全 文 ：洞北农业技术师范学院学报 18 98 12扭 )
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以种胚为外植体的
西伯利亚杏器 `言分化的研究 ’
刘桂森 依立彬 陈玉林 王同坤 李淑杰
( 河北农业技术师范学院 )
摘 要
本文研究 了以 种胚 为外植体 西伯利亚杏器官分化各阶段的培养条件以 及影响 因素 , 并在
愈伤组 织上诱导 出幼 苗 。 为 山 杏的进一步研 究和矛!1用提供 了方法和材针 。
关键词 ; 西伯利亚杏 种胚 培养
西伯利亚杏 ( P ur n us s ib ir i c a L . ) 也称山杳 , 是生长在干燥 、 寒冷山区的 一种野生果
树资掠 , 是生产苦杳仁的主要树种 。 它具有很高的经济价值 、 药用价值以及独 特 的 生态价
值 , 是山区绿化和致富的优选树种之一 。 但山杏长期以来处于半野生状态 , 群体比较混杂 ,
变异类型繁多 , 对其群体结构及其遗传特性的研究将有利于山杳的进一步开发利用 。 本试验
首先以山杏种胚 为原始材料进行器官分化的研究 。
1 材料和培养条件
将处于休眠状态的山杳种子浸泡 2 4小时 , 去掉种皮或子叶后进行材料消毒和无菌条件下
接种外植体 , 各阶段的培养基均以 M S为基本培养基 , 激素 ( B A , I B A , N A A ) 浓度范围 为
。 . 1一 2 . o m g / L (单位下同 ) , 蔗搪 30 9 / L , 凉脂 7 . 5 9 / L 。 每瓶 (5 。m l) 接种三 个 外植体 ,
每天光照 2 0小时 , 光强 l 0 0 0 L x 。
2 结果与分析
2
.
1 子叶对胚的萌发育有抑制作用 。 将带全部子叶 、 1 / 2子叶和不带子叶的胚分别接人
各组培养基中 , 18 天后种胚在培养基中的平均萌发率见表 1 。 由表 1 可以看到休眠种胚的子
叶中存在着抑制萌发的物质 。 抑制物质的存在同时也影啊着种胚苗的生长情况 , 钓 天后带于
* 参加本项工作的还有王立国、 赵俊喜同志 。
收稿日期 : 103 8年6月 0日
、期 刘哇森 张立彬 陈玉林 王同坤 李淑杰 以种胚为外植体的西伯利亚杏器官分化的研究 4了
叶的种胚苗节间不易伸长 , 叶片狭小 , 呈莲座状 , 而这时 的离体胚幼苗高度已达到 3一 c4 m 。
表 1 子叶对种胚萌发的影响 1 9 8 8年 4月
_ 上 一一 ~兰一……型竺翌兰卜二二兰些一…一里-兰翌竺 -
-
-一 i日三生一一一 -…- 一 一三生一 -一…一一一土- 一- 卜一一 一卫生一一J』立+ 李于口卜 1 TO 」 7 } 1 0 . 0— {-— — {— 一…——-一 …i至i翌生 ~ 一 - 一 {- 一些竺- …一竺 一…一一一竺生一一-矛仁子萌发试验 一 45 } 0 ! 02 . 2 低温处理促进了种胚萌发和生长 。 将种子在 4 ℃条件下 (冰箱内保温 ) 处 理 72 小时 , 能提高萌发率 1 1 . 4% (结果见表 2 ) , 而且幼苗的生长势力也优于前者 。 可见低温也是打破山杏胫体眠的必要条件 , 而且需要一定的低温层夏积量 。表 2 低温对种胚萌发的影响 、 1 088年 4月
_ 少 理 …接种夕卜植体数 (个 , …_ _萌 发 数 (个 , … 萌 发 率 (` ,未经低温处理的离体困 。 7 } 扭 { , , :
~ 卫退竺坠一— 一— }— 三一一— …— }— 一二二止一 一一一 -经低温 7 2小时的离体胚 { 7 3 1 2 5 ! 3 4 · 22 . 3 将种胚分别接人 M S以及附加不同激素的培养基 , 种胚在各组培养基中的萌发情况见表 3 。 由表 3可以看出 , 激素对胚的萌发起了主要促进作用 , 而不同种类的激素在萌发率上存在差异 。 激素种类对种胚萌发的影响 1 98 8年5月
些竖型垫旦上生吐竺竺竺梦 {竺塑丝上生竺竺竺竺塑 - }
M S 】
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2
.
4 黄化培养有利于愈伤组织的形成 。 接种后在暗室中进行暗培养 , 两周内 愈 伤组织
量比对照 (光培养 ) 增加一倍 。 咭培养形成的愈伤组织在分化培养基中不易老化 。 但胚在生
长 培养基中形成丛状芽的数量较少 , 可能是光氧化使部分生产素降解 , 改变了生长素与分裂
素的比 例 , 从而使暗培养与光培养之间出现差异 。
2
.
5 胚在不同培养基中的生长和分化有三种情况 。 第一种情况是在生长素 /分裂素较高
的培养基 (M S 十 B A 0 . 25 十 BI A I . o ~ 2 . 0) 中 , 下胚轴迅速膨大 , 形成较多的 愈伤组织 。 胚
芽的生长很慢 . 被愈伤组织包围 。 转人M S 十 B A o . 5一 1 . 0 十 BI A 0 . 5一 1 . 。培养基中 , 则胚芽
较快伸长并逐渐形成一团芽丛 , 将芽丛分切后在此培养基上可迸行继代 , 继代周期一般为 12
~ 16 天 。 第二种情况是胚在M S 十 B A 。。 5 + N A A O . 5培养基中 , 胚芽快速生 长 , 常 形 成单个
无根苗。 第三种情况是 M S 十 B A o . 1 十 BI A o . 5培养基中 , 周围先形成少量愈伤组 织 , 7 ~ 10
48何北农业技术师范学院学报 2卷
天后根与芽同时生长 , 这样的幼苗一般较矮 。
2
.
6 将种胚形成的愈伤组织切割成 。 . 3 ~ o . sc m 的小块 , 置于分化培养基 ( M S + B A o . 5
+ BI A O
.
5 ; M S 十 B A O . 25 十 N A A O
.
5) 中 , 在光照条件下第 17 天开始有绿色芽点产生 , 随后
逐渐形成丛状芽 。
2
.
7 无根苗生长到 3 ~ 5 c m时 , 切去基部愈伤组织进行根的诱导 。 在生根 培养基 中第
4 天开始发现新根 , 第 6 天转人 1 / ZM S基本培养基后 4 ~ 5 天新根即可生长到 1 ~ 3 c m 。 在
不同生根培养基中生根数量和生长速度有所不同 , 其中以 1 2/ M S 十 BI A 1 . 0为最好 , 其生根率
为 95 % 。 一直处在生根培养基而不能转移到 1 / ZM S基本培养基中的幼苗 , 新根 的生长表现缓
慢 。 说明生长素对生根的促进作用有一定的浓度范围及其阶段效应 。
2
.
8 幼苗在 l / ZM S基本培养基中培养 2 周 , 完整植株 的根系达到 4 ~ 5 c m , 在 培养室
内去掉瓶盖锻炼 4 ~ 6 天 , 移入蛙石培养 , 3 一 5 天后新根上的根毛明显增多 ; 待幼苗根系
比较发达时 , 移人以瓦盆 为容器的培养土中即能成活 。
3 小结
通过以山杏种胚 为外植体进行的器官诱导试验 , 基本了解了根、茎 、 叶各器官分化 的培养
条件 , 以及由愈伤组织诱导成芽的培养条件 , 并且对影响休眠种胚萌发的因子进行了初步探
讨。 这些工作给山杏 的进一步研 究提供了必要的手段和试验材料 , 它将保障下一步研究的顺
利进行 。
参 考 文 献
〔 1〕 杨增海 . 园艺植物组织培养 . 农业出版社 , 1 9 8 7 ;
〔2〕 陈正华 . 木本植物组织培养及其应用 . 高等教育出版社 , 19 8 6 ;
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