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长柄扁桃茎尖离体培养研究



全 文 :长柄扁桃茎尖离体培养研究
孙占育 (渭南职业技术学院 ,陕西渭南 714000)
摘要 [目的 ]探索长柄扁桃茎尖离体培养技术。 [方法]以长柄扁桃试管苗茎尖为材料 ,接种于 QL培养基上 , 比较不同激素组合对长
柄扁桃增殖的影响;将试管苗茎尖接种于不同浓度IBA和 1g/L活性炭(AC)的 1/2MS培养基暗培养 6d, 然后转入不含任何激素的 1/2
MS培养基中 ,比较不同浓度 IBA对长柄扁桃诱导生根的影响。[结果] 在 QL培养基中分别添加 0.2mg/L6-BA和 0.6mg/LIBA的增
殖效果较好 ,增殖倍数可达 3.96;在 1/2MS的培养基中添加 30mg/LIBA诱导生根较好 ,生根率达 93.3%。[结论]长柄扁桃试管苗茎尖
适宜于增殖的培养基为QL+6-BA0.2mg/L+IBA0.6mg/L,试管苗茎尖诱导生根的适宜培养基为 1/2MS+IBA30mg/L+活性炭 1g/L。
关键词 长柄扁桃;茎尖;离体培养
中图分类号 S188  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)19-09988-02
StudyonMicroPropagationofAmygdaluspedunculataPal.Shoot-tipsinvitro
SUNZhan-yu (WeinanUniversityofArtsandSciences, Weinan, Shaanxi714000)
Abstract [ Objective] ThisexperimentationaimedtoexploremicropropagationtechnologyofAmygdaluspedunculataPal.shoot-tipsin
vitro.[ Method] Shoot-tipsofAmygdaluspedunculataPal.wereinoculatedinQLmedium.Theefectofdiferentcombinationsofhormoneon
themultiplicationofAmygdaluspedunculatawascompared.Shoot-tipsofAmygdaluspedunculataPal.wereinoculatedin1/2MSmediumwith
diferentconcentrationsofIBAand1 g/LACwith6dtreatmentthenin1/2MSmediumwithoutanyhormone.TheefectofIBAonrootingof
AmygdaluspedunculataPal.wasanalyzed.[ Result] Theefectsofadding0.2mg/L6-BAand0.6mg/LIBAinQLmediumonthemultipli-
cationwerebetter.Itsmultiplicationcoeficientwas3.96.Theeffectofadding30mg/LIBAin1/2MSmediumonrootingculturewasbeter,
andtherateofrootingreached93.3%.[ Conclusion] QL+6-BA0.2mg/L+IBA0.6mg/Lwassuitableforthemultiplicationofshoot-tips
ofAmygdaluspedunculataPal.Thesuitablemediumforrootinductionwas1/2MS+IBA30mg/L+AC1g/L.
Keywords AmygdaluspedunculataPal.;Shoot-tips;Micropropagation
基金项目 陕西省科技攻关项目(2005K01-G12-02)。
作者简介 孙占育(1971-),男 ,陕西蒲城人 , 在读硕士 ,讲师 , 从事农
业生物技术与植物生理的教学与科研工作。
收稿日期  2010-03-30
  长柄扁桃(AmygdaluspedunculataPal.)是蔷薇科扁桃亚
属落叶灌木 [ 1] ,是我国特有的扁桃属野生种 。长柄扁桃具有
适应范围广 、抗旱 、耐瘠薄 、抗风 、固沙能力强等特性 ,有很好
的生态效益。长柄扁桃果仁的营养价值高 ,其含油量高达
45.19% ~ 52.00%,可作工业原料 [ 2] ,是一种极具开发潜力
的野生果树资源树种。当前由于沙漠淹没和人为破坏 ,长柄
扁桃已成为濒危植物种类 [ 3] 。
长柄扁桃花粉可育性偏低 ,产种量少 ,繁殖系数小 ,人工
实生繁殖速度慢。当前急需利用组织培养技术 ,加速长柄扁
桃的繁殖 ,以保护这一珍贵的果树资源树种 。长柄扁桃茎尖
离体培养技术目前还处于探索阶段 。笔者以其试管苗为试
材 ,对影响其茎尖增殖和生根的主要因素进行试验 ,旨在为
长柄扁桃茎尖快繁体系的建立提供试验依据。
1 材料与方法
1.1 材料 采用西北农林科技大学园艺学院组培室的长柄
扁桃试管苗。
1.2 方法 在组培室挑选生长相对整齐的试管苗 ,切取 0.5
~ 1.0cm茎尖 ,接种在含有不同浓度 6-BA、IBA、GA的 QL培
养基上进行增殖培养。培养基的 pH值为 5.8,蔗糖 30 g/L,
琼脂粉 6.5g/L。每瓶接种 3 ~4个嫩茎 ,每个处理至少 6瓶 ,
重复 3次 。培养 30 d后统计嫩茎的增殖倍数 、有效新梢率及
平均苗高。
切取 1.0 cm左右的试管苗茎尖 ,接种到附加不同浓度
IBA和活性炭(AC)1g/L的 1/2MS培养基暗培养 6d诱导生
根 ,然后转入不含任何激素的 1/2MS培养基中进行培养 ,
20 d后统计生根率 、每株生根数 、平均根长及愈伤状况。
用 SAS8.0软件对结果进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 增殖培养 由表 1可知 ,处理⑥、⑦、⑧增殖倍数在
0.05水平显著高于其他处理 ,处理②、③、④、⑤增殖倍数间
表 1 不同激素组合对长柄扁桃增殖的影响
Table1 EffectsofdiferentcombinationsofhormoneonproliferationofAmygdaluspedunculataPal
处理Treatment 6-BAmg/L IBAmg/L GAmg/L
接种数Inoculationnumber
增殖苗数Proliferationseedlings
有效苗数Efectiveseedlings
有效新梢率∥%Efectivenewshootrate
增殖倍数Proliferationtimes 平均苗高∥cmAverageseedlingheight
① 0.03 0.10 0 54 69 12 17.4b 1.28d 0.30b② 0.05 0.15 0 61 110 30 27.3a 1.80c 0.50b③ 0.10 0.30 0 62 154 32 20.8b 2.48c 0.76b④ 0.10 0.30 0.3 67 141 20 14.2b 2.10c 0.40b⑤ 0.10 0.30 0.1 58 107 17 15.9b 1.84c 0.40b⑥ 0.20 0.60 0 75 297 90 30.3a 3.96a 1.20a⑦ 0.25 0.75 0 66 244 13 5.3c 3.70a 0.60b⑧ 0.30 0.90 0 58 181 50 27.6a 3.12ab 1.10a
 注:同列数据后标不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)。下同。
 Note:Diferentlowercasesinthesamecolumnstandforsignificantdiferences(P<0.05).Thesameasbelow.
差异不明显。可见 ,在 6-BA0.2 ~ 0.3 mg/L、IBA0.6 ~ 0.9
mg/L条件下 ,长柄扁桃的增殖倍数处于优水平。这说明较高
浓度的 6-BA与 IBA组合有利于提高长柄扁桃试管苗的增殖
责任编辑 刘月娟 责任校对 况玲玲安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(19):9988-9989
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.19.127
率 ,而 GA对长柄扁桃的增殖倍数无明显影响。
  从表 1还可以看出 ,处理⑥、⑧有效新梢率和平均苗高
均在 0.05水平显著高于其他处理 ,处理⑥有效新梢率和平
均苗高最高。由此可见 ,处理⑥对长柄扁桃的增殖效果最
好 ,即在 QL培养基中加入 6-BA0.2 mg/L、IBA0.6 mg/L的
条件下 ,长柄扁桃试管苗的增殖倍数达 3.96,有效新梢率为
30.3%,平均苗高为 1.2cm。
2.2 生根培养 由表 2可知 ,处理②、③生根率 、平均根数 、
平均根长均在 0.05水平显著高于处理①,即在 IBA30 ~ 60
mg/L条件下 ,生根率 、平均根数 、平均根长均处于优水平。
这说明高浓度的 IBA有利于长柄扁桃的诱导生根。处理②
基本无愈伤组织 ,易于移栽成活 ,而处理③有一定量的愈伤
组织 ,移栽难成活。由此可知 ,处理②诱导生根的效果最好 ,
即在 1/2MS+IBA30 mg/L+AC1 g/L培养基中 ,诱导长柄
扁桃试管苗的生根率达 93.3%,平均根数为 4条 ,平均根长
1.75 cm,基本无愈伤组织 ,生根效果最好。
表 2 不同浓度IBA对长柄扁桃诱导生根的影响
Table2 EffectsofdiferentconcentrationsofIBAonrootinductionofAmygdaluspedunculataPal.
处理
Treatment
IBA
mg/L
AC
g/L
生根率∥%
Rootingrate
平均生根数
Averagerootingnumber
平均根长∥cm
Averagerootlength
愈伤组织
Calus
① 0 1 0b 0b 0b 无  
② 30 1 93.30a 4a 1.75a 基本无
③ 60 1 100.00a 6a 1.43a 一定量
3 结论与讨论
研究表明 ,适合长柄扁桃增殖的培养基为 QL+6-BA
0.2mg/L+IBA0.6mg/L。影响植物器官分化的内源激素 、
细胞分裂素和生长素只有达到一定的浓度和比例才能使器
官发生 ,从而达到预期的目的 [ 4] 。在长柄扁桃增殖培养中 ,
所有处理的 6-BA/IBA浓度比例相同。只有当 6-BA和 IBA
的浓度达到相对较高时 ,长柄扁桃的增殖效果才较好。在该
试验中 , GA对长柄扁桃的增殖效果无明显的影响。这可能
与试验材料的种类 、GA浓度有关。
该研究将长柄扁桃试管苗茎尖在 1/2MS+IBA30 mg/L
+活性炭 1 g/L培养基上暗培养 6d诱导生根 ,然后转入不
含任何激素的 1/2MS培养中进行培养生根效果较好。在根
原基的发生阶段 , IAA可能作为基因的活化剂 ,促进早期根
原基的形成 [ 5] 。该试验正是利用高浓度的 IBA诱导组培苗
根原基的发生 。在该次试验中 ,诱导生根的培养基中加入活
性炭 1g/L,可提供生根的暗环境 ,有利于生根。这与韩文璞
等在甜樱桃生根培养基中加入 1 000 mg/L活性炭的结论 [ 6]
一致。长柄扁桃在常规条件下较难生根。生根过程中还受
材料种类 、激素浓度与种类 、光照 、温度等因子的影响 ,需进
一步的研究。
参考文献
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3 结论与讨论
(1)研究结果表明 ,黄色鸡冠花种子的无菌萌发采用浓
度 75%乙醇表面消毒 60s和浓度 0.1%HgCl2灭菌 8min效果
最好。时间过短 ,灭菌不彻底 ,外植体易污染;时间过长 ,外
植体芽萌发率不高。增殖的最适宜培养基为 MS+6-BA1.0
mg/L+NAA0.050mg/L。在生根培养过程中 ,最佳生根培
养基为 1/4MS+IBA0.3 mg/L,生根率达 93%。
(2)该试验中已生根的鸡冠花在组培瓶内生长一段时间
后能开花。高级观赏花木培育的另一趋向是微型化 ,组培苗
小巧玲珑是典型的微型植物。试管开花在一些植物组织培
养中成功实现 [ 5] 。目前有关鸡冠花的试管开花已有不少报
道 [ 6-8] ,其组培瓶内开花为发展微型观赏植物提供了实际应
用前景 。
参考文献
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998938卷 19期                   孙占育 长柄扁桃茎尖离体培养研究