全 文 ：第４８卷第５期 华中师范大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４８ Ｎｏ．５
２０１４年１０月 ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＨＵＡＺＨＯＮＧ　ＮＯＲＭＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（Ｎａｔ．Ｓｃｉ．） Ｏｃｔ．２０１４
收稿日期：２０１４－０３－２４．
基金项目：湖北省自然科学基金项目（２０１３ＣＦＢ４０８）；中央高校基本科研业务费专项资金项目（ＣＵＧ０９０１０３）．
＊通讯联系人．Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｌｓｈｅｎｇ＠ｃｕｇ．ｅｄｕ．ｃｎ．
文章编号：１０００－１１９０（２０１４）０５－０７１７－０５
神农架大九湖湿地泥炭藓遗传多样性ＲＡＰＤ研究 !
杜　明，盛桂莲＊
（中国地质大学 生物地质与环境地质国家重点实验室，武汉４３００７４）
摘　要：泥炭藓是重要的沼泽湿生藓类，其生长情况对环境气候变迁具有直接的指示意义．通过
ＲＡＰＤ分子标记对湖北神农架４７份泥炭藓样品的遗传多样性进行了研究：（１）对２０条随机引物进
行筛选，共选出６条重复性好，条带清晰的引物，对４７份样品共扩增出４０个条带，多态性比率为
９５％；（２）以遗传相似性系数０．６１为界限，可将４７份样品划分为４大类群；（３）对泥炭藓扩增条带
的聚类分析显示，大九湖湿地泥炭藓遗传多样性与采样点地域之间没有明显的相关性．对上述结
果综合分析表明：大九湖湿地泥炭藓遗传多样性水平较低，一定程度上反映出近些年来旅游开发、
排水工程改造等人类活动对大九湖湿地自然环境的影响．
关键词：ＲＡＰＤ；泥炭藓；遗传多样性；相似性系数
中图分类号：Ｑ３７ 文献标识码：Ａ
　　泥炭藓（Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｐａｌｕｓｔｒｅ　Ｌ．）植物仅一属，
３００余种，分布于世界各地，以美洲、亚洲东北部
和欧洲最为丰富，属沼泽湿生藓类．我国约有５０
种，主要分布在东北和西南各省区．泥炭中所保留
的环境信息可以比较全面的反映自然环境变化的
本来面目，在全球古气候古环境变化研究中有着重
要意义［１］．神农架大九湖湿地位于神农架西端，晚
更新世以来，由于冰川［２］、岩溶和流水的不断作用，
逐渐形成了独特的封闭高山盆地［３］．自全新世以
来，大九湖形成了稳定连续的泥炭堆积，加之地理
位置偏僻，人迹罕至，很少受到人为活动影响．然而
近年来，由于当地政府实施排水工程改造，加上人
们对泥炭藓的收购采集和引进外来植被，使得沼泽
面积不断缩小，大九湖湿地不断地丧失其作为研究
当地历史气候变化、环境演变、生物变化的信息载
体的作用［４］．泥炭藓密枝（亚种）（Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｐａｌ－
ｕｓｔｒｅ　ｓｕｂ　ｓｐ．ｐｓｅｕｄｏｃｙｍｂｉｆｏｌｉｕｍ）作为大九湖湿
地的优势种，也是关键种，其遗传多样性已经受到
人类活动和生境片段化影响［５］．
ＲＡＰＤ （Ｒａｎｄｏｍ　Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ＤＮＡ），即随机扩增多态性ＤＮＡ，是１９９０年由美
国杜邦公司的 Ｗｉｌｉａｍｓ等和加尼福利亚生物研究
所的 Ｗｅｌｓｈ等同时推出的一种分子遗传标记技
术，是应用最早的ＤＮＡ标记技术之一［６］．具有模
板ＤＮＡ量少、无污染或少污染、费用较低、对实验
设备要求相对简单、技术简便、周期短，且无需预先
了解目标ＤＮＡ模板序列信息等特点．尽管有关于
ＲＡＰＤ技术体系不稳定的报道，但根据研究发现，在
增加其引物的长度以及严格选择ＰＣＲ退火温度的
情况下可以对 ＲＡＰＤ技术不稳定性加以克服，
ＲＡＰＤ标记技术有其特点与优势［７］．由于ＧｅｎＢａｎｋ
中现有的泥炭藓序列数据极其有限，有鉴于此，本研
究利用ＲＡＰＤ分子标记技术对大九湖泥炭藓进行
研究，优化泥炭藓基因组提取和ＲＡＰＤ扩增ＰＣＲ反
应体系，并对样品遗传多样性进行统计分析，探讨泥
炭藓遗传多样性对人类活动的分子响应，为大九湖
湿地该种群退化的理论研究提供基础资料，并为泥
炭藓野生资源的保护和合理利用提供参考．
１ 材料与方法
１．１ 实验材料
本次实验材料采自湖北神农架大九湖湿地，共
有泥炭藓密枝（亚种）样品４７份，编号为Ｄ－１～Ｄ－
４９（Ｄ－３，Ｄ－２４样品缺失），分别来自于养鹿场（Ｄ－１
～Ｄ－１１），娘娘墓（核心区）（Ｄ－１２～Ｄ－３６），二号湖
（Ｄ－３７～Ｄ－４１），娘娘墓（捌字号）（Ｄ－４２～Ｄ－４７），
三号湖（Ｄ－４８，Ｄ－４９）等５个采样点．根据各个采
样点之间样品的盖度及生长状况，进行随机采
７１８　 华中师范大学学报（自然科学版） 　　第４８卷
样，为了避免采到同一个体的不同分株，每个采
样点各个样本间间距３０ｍ以上，选取泥炭藓地
表茎叶，清水冲洗后用塑料袋封装置于冰盒内保
存，带回实验室后，依次用超纯水和灭菌水清洗，
烘干后置于－８０℃冰箱中保存备用．
１．２ 仪器和试剂
１．２．１ 实验仪器　Ｂｉｏ－Ｒａｄ　Ｐｏｗｅｒ　ＰＡＣ　３００电泳
仪，ＭＪ　ＰＴＣ－１００荧光定量 ＰＣＲ仪，Ｂｉｏ－Ｒａｄ　Ｇｅｌ
２０００凝胶成像分析系统
１．２．２ 试剂　提取：提取采用 ＤＮＡｓｅｃｕｒｅ　Ｐｌａｎｔ
Ｋｉｔ（ＤＰ３２０）．包括 ＲＮａｓｅ　Ａ（１０ｍｇ／ｍＬ）、缓冲液
ＬＰ１、缓冲液ＬＰ２、缓冲液ＬＰ３、漂洗液ＰＷ、洗脱缓
冲液ＴＥ、吸附柱ＣＢ３；
ＰＣＲ：１０×ＰＣＲ　ｂｕｆｆｅｒ，２５ ｍｍｏｌ　ＭｇＣｌ２，
１０ｍｍｏｌ　ｄＮＴＰｓ，５ＵＴａｑ聚合酶、灭菌水 ；
电泳：琼脂糖（ａｇａｒｏｓｅ），ＤＮＡ　ｍａｒｋｅｒ（１００ｂｐ
ＤＮＡ　ｌａｄｄｅｒ）；
ＲＡＰＤ引物选用北京赛百盛基因技术有限公
司Ｂ组２０个引物，由南京金斯瑞生物科技有限公
司合成．
１．３ ＤＮＡ的提取
采用植物基因组 ＤＮＡ提取试剂盒（ＤＮＡｓｅ－
ｃｕｒｅ　Ｐｌａｎｔ　Ｋｉｔ）进行提取，并根据苔藓植物的特点
进行适当改进及优化［８］．具体操作为：选取植物新
鲜组织干重３０ｍｇ，液氮充分研磨后转入２ｍＬ的
离心管中，加入４００μＬ含有１％ β－巯基乙醇的
ＬＰ１缓冲液和６μＬＲＮａｓｅ　Ａ，漩涡振荡，室温下静
置１０ｍｉｎ，加入酚／氯仿１∶１的混合液等体积抽
提，然后依照试剂盒加入 ＬＰ２、ＬＰ３ 缓冲液及
３００μＬ漂洗液ＰＷ 并分别进行离心，最后加入洗
脱缓冲液ＴＥ将提取的样品收集至离心管中．将所
得 的 ＤＮＡ 样 品 用 Ｎａｎｏｄｒｏｐ２０００ 进 行 检 测，
ＯＤ２６０／ＯＤ２８０比值大于１．８为合格．
１．４ ＲＡＰＤ反应及电泳
扩增条件：０．２ｍｍｏｌ／Ｌ　ｄＮＴＰｓ；２．０ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｍｇ２＋；１．０ＵＴａｐ酶；引物浓度，１０ｐｍｏｌ／μＬ；模板
ＤＮＡ　６０ｎｇ；１０×ｂｕｆｆｅｒ　１．５μＬ．反应体积２５μＬ；
ＰＣＲ反应：９４℃预变性３ｍｉｎ；９４℃变性１ｍｉｎ，３６℃
退火１ｍｉｎ，７２℃延伸２ｍｉｎ，循环４３次；７２℃延伸
１０ｍｉｎ；ＰＣＲ 电泳检测：取扩增产物４μＬ，加入
１．５μＬ６×ｌｏａｄｉｎｇ　ｂｕｆｅｒ，用１．５％琼脂糖凝胶电泳
进行检测，在凝胶成像系统中观察拍照．
１．５ 数据统计及分析
在筛选出来的引物当中，选取扩增产物条带清
晰、稳定、重复性好的引物进行条带统计．根据扩增
产物的电泳结果，统计选出的每条引物扩增出的条
带数，在同一位置扩增出ＤＮＡ条带数的记为“１”，
无条带的记为“０”，强带或者可分辨的弱带均记为
“１”，构建（０，１）矩阵．采用 ＮＴＳＹＳｐｃ－２．１０ｅ软件
处理ＲＡＰＤ数据，计算出扩增产物得到的总条带
数，多态性条带数和相似系数，采用类平均法 ＵＰ－
ＧＭＡ构建亲缘关系树状图．
２ 结果分析
２．１ 多态性分析
通过４７个样品的模板ＤＮＡ对２０条 ＲＡＰＤ
引物的筛选，共选出 ＳＢＳ－Ｂ－８，ＳＢＳ－Ｂ－１０，ＳＢＳ－Ｂ－
１１，ＳＢＳ－Ｂ－１２，ＳＢＳ－Ｂ－１５和ＳＢＳ－Ｂ－１７等６个条带
清晰、重复性和多态性都好的ＲＡＰＤ引物（引物序
列参见表１）．用筛选出来的６条引物对４７个样品
都进行了ＰＣＲ扩增，本实验对这６条引物扩增出
来的条带进行了全面的ＲＡＰＤ分析，所得的条带
数及多态性结果参见图１、表１．
１～２３泳道为泥炭藓样品，２４泳道为空白对照，
Ｍ为１００ｂｐ梯形ＤＮＡ标记
图１　ＳＢＳ－Ｂ－８扩增的部分样品ＲＡＰＤ电泳图谱
Ｆｉｇ．１　Ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｇｒａｍ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅｓ
ｂｙ　ｐｒｉｍｅｒ　ＳＢＳ－Ｂ－８
表１　ＲＡＰＤ引物及其扩增结果
Ｔａｂ．１　ＲＡＰＤ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ
ＲＡＰＤ引物 序列（５’－３’）
多态性
条带数
总条
带数
多态性条
带比例／％
ＳＢＳ－Ｂ－０８ ＧＴＣＣＡＣＡＣＧＧ　 ５　 ６　 ８３．３３
ＳＢＳ－Ｂ－１０ ＣＴＧＣＴＧＧＧＡＣ　 ８　 ９　 ８８．８９
ＳＢＳ－Ｂ－１１ ＧＴＡＧＡＣＣＣＧＴ　 ６　 ６　 １００
ＳＢＳ－Ｂ－１２ ＣＣＴＴＧＡＣＧＣＡ　 ６　 ６　 １００
ＳＢＳ－Ｂ－１５ ＧＧＡＧＧＧＴＧＴＴ　 ７　 ７　 １００
ＳＢＳ－Ｂ－１７ ＡＧＧＧＡＡＣＧＡＧ　 ６　 ６　 １００
　第５期 杜　明等：神农架大九湖湿地泥炭藓遗传多样性ＲＡＰＤ研究 ７１９　
６条引物扩增出的条带数在６～９条之间，扩
增片段长度位于２００ｂｐ～１　５００ｂｐ之间，共扩增出
４０个条带，平均每条引物扩增条带数为６．６７条，
其中多态性条带数３８条，多态性比率为９５％，因
此可见ＲＡＰＤ分子标记显示了较高的多态性比
率，实验材料之间遗传多样性较大，但就每条引物
扩增的条带数而言，采用ＲＡＰＤ引物来扩增泥炭
藓基因组得到的条带数较少，平均只有６．６７条．
２．２ 聚类分析
将６条引物扩增得到的数据运用 ＮＴＳＹＳ－ｐｃ
软件进行分析，计算任意两个样品间的 Ｎｅｉ－Ｌｉ遗
传相似性，对实验材料根据Ｎｅｉ－Ｌｉ遗传相似性，按
ＵＰＧＭＡ法进行聚类分析，构建聚类树状图（参见
图２）．
图２　４７个泥炭藓样品的ＲＡＰＤ分析聚类图
Ｆｉｇ．２　Ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ　ｏｆ　ＲＡＰＤ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　４７Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｓａｍｐｌｅｓ
　　由图２可以看出，４７个泥炭藓样品的遗传相
似性系数在０．５９～０．９３之间，在遗传相似性系数
０．６１处可以将４７个实验材料分为４个大类，第一
个类群包含了本次实验的３４个样品，包括养鹿场
８个，娘娘墓（核心区）１５个，二号湖４个，娘娘墓
（捌字号）５个以及三号湖的２个样品．在相似性系
数约为０．６９处进一步可分为４个亚类群，其中Ｄ－
１，Ｄ－２１和 Ｄ－３０距离其它样品最远，遗传差异较
大．其余３１份样品遗传相似系数大多约在０．７３～
０．８６之间，在遗传上表现为较高的遗传相似性；第
二大类包含６个样品，其中采自二号湖的Ｄ－３８和
其它５份娘娘墓（核心区）样品虽采样地环境不同，
但却表现出了较高的遗传相似性；第三大类包含５
份材料，其中采集自娘娘墓（核心区）的Ｄ－２６与养
鹿场的Ｄ－２，Ｄ－９样品聚为一小类，其余２份采集自
娘娘墓（核心区）的Ｄ－１３和Ｄ－１４样品聚为一小类；
第四大类仅包含２份实验材料（Ｄ－１２、Ｄ－３９），分别
采集于核心区及二号湖．
３ 讨论
３．１ 泥炭藓遗传多样性
ＤＮＡ分子水平多态性检测技术可以作为基因
组研究的基础．自从１９７５年Ｃｒｏｄｚｉｃｋｅｒ等人首次
采用ＲＦＬＰ分子标记对腺病毒血清型突变体基因
组进行作图，ＤＮＡ分子水平上的多态性便被广泛
应用于进行基因组遗传图谱构建、基因定位以及生
物进化和分类的研究［９］．ＲＡＰＤ技术建立于ＰＣＲ
技术基础上，能从分子水平上揭示同一物种内材料
间的差异，并已在苔藓的遗传多样性及其他许多物
种的种质资源鉴定上得到广泛应用［１０－１４］．本研究
利用从２０条随机引物中筛选出来的条带清晰、重
复性好的６条ＲＡＰＤ引物对４７个实验样品进行
扩增，从条带统计结果看，实验材料间有一定的遗
传差异，遗传相似性系数介于０．５９～０．９３之间．从
聚类分析来看，实验材料与采样地之间并没有明显
的关联（参见图３），例如娘娘墓（核心区）采集的样
品在聚类结果四大类群中均有分布，表明大九湖湿
地泥炭藓遗传多样性与地域间并没有明显的相关
性．此外，从聚类分析结果来看，本研究的遗传相似
性系数总体相对较高，表明本次实验材料在群体水
平遗传差异相对较低．因此可以对泥炭藓遗传多样
性研究工作提供一定的参考，在野外材料采集时应
扩大采样点，即使在同一环境也要根据环境地理条
件变化，尽可能增加采样量，采集有遗传差异的资
７２０　 华中师范大学学报（自然科学版） 　　第４８卷
图３　泥炭藓采样点分布与聚类分析
Ｆｉｇ．３　Ｔｈｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｐｏｉｎｔｓ　ａｎｄ　ｃｌｕｓｔｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｓｐｈａｇｎｕｍ
源．本研究结果也可以为泥炭藓遗传多样性的后续
研究工作提供借鉴和参考．
通过对神农架大九湖泥炭的气候变化记录研
究发现，大九湖先后从气候相对冷湿转为凉干［１５］．
大九湖泥炭沼泽先由最初的草本沼泽，经过混有泥
炭藓的草本沼泽，再演化为现在的以泥炭藓为主的
贫营养沼泽［１６］．然而进入２０世纪８０年代后期，由
于人为干扰，大九湖的生态环境发生很大变化，贫
营养沼泽正在逐步退化［１７］．从图３可以看出，经过
聚类分析，第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类的泥炭藓样品大致都位于
娘娘墓（核心区），其遗传多样性相对较为丰富，而
养鹿场、娘娘墓（捌字号）和三号湖采样点均只含有
部分Ⅰ类样品，遗传多样性则显得相对比较单一．
因此，为了保护和合理利用大九湖湿地泥炭藓资
源，应重点保护遗传多样性水平较高的娘娘墓（核
心区）的种群．对于核心区周边遗传多样性较低的
养鹿场、三号湖等地区应给予特别重视，尽量减少
人为活动对其生境造成的破坏，避免生境片段化带
来的不良效应，可通过人工的方式恢复种群数量，
提高遗传多样性水平．
３．２ ＲＡＰＤ分子标记的局限性
ＲＡＰＤ已经在种内不同居群间亲缘关系的研
究中得到广泛运用，在种间关系的研究中也已具有
相当大的潜力．本实验探讨了ＲＡＰＤ分子标记在
泥炭藓遗传多样性研究上的可行性，结果表明
ＲＡＰＤ标记能够用于种内遗传多样性研究．Ｄｅ－
ｍｅｋｅ等［１８］用ＲＡＰＤ标记研究了芸苔属与萝卜属
（Ｒａｐｈａｎｕｓ）、欧自芥属（Ｓｉｎａｐｉｓ）的属间关系．采
用ＲＡＰＤ分子标记研究得出的结论与传统的形态
分类的结果完全吻合，由此认为ＲＡＰＤ标记适用
于不同居群、种间乃至属间的分类学研究；然而，张
安世等［１９］在对１１种苔藓植物的亲缘关系研究中，
对ＳＲＡＰ和ＲＡＰＤ标记分别得出的结果进行了比
较分析，发现两者均与形态学分类的结果基本一
致，但在科上等级的结果则有一定的差异．由此可
知：ＲＡＰＤ方法可以应用于种间乃至近缘属之间
亲缘关系的研究，但有一定的局限性．任何一种检
测方法都存在些许不足，因此，多种方法联合使用，
取长补短，才能得出客观的结果，为泥炭藓遗传多
样性研究提供背景资料．
致谢：生物地质与环境地质国家重点实验室
侯新东老师在实验过程中给予了精心指导，尹帅、
刘乔和王翰林等同学在样品采集及野外数据整理
上提供了帮助，在此一并表示衷心的感谢．
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ｓｔｕｄｙ　ｉｎ　ｂｒａｓｓｉｃａ［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，
１９９２，８４：９９０－９９４．
［１９］　张安世，张为民，刑智峰，等．ＲＡＰＤ和ＳＲＡＰ标记技术在
苔藓植物亲缘关系研究中的比较分析［Ｊ］．中国农学通报，
２０１０，２６（３）：３２－３６．
ＲＡＰＤ　ｍａｒｋｅｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ
Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｉｎ　Ｄａｊｉｕｈｕ　Ｗｅｔｌａｎｄ，Ｓｈｅｎｎｏｎｇｊｉａ
ＤＵ　Ｍｉｎｇ，ＳＨＥＮＧ　Ｇｕｉｌｉａｎ
（Ｓｔａｔｅ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｉｏｇｅｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｇｅｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｇｅｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗｕｈａｎ　４３００７４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　Ｓｐｈａｇｎｕｍ，ａｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｍｕｓｃｉ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗｅｔｌａｎｄ，ｉｓ　ａｌｓｏ　ａ　ｄｉｒｅｃｔ
ｉｎｄｉｃａｔｏｒ　ｏｆ　ｃｌｉｍａｔｅ　ａｎｄ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ．Ｗｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　４７
Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｄａｊｉｕｈｕ　ｗｅｔｌａｎｄ　ｖｉａ　ＲＡＰＤ　ｍｅｔｈｏｄ：（１）ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　６
ｏｕｔ　ｏｆ　２０ｒａｎｄｏｍ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　ｗｉｔｈ　４０ｃｌｅａｒ　ａｎｄ　ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ　ｐｏｌｙ－
ｍｏｒｐｈｉｃ　ｂａｎｄｓ，ｗｈｉｃｈ　ｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｆｏｒ　ａ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　９５％；（２）ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｄｉ－
ｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｐｏｉｎｔ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｏｆ　０．６１；（３）ｃｌｕｓｔｅ－
ｒｉｎｇ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｎｄｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｇｅ－
ｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｄａｊｉｕｈｕ　Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｓａｍｐｌｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ　ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｌｏｃａｔｉｏｎｓ．
Ａｌ　ｔｈｅ　ａｂｏｖｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｄａｊｉｕｈｕ　Ｓｐｈａｇｎｕｍ　ｉｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ
ｌｏｗ，ｗｈｉｃｈ　ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｕｒｉｓｍ，
ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｒａｉｎｉｎｇ　ｐｒｏｊｅｃｔｓ，ｏｎ　ｔｈｅ　ｌｏｃａｌ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｄａｊｉｕｈｕ　ｗｅｔｌａｎｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＲＡＰＤ；Ｓｐｈａｇｎｕｍ；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ