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高效液相色谱法测定斑纹芦荟中芦荟苷含量



全 文 :·药物分析与检验·
高效液相色谱法测定斑纹芦荟中芦荟苷含量
陈 丹 包国荣 曾云瑾1 蔡铃英1 刘兴嘉2(福州 350003福建中医学院中药系;1 福建中医学院中药系 92级实
习生;2 福建莆田芦荟厂)
摘要 目的:采用高效液相色谱法测定斑纹芦荟中芦荟 苷含量。方法:芦荟叶汁浓缩物用甲醇超声提取总蒽醌 , 经
薄层色谱分离后 , 用高效液相色谱法测定。结果:方法回收率为 96.17%, RSD 为 1.00%(n=5)。结论:该法准确 ,
且简便可靠 , 重现性好 ,为开发利用芦荟资源提供依据。
关键词 斑纹芦荟;芦荟苷;薄层色谱;高效液相色谱
Determination of aloin in the leaves of aloe vera L.var Chinensis(Haw.)Berger by HPLC
Chen Dan(Chen D), Bao Gorong(Bao GR), Zhen Yujin(Zhen YJ), et al(Dept of Traditional Chinese
Parmacoligy , Fujian College of Traditional Chinese Medicine , Fuzhou 350003)
ABSTRACT OBJECTIVE:A HPLC method for the determination of aloin in the leaves of Aloe vera L.var Chinensis
(Haw.)Berger was developed.METHOD:The anthraquinones were extracted from the leaves by ultrasonic wave using
MeOH , and aloin was separated by thin layer chromatography.The spot of aloin was then extracted with MeOH and
determined by HPLC.RESULTS:The average recovery of the method is 96.17% and RSD is 1.00%(n =5).
CONCLUSION:The method is accurate and simple with good reproducibility.The results provide a tool to study the leaves
of aloe.
KEY WORDS aloe vera L.var hinensis(Haw.)Berger , aloin , TLC ,HPLC
  斑纹芦荟 Aloe vera L.var.Chinensis(Haw.)Berger
系百合科植物 , 为我国特有的芦荟品种 , 长期以来多为
观赏用 , 仅在我省民间有用作美发及治疗水火烫伤等。
作为药用 的芦荟 多为 进口 的库 拉索 芦荟 Aloe
barbadensis Miller和好望角芦荟 Aloe ferox M iller[ 1] 。近
年来 , 随着芦荟类保健制品风糜国际市场 , 国产斑纹芦
荟的应用已逐渐引起国内医药界的重视。为了开发我
省丰富的斑纹芦荟资源 , 我们应用薄层色谱 高效
液相色谱法[ 2 , 3]对闽产斑纹芦荟中芦荟苷含量进行了
分析测定。
1 仪器与试药
1.1 P-2000 泵高效液相色谱仪(美国 TSP 公司);UV
-2000 检测器 , C-R1B 积分仪(日本岛津)。
1.2 CQ50 超声波清洗器(上海第三分析仪器厂)。
1.3 芦荟苷对照品(中国药品生物制品检定所)。
1.4 斑纹芦荟(莆田芦荟厂)。
1.5 试剂:甲醇为分析纯 ,重蒸;蒸馏水 , 重蒸;其它试
剂均为分析纯。
3 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱 Keystone ODS -2(5μm , 4.6mm
×250mm),流动相为甲醇-水(7∶3), 流速 1ml/min ,检
测波长 354nm。
2.2 对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的芦荟
苷对照品 20.5mg , 加甲醇定容至 10ml , 精密量取 1ml ,
用甲醇定容至 25ml , 再精密量取 3ml 用甲醇定容至
25ml , 用前 0.45μm 滤膜滤过。
2.3 供试品溶液的制备:取斑纹芦荟鲜叶 , 捣碎 , 绞
汁 , 滤过。精密移取该液汁 50ml , 置 100ml 烧杯中 , 水
浴蒸干 , 加甲醇超声振荡提取 30min , 滤过 , 定容至
25ml , 作为样品溶液 ,备用。
微量进样器精密量取以上样品溶液 150μl , 点样于
20cm ×20cm 硅胶 H CMC -Na 薄层板 , 以醋酸乙酯-
甲醇-水(100∶17∶13)为展开剂展开 , 取出晾干 , 365nm
紫外灯下检视 ,芦荟苷对照品定位 , 刮取样品色谱中与
·43·中国现代应用药学杂志 1999年 6月第 16卷第 3期
DOI :10.13748/j.cnki.issn1007-7693.1999.03.021
对照品相对应的斑带区 , 甲醇洗脱 ,定容至 10ml , 用前
0.45μm 滤膜滤过。薄层色谱图见图 1。
图 1 薄层色谱图
a , b-芦荟苷对照品;c-斑纹芦荟样品溶液
2.4 芦荟苷的含量测定:分别精密量取供试品溶液和
芦荟苷对照品溶液 20μl ,分别注样 , 高效液相色谱法测
定 , 得色谱图 , 外标法计算样品中芦荟苷含量 , 结果及
色谱图见表 1 和图 2。
表 1 斑纹芦荟中芦荟苷含量测定结果
样品溶液 含量(mg/ml) 平均含量(mg/ml) SD RSD(%)
1 0.260
2 0.268 0.261 0.0067 2.56
3 0.255
图 2 高效液相色谱图
A-芦荟苷对照品;B-斑纹芦荟供试品;1-甲醇峰;2-芦荟
苷峰
2.5 回收率试验:采用加样回收法 , 分别精密量取已
知含量的斑纹芦荟 液汁 , 精密添加一定量的芦荟苷对
照品 , 按“供试品溶液的制备” 及“芦荟苷的含量测定”
项下同法操作 ,测定 , 结果见表 2。
表 2 回收率测定结果
液汁中芦荟
苷量(mg)
添加芦荟苷对
照品量(mg)
测出芦荟苷
量(mg)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
0.510 0.328 0.823 95.43
0.510 0.410 0.903 95.85
0.520 0.492 0.996 96.75 96.17 1.00
0.520 0.574 1.086 97.56
0.536 0.656 1.161 95.27
3 讨 论
关于芦荟中芦荟苷的含量测定方法有多种 , 中国
药典(1995年版)与 BP(1993)均采用通过测定总蒽醌
以测定芦荟苷含量 , 测定结果均偏高[ 4] 。我们将斑纹
芦荟叶汁的浓缩物用甲醇超声提取总蒽醌后 , 经薄层
色谱分离出芦荟苷 , 再采用反相高效液相色谱法测定
其含量 , 平均回收率为 96.17%, RSD 为 1.00%。实验
结果表明本法可准确测定斑纹芦荟中芦荟苷含量 , 且
方法简便可靠 ,重现性好 , 为开发利用我国班纹芦荟的
药用资源提供科学依据。
参考文献
1 中国医学科学院药用植物资源开发研究所 ,中国医学科学
院药物研究所.中药志.Ⅴ.北京:人民卫生出版社 , 1994∶
840.
2 王宝琴 ,陈德昌 ,鲁静, 等.中成药质量标准与标准物质研
究.北京;中国医药科技出版社 , 1992∶516.
3 Yamamoto , Masatoshi.An analyt ical method for standardizat ion
of aloe-containing foods.Gijutsu Joho-Shizhoka-ken Eissei
Kankyo senta , 1989 ,7(2)∶10.
4 包国荣 ,陈丹 ,黄声强, 等.芦荟苷的含量测定方法比较研
究.药物分析杂志 , 1997 , 17(5)∶338.
收稿日期:1998-06-08
滋肾胶囊质量标准的研究
张林松 谢东浩1(镇江 212003 江苏镇江市药品检验所;1 镇江 212000江苏镇江医学院附院)
摘要 目的:建立滋肾胶囊的质量控制方法。方法:用薄层层析法对其中牡丹皮 、枸杞子进行了定性鉴别 , 用水蒸
气蒸馏 一阶导数光谱法测定了其中丹皮酚的含量 ,检测波长为 262 和 282nm , Δλ为 1nm。结果:线性范围为 0
~ 7.5μg/ml(r =0.9996),平均回收率为 98.93%(n =5), RSD 为 1.12%。结论:该方法简便 、准确 , 可以作为该制
·44· 中国现代应用药学杂志 1999年 6月第 16卷第 3期