１４　 １２．８７　 １１．６６
２１　 １４．３６　 １１．６２
　０　 １１．５２　 ０
　７　 １２．７２　 １０．３６
１４　 １４．０７　 １０．６１
２１　 １５．５１　 １０．２３
１１．７４
１０．４０
３　结语
１）通过毒力测定，得出１４４ｈ时臭蒿水乳剂对烟草疫霉菌丝生长的抑菌率，由其拟合的毒力回归方
程计算出其ＥＣ５０为５．９３ｇ·Ｌ－１，同时由不同浓度臭蒿水乳剂对烟草疫霉孢囊产生抑制的毒力回归方
程计算出其ＥＣ５０为６．５６ｇ·Ｌ－１．上述结果说明低浓度臭蒿水乳剂对烟草黑胫病病原菌具有很好的抑
制作用．
２）稳定性实验结果表明该水乳剂具有良好的稳定性，尤其是光稳定性和常温贮藏稳定性比较好．
作为农药使用的植物提取物，可能存在储存中的氧化问题，最典型的例子是天然除虫菊素，由于光稳定
性差而限制其在大田农作物上的应用，由于该水乳剂光稳定性比较好，且在很长时间内依然保持很高抑
菌率，故其有开发成大田使用的植物源农药的潜能．
３）臭蒿水乳剂２２ｄ对烟草黑胫病的防效为５６．２％，盆栽防效实验表明其对烟草黑胫病具有一定
防治效果和治疗效果，同时由烟苗生长影响实验结果说明臭蒿水乳剂对烟苗基本不造成危害．
上述对烟草黑胫病的药效实验结果表明臭蒿水乳剂具有较高的抑菌活性，且对烟苗基本不造成伤害．
在烟草生长周期内保持较高抑菌活性，且具有良好的光稳定性，因此，用臭蒿水乳剂来防治烟草作物病害，
不仅能高效地防治病害的发生，且符合环保、健康、持续发展的理念，后续可以考虑进一步改进该植物源杀
菌剂剂型，将其广泛地应用于烟区，生产高品质、无残留的烟叶，降低农药残留对人身体造成的危害．
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（责任编辑　游俊）