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山合欢皮镇静安神活性成分的研究



全 文 : 表 2     菝葜各提取部位对大鼠棉
球肉芽肿的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(g生药 /kg) 肿重量(mg)
阴性对照组 - 37.1±6.73
总醇提部位
高剂量组 24 28.4±6.46*
中剂量组 12 27.5±12.5*
低剂量组 6 29.2±9.20
鞣质部位
高剂量组 24 34.0±5.72
中剂量组 12 33.0±5.72
低剂量组 6 34.6±5.51
正丁醇部位
高剂量组 24 26.7±5.97*■
中剂量组 12 25.8±4.11**■■
低剂量组 6 25.8±2.62**■■
乙酸乙酯部位
高剂量组 24 24.1±4.50**■■
中剂量组 12 22.4±6.61**■■
低剂量组 6 30.8±6.81
阳性对照组 24 31.7±3.56*
3 结论
采用溶剂法和蛋清沉淀法 ,将菝葜药材提取分
离为四个供试品部位。本实验结果表明 ,菝葜的乙
酸乙酯部位和正丁醇部位具有显著对抗致炎物质引
起的水肿作用 ,对棉球引起的肉芽组织增生有明显
的抑制作用;在同等剂量下(以生药材量计),其抗
炎效果优于原制剂金刚藤胶囊 ,这可能与剔除菝葜
粗提物的杂质干扰 ,使菝葜抗炎有效物质充分发挥
药效作用有关 。
菝葜的乙酸乙酯部位可能为黄酮类化合物 ,其
正丁醇部位可能为皂苷类化合物。因此 ,本研究为
阐释菝葜抗炎物质基础提供了一定依据 ,为探讨其
抗炎作用奠定了一定的基础 。
参 考 文 献
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(2008-03-10收稿)
山合欢皮镇静安神活性成分的研究
文 莉1 ,朱 红 2 ,干国平 2 ,刘焱文2*
(1.湖北中医学院药理教研室 ,湖北武汉 430061;2.湖北省中药资源与中药化学省级重点实验室 ,湖北武
汉 430061)
  摘要 目的:研究山合欢皮中不同化学成分对小鼠的镇静安神作用 , 筛选出山合欢皮中的活性成分。方法:用
戊巴比妥钠阈下剂量与山合欢皮中不同化学成分合用 ,探讨山合欢皮中化学成分的镇静安神作用。结果:正丁醇
中组分 2、3、4使小白鼠入睡个数显著增加 ,与阴性对照组比较 , 其中组分 2和 4的 P值 <0.001, 组分 3的 P值 <
0.01;(-)-丁香树脂酚-4-O-β -D-葡萄糖苷具有显著的镇静安神作用(P<0.001)。结论:(-)-丁香树脂酚-4-
O-β -D-葡萄糖苷为山合欢皮中镇静安神活性成分之一。
关键词 山合欢皮;化合物;镇静安神
中图分类号 R285.5  文献标识码:A  文献编号:1001-4454(2008)07-1056-03
  山合欢皮为豆科植物山合欢 Albiziakalkora
(Roxb.)Prain的树皮 ,其药用历史不长 ,但使用地
区较广 。据文献记载 〔1〕 ,我国北京 、山西 、河北 、河
南 、江苏 、江西 、湖南 、四川等地区混作合欢皮药用。
合欢皮具有镇静 、免疫增强以及抗生育的作用。合
欢皮的生长年限较长 ,而市场需求量较大 ,导致合欢
·1056· JournalofChineseMedicinalMaterials  第 31卷第 7期 2008年 7月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.07.040
皮的资源日益匮乏 ,有必要找寻其代用品 。现代研
究表明山合欢皮与合欢皮的药理作用基本相同 ,同
时山合欢皮具有资源丰富 、毒性小等优势 〔2〕。为了
开发和利用该药用资源 ,本文结合本实验室前期的
研究 ,通过对用色谱法从山合欢皮活性部位分离得
到的三种成分进行了镇静安神活性筛选 ,确定了山
合欢皮中镇静安神的活性成分 。
1  材料
1.1  动物 昆明种小鼠 330只 , 18 ~ 22g,雌雄各
半 ,由湖北省疾病控制动物实验中心提供 ,动物许可
证号:SCXK(鄂)2003-2005。
1.2  药物与试剂 (-)-丁香树脂酚 -4-O-β -D-葡萄
糖苷(化合物 A)、淫羊藿次苷 (E5化合物 B)、L-2
哌啶酸(化合物 C)由本实验室提取分离所得 ,临用
时配成 0.5%的浓度;艾司唑仑片由安徽邦宁制药
有限公 司生产 , 批 号:20051029, 临用 时配到
0.005%浓度;戊巴比妥钠的给药剂量分别为 25mg/
kg。
2  方法与结果
2.1  山合欢皮的组分分离 山合欢皮正丁醇部位
经层析柱色谱分离 , CHCl3∶MeOH梯度洗脱 ,收集到
4个组分 ,编号为 1、2、3、4,临用前分别配成 1%浓
度 。从表 1得出组分 2镇静安神活性最好 ,我们进
一步对组分 2进行分离 ,得到单体化合物 ,其分离路
线见图 1。
图 1 山合欢皮组分分离路线
2.2  山合欢皮正丁醇部位各组分协同阈下剂量的
戊巴比妥致小鼠入睡只数的影响 〔3-5〕 将昆明种小
鼠 ,随机分为 6组 ,每组 30只 。(1)阴性对照组:灌
胃给予等体积生理盐水;(2)组分 1组:灌胃给予组
分 1 0.2g生药 /kg;(3)组分 2组:灌胃给予组分 2
 0.2g生药 /kg;(4)组分 3组:灌胃给予组分 3 
0.2g生药 /kg;(5)组分 4组:灌胃给予组分 4 0.2g
生药 /kg;(6)阳性对照组:灌胃给予艾司唑仑 1mg/
kg。灌胃体积 20ml/kg,单次给药 30min后 ,按预实
验定好的阈下剂量腹腔注射戊巴比妥钠 25mg/kg,
观察并记录入睡个数 ,以 15min内翻正反射消失
1min以上者为阳性。结果见表 1。
 表 1  山合欢皮正丁醇部位各组分协同阈下剂量的
戊巴比妥致小鼠入睡只数的影响(n=30)
组别 剂量(g/kg) 入睡数(只)
阴性对照组 - 0■■■
组分 1 0.2 5■■■
组分 2 0.2 16***
组分 3 0.2 7*■■
组分 4 0.2 11***■
阳性对照组 0.001 20***#
  注:与阴性对照组比较 , *P<0.05, **P<0.01, ***P<
0.001;#给药后一小时内死亡 3只;与阳性对照组比较 , ■ P<
0.05, ■■P<0.01, ■■■P<0.001。下表同
  由表 1可见 ,一次灌胃给予山合欢皮正丁醇各
组分后 ,艾司唑仑 1mg/kg、组分 2、3、4组 200 mg生
药 /kg,具有非常显著协同戊巴比妥睡眠作用 ,镇静
强度依次为组分 2>组分 4>组分 3。在 200mg生
药 /kg剂量下 ,组分 2具有非常显著协同戊巴比妥
睡眠作用;组分 4亦具有非常显著协同戊巴比妥睡
眠作用 ,但镇静作用显著低于艾司唑仑;组分 3具有
显著协同戊巴比妥睡眠作用 ,但镇静作用显著低于
艾司唑仑;而组分 1未见明显协同戊巴比妥睡眠作
用。
2.3 山合欢皮正丁醇部位各化合物协同阈下剂量
的戊巴比妥致小鼠入睡只数的影响〔6〕 将昆明种
小鼠随机分为 5组 ,每组 30只。 (1)阴性对照组:
灌胃给予等体积生理盐水;(2)化合物 A组:灌胃给
予化合物 A100mg/kg;(3)化合物 B组:灌胃给予化
合物 B100 mg/kg;(4)化合物 C组:灌胃给予化合
物 C100 mg/kg;(5)阳性对照组:灌胃给予艾司唑
仑 1 mg/kg。灌胃给予体积 20 ml/kg, 单次给药 30
min后 ,按预实验定好的阈下剂量腹腔注射戊巴比
妥 25 mg/kg,观察并记录入睡个数 ,以 15 min内翻
正反射消失 1min以上者为阳性 ,结果见表 2。
 表 2  山合欢皮正丁醇部位各化合物协同阈下剂量
的戊巴比妥致小鼠入睡只数的影响(n=30)
组别 剂量(g/kg) 入睡小鼠数(只)
阴性对照组 - 3■■■
A 0.1 21***
B 0.1 10■■
C 0.1 9■■
阳性对照组 0.001 24***
·1057·JournalofChineseMedicinalMaterials  第 31卷第 7期 2008年 7月
  由表 2可见 ,由有效组分 2中分离的单体(-)
-丁香树脂酚-4-O-β -D-葡萄糖苷(化合物 A)具有
镇静活性 ,在 100 mg/kg剂量时能够增加腹腔注射
阈下剂量戊巴比妥钠后小鼠的入睡个数 ,具有非常
显著协同戊巴比妥睡眠作用 ,与阴性对照组相比 , P
<0.001。淫羊藿次苷 E5(化合物 B)、L-2哌啶酸
(化合物 C)皆没有明显的镇静活性。
2.4  统计学处理 采用 SPSS11.5统计软件处理 ,
各组与阴性对照组 、阳性对照组比较 ,采用 χ2检验 ,
P<0.05为有统计学意义。
3  讨论
合欢皮为安神类中药 〔7〕 ,但文献对合欢安神物
质基础的报道差别很大 ,张立新报道合欢皮水提物
和醇提物均有活性 ,有学者认为木质素为中药合欢
皮的活性成分〔8〕 ,田珍报道合欢皮醇提物没有显著
的镇静活性 〔9〕。结合中医传统用药的方法和本实
验室前期的研究基础 ,笔者对山合欢皮石油醚 、乙酸
乙酯 、氯仿以及正丁醇萃取部分进行了体内镇静活
性研究 ,确定了正丁醇部位为山合欢皮镇静的活性
部位。
由正丁醇提得的四个组分中 ,以组分 2的效果
最佳 ,故笔者将其进一步进行色谱分离 ,将得到的三
个单体化合物进一步做体内药理研究 ,结果表明
(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷具有镇静活
性 ,能够延长腹腔注射戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间 ,
此结果与霍长虹〔8〕等认为木质素是合欢镇静成分
一致 ,故确定(-)-丁香树脂酚 -4-O-β -D-葡萄糖苷
为山合欢皮镇静安神活性成分之一 。由于组分 4也
有较好的镇静催眠作用 ,故有待对该组分进一步分
离 ,并进行药理学评价。
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(2008-03-10收稿)
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·1058· JournalofChineseMedicinalMaterials  第 31卷第 7期 2008年 7月