全 文 ：不同炮制品瑞香狼毒药材急性毒性试验研究
胡 爽1，刘 峰2，陈美言3 (1．沈阳工学院生命工程学院，辽宁抚顺 113122;2．辽宁格林生物药业集团有限公司，辽宁沈阳 110000 ;3．中
国医科大学基础医学院，辽宁沈阳 110000 )
摘要 ［目的］通过对瑞香狼毒药材急性毒性试验的研究，对瑞香狼毒生品、醋制品和姜矾制品的急性毒性进行比较，为瑞香狼毒炮制工
艺的规范化和临床用药安全提供试验依据。［方法］按照经典急性毒性试验方法，各组试验连续观察 10 d，计算各组动物死亡数，采用
Bliss法计算小鼠的 LD50及其 95%的可信限。［结果］瑞香狼毒生品 LD50 = 547． 56 mg /kg，其 95%的可信限为 476． 86 ～ 625． 58 mg /kg;醋
制品 LD50 = 689． 23 mg /kg，其 95%的可信限为 546． 96 ～ 817． 22 mg /kg;姜矾制品 LD50 = 976． 89 mg /kg，其 95%的可信限为 826． 95 ～
1 134． 50 mg /kg。［结论］瑞香狼毒生品经炮制后毒性有所降低，毒性由小到大的排列顺序为姜矾制品 ＜醋制品 ＜生品。
关键词 瑞香狼毒;炮制品;急性毒性试验
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2015)09 －072 －01
作者简介 胡爽(1985 －) ，女，辽宁锦州人，讲师，硕士，从事中药制剂
分析方面研究。
收稿日期 2015-02-12
瑞香狼毒其主要的活性成分有黄酮类、二萜类、香豆素
类以及木脂素类化合物［1］。文献资料报道瑞香狼毒中黄酮
类和二萜原酸酯类具有较强的体内和体外抗肿瘤作用，同时
也是瑞香狼毒的主要有毒成分［2］。所以，采用适当的炮制方
法可以避免有效成分的损失，降低毒性。笔者通过对瑞香狼
毒药材急性毒性试验的研究，计算急性毒性参数，对生品、醋
制品和姜矾制品的毒性进行比较，为瑞香狼毒炮制工艺的规
范化和临床用药安全提供试验依据。
1 材料与方法
1． 1 试验动物 清洁级昆明种小鼠，体重 18 ～ 22 g，雌雄各
半，由大连医科大学实验动物中心提供，使用许可证号 SCXK
(辽)2013 －0002。
1． 2 试验药品 瑞香狼毒药材购自于内蒙古，经辽宁中医
药大学王冰教授鉴定为正品药材。瑞香狼毒生品、醋制品和
姜矾制品的样品液均自制。
1． 3 样品液的制备 精密称取瑞香狼毒生品、醋制品和姜
矾制品的粉末各(过 60 目筛)50 g，分别加入 95%乙醇 500
ml，加热回流 1 h，过滤，滤液浓缩，蒸干，得干膏，用 30%的
1，2-丙二醇为溶剂，超声溶解备用。
1． 4 主要仪器与设备 电子分析天平(D432810821) ;腹腔
注射器等。
1． 5 剂量与分组 通过预试验所得到的全死剂量和全不死
剂量，设定给药剂量，组距 = 0． 8。同时设立溶媒对照组，即
30%的 1，2-丙二醇组，以观察溶剂是否对小鼠产生影响。给
药剂量分组情况如表 1所示。
表 1 不同炮制品瑞香狼毒样品液经腹腔注射给药剂量分组情况
剂量等级 生品∥mg /kg 醋制品∥mg /kg 姜帆制品∥mg /kg
1 900 1 200 1 600
2 720 960 1 280
3 576 768 1 024
4 461 614 819
5 369 492 655
1． 6 急性毒性测定 生品组、醋制品组和姜矾制品组中清
洁级小鼠各50只，体重18 ～22 g，雌雄各半，按体重随机分为
5组，每组 10只。试验前禁食(不禁水)12 h，采用腹腔注射
法，注射剂量0． 2 ml /10g。各组连续观察10 d，计算各组动物
死亡数，采用 Bliss法计算小鼠的 LD50及其 95%的可信限。
2 结果与分析
2． 1 瑞香狼毒生品组急性毒性试验 由表 2 可见，按瑞香
狼毒生品组剂量等级 1 组给药后，小鼠明显出现活动困难、
呼吸急促，死亡时间短暂，最短时间约 3 min，其余小鼠 30
min内全部死亡;剂量等级 5 组给药，小鼠死亡率明显下降，
仅有 1只小鼠死亡;其他等级给药，小鼠明显活动困难，呼吸
急促、步态不稳。死亡率按照用药剂量的降低有所升高。给
药 24 h后，未亡小鼠饮食饮水逐渐恢复正常，存活小鼠产生
的毒性反应随时间慢慢恢复。空白对照组和溶媒对照组未
见有小鼠异常反应和死亡。
表 2 瑞香狼毒生品样品液经腹腔注射给药后小鼠急性毒性试验结果
剂量∥mg /kg 动物数∥只 死亡动物数∥只 死亡率∥%
900 10 10 100
720 10 8 80
576 10 5 50
461 10 3 30
369 10 1 10
溶媒对照组 10 0 0
空白对照组 10 0 0
2． 2 瑞香狼毒醋制品组急性毒性试验 表 3 显示，按瑞香
狼毒醋制品组剂量等级 1 组给药后，小鼠同样出现活动困
难、呼吸急促，但死亡时间延长，在 12 h内陆续死亡，仅有 1
只小鼠存活;剂量等级 5组给药，小鼠死亡率下降，仅有 2 只
小鼠死亡;其他等级给药，小鼠肌肉痉挛明显，静伏少动，死
亡时间延长至 48 h。空白对照组和溶媒对照组未见有小鼠
异常反应和死亡。
2． 3 瑞香狼毒姜矾制品组急性毒性试验 按瑞香狼毒姜矾
制品组剂量等级 1组给药后，小鼠死亡时间延长至 48 h内陆
续死亡，1只小鼠存活;剂量等级 5组给药，小鼠死亡率下降，
仅有 1只小鼠死亡;其他等级给药，死亡时间延长至 60 h。
(下转第 85页)
责任编辑 黄小燕 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2015，43(9):72，85
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.09.030
沤紫云英较适宜，具体为在翻压期应根据紫云英的生长发育
情况和水稻的栽秧期来确定。湘紫 2 号为极早花早熟型品
种，一般于 4月初达到盛花期，在盛花期或稍过盛花期时产
草量最高，鲜草所含养分量也最高，此时是最佳翻压时期，因
此可在 4月的第一个星期翻压紫云英，一般不迟于 4 月 15
日。
2． 4 高产留种技术
2． 4． 1 留种田选择。选择地势高、靠近水源、排灌方便的田
块作留种田。中等或中上等肥力水平的田块适宜于作留种
田。忌连作留种，以免上茬的落粒、落荚造成出苗不整齐，生
长发育不一致。菌核病发生严重的田块不宜选作留种田。
第 2年种早稻的田块也不宜作留种田。
2． 4． 2 收割和脱粒。湘紫 2 号紫云英属无限花序，种荚自
下而上成熟。当有 80%左右的花序种荚变黑或变黄，茎秆失
水、变干时为适宜收割期，应及时收割。传统收割采用人工
方法，也可利用水稻联合收割机收获紫云英种子。
人工收割方法为:种子成熟后易落荚，晴天干燥，更易落
荚。为了减少落荚，宜选择在有露水的早晨收割，或先在田
间均匀洒水，使种荚受潮，而后收割。收割方法是边割、边
卷、边打捆、边挑运。若田间落荚过多，则可灌水漂起种荚，
用竹竿赶至田角，捞起晒干脱粒。脱粒技术为:①收割运回
后及时摊晒，以免种子受闷变黑，有碍发芽;②根据紫云英易
落荚的特点，首先打下种荚;③对种荚反复脱粒，扬净，晒干
贮藏。
紫云英收割目前没有专用的收割机，可采用全喂入式水
稻联合收割机进行紫云英收割，但要将收割机进行如下调
整:①调低割刀与地面的距离，尽量做到最低割茬;②调小脱
粒滚筒内与粮筛的间距;③更换粮筛，更换适合紫云英小粒
种子的粮筛孔径，具体孔径尺寸应通过试验后再确定。机械
化收割要选择晴天干燥时进行。紫云英虽易落荚，但脱粒困
难，在脱粒后的秸秆和荚皮中往往带有种子。这些秸秆和荚
皮还可再利用。将它们均匀地施于计划播种绿肥的田间，既
可肥田，又可利用其中的种子用于生产。
参考文献
［1］林多胡，顾荣申．中国紫云英［M］．福州:福建科学技术出版社，2000:6
－15，60 －95．
［2］焦彬，顾荣申，张学上，等．中国绿肥［M］．北京:农业出版社，1986:3 －
21，291 －343．
［3］青先国．湖南水稻生产发展的对策与关键技术［J］．中国稻米，2013，19
(1):7 －9．
［4］湖南省农村经济调查队．湖南农村统计年鉴2013［M］．北京:中国统计
出版社，
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
2013．
(上接第 72页)
空白对照组和溶媒对照组未见有小鼠异常反应和死亡
(表 4)。
表 3 瑞香狼毒醋制样品液经腹腔注射给药后小鼠急性毒性试验结果
剂量∥mg /kg 动物数∥只 死亡动物数∥只 死亡率∥%
1 200 10 9 90
960 10 8 80
768 10 6 60
614 10 4 40
492 10 2 20
溶媒对照组 10 0 0
空白对照组 10 0 0
表 4 瑞香狼毒姜矾制品样品液经腹腔注射给药后小鼠急性毒性试验
结果
剂量∥mg /kg 动物数∥只 死亡动物数∥只 死亡率∥%
1 600 10 9 90
1 280 10 8 80
1 024 10 6 60
819 10 3 30
655 10 1 10
溶媒对照组 10 0 0
空白对照组 10 0 0
2． 4 LD50及其可信限 由表 5 可知，生品 LD50 = 547． 56
mg /kg，其 95%的可信限为 476． 86 ～ 625． 58 mg /kg;醋制品
LD50 = 689． 23 mg /kg，其 95%的可信限为 546． 96 ～ 817． 22
mg /kg;姜矾制品 LD50 = 976． 89 mg /kg，其 95%的可信限为
826． 95 ～1 134． 50 mg /kg。
表 5 瑞香狼毒不同炮制品急性毒性试验 LD50的测定结果
组别
LD50
mg /kg
LD5095%可信
限∥mg /kg
LD50提高
指数
瑞香狼毒生品 547． 56 476． 86 ～625． 58 1． 000 0
瑞香狼毒醋制品 689． 23 546． 96 ～817． 21 1． 258 7
瑞香狼毒姜矾制品 976． 89 826． 95 ～1 134． 50 1． 784 1
3 小结与讨论
试验结果表明瑞香狼毒经炮制后毒性有所降低，毒性由
小到大的排列顺序为姜矾制品 ＜醋制品 ＜生品，说明瑞香狼
毒经姜矾制后毒性降低的程度优于醋制，确实达到了降低毒
性，提高用药安全性的作用。
现今文献报道中，对瑞香狼毒生品的药效药理、毒性试
验报道的较多，而其醋制品和姜矾制品方面的文献报道较
少。该试验将其生品和炮制品在急性毒性方面的不同进行
研究，通过三者的 LD50及 LD50的可信限，比较三者毒性强弱
顺序，对进一步了解炮制作用、阐明炮制机理具有重要意义。
参考文献
［1］王敏．瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用［J］．中国中药杂志，2005，
30(8):603 －606．
［2］汤亚杰，徐小玲，李冬生，等．瑞香狼毒化学成分与抗肿瘤作用研究进
展［J］．中成药，2008，30(7):21 －23．
5843 卷 9 期 廖育林等 双季稻适用型“湘紫 2 号”紫云英的种植表现及高产栽培技术