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茺蔚子降血压活性成分筛选的实验研究



全 文 :茺蔚子降血压活性成分筛选的实验研究
高文义 ,李银清 ,蔡广知 ,陶贵斌 ,贡济宇*
(长春中医药大学 ,吉林 长春 130117)
  摘 要:目的:观察茺蔚子的降压作用并对其降压作用的具体化学成分进行初步探讨。方法:以正常大鼠
在给药前后血压变化情况 ,观察茺蔚子的降压作用 。空白对照组给予相应量的蒸馏水 ,阳性对照组给予硝苯吡
啶0.003 g kg;实验组给予茺蔚子醇提液的乙醚 、乙酸乙酯 、正丁醇和水萃取物 ,剂量为 0.216 g mL;灌胃给药 ,
连续 10 d;采用颈动脉插管法 ,分别观察并记录最后 1次给药后 10 、20 、30 、45 、60 min时的血压变化。结果:茺
蔚子水层对正常大鼠有明显降压作用(P <0.05),正丁醇层 、乙酸乙酯层 、乙醚层均可使正常大鼠收缩压降低
(P >0.05),对舒张压无明显影响 ,但有一定降低趋势 。结论:茺蔚子水溶性成分对正常大鼠降压作用明显 ,水
层中主要含生物碱类成分 ,生物碱可能是茺蔚子降压作用的主要化学成分 。
  关键词:茺蔚子;降压作用;化学成分;大白鼠
  中图分类号:R285.6   文献标识码:A   文章编号:1007-4813(2008)02-0142-02
 基金项目:吉林省教育厅资助项目(吉教科合字〔2005〕第 53号)
 作者简介:高文义(1967-),男 , 吉林长春市人 , 硕士研究生 ,副教授。研究方向:药物分析学。
*通讯作者:贡济宇 ,女 , 教授 ,硕士研究生导师。 E-mail:lyq811008@tom.com
  茺蔚子为唇形科植物益母草 Leonurus japonicus
Houtt.的干燥成熟果实 。史载于《神农本草经》 ,列为
上品 ,历代本草均有收载 。据报道[ 1-5] ,茺蔚子主要
用于治疗原发性高血压 、子宫脱垂 、甲状腺机能亢进
等症 。茺蔚子化学成分丰富[ 6-10] ,但是对其降血压作
用的成分在国内尚未见详细报道 。本实验对茺蔚子
的降血压作用的成分进行了初步研究 ,为阐明其降血
压作用和进一步开发利用奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 昆明种大白鼠 ,体重 180-200 g ,雄性 ,
由长春中医药大学中药药理动物室提供 。
1.1.2 药物 茺蔚子由吉林省宏检医药药材有限公
司购进;硝苯吡啶 ,杭州药厂生产 ,批号:900722;戊巴
比妥钠溶液 5 g d ,上海化学试剂厂 ,批号 860122;其
他试剂均为国产分析纯。
1.1.3 仪器 实验仪器 BL-410型四道生理记录仪 ,
成都泰盟科技有限公司生产;YH-4型生理压力传感
器 ,北京航天医学工程研究所生产 。
1.2 方法
1.2.1 茺蔚子化学成分提取工艺研究 取茺蔚子粉
末100 g ,超声提取 2次 ,第 1次加 95%乙醇 800 mL ,
第 2次 600 mL ,每次 30 min ,过滤 ,总提取液回收乙
醇 ,转移至蒸发皿中 , 80℃水浴挥散至无醇味 ,用 40
mL蒸馏水转移至分液漏斗中 ,石油醚脱脂 ,除去石油
醚 ,水层继续用 DE ,等量萃取至醚层无色 ,乙醚层回
收溶剂后加 1mL吐温-80蒸馏水定容至 463 mL ,冰箱
冷藏;水层挥散乙醚 ,继续用 EtoAc等量萃取至酯层
无色 ,酯层回收溶剂后用蒸馏水定容至 463 mL ,冰箱
冷藏;水层挥散 EtoAc ,继续用水饱和 n-BuOH 等量萃
取至醇层无色 ,醇层回收溶剂后用蒸馏水定容至 463
mL ,冰箱冷藏;水层挥散至无醇味定容至 463 mL ,冰
箱冷藏 。
1.2.2 分组 雄性大鼠 60只 ,随机分为对照组 ,阳
性对照组 ,茺蔚子水层组(CWZ)、乙醚组(DE)、乙酸
乙酯组(EtoAc)和正丁醇组(n-BuOH),每组 10只 。
1.2.3 给药方式 灌胃给药 ,连续 10 d ,每组每天给药 1
次 ,给药量0.5mL 200 g体重(相当于生药 0.108 g)[ 11] 。
1.2.4 血压测定方法[ 12-13]  大鼠以戊巴比妥钠 50
mg kg体重腹腔注射 ,麻醉 ,仰卧固定于鼠手术台上 ,
剪开颈部正中皮肤 2 cm左右 ,分离肌肉 ,游离出左侧
颈总动脉 ,结扎远心端 ,近心端用动脉夹阻断 ,将动脉
在靠近远心端结扎一侧用眼科剪剪一“V”形小口 ,插
入动脉插管 ,结扎 ,打开动脉夹 。经 YH-4型生理压
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第24卷第2期
2008 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.24
4 , 2008
DOI :10.13463/j.cnki.cczyy.2008.02.058
力传感器与 BL-410型四道生理记录仪生物机能实验
系统连接记录动脉血压。剪开大鼠右上腹部皮肤 ,分
离肌肉 ,打开腹腔 ,分离十二指肠 ,留用给药 ,手术完
毕后约10 min ,待大鼠血压稳定 ,开始记录给药前血
压。然后进行十二指肠末次给药 ,并观察 、记录给药
后10 、20 、30 、45 、60 min时的血压变化 。
1.2.5 降压功效判定标准 显效:舒张压下降 ≥20
mmHg;收缩压下降≥30 mmHg;有效:舒张压下降≥10
mmHg;收缩压下降≥20 mmHg;无效:未达到以上标
准者 。
1.2.6 数据处理 对实验中所测得的血压进行统计
分析 ,计算血压的平均值和均数相差的标准误 ,并进
行组间 t 检验 。
2 实验结果
在连续给药 10 d后 ,与空白对照组比较 ,给予茺
蔚子水层组的收缩压 ,舒张压差异均极显著 ,收缩压
平均降低(35.21 ±11.92)mmHg ,舒张压平均降低
(22.05±5.26)mmHg;给予正丁醇层组 、乙酸乙酯组 、
乙醚组收缩压差异显著 ,但舒张压无明显影响 ,但有
降压趋势。见表 1。
表 1 CWZ 对正常大鼠血压的影响(n=10)
组  别
给药前(mmHg)
收缩压 舒张压
给     药     后(mmHg)
10′ 20′ 30′ 45′ 60
收缩压 舒张压 收缩压 舒张压 收缩压 舒张压 收缩压 舒张压 收缩压 舒张压
空白组 127.01 82.99 146.76 83.22 150.42 86.88 152.36 86.13 143.96 81.52 145.75 82.78
阳性对照 119.06 62.12## 123.55## 56.59## 121.16# 56.45## 129.19# 66.39## 115.02 46.09 98.38#3 43.35
CWZ 114.14 69.89## 114.66## 68.00## 117.46## 68.24## 118.50# 65.72## 110.50## 55.89## 102.06## 52.45
n-BuOH 103.25## 72.29# 116.39## 78.64# 119.11 79.37# 121.88 76.48 122.95# 81.34 123.28# 81.92
EtoAc 112.90# 74.80 122.26# 80.43 122.39## 78.49# 125.45## 80.35 128.66 80.95 126.99# 77.17
DE 110.20# 78.92 119.98## 86.62# 123.83## 87.37 127.33## 88.27 126.88# 86.77 126.96# 86.12
  注:与空白对照组进行组间 t检验 ,各组比较:#P<0.05, ##P<0.01
3 小结与讨论
茺蔚子化学成分丰富 ,有报道[ 14] 从茺蔚子的乙
酸乙酯层中分离得到了 6 种成分 ,分别为 β-谷甾醇 、
汉黄芩素 、槲皮素 、胡萝卜苷 、magastigmane 和核黄素 ,
从水层中分离得到一个生物碱成分 ,经波谱鉴定为益
母草宁 。茺蔚子中还含有其他一些生物碱类成分。
在临床中除用于治疗月经不调 、经闭 、痛经 、产后瘀血
腹痛 、目赤肿痛 、目暗不明 、头晕胀痛外 ,还常用于治
疗原发性高血压 ,而且降压作用明显[ 15-16] 。
经过本实验可知中药茺蔚子确实具有降压作用 ,
与临床应用相符合。对正常大鼠血压作用明显 ,其水
溶性成分对正常大鼠降压作用尤为明显 ,水层中主要
含有生物碱类成分 ,可能是茺蔚子降压作用的主要化
学成分。其降压作用的机理还有待于进一步探讨 。
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(收稿日期:2007-12-20;修回日期:2008-01-22)
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第24卷第2期
2008 年 4月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1.24
4 , 2008