全 文 ：含量 , 操作方便 ,简单 , 快速 ,重复性好。
本研究筛选出用 HPLC法测定异株荨麻中黄酮化合物的色
谱条件为:柱温 25℃;检测波长 370nm;流动相为甲醇∶0.4%磷
酸 =55∶45;流速 1.0ml/min;进样量 20μl。 HPLC法是国家标
准规定的测定黄酮含量的方法 ,可以准确地测定出样品中不同的
黄酮类化合物单体的含量 ,精确性和灵敏度高 , 也可以通过计算
得到所测样品中总黄酮的含量 , 但测定过程相对繁琐 ,也易受仪
器条件和环境条件的限制。
从两种方法测定的结果来看 , 所测定的总黄酮含量相差甚
微 , 因此 ,应根据不同的测定指标 ,选择适当的测定方法。
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收稿日期:2007-08-29;　修订日期:2007-10-23
基金项目:江西省卫生厅中医药科研资助项目(No.2007A094)
作者简介:刘建群(1970-),男(汉族),江西萍乡人 ,现任江西中医学院现
代中药制剂教育部重点实验室副教授 ,博士学位 ,主要从事中药活性成分
及代谢研究工作.
扁担杆提取物体外抑菌活性研究
刘建群 ,吴继梅 ,何志恒 ,寇晓莉 ,洪　沁
(江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 ,江西南昌　330004)
摘要:目的 研究药用植物扁担杆乙醇提取物的抑菌活性 , 寻找抗菌活性成分。方法 制备扁担杆乙醇提取物及其不同
极性溶剂萃取物 , 采用液体两倍稀释法对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、绿脓杆菌 、β -溶血性链球菌 、表皮葡萄球菌 、柠檬
色葡萄球菌进行体外抑菌实验。结果 扁担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对上述 6种细菌生长均有一定抑制
作用 , 其中对 β -溶血性链球菌的抑制作用最强 ,正丁醇萃取物对上述 6种菌的抑制活性最好。结论 扁担杆乙醇提取物
有较强的抑菌活性 , 值得进一步研究开发。
关键词:扁担杆;　提取物;　体外抗菌活性;　液体两倍稀释法
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)06-1351-01
StudyontheAntibacterialActivitiesofExtractsfromGrewiabilobaG.Doninvitro
LIUJian-qun, WUJi-mei, HEZhi-heng, KOUXiao-li, HONGQin
(KeyLaboratoryofModernPreparationofTCM, MinistryofEducation, JiangxiUniversityofTraditionalChi-
neseMedicine, Nanchang, Jiangxi330004 China)
Abstract:ObjectiveTostudytheantibacterialactivitiesofextractsfromGrewiabilobaandfindactivecomponents.Methods-
Doubledilutionmethodwasusedtodeterminetheminimuminhibitoryconcentration(MIC)oftheextractsofGrewiabilobaagainst
Staphylococcusaureus, Escherichiacoli, Pseudomonasaeruginosa, β -Hemolyticstreptococcus, Staphylococcusepidermidisand
Staphylococcuscitreus.ResultsTheextractsofGrewiabilobacouldobviouslyinhibitthegrowthofalltheabovesixbacteria, espe-
ciallyβ -Hemolyticstreptococcusandthen-butanolextractshowedthebestantibacterialactivity.ConclusionTheextractsof
Grewiabilobahaveobviousantibacterialactivityandareworthfurtherstudying.
Keywords:GrewiabilobaG.Don;　Extracts;　Antibacterialactivityinvitro;　Doubledilutionmethod
　　扁担杆 GrewiabilobaG.Don为椴树科(Tiliaceae)扁担杆属
(Grewia)植物 , 全世界约有 150种 ,为灌木或小乔木。据《中国植
物志》 [ 1]记载我国有 27种和 1存疑种 , 主要分布于云南 、广西 、
广东和江西等省。在非洲和亚洲一些国家地区 ,部分扁担杆属植
物被作为民间草药使用 ,多具有抗菌消炎作用。如南非的 Grewia
occidentalis和巴基斯坦的 Grewiaerythraea在民间作为传统草药
治疗伤口细菌感染 [ 2, 3];Grewiabicolor在苏丹作为传统草药治疗
皮肤脓疱疮 , 还有镇静作用 [ 4];《新修本草》[ 5]记载小花扁担杆枝
叶煮汁可治小儿蛔虫病 , 《开宝本草》称其可 “主三虫 , 下气消
谷”;《中药大辞典》记载其全株和枝叶能祛风除湿 , 理气消痞 , 可
治小儿因虫疳积 , 大人气痞 , 脾虚食少 , 妇女崩带 , 风湿 [ 6];扁担
杆的根在江西部分地区民间用来治疗皮肤脓疱疮等细菌感染 , 疗
效很好 。目前 , 关于扁担杆的化学成分和药理活性研究还未见报
道。为了寻找抗菌活性成分 ,本文采用液体两倍稀释法 [ 7 , 8]对扁
担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物进行了体外抑菌活性
研究。
1 　材料
1.1　菌种 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureaus, ATCC259223)、
大肠杆菌(Escherichiacoli, ATCC25922 )、绿脓杆菌(Pseudomonas
aeruginosa, ATCC27853)和 β -溶血性链球菌(β -Hemolyticstrepto-
coccus, ATCC0604)均由江西省临床疾病检验中心提供。表皮葡萄
球菌(Staphylococcusepidermidis)和柠檬色葡萄球菌(Staphylococcus
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.6 时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期
citreus)由本单位临床分离所得。
1.2　药物 扁担杆的干燥根皮 90%乙醇提取物及其醋酸乙酯 、
正丁醇和水萃取物;盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所)。
1.3 　培养基 营养肉汤(杭州微生物试剂有限公司);琼脂粉
(成都科龙化工试剂厂);苯酚红(天津市大茂化学试剂厂);无菌
脱纤维绵羊血(江西省临床疾病检验中心)。
2 　方法与结果
2.1　 普通培养基的制备 用蒸馏水将营养肉汤和琼脂粉溶解
后 , 高压灭菌。趁热将培养基倾倒入培养皿中 , 冷却备用。
2.2　血平板培养基的制备 [ 9] 在普通营养琼脂培养基础上高压
消毒后 , 冷却至 56℃时加 5% ～ 10%无菌脱纤维绵羊血混匀 ,
倒入培养皿中备用。
2.3　菌液的制备 将在低温保存的菌种活化 2 ～ 3次 , 然后于肉
汤蛋白胨琼脂培养基斜面 37℃培养 24 h。再从斜面培养基上沾
取一铂金耳菌苔 , 接种到灭菌的葡萄糖酚红肉汤培养基中 , 于
37℃培养 24 h,取出作为原菌液。再用无菌生理盐水稀释至浓度
为 1 ∶1 000做实验菌液。
2.4 　实验药液的制备 将扁担杆干燥根皮粉碎 , 用 90%乙醇回
流提取减压蒸干溶剂得总浸膏 。将总浸膏混悬于水中 ,依次用醋
酸乙酯 、正丁醇萃取 ,减压蒸干溶剂得醋酸乙酯 、正丁醇和水部位
浸膏。总浸膏和各部位浸膏用蒸馏水配成 40 mg/ml水溶液作为
供试液 , 同时以盐酸小檗碱(4 mg/ml)作药物阳性对照。
2.5 　最低抑菌浓度(MIC)的测定 取 16支灭菌过带有棉塞的
试管 , 每管均加入 1ml灭菌的葡萄糖酚红肉汤培养基。取上述 5
种供试液各 1ml, 加入各自的第 1管中 ,混匀 ,吸出 1ml加至第 2
管中……如此稀释至第 14管 ,取出 1ml弃去。第 15管不加药物
(作阳性对照),第 16管不加药物也不加菌液(作阴性对照)。随
后第 1 ～ 15管中分别用移液枪 ,按无菌操作加入稀释好的实验菌
液各 0.1ml,混合均匀。以上各实验用具及各种培养基均按要求
事先灭菌 , 各步骤均按无菌操作进行实验。于 37℃恒温箱中培
养 24h。观察结果 ,以完全没有菌生长的最低药物浓度作为该药
物对实验菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果见表 1。
3　讨论
结果表明扁担杆乙醇提取物及其醋酸乙酯 、正丁醇和水萃取
物对上述 6种细菌均有一定的抑制活性 , 其中对 β -溶血性链球
菌的抑制作用最强 , 并以正丁醇萃取物的抑制作用最好 , 有的与
阳性对照盐酸小糪碱的抑菌作用相当。 β -溶血性链球菌 、金黄
表 1　扁担杆乙醇提取物和各萃取物对 6种菌株的最低抑菌浓度
mg· ml-1
菌株 金黄色葡萄球菌
大肠
杆菌
绿脓
杆菌
β -溶血性
链球菌
表皮葡
萄球菌
柠檬色葡
萄球菌
90%乙醇 5.00 5.00 10.00 0.16 0.08 0.16
提取物
醋酸乙酯 10.00 10.00 10.00 0.62 0.16 0.62
萃取物
正丁醇 5.00 10.00 2.50 0.04 0.16 0.31
萃取物
水萃取物 20.00 10.00 10.00 2.50 2.50 0.62
盐酸小 0.25 2.00 2.00 0.005 0.12 0.01
糪碱
色葡萄球菌 、表皮葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌属于革兰氏阳性
菌 , 绿脓杆菌和大肠杆菌属于革兰氏阴性菌。实验结果表明扁担
杆乙醇提取物及其萃取物对革兰氏阳性菌的抑制效果相对较好 ,
提示扁担杆可作为有潜力的抗菌药值得进一步研究开发。
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文献综述
收稿日期:2007-07-30;　修订日期:2007-09-20
基金项目:国家科技支撑计划项目(No.2006BA020101)
作者简介:童黄锦(1983-),女(汉族),浙江金华人 ,现为南京中医药大学
在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事支气管哮喘研究工作.
＊通讯作者简介:许惠琴(1961-), 女(汉族),江苏常熟人 , 现任南京中医
药大学药理教研室教授 ,博士学位 ,主要从事中药药理研究工作.
呼吸道合胞病毒感染与哮喘的关系
童黄锦 , 许惠琴＊ , 范欣生
(南京中医药大学 ,南京 江苏　210029)
关键词:呼吸道合胞病毒;　哮喘
中图分类号:R56　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2008)06-1352-03
　　哮喘的本质是一种慢性非特异性炎症 ,它与遗传因素和环境
因素有关。近年来越来越多的观察表明 ,在哮喘的形成和反复发
作中 , 呼吸道病毒感染起了很大的作用 , 其中与人们哮喘发病关
系最密切的是呼吸道合胞病毒(RSV)感染。
1　流行病学
近年来 ,采用 RT-PCR结合血清学检查及病毒培养 , 证实
80%的美国社区 9 ～ 11岁儿童以及 50% ～ 55%的成人哮喘发作
与病毒感染有关 [ 1] 。显然呼吸道病毒感染是引起小儿及成人哮
喘发作的主要原因。在婴幼儿最常见的呼吸道病毒是 RSV, 有
50%的喘息性疾病和 80%左右的毛细支气管炎的发生与 RSV感
染有关 。婴儿期 RSV急性感染不仅可引起喘息反复发作 , 而且
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.6