全 文 ：第１０卷第３期
２０１１年５月
杭州师范大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈａｎｇｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖｏｌ．１０Ｎｏ．３
Ｍａｙ　２０１１
收稿日期：２０１０－１２－２８
基金项目：国家自然科学基金项目（３０７７０１６１，３０９７０１８８）；杭州师范大学科研启动基金项目（ＹＳ０５２０３１３０）．
作者简介：李鹏勃（１９８６—），男，陕西周至人，植物学专业硕士研究生，主要从事植物系统进化与生态学研究．
＊通信作者：吴玉环（１９７２—），女，浙江苍南人，教授，博士，主要从事植物系统进化与生态学研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕｈｕａｎｗｕ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－２３２Ｘ．２０１１．０３．０１０
牛角藓Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ
的ＲＡＰＤ分类研究
李鹏勃１，吴玉环１，２＊，罗　昊２
（１．杭州师范大学生命与环境科学学院，浙江 杭州３１００３６；２．中国科学院沈阳应用生态研究所，辽宁 沈阳１１００１６）
摘　要：以采自四川、甘肃、湖南等８省的９份牛角藓标本为材料，运用ＲＡＰＤ技术对牛角藓的分类修订进
行研究．利用１５条随机引物共获得１３４条清晰谱带，其中多态性条带占９１．７９％，牛角藓各标本间的遗传相似系
数为０．７０３～０．８７０．结果显示：虽然９份牛角藓标本的形态特征差异非常大，但通过ＲＡＰＤ分析表明其为同
一种．
关键词：牛角藓；ＲＡＰＤ；分类修订；环境饰变
中图分类号：Ｑ９４９　　　　　文献标志码：Ａ
文章编号：１６７４－２３２Ｘ（２０１１）０３－０２３７－０５
牛角藓属（Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ（Ｓｕｌ．）Ｓｐｒｕｃｅ）是薄罗藓亚目（Ｌｅｓｋｅｉｎｅａｅ）柳叶藓科（Ａｍｂｌｙｓｔｅｇｉａｃｅａｅ）的一
个属，现记录仅有１种１变种［１］，即牛角藓（Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ）和牛角藓宽肋变种
（Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ　ｖａｒ．ａｔｒｏｖｉｒｅｎｓ（Ｂｒｉｄ．）Ｏｃｈｙｒａ），广泛分布于日本、俄罗斯，东
南亚、欧洲、北美和北非等地，我国东北、秦岭沿线、西南地区及新疆等地也有较为丰富的资源［２］．
牛角藓植物体大小、叶形和角部细胞等形态特征变异非常大，且表现出明显的依生态环境（尤其是固
着基质和水湿条件）不同而相异的特点［３］，因此对经典形态分类学结果造成了较大的影响，以致以前的学
者们根据是否具鳞毛、中肋的粗细、叶形和角部细胞的不同变化等将大量牛角藓标本作为新种发表，其中
以中国牛角藓植物标本发表的新种就有１７个［４－６］．而Ｏｃｈｙｒａ［１］则认为全世界牛角藓属仅存牛角藓及其宽
肋变种，吴玉环等［７］对２００余份牛角藓标本的叶形、中肋和角部细胞等特征数据进行线性回归分析也得到
了相似的结果．因此，急需寻求一种新的、更加稳定可靠的研究方法来确定这些叶形和中肋等形态特征变
化较大的牛角藓是否可以简单地归于一种．
ＲＡＰＤ技术因其简单、快速、高效等优点，加之在苔藓植物研究中应用时，能够避免自身不能区分纯合
和杂合等劣势［８］，近年来已在苔藓植物遗传多样性检测、遗传关系讨论、遗传图谱构建、基因定位与分离等
方面得到了广泛的应用［９－１１］．
该文拟通过分子生物学手段对采自四川、甘肃、湖南等８个省份９个居群的牛角藓进行ＲＡＰＤ分类
研究，探讨中国牛角藓不同居群的遗传变异程度，并结合近年来经典形态分类学所取得的研究成果，提出
关于中国牛角藓分类的新观点，从期能为经典形态分类学的研究成果提供新的分子实验证据，并为其他科
属苔藓植物的系统分类修订提供新的借鉴和参考．
１　材料与方法
１．１　材　料
９份采于不同地区及不同生态环境的牛角藓标本（表１），选取牛角藓宽肋变种和柳叶藓（Ａｍｂｌｙｓｔｅｇｉ－
ｕｍ　ｓｅｒｐｅｎｓ）作为外类群．所用标本均由沈阳应用生态研究所标本馆（ＩＦＳＢＨ）提供．
表１　试验用标本及其形态特征与采集地生态环境
Ｔａｂ．１　Ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ａｎｄ　ｅｎｖｉｒｏｍｅｎｔｓ
种、变种 标本凭证 中肋 叶形 生态环境
牛角藓　 Ｓｉｃｈｕａｎ 四川卧龙，曹同４３１３８ 突出叶尖 披针形，宽而长且弯曲 石生
Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　Ｇａｎｓｕ１ 甘肃天水，吴玉环１５２１ 达叶中部 披针形，窄而长且弯曲 石生
ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ　Ｇａｎｓｕ２ 甘肃肃南，吴玉环１６５７ 达叶尖 披针形，长而短且略弯曲 土生
Ｈｕｎａｎ 湖南桑植，曹同 付星４２８７７ 达叶尖 三角形，窄而短且略弯曲 土生
Ｙｕｎｎａｎ 云南中甸，Ｌｏｎｇ　２３７１５ 突出叶尖 披针形，窄而长且弯曲 石生
Ｌｉａｏｎｉｎｇ 辽宁宽甸，吴玉环０９５２ 达叶中部 三角形，窄而长且直 水里石生
Ｘｉｎｊｉａｎｇ 新疆策略，买买提明９６０００７４ 突出叶尖 三角形，下部椭圆窄而长且直 水中
Ｈｅｂｅｉ 河北蔚县，赵建成９７１８４８ 达叶尖 三角形，宽而短且直 水边生
Ｊｉｌｉｎ 吉林长白山，吴玉环１１０３ 突出叶尖 披针形，宽而短且略弯曲 土生
牛角藓宽肋变种
Ｃ．ｆｉｌｉｃｉｎｕｍｖａｒ．ａｔｒｏｖｉｒｅｎｓ
北京怀柔，吴玉环９８００１
柳叶藓
Ａｍｂｌｙｓｔｅｇｉｕｍ　ｓｅｒｐｅｎｓ
黑龙江伊春，吴玉环１２３９
１．２　方　法
１．２．１　基因组ＤＮＡ提取（参考张道远等［１２］，稍作改动）
苔藓植物ＤＮＡ提取过程中经常受到多酚和蛋白等物质的影响，难度较大．该研究中ＤＮＡ的提取采
用改良ＣＴＡＢ法，在研磨后加入含有ＰＶＰ，Ｖｃ等抗氧化剂和稳定剂的缓冲液，能很好地抑制多酚氧化酶
和细胞色素氧化酶的活性；抽提方法上，两次使用氯仿抽提，能有效地去除蛋白质等的影响．
将试验材料分别用７０％酒精和蒸馏水清洗后放入研钵中，加入液氮迅速、充分研磨，待成极细粉末状
时迅速转移至１．５ｍＬ离心管中，加入８００μＬ冰浴预冷的ＤＮＡ研磨缓冲液，充分混匀后２　０００ｒ／ｍｉｎ
４℃离心１０ｍｉｎ，弃上清，在沉淀中加入６００μＬ经６５℃预热的裂解缓冲液，缓慢混匀，６５℃水浴６０ｍｉｎ
（中间不时轻轻搅动）后加入等体积氯仿，摇匀后６　０００ｒ／ｍｉｎ　４℃离心１０ｍｉｎ．然后取上清液于１．５ｍＬ
离心管中，再加入等体积氯仿，摇匀后６　０００ｒ／ｍｉｎ　４℃离心１０ｍｉｎ．取上清液，加入１／５体积１０ｍｏｌ／Ｌ
ＮＨ４Ａｃ和等体积预冷异丙醇，混匀后－２０℃静止１ｈ以上或过夜．１２　０００ｒ／ｍｉｎ　４℃离心１０ｍｉｎ沉淀
ＤＮＡ，再用７０％乙醇洗涤沉淀数次，６５℃干燥数分钟，将沉淀溶于３０μＬ的ＴＥ中，－２０℃保存．
ＤＮＡ研磨缓冲液配方：０．１ｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ，ｐＨ为８．０；５ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｎａ２ＥＤＴＡ，ｐＨ为８．０；２０ｍｇ／ｍＬ
ＰＶＰ；２５ｍｇ／ｍＬβ－巯基乙醇；１ｍｇ／ｍＬ　Ｖｃ．
裂解缓冲液配方：２０ｍｇ／ｍＬ　ＣＴＡＢ；０．１ｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ，ｐＨ为８．０；２０ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｎａ２ＥＤＴＡ，ｐＨ为
８．０；１．４ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＣｌ；２０ｍｇ／ｍＬ　ＰＶＰ；２５ｍｇ／ｍＬβ－巯基乙醇；１ｍｇ／ｍＬ　Ｖｃ．
１．２．２　ＲＡＰＤ扩增
反应体系主要成分为：１０×ＰＣＲ　ｂｕｆｆｅｒ　２．５μＬ（１０ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ，ｐＨ为８．３；５０ｍｍｏｌ／Ｌ　ＫＣｌ），
模板ＤＮＡ　１００ｎｇ，ｄＮＴＰ　０．１ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｔａｑ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　０．７５Ｕ，引物０．２０μｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ
２＋ 浓度２．００
ｍｍｏｌ／Ｌ．反应体系总体积为２５μＬ．ＲＡＰＤ反应程序为：９４℃预变性３ｍｉｎ；变性９４℃１ｍｉｎ，退火３６．５
８３２ 杭州师范大学学报（自然科学版） ２０１１年　
℃１ｍｉｎ，延伸７２℃１ｍｉｎ，３５个循环；延伸７２℃１０ｍｉｎ．冷却至４℃保存备用．
１．３　数据处理
ＰＣＲ扩增反应重复１次，选取可重复的ＤＮＡ带（包括强带和弱带）记录．每个样品的扩增带按“有”或
“无”记录．“有”赋值为１，“无”赋值为０．根据Ｎｅｉ等［１３］的方法计算样品间的简单遗传相似系数Ｉ，计算公
式为Ｉ＝２　Ｎｉｊ／（Ｎｉ＋Ｎｊ），其中，（Ｎｉ＋Ｎｊ）为两样品的总扩增带数，Ｎｉｊ为两样品共有的扩增带数．利用
ＭＶＳＰ程序，按非加权算术平均数聚类方法（ＵＰＧＭＡ）计算种间遗传距离，建立系统聚类分析树状图．
２　结果与分析
２．１　遗传多态性
对６０个引物进行筛选，得到３０个多态性引物，从中挑选出１５个条带清晰的引物进行统计分析（表
２）．这１５个引物的Ｇ＋Ｃ占６４．４％，共扩增得到１３４条清晰稳定的扩增带，其中１２３条为多态性条带，多
态条带比率（ＰＰＢ）为９１．７９％，平均每个引物扩增出８．９条多态性带．片段大小在２３０～２　８００ｂｐ之间，每
个引物扩增６至１４条不等，表明这些物种ＲＡＰＤ变异性较大，多态性高（图１）．
表２　ＲＡＰＤ分析用的１５个随机引物序列
Ｔａｂ．２　Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　１５ｐｒｉｍｅｒｓ　ｕｓｅｄ　ｂｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ＲＡＰＤ
引物 序列 引物 序列
ＯＰＡ－１２　 ５′－ＴＣＧＧＣＧＡＴＡＧ－３′ ＯＰＣ－１１　 ５′－ＡＡＡＧＣＴＧＣＧＧ－３′
ＯＰＡ－１４　 ５′－ＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧ－３′ ＯＰＣ－１５　 ５′－ＧＡＣＧＧＡＴＣＡＧ－３′
ＯＰＡ－１６　 ５′－ＡＧＣＣＡＧＣＧＡＡ－３′ ＯＰＣ－１９　 ５′－ＧＴＴＧＣＣＡＧＣＣ－３′
ＯＰＡ－１８　 ５′－ＡＧＧＴＧＡＣＣＧＴ－３′ ＯＰＣ－２０　 ５′－ＡＣＴＴＣＧＣＣＡＣ－３′
ＯＰＡ－１９　 ５′－ＣＡＡＡＣＧＴＣＧＧ－３′ ＯＰＤ－０９　 ５′－ＣＴＣＴＧＧＡＧＡＣ－３′
ＯＰＣ－０１　 ５′－ＴＴＣＧＡＧＣＣＡＧ－３′ ＯＰＤ－１４　 ５′－ＣＴＴＣＣＣＣＡＡＧ－３′
ＯＰＣ－０５　 ５′－ＧＡＴＧＡＣＣＧＣＣ－３′ ＯＰＺ－２０　 ５′－ＡＣＴＴＴＧＧＣＧＧ－３′
ＯＰＣ－０９　 ５′－ＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣ－３′
图１　随机引物ＯＰＣ－１１扩增产生的ＲＡＰＤ带型
Ｆｉｇ．１　ＲＡＰＤ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｒａｎｄｏｍ
ｐｒｉｍｅｒｓ　ＯＰＣ－１１
（Ｍ：λＤＮＡ；１．Ａｍｂｌｙｓｔｅｇｉｕｍ　ｓｅｒｐｅｎｓ；２．Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉ－
ｎｕｍ ｖａｒ．ａｔｒｏｖｉｒｅｎｓ；３．Ｓｉｃｈｕａｎ；４．Ｇａｎｓｕ１；５．Ｇａｎｓｕ　２；
６．Ｈｕｎａｎ；７．Ｙｕｎｎａｎ；８．Ｌｉａｏｎｉｎｇ；９．Ｘｉｎｊｉａｎｇ；１０．Ｈｅｂｅｉ；
１１．Ｊｉｌｉｎ）
２．２　遗传相似性
基于ＲＡＰＤ数据求得材料的遗传相似系数（ＧＳ），结
果如表３所示．１１份样品种内或种间两两之间的ＧＳ值在
０．３１５～０．８７０之间，平均为０．７１４．供试材料的种内遗传
相似系数较高，种间遗传相似系数较低：９份牛角藓样品两
两之间的ＧＳ在０．７０３～０．８７０之间；而牛角藓宽肋变种与
９份牛角藓样品的ＧＳ为０．６１７～０．６８３；柳叶藓与９份牛
角藓样品的ＧＳ最低，在０．３１５～０．４１９之间．
２．３　牛角藓的聚类分析
供试材料的聚类分析结果见图２．从图中可以看出，１１
份样品可划分为３个类群：第一类群为柳叶藓；第二类群
为牛角藓宽肋变种；第三类群为９份牛角藓样品．在不同
的引物中，９份牛角藓样品都存在特有带，说明它们在基因
组ＤＮＡ的组成上具有共同序列．而这些带在牛角藓宽肋变种和柳叶藓中并不存在，说明这些条带是种的
特征带，由此表明９份样品属同一种．此外，ＵＰＧＭＡ聚类图显示９份牛角藓标本中产于北温带附近的６
个聚在一起，而产于高纬度的２个牛角藓样品聚在一起．
９３２　第３期 李鹏勃，等：牛角藓Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ的ＲＡＰＤ分类研究
表３　基于ＲＡＰＤ数据计算的１１份标本间的遗传相似系数
Ｔａｂ．３　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｏｆ　１１ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＲＡＰＤ　ａｎａｌｙｓｉｓ
标本 柳叶藓
牛角藓
宽肋变种
牛角藓
Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｇａｎｓｕ１ Ｇａｎｓｕ２ Ｈｕｎａｎ　Ｙｕｎｎａｎ　Ｌｉａｏｎｉｎｇ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｈｅｂｅｉ　 Ｊｉｌｉｎ
柳叶藓 １．０００
牛角藓宽肋变种 ０．４５２　 １．０００
牛
角
藓
Ｓｉｃｈｕａｎ　 ０．３６１　 ０．６３２　 １．０００
Ｇａｎｓｕ１　 ０．３２６　 ０．６６２　 ０．８７０　 １．０００
Ｇａｎｓｕ２　 ０．３９４　 ０．６８３　 ０．８３４　 ０．８４４　 １．０００
Ｈｕｎａｎ　 ０．３５８　 ０．６３４　 ０．７７３　 ０．７３４　 ０．７８　 １．０００
Ｙｕｎｎａｎ　 ０．４１９　 ０．６３６　 ０．７５４　 ０．７９１　 ０．７５６　２　０．７１９　 １．０００
Ｌｉａｏｎｉｎｇ　 ０．３７２　 ０．６４９　 ０．７８３　 ０．８０６　 ０．７４８　 ０．７０３　 ０．７７６　 １．０００
Ｘｉｎｊｉａｎｇ　 ０．３１５　 ０．６１７　 ０．７０６　 ０．７４２　 ０．７７２　 ０．７３　 ０．７４２　 ０．７８８　 １．０００
Ｈｅｂｅｉ　 ０．３９７　 ０．６５７　 ０．７３８　 ０．７４６　 ０．７１９　 ０．７８３　 ０．７７８　 ０．７３　 ０．７２６　 １．０００
Ｊｉｌｉｎ　 ０．３７３　 ０．６６７　 ０．７８３　 ０．７９１　 ０．８１６　 ０．７５２　 ０．７５６　３　０．８０６　 ０．８７６　 ０．７４８　１．０００
图２　基于ＲＡＰＤ数据用ＵＰＧＭＡ法构建的树系图
Ｆｉｇ．２　Ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ　ｕｓｉｎｇ　ＵＰＧＭＡ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＲＡＰＤ　ｄａｔａ
３　讨　论
该研究在分析每一个引物对试验样品
扩增结果的基础上，将大量的ＤＮＡ条带显
示结果数字化，编入二进制输入计算机，得
出每一样品的遗传相似性系数，以种内个
体间相似系数的平均值为基础，得出种间
聚类图．结果表明牛角藓遗传多样性较高，
且表现为地域较近的样品首先聚合到一
起，说明影响牛角藓遗传多样性的因素与
所处地域的远近有关．牛角藓多生于水源
处，基因流的转移有可能随着水流的变化而变化．从聚类图可以看出牛角藓与其变种的相似性较大而与柳
叶藓较小，这是因为牛角藓与牛角藓宽肋变种为同属，亲缘关系较近，而与柳叶藓关系较远．
牛角藓为世界广布种，生于各种环境中，植物体大小和形态变化较大，尤其是叶片和细胞特征变化较
大．对不同生态条件下采集的牛角藓标本进行形态特征观察，其叶片三角形或披针形，中肋或达于叶尖、
或终于叶尖前部、或突出叶尖，叶片中部细胞从六边形到长菱形均有，表现出明显依生态环境尤其是固着
基质和水湿条件不同而相异的特点．这些多变的生态型给系统分类带来许多争议．有研究［１４］表明，苔鲜植
物普遍存在着可塑性，其可塑性甚至比大多数有花植物还要强．这是因为在苔鲜植物中，选择作用有利于
可塑性的产生，苔鲜植物有限的异体受精和基因交流能力限制了以产生新基因型的办法来提高对环境的
适应能力［１５］．因此不应把形态特征上有明显变异的牛角藓简单地成立为新种，这些变异可能是环境饰变
的结果．该研究中，虽然不同生长环境条件下的牛角藓植物体及其形态特征变化很大，但依据ＲＡＰＤ分析
结果，９份牛角藓样品聚在一起，明显与外类群牛角藓宽肋变种和柳叶藓分离，充分说明其为同一物种．该
结果为经典形态分类学的观点提供了新的分子证据．
参考文献：
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［１１］Ｚｈｕ　Ｙｏｎｇｑｉｎｇ，Ｌｉｕ　Ｌｉ，Ｗａｎｇ　Ｙｏｕｆａｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｂｒａｃｈｙｔｈｅｃｉｕｍ　ｒｉｖｕｌａｒｅ　Ｓｃｈｉｍｐ．
（Ｂｒａｃｈｙｔｈｅｃｉａｃｅａｅ）ｆｒｏｍ　Ｆｏｐｉｎｇ　Ｎａｔｕｒｅ　Ｒｅｓｅｒｖｅ，Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ，ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＲＡＰＤ　ｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｒｙｏｌｏｇｙ，２００７，２９（２）：
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［１３］Ｎｅｉ　Ｍ，Ｌｉ　Ｗ　Ｈ．Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｓｔｕｄｙｉｎｇ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｅｒｍｓ　ｏｆ　ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ　ｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，
１９７９，７６：５２６９－５２７３．
［１４］Ｌｏｎｇｔｏｎ　Ｒ　Ｅ．Ｇｅｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｂｒｙｏｐｈｙｔｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈａｔｔｏｒｉ　Ｂｏｔａｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，１９７４，３８：４８－６５．
［１５］崔明昆．苔藓植物的生态变异及其分类学中的生态学准则［Ｊ］．云南师范大学学报：自然科学版，２００１，２１（４）：６１－６４．
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ
Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ　ｂｙ　ＲＡＰＤ
ＬＩ　Ｐｅｎｇ－ｂｏ１，ＷＵ　Ｙｕ－ｈｕａｎ１，２，ＬＵＯ　Ｈａｏ２
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１００３６，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｈｏｏｓｉｎｇ　ｎｉｎｅ　Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｇａｎｓｕ，Ｈｕｎａｎ，Ｙｕｎｎａｎ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，
Ｈｅｂｅｉ，Ｊｉｌｉｎ　ａｎｄ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｔｈｅ　ｐａｐｅｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　ｒｅｖｉｓｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｃ．ｆｉｌｉｃｉｎｕｍｂｙ
ＲＡＰＤ，ｏｂｔａｉｎｅｄ　１３４ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｂａｎｄｓ　ｆｒｏｍ　１５ｐｒｉｍｅｒｓ，ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　９１．７９％ ｗｅｒｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ（ＧＳ）ａｍｏｎｇ　ｎｉｎｅ　Ｃ．ｆｉｌｉｃｉｎｕｍｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｖａｒｉｅｄ　ｆｒｏｍ　０．７０３ｔｏ　０．８７０．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｏｆ
ｎｉｎｅ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｓｐｅｃｉｅ　ｔｈｏｕｇｈ　ｔｈｅｙ　ａｒｅ　ｖｅｒｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｎ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ；ＲＡＰＤ；ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　ｒｅｖｉｓｉｏｎ；ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ
１４２　第３期 李鹏勃，等：牛角藓Ｃｒａｔｏｎｅｕｒｏｎ　ｆｉｌｉｃｉｎｕｍ （Ｈｅｄｗ．）Ｓｐｒｕｃｅ的ＲＡＰＤ分类研究