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金脉单药花组培工厂化技术研究



全 文 :北方园艺 2007(7):179 ~ 181 生物技术
第一作者简介:李永文(1964-),男 ,副教授, 主要从事植物及植物
生理 、植物组织培养等课程的教学与研究工作, E-mail:lyw1963@
163. com。
收稿日期:2007- 03 - 26
金脉单药花组培工厂化技术研究
李 永文 , 李  红
(河北省保定职业技术学院农林与生物工程系 , 071051)
  摘 要:选用金脉单药花健壮枝条作为材料 ,进行组培工厂化育苗繁殖技术研究。结果表
明:愈伤组织诱导激素组合以6-BA 0.5mg /L+NAA 0. 2mg /L最为适合 ,愈伤组织的生长速度和
质量均满足要求 ,继续培养可分化产生大量不定芽;继代培养采用 6-BA 0. 3 mg /L +NAA 0. 1
mg /L ,增殖倍率控制在 6 ~ 8倍;生根培养采用NAA 0.5mg /L+IBA 0.1mg /L ,一般15d左右生
根 ,平均根量5 ~ 6条 ,生根率 100%,移栽成活率高 ,满足植物组织培养工厂化育苗技术要求。
关键词:金脉单药花;植物组织培养;快速繁殖
中图分类号:S 682. 36;S 603. 6 文献标识码:A 文章编号:1001 - 0009(2007)07 - 0179 -03
  金脉单药花(Aphelandra squarrosa cv“Dania”)又名
丹尼亚单药花 、斑马花 ,系爵床科单药花属多年生常绿
草本观叶植物[ 1, 2] 。主产于热带美洲的墨西哥至巴西的
广大地区 ,既可观花又可观叶 ,形成叶花争艳 ,叶花同
赏 ,具有较高的观赏价值。近年来市场上畅销 ,但由于
扦插繁殖数量有限 ,不能大批量生产。植物组织培养中
快速繁殖技术在园艺植物种苗生产中具有广泛的应
用[ 3 , 4] 。我们采用组培手段 ,利用其具有繁殖速度快的
特点 ,开发出组培工厂化育苗技术 ,增加了金脉单药花
的繁殖倍数 ,这为市场提供了一条有效的扩大繁殖此种
植物的途径。
1 材料和方法
1. 1 材料
试验于 2005年 7月~ 2006年7月在保定职业技术
学院组培实验室和教学农场进行。采用保定竞秀公园
花卉市场采购的金脉单药花(Aphelandra squarrosa cv
“Dania”)成年植株的健壮枝条作为试验材料。
1. 2 方法
1. 2. 1 外植体消毒与培养 选用健壮嫩枝 ,用洗涤灵水
反复摇动泡洗 ,自来水冲洗 30 min ,用 75%酒精处理
30 s ,再用 0. 1%升汞处理 8 min ,加入数滴吐温 80以提
高灭菌效果 ,最后用无菌水冲洗4 ~ 6次 ,每次1 ~ 2min ,
以彻底除去升汞 ,取出后将材料水分用无菌滤纸吸干 ,
切取茎节和叶片作为外植体接种于诱导培养基上。
1. 2. 2 培养基 金脉单药花愈伤组织诱导和分化使用
MS培养基 ,附加不同浓度激素 6-BA和 NAA;继代培养
附加 6-BA 、NAA;以上均加入蔗糖 30 g /L ,琼脂 7 g /L ,
pH值为 5. 8。诱导生根的培养基为 l /2MS 培养基 ,附
加不同浓度的NAA和 IBA ,蔗糖为 10 g /L ,pH值 5. 8。
1. 2. 3 培养条件 培养温度控制在 23℃~ 25℃,光照
强度为 1 500 ~ 2 000 Lx ,光照时间 12 h /d。
2 结果分析
2. 1 金脉单药花愈伤组织的诱导和不定芽分化
将金脉单药花茎节和叶片外植体接种到培养基上 ,
几天后 ,部分茎节外植体开始膨大 ,约15 d后 ,茎节两端
可见绿色的愈伤组织形成 ,以后愈伤组织逐渐增大。叶
片接种到培养基上后 ,只有少数叶片逐渐变厚 ,从叶缘
切口处长出少量愈伤组织 ,愈伤组织生长较慢 ,逐渐变
褐死亡;其他叶片外植体则随着培养时间的延长 ,逐渐
干枯 、变褐 ,直至死亡。
图1 金脉单药花愈伤组织在培养基上陆续分化出不定芽
  试验表明 ,诱导金脉单药花愈伤组织的形成 ,与外
植体的种类有关 ,愈伤组织诱导以茎节外植体培养为
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生物技术 北方园艺 2007(7):179~ 181
佳 ,具有愈伤组织出现早 ,形成快的特点。愈伤组织培
养激素组合以 6-BA0. 5 mg /L+NAA 0. 2 mg /L 最为适
宜 ,所形成的愈伤组织生长速度快和呈现绿色 、菜花状 ,
极易进行再分化 ,因此诱导产生愈伤组织质量较高 ,能
够满足进一步培养要求。
将金脉单药花愈伤组织转接到选出的培养基上继
续进行培养。愈伤组织在接种 7 ~ 10 d后 ,进行再分化
逐步形成不定芽原基 ,分化出许多绿色芽点 ,继续培养
陆续形成小植株 ,逐步形成丛状结构。增殖方式为器官
发生型再生方式(见图 1)。
2. 2 继代培养
将上述愈伤组织 ,用解剖刀分割成蚕豆大小 ,接种
到培养基上 ,进行继代培养。继代培养基采用 MS+6-
BA 0. 3 mg /L+NAA 0. 1 mg /L +蔗糖 30 g /L +琼脂
7 g /L , pH5. 8。愈伤组织继续生长的同时 ,不断分化出
不定芽 ,形成丛状结构。由于适当降低了激素水平 ,虽
然降低了试管苗增殖倍率 ,但试管苗质量有明显提高 ,
为进一步生根培养打下基础。继代周期为 3 ~ 4周左
右 ,增殖倍率在6 ~ 8倍以上 ,增殖方式为不定芽增殖。
2. 3 生根培养
切取 2 ~ 3 cm 的单芽接种到生根培养基上培养。
试验表明 ,培养基为 1 /2 MS+NAA 0. 5 mg / /L+ IBA
0. 1mg /L+蔗糖10 g /L+琼脂 7 g /L+活性碳5. 0 g /L ,
pH5. 8时 ,一般 15 d后芽苗基部产生白色突起 , 1个月
后 ,长出约4 ~ 6条白色的根 ,进而形成完整植株 ,生根率
100%,较粗壮 ,符合试管苗驯化与移栽阶段的要求。试
验结果见表 1。
  表 1 不同浓度激素组合对金脉单药花试管
苗生根的影响
组别 激素组合
NAA IBA
接种数量 生根率 /% 平均根量 生长状况
1 0. 5 0  30 100 3. 1 粗壮
2 0. 5 0. 1 30 100 4. 7 粗壮
3 0. 1 0. 5 30 100 5. 8 细弱
4 0  0. 5 30 100 5. 3 细弱
  注:生根率、平均根量是随机选取20棵试管苗测量结果的平均值
2. 4 练苗移栽
当根长至 1~ 2 cm左右时 ,将生根试管苗连同培养
瓶转移至驯化室(驯化室为防虫网室)中打开瓶口驯化
2~ 3 d ,用镊子取出试管苗 ,注意不要受伤 ,然后于室温
的水温中彻底洗去附着在根部的培养基 ,再用 800倍的
多菌灵药液浸泡 4 ~ 5min ,最后移栽到经 1%高锰酸钾
消毒过的基质中。移栽基质采用草炭土与珍珠岩或蛭
石等按1 ~ 2∶1的比例混合 ,具有保水、透气和重量轻等
优点 ,非常适宜试管苗移栽 ,移栽株行距 5 cm×5 cm ,移
栽成活率达90%以上。
移栽初期为管理的关键阶段 ,初期湿度控制在
95%,温度 20℃~ 25℃,散射光 ,以后逐步降低空气湿
度 ,增加光照强度;移栽基质需用 50%多菌灵1 000倍液
每周喷洒 1次进行基质消毒。1周后开始施肥 ,可用 3
倍 MS大量元素液喷施 ,每周 1次。组培苗驯化期为
30 d左右 ,当苗高 5 ~ 8 cm ,具 6 ~ 8片叶 ,其中已有 3片
以上新叶时 ,试管苗已经适应外界环境条件 ,可盆栽进
行常规管理。
3 结论与讨论
金脉单药花茎节作为外植体 ,进行愈伤组织诱导 ,
具有愈伤组织诱导速度快 ,生长迅速 ,且质量高特点。
愈伤组织诱导和再分化激素组合为 MS+6-BA 0. 5 mg /
L+NAA 0. 2 mg /L。将愈伤组织进一步转接到激素组
合为 MS+6-BA 0. 3mg /L+NAA 0. 1 mg /L培养基上
进行继代培养 ,愈伤组织以器官发生型再生方式分化形
成大量不定芽。由于降低了激素水平 ,在 3 ~ 4周的继
代周期中 ,继代培养增殖倍率保持在 6 ~ 8倍以上 ,同时
具有壮苗的作用 ,符合组培工厂化育苗要求。
生根培养筛选出的激素组合为 1/2MS +NAA
0. 5mg /L+IBA 0. 1mg /L ,并加入活性碳5. 0 g /L ,一般
培养 30 d左右生根 ,平均根量 5 ~ 6条 ,生根率 100%。
此期应选择整齐一致的无根试管苗进行生根培养 ,这对
规范化和标准化生产金脉单药花商品种苗至关重要。
移栽成活率是影响工厂化育苗生产成本的关键因
素 ,不仅要求试管苗健壮和拥有较为发达的根系 ,而且
需要适宜的栽培基质 ,移栽后的管理也同样重要。试验
表明采用草炭土与珍珠岩或蛭石等按 1 ~ 2∶1的比例
混合 ,具有保水 、透气和重量轻等优点 ,非常适宜试管苗
移栽。同时加强移栽初期管理(第1~ 2周),能显著提高
移栽成活率 ,移栽成活率可达90%以上。
总之 ,此项研究建立了符合工厂化育苗要求的金脉
单药花快速繁殖体系 ,为金脉单药花组培育苗工厂化奠
定了基础。
参考文献
[ 1]  王意成,刘树珍 ,王翔.名贵花卉鉴赏与养护[M] .南京:江苏科学技
术出版社 ,2003:167-168.
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-38.
[ 3]  崔德才,徐培文.植物组织培养与工厂化育苗[ M] .北京:化学工业出
版社, 2003:180-209.
[ 4]  王清连.植物组织培养 [ M] .北京:中国农业出版社 ,2002:5-6.
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北方园艺 2007(7):181 ~ 184 生物技术
彩 叶 草 组 织 培 养 研 究
胡 国富 , 魏  琪 , 胡 宝忠
(东北农业大学生命科学学院 ,哈尔滨 150030)
  摘 要:以唇形科鞘蕊花属彩叶草(Coleus blumei Benth.)叶片为外植体 ,进行组织快繁的研
究。结果表明:叶片组织培养中 ,最适宜的消毒处理为消毒剂采用 0. 1%升汞溶液 ,加入 3~ 4滴
吐温 80 ,消毒时间为 5 min ,总体污染率低于 20%;最适的愈伤组织诱导及继代培养基为
1/2MS+2. 0 mg /L 6-BA+1. 0 mg /L NAA 的组合 ,其平均诱导率为 72%;最适分化培养基是
1/2MS+1. 0mg /L 6-BA+0. 5mg /L NAA的组合 ,其平均分化率为85. 4%;彩叶草不定芽的最适
生根培养基是 1/2MS+0. 5 mg /L NAA组合 ,其平均生根率为 92. 5%。
关键词:彩叶草(Coleusblumei Benth.);组织培养
中图分类号:S 681. 903. 6 文献标识码:A 文章编号:1001 -0009(2007)07 - 0181 - 04
  彩叶草(Coleus blumei Benth.)的繁殖可采用播种或
扦插等常规育苗方法 ,但这些方法受到季节限制 ,速度
慢 ,质量常常参差不齐 ,难以满足市场需求。而采用水
培技术培育彩叶草的方法较为适合家庭室内栽培 ,不适
合园林栽种。因此 ,应用植物组织培养技术来快速繁殖
彩叶草 ,是一种较为理想的方法。该技术成本适中 ,方
法简便 、易学 ,繁殖系数高 ,繁殖量大 ,品质均一性好 ,能
较好地保持母本植株的优良性状 ,是一种较为成熟的方
法 ,在许多花卉的繁殖中应用 ,且应用效果良好 。彩叶
第一作者简介:胡国富(1974-),黑龙江人 ,农学博士 ,讲师,现任教
于东北农业大学生命科学学院 ,研究方向为植物生殖生物学与分
子生物学。
通讯作者:胡宝忠。
收稿日期:2007- 04 - 12
草的组织培养虽然已有所报道 ,但主要是采用对茎段诱
导产生愈伤组织后 ,再分化长成植株 ,所需时间长。而
且利用茎段作为外植体会伤害母本植株 ,因此 ,还需对
其它器官如叶等外植体进行研究 ,来获得更好的繁殖
途径。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
试验选取不同发育时期的彩叶草栽培植株及营养
生长阶段的叶片(所用材料 ,中文品名为彩叶草 ,中文品
种为奇才 ,颜色为天鹅绒 ,产地为美国泛美 ,国外供应商
为美国伯爵种子公司(Bodger Seeds ,Ltd.),进口单位为
大连华晟景观设计有限公司)。
1. 2 试验方法
以下所用培养基均含有蔗糖3%,琼脂8 g /L ,pH5.8 ,
并置于121℃高温高压蒸气灭菌20min ,灭菌后的培养基
Study on the Industrialized Rapid Clonal Propagation Technology of
Aphelandra squarrosa cv“Dania”
LI Yong-wen , LI Hong
(Baoding Vocational and Technical College ,Hebei , 071051)
Abstract:Selects the vigorous and healthy branch of Aphelandra squarrosa cv“Dania” as explants carried on the industrialized
rapid clonal propagation technology research. The results showed that plant hormone combination of 6-BA0.5 mg /L+NAA
0.2mg /L is best for callus induction and Adventitious buds differentiation. 6-BA 0.3mg /L +NAA0.1mg /L is suitable for
continuous cultivation , the coefficient of reproduction is up to 6~ 8. NAA 0.5mg /L+IBA 0.1mg /L is good for rootage ,roo-
ting rate was 100%,and completely meets the demands of the industrialized rapid clonal propagation technology.
Key words:Aphelandra squarrosa cv “Dania”;Plant tissue culture;Rapaid clonal propagation
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