全 文 ：收稿日期:2008-02-01;　修订日期:2008-04-27
基金项目:广西壮族自治区科学技术厅课题(No.桂科攻 0428005-3)
作者简介:梁　宁(1974-),女(汉族),广西容县人 ,现任广西中医学院壮
医药学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事民族药研究与开发工作.
鸡血藤总黄酮对血虚小鼠抗贫血作用及机理研究
梁　宁 , 韦松基 , 林启云
(广西中医学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 观察鸡血藤总黄酮(STF)对化学因素所致的血虚小鼠外周血象及血清白细胞介素 -3(IL-3),促红细胞生
成素(EPO)水平的影响。方法 采用盐酸苯肼(APH)、环磷酰胺(CTX)复合造模 , 建立血虚小鼠模型 , 检测外周血象
RBC, HGB, HCT及血清 IL-3, EPO水平。结果 与正常对照相比 ,模型小鼠的外周血象 RBC, HGB, HCT, 血清中的 IL-3
降低 , 而 EPO升高(P<0.01), 鸡血藤总黄酮各剂量组的外周血象 RBC, HGB, HCT, IL-3水平高于模型对照组(P<
0.05)、EPO水平显著低于模型对照组(P< 0.01)。结论 鸡血藤总黄酮具有抗贫血作用 ,其作用机理可能与促进机体分
泌 IL-3、调节 EPO水平 , 促进红系造血有关。
关键词:鸡血藤总黄酮;　血虚;　白细胞介素 -3;　促红细胞生成素
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0362-01
StudyontheBloodEnrichingEffectandMechanismofSpatholobussuberectTotalFla-
vonoids
LIANGNing, WEISong-ji, LINQi-yun
(GuangxiColegeofTraditionalChineseMedicine, Nanning, 530001, China)
Abstract:ObjectiveToobservetheefectsofSuberectspatholobustotalflavonoids(STF)ontheperipheralbloodhemogramand
serumlevelsofIL-3andEPOinhemophthisismice.MethodsThemethodsofs.c.PHHandi.p.CTXwereusedtoinducethe
modelofhematopeniainmice.Theperipheralbloodhemogramandtheserum levelsofIL-3 andEPOweremeasured.
ResultsSTFcouldobviouslyincreasethenumbersofHGB, RBC, HCTandthelevelofIL-3 ofhemophthisismiceanddegrade
thelevelofEPO.ConclusionAllresultssuggestedthatSTFcanenrichbloodSTFandrecoverthehaematogenesisfunctionofhe-
mophthisismicebyincreasingthelevelofIL-3 andregulatingtheEPOlevel.
Keywords:Suberectspatholobus;　Totalflavonoids;　Hemophthisis;　IL-3;　EPO
　　鸡血藤是一种活血化瘀的壮药 , 主要分布在广西 、广东。其
性温 , 味苦 、甘 , 归肝 、肾经。有补血 、活血 、通络的功效 , 用于治疗
月经不调 、血虚萎黄 、麻木瘫痪 、风湿痹痛等。 《本草纲目拾遗》
记载鸡血藤 “活血”, 《饮片新参》记载 “鸡血藤去瘀血 ,生新血 ,流
利经脉” 。民间常用鸡血藤治疗各种原因引起贫血 , 具有较好的
疗效。为探讨鸡血藤治疗贫血的有效部位和抗贫血作用机理 ,我
们用 ELISA法测定小鼠血清 IL-3及 EPO水平。现报道如下。
1　材料
1.1　动物 昆明种小鼠(SPF级), 18 ～ 22g, 广西壮族自治区食品
药品检验所提供(生产许可证号:SCXK桂 2003-0001)。
1.2　药品 鸡血藤总黄酮(STF), 广西中医学院中药化学教研室
提供 , 含量为 60%;盐酸苯肼(APH)(上海元越化工有限公司)批
号:20051030;阿胶(山东东阿阿胶股份有限公司)批号:2004030;
环磷酰胺(CTX)(上海华联制药有限公司)批号:050914。
1.3　试剂 MouseIL-3试剂盒(上海船夫生物公司)批号:
20060512, MouseEPO试 剂 盒 (上 海 船 夫 生 物 公 司)批
号:20060725。
1.4　仪器 血球计数仪(sysmexKX-21型), 吉尔森微量取样器
(法国 Pipetman公司), 酶标仪(奥地利 Sunrise公司)。
2　方法
2.1　分组与给药 取小鼠 60只 , 体重 18 ～ 22 g, 雌雄(♀♂)兼
用 , 随机分为 6组:鸡血藤总黄酮高剂量组(200 mg/kg)、中剂量
组(100 mg/kg)、低剂量组(50 mg/kg), 阳性对照组给予阿胶(10
g/kg),空白对照组 、模型组给予等容量的蒸馏水 , 以上各组 i.g.
给药 , qd×8d,给药容量为 0.2 ml/10 g。
2.2　血虚小鼠造模方法 [ 1] 除空白对照组外 , 给药后第 2天 sc
盐酸苯肼(20 mg/kg)、第 4天 sc盐酸苯肼(40 mg/kg),第 4, 5, 6,
7天 ip环磷酰胺(100 mg/kg),第 8天末次给药后 1 h, 取血进行
RBC, HGB, HCT计数。结果见表 1。
2.3　ELISA法测定小鼠血清 IL-3及 EPO水平 小鼠摘眼球取
血至 EP管 , 放置室温下析出血清。 3 000 r/min离心 , 分离血清 ,
备用。将板条平衡至室温 ,从密封袋中取出 , 除空白孔外 ,分别将
标本或稀释好的不同浓度的标准品 50μl加入相应的孔中 ,除空
白孔外 , 每孔再加入已稀释好的生物素化抗体 50μl,用封板胶封
住反应孔 , 37℃温育 90 min, 取出后洗板 4次 , 除空白孔外 , 各管
加入稀释好的酶结合物 100 μl, 用封板胶封住反应孔 , 37℃温育
30 min, 取出后洗板 4次 , 每孔加底物 A、底物 B各 50μl,避光 , 室
温(20 ～ 25℃)10min,每孔加终止液 50 μl, 混匀 , 混匀后在 10 ～
20 min内测量 OD
450
值。查标准曲线得出IL-3, EPO含量。观察
药物对小鼠血清中 IL-3, EPO含量的影响。结果见表 2。
2.4　统计分析 应用 SPSS10.0分析系统 , 数据以 x±s表示 , 组
间差异用 t检验。
3　结果
除阳性对照组 、STF高剂量组的 HGB与模型组比较有极显
著差异(P<0.01), STF高剂量组的 HCT与模型组比较有极显著
差异外(P<0.01)外 , 各剂量组药物 RBC, HGB, HCT与模型组比
较有显著性差异(P<0.05)。 提示:各组剂量药物对血虚动物
RBC, HGB, HCT的下降有拮抗作用 , 与模型组对比有显著差异。
结果见表 1。
阳性对照组和各剂量组对 IL-3的下降和 EPO的上升有拮
抗作用 , 与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。提示:各剂量
组对 IL-3浓度的下降和 EPO浓度的上升有拮抗作用 , 与模型
组比较有显著性差异。结果见表 2。
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2　
表 1　鸡血藤总黄酮对血虚小鼠血常规的影响( x±s)
组别 剂量 RBC/×1012· L-1 HGB/×g· L-1 HCT(%)
空白对照 - 9.87±1.30 145.20±14.34 62.12±9.2
模型 - 4.56±1.41② 87.49±27.37② 34.23±12.1②
阳性对照 10g· kg-1 5.96±1.09③ 117.33±18.44④ 45.40±8.3③
STF高剂量 200mg· kg-1 6.48±1.54③ 126.40±28.38④ 49.15±6.0④STF中剂量 100mg· kg-1 6.46±1.58③ 120.10±26.88③ 44.26±7.2③STF低剂量 50mg· kg-1 5.64±0.86③ 107.90±11.21③ 43.36±6.1③
　　与空白对照组比较 , ②P<0.01;与模型组比较 , ③P<0.05;④P<0.01;n=10
表 2　鸡血藤总黄酮对血虚小鼠血清中IL-3、EPO含量影响( x±s)
组别 剂量 IL-3含量 /pg· ml-1 EPO/pg· ml-1
空白对照 - 3.21±0.99 61.23±11.43
模型 - 1.23±0.71② 208.89±89.53②
阳性对照 10g· kg-1 2.14±0.40③ 135.00±62.30③
STF高剂量 200mg· kg-1 2.31±0.58③ 120.55±72.31③
STF中剂量 100mg· kg-1 2.24±0.73③ 127.72±62.18③
STF低剂量 50mg· kg-1 2.26±1.49③ 130.31±45.33③
　　与空白对照组比较 , ② P<0.01;与模型组比较 , ③P<0.05;n=10
3　讨论
IL-3(白细胞介素 -3)是一种造血促进因子 , 从干细胞到
祖细胞多个不同阶段促进造血细胞增殖分化 ,造血生长因子促红
细胞生成素(erythmpoietin, EPO)是一种主要由肾脏分泌的具有
高度糖基化的多肽细胞因子 ,是红细胞发育过程中最重要的调节
因子 [ 2] 。 IL-3由活化的 T细胞产生 , 作为一种造血促进因子 ,
从多个环节部位促进造血细胞的增殖分化 [ 3] 。鸡血藤总黄酮对
血虚小鼠 IL-3水平有显著影响 , 推断鸡血藤总黄酮抗贫血作用
是通过调节促进因子如 IL-3的生成而起作用 。研究表明 , EPO
的水平与HGB成反比关系 [ 4] 。本实验结果显示化学因素造成小
鼠的贫血 ,反馈性地引起血清 EPO水平升高。给药组致使 EPO
下降 , 可能是治疗后贫血症状缓解 , 使 EPO反馈性升高的程度
减轻。
参考文献:
[ 1 ] 　金若敏 , 宁　炼, 陈长勋 ,等.血虚模型动物制备及当归补血汤的
作用研究 [ J] .中成药 , 2001, 23(4):269.
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影响 [ J] .医药导报 , 2003, 22(7):437.
[ 3 ] 　丁敬远 ,黄振翘 ,孙关林 ,等.健脾药对免疫介导再生障碍性贫血小
鼠 IL-3 , IFN-γ影响的实验研究 [ J] .新中医 , 2004, 36(1):76.
[ 4 ] 　高丽萍 ,柴锡庆 ,苏安英 ,等.益气补肾中药抑制 5-氟尿嘧啶所致
大鼠贫血的实验研究 [ J] .中国中医基础医学杂志 , 2002, 8
(4):46.
收稿日期:2008-01-23;　修订日期:2008-10-26
基金项目:四川省科技厅重点科技攻关项目(No.03SC011-6)
作者简介:钟　华(1981-),女(汉族),四川绵阳人 ,成都中医药大学 2007级
在读博士研究生 ,硕士学位,主要从事中药新制剂 、新剂型的研究开发工作.
杞黄颗粒中挥发油提取和 β -CD包合工艺的研究
钟　华1 ,尹蓉莉 1 ,周淑芳1 ,张　丹 2 ,李　毅 3
(1.成都中医药大学药学院 ,四川 成都　610075;
2.泸州医学院 ,四川 泸州　646000;　3.川北医学院 ,四川 南充　250021)
摘要:目的 考察杞黄颗粒中挥发油的最佳提取工艺和 β -CD最佳包合工艺。方法 采用单因素以收油率作为评价提取
工艺的指标;以包合物收得率和挥发油包合率的综合评分作为评价包合工艺的指标优选 β -CD包合工艺。结果 挥发油
最佳提取工艺为:莪术加水 6倍量 ,浸泡 12h,提取 6 h;挥发油的最佳包合工艺为采用饱和水溶液法在一般温度下 β -
CD与挥发油的配比为 6∶1, 水与挥发油的配比为 60∶1,包合时间为 45min。结论 所选提取工艺提取率高 , 包合工艺合
理可行。
关键词:杞黄颗粒;　挥发油;　β -CD包合物;　单因素实验;　正交实验
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0363-03
StudiesontheExtractionofVolatileOilinQihuangGranuleandthePreparationoftheir
CDInclusionCompounds
ZHONGHua1 , YINRong-li1 , ZHOUShu-fang1 , ZHANGDan2 , LIYi3
(1.ColegeofPharmacology, ChengduUniversityofT.C.M, Chengdu610075, China;2.DepartmentofPhar-
macology, LuzhouMedicalColege, Luzhou646000, China;3.MedicamentSection, NorthSichuanMedicalCol-
lege, Nanchong637007, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheoptimumconditionsfortheextractionofvolatileoilinQihuangGranule, andfortheprepara-tionoftheirβ -CDinclusioncompounds.MethodsThestudywascarriedoutwithsinglefactor.Withthepercentagesofextrac-
tedvolatileoilasthetargetmarkers, theoptimumconditionswasdeterminedforextractionofthevolatileoil.Withtheratioofin-
clusionandtheoilingbearingfromtheinclusionasthetargetmarkertheconditionsforincludingtheoilswithβ -CDwereopti-
mized.ResultsTheoptimizedextractionconditionswere:thewaterwas6timesoftheherbsinweight, theherbalmedicineofRhi-
zomaCurcumaeshouldbeextractedfor6 hafteradvancedsoaking12 hourswithwater.Theoptimalinclusionconditionswere:ap-
plyingthesaturatedaqueoussolutionmethod, underthenaturetemperature, theproportionofβ -CDandoilwas6 g:lml, the
proportionofwaterandoilwas60ml:lml, thetimewas45 minutes, respectively.ConclusionTheestablishedprocesscanbe
usedfortheextractionandtheinclusionofvolatileoilinQihuangGranule.Theobtainedratioofoilishigh, theinclusionprocess
issuitable.
Keywords:QihuangGranule;　Volatileoil;　β -CDinclusioncompounds;　Singlefactortest;　Orthogonaldesigntest
　　杞黄颗粒是由黄芪 、枸杞 、莪术 、泽泻等中药制成的复方制
剂 , 具有益气血 、补肝肾 、活血化淤的功效 , 多用于治疗年老体虚 ,
气血不足 ,肝肾亏损引起的气血淤滞。方中莪术和泽泻均含有挥
发油 , 尤其是莪术挥发油在发挥功能主治方面起重要作用 , 所以
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.2 时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期