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野生毛葡萄两性花优良株系种苗繁育技术研究



全 文 :中 国 南 方 果 树 2011 年 第 40 卷 第 3 期
野生毛葡萄两性花优良株系种苗繁育技术研究
邹 瑜 ,牟海飞 ,吴代东 ,李朝生 ,林贵美 ,韦华芳 ,张进忠 ,吕朝安 ,桂  杰
(广西植物组培苗有限公司/广西农业科学院生物研究所 ,南宁 ,530007)
 收稿日期:2011-02-12
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 0992011-5);广西农业科学院基本科研业务专项(200811基);广
西农业科学院科技成果转化项目(201002转和农成转 2011008)资助。
作者简介:邹瑜 ,男 ,研究员 ,主要从事香蕉 、野生毛葡萄组培技术 、品种选育 、栽培等研究。 E-mail:zy@gxaas.n et
摘 要:通过对两性花野生毛葡萄特异新种质种苗繁育研究表明 ,生产上采用硬枝扦插方法进行种
苗扩繁成活率极低。 在组培培养基上添加 0.01 ~ 0.1 mg/ L 的活性炭 ,明显降低生根苗的玻璃化
和愈伤组织发生率 ,提高出苗率。研究创新的毛葡萄“三步假植育苗法” ,具有成活率高 、操作简便 、
成本低 、速度快和扩繁系数大等优点 , 使种苗数量扩繁到组培苗的 10 倍以上 ,加快了育苗进程。
关键词:毛葡萄;两性花;组培苗;嫩枝扦插;假植育苗
中图分类号:S 663.103.2  文献标志码:A  文章编号:1007-1431(2011)03-0076-03
  广西野生毛葡萄 Vitis heyneana Roem.et
Schult(Vitis quinquangularis Rehd.)资源蕴藏量十
分丰富 ,主要分布于桂中 、桂北 、桂西的岩溶地貌地
区。野生毛葡萄鲜果含多种维生素 、各种氨基酸 、矿
物质等营养物质 ,还含有丰富的花色素双糖苷 、超氧
化歧化酶(SOD)及白藜芦醇(RES),具有软化血管 、
抗衰老 、防癌等作用。毛葡萄的特点为酸高 、糖低 、
皮厚 、单宁多 、色素浓 、香味独特 , 是酿造红葡萄酒的
好原料[ 1 ,2] 。广西罗城仫佬族自治县等地利用野生
或人工种植的毛葡萄为原料酿造的野生葡萄酒 , 畅
销国内外市场 ,获“中国毛葡萄原产地保护标志” , 是
国家命名的目前我国唯一的“中国野生毛葡萄之
乡” 。随着酿酒业的发展和市场的需求 , 广西开始利
用单性花植株大面积人工种植毛葡萄 , 达 0.7 万
hm2 。雌性植株不能自花授粉结实 , 需要花粉可育
的雄株授粉才能正常结果 , 生产上需搭配种植 10%
的花期相近的雄株作授粉树 , 才能保证雌株正常挂
果。毛葡萄开花期一般是在 5 月下旬至 6 月上旬 ,
而这时通常也是雨季的开始 , 影响到毛葡萄花粉的
传粉与授粉 ,生产上容易出现雌株自然授粉着果率
低 ,产量不稳定 、不高产等问题。我们经过 8 年的研
究 ,首次发现了世界上第一株野生毛葡萄原生种两
性花单株 ,经多年研究表明 , 该品系植株长势中庸 ,
不受天气因素影响 ,自然着果率高 , 结果枝率和结实
系数高 ,果穗大 , 是生产上稳产高产的保证 , 同时也
是遗传研究 、种质创新 、选育新品种的珍贵材料[ 3] 。
野生毛葡萄两性花优良株系种苗繁育技术研究 , 对
加快两性花野生毛葡萄品系的推广 , 为毛葡萄野生
资源的科学合理利用 , 解决生产栽培上的诸多难题 ,
促进南方毛葡萄产业的发展具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 硬枝扦插 2006 年 2 月 , 在广西农业科学院
野生毛葡萄资源圃共修剪 75 个株系(含雌株 、雄株 、
两性花株),选取直径 0.6 cm 以上枝条 , 剪成 2 ~ 3
个芽的插穗 , 在生根剂“生跟”(四川国光农药厂产)
250 倍液中浸泡 5 小时后扦插。扦插沙床下部是疏
松红壤 , 上部是约 10 cm 厚中沙。
1.2 培养基添加不同量活性炭组培 在 6—7 月 ,
对品种圃中的两性花株系取嫩枝进行组培 。微型扦
插组培培养基为 1/ 2MS +BA0.05 mg/ L+IAA1.0
mg/ L+白糖 3%(pH 值 5.8), 其他参照文献[ 4] 的
方法。在培养基中添加不同用量的活性炭进行试
验 , 并统计其繁殖系数 、愈伤组织 、玻璃化发生比例。
1.3 组培苗不同基质假植 假植前要进行自然散
射光炼苗 7 ~ 10 天 , 一般要盖一层遮光率 70%的遮
光网 , 中午气温>35 ℃时要盖两层 , 保持温度为 28
~ 32 ℃为宜。洗净的组培苗在高锰酸钾 800 倍液
中泡一下。对个别有愈伤组织的苗 , 可以去掉愈伤
组织 , 当扦插处理。假植的管理方法同上述的嫩枝
扦插方法一样。以沙 、红泥 、塘泥 、泥炭土及猪粪不
同组合设置 8 种假植基质。用黑色营养杯假植 , 高
×宽为 12 cm×14 cm , 基质表面覆盖一层 0.5 ~
1.0 cm沙。
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DOI :10.13938/j.issn.1007-1431.2011.03.024
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1.4 组培沙床假植苗嫩枝扦插 嫩枝扦插 3—11
月均可以进行。野生毛葡萄两性花组培苗在大棚沙
床上(或营养杯中)长有 7 ~ 9 片叶(含组培老叶)后
即可采插穗。采穗后原小植株要保留 2~ 3 片叶 , 并
马上喷洒杀菌剂防腐。过 15 ~ 20 天后(气温低的季
节时间长些), 剪过的小植株又萌出 2~ 4 个新枝 , 即
可进行第二轮采穗。作插穗的嫩枝要求节间短 , 不
徒长 ,无卷须 , 不成蔓状 , 无木质化 , 否则不能做插
穗。采下的嫩枝剪成带 2~ 3 片新叶(即 2 ~ 3 个节
位)的插穗 , 去半片叶片后 , 马上泡到清水中备用。
在配制好的根太阳(广东产)2 000倍液 ,强力生根剂
(重庆产)1 000 倍液或萘乙酸2 000倍液泡一下基
部 ,即扦插到沙床上。沙床规格 1.2 m×2.5 m , 下
部垫 6~ 7 cm 厚的松土 ,面上铺中沙 3 cm 左右 , 扦
插前对沙床基质不作任何消毒处理。扦插后淋足水
分 ,直接盖上地膜 , 四周密封。 4 ~ 5 天后 , 在地膜上
开 3~ 4 个/ m2约筷子大小的小孔。 7 ~ 8 天后 , 下午
16 时到次日 10 时前揭开地膜 , 白天盖回。 10 天后
则可全天揭开地膜。
  硬枝扦插成活率调查一般是在扦插后 45 ~ 60
天进行;组培苗 、嫩枝扦插和营养杯假植试验 , 一般
在 15 天后统计其成活率 , 并连续观察其长叶 、长根
等情况。
2 结果与分析
2.1 3 种花型硬枝扦插的效果 试验结果表明 ,野
生毛葡萄硬枝扦插成活率很低 , 3 种花型的植株成活
率均不到 10%,而雄株和两性花株系不到 5%(见表
1)。供试株系中有 33 个株系成活率为零 , 成活率最
高的株系也只有 27.5%。死亡的插条 , 不发根 ,长或
不长愈伤组织 ,即使芽眼萌发长出枝叶 ,最后也会干
枯死亡。因此, 野生毛葡萄不宜采取硬枝扦插方法进
行种苗扩繁。这在多年反复试验中得到证实。
表 1 野生毛葡萄硬枝扦插的效果 (2006年)
花型 株系数/个 插条数/条 发根成活数/条 成活率/%
雄株 6 155 1 0.65
雌株 68 2 313 148 6.40
两性花株 1 35 1 2.86
2.2 培养基添加活性炭对两性花毛葡萄嫩枝组培
的影响 在毛葡萄微型扦插组培中 , 我们发现存在
有不同程度的愈伤组织和玻璃化现象 ,特别是随着
组培代数的增加 , 这两种现象更为突出 ,影响到组培
苗的生根和进一步的扩繁工作。通过在培养基中添
加活性炭成分 , 较好地解决了这一问题。在添加活
性炭的培养基上 , 玻璃化和愈伤组织发生率明显比
对照降低(见表 2),接种材料基部不膨大 , 根系直接
从基部长出 , 而对照的根系有的是从膨大或长有愈
伤组织的基部长出。生产上培养基活性炭的用量一
般是 0.05 ~ 0.1 mg/ L , 腋芽萌芽率一般达 95%以
上 , 经过 40 天培养 , 小植株长出 3 ~ 5 条根 , 4~ 6 片
叶 , 即可转瓶 ,此时繁殖系数可达 3.5 倍以上。活性
炭用量过大 , 不经济 , 根变得粗大 , 腋芽萌芽率会降
低 , 同时组培苗生长变缓慢。
表 2 活性炭对毛葡萄微型扦插组培苗质量的影响
活性炭
用量/ %
繁殖系
数/倍
腋芽萌芽
率/ %
愈伤组织
率/ %
玻璃化
率/ %
0.01 3.5 95.8 0 1.0
0.10 3.8 96.5 0.8 0.2
1.00 3.4 94.8 1.0 0.2
0(对照) 3.8 93.4 2.1 4.3
2.3 组培苗假植基质的筛选 从表 3 可以看到 ,纯
塘泥由于过度板结 , 假植成活率较低 , 加入 20%沙
后 ,疏松透气及成活率有所提高 ,但成活的苗长势迟
缓或者在中后期生长不佳 , 以纯红泥为基质也有类似
现象。加入 5%猪粪的红泥基质在中后期茎干易腐
烂 ,影响后期成活率。育苗生产上除了要达到 90%
以上成活率外 ,还要求中后期长势好 , 并能保证下一
步的持续采穗操作。考虑到成活率和生长持续性, 在
8 个基质中只有 80%红泥+20%沙能满足育苗要求。
表 3 基质对毛葡萄组培苗假植效果的影响
基 质 成活率/% 生 长情 况
100%沙 >90 生长不好 ,没持续性
100%红泥 >80 板结 ,中后期生长不良
100%塘泥 >65 板结 ,中后期生长不良
100%泥炭土 >95 中后期长势差 ,叶片发黄
80%红泥+20%沙 90~ 95 中后期生长正常
50%红泥+50%沙 90~ 95 中后期长势差
95%红泥+5%猪粪 >90 中后期茎干易腐烂发霉
80%塘泥+20%沙 >85 成活后生长量很少
2.4 组培沙床假植苗嫩枝扦插的效果 两性花毛
葡萄组培苗经假植 , 长到一定高度后 , 取其嫩枝扦
插 , 成活情况见表 4。用生根剂处理与不用任何生
根剂处理(对照), 成活率均达 90%以上 , 没有大的
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区别 ,只有萘乙酸处理稍低于 90%。因此 , 生产上
不必用生根剂处理即可直接扦插。死亡的嫩枝一般
表现为不发根 ,失水干枯 , 极少表现霉烂。
表 4 不同生根剂对组培苗嫩枝扦插成活率的影响
生根剂 成活率/%
发根数/

扦插至开始发根
历期/天
根太阳 95~ 98 3~ 5 5~ 6
强力生根剂 95~ 98 3~ 5 5~ 6
萘乙酸 85~ 90 3~ 5 6~ 7
对照(空白) 95~ 98 3~ 5 6~ 7
  对照处理一般 6 ~ 7 天开始发根 , 8 ~ 11 天基
本全部长根 ,在温度低的春 、秋季节则要 20 天后才
生根;根数以 3 ~ 4 条居多 , 而粗壮的嫩枝则可长 5
~ 6 条根。剪取第一轮插穗后 , 在高温季节一般经
过 15~ 20 天 , 每株苗即可重新长出 2 ~ 4 个新的嫩
枝 ,则可进行第二轮剪取插穗 , 如此循环操作。 但
随着剪取轮数的增加 , 嫩枝扦插成活率呈现递减规
律:第一轮和第二轮的成活率>95%, 第三轮约
85%, 第四轮 50%~ 60%, 第五轮<30%。随着剪
枝次数增多 ,新长的嫩枝变得粗壮 , 叶片大 ,且很快
木质化或长出小卷须 , 扦插成活率越来越低 , 直至
失去扦插繁殖价值。一般我们在第五轮之后即停
止再修剪扦插。经过至少 5 轮的嫩枝扦插 , 可以在
大棚内把种苗的数量扩大到原来组培苗的 7 ~ 10
倍 ,加上第一二轮成活的扦插苗再修剪扦插 1 ~ 2
次 ,则种苗扩大的倍数可达 10 倍以上 。以这个方
式进行种苗扩繁 , 生产成本大大降低 , 并且可以迅
速增殖数量 。经过扦插后的组培苗 ,形成了完整根
系和叶片 , 即可挖取上营养杯培育 , 成活率接近
100%,当长出 8 ~ 10 片叶后即可成为商品苗。
3 结论与讨论
  在毛葡萄微型扦插组培生产的培养基中添加
0.01~ 0.1 mg/ L 活性炭 ,玻璃化和愈伤组织发生率
明显降低 , 腋芽萌芽率一般达 95%以上。经过 40
天培养 ,小植株长出 3 ~ 5 条根 ,繁殖系数 3.5 倍以
上。接种材料的基部不膨大 ,根系直接从基部长出 ,
组培苗质量和成苗率明显提高。多年反复试验证
明 ,生产上野生毛葡萄采取硬枝扦插方法进行种苗
扩繁 ,成活率极低。
  我们把“组培苗沙床假植—嫩枝沙床扦插假
植—生根苗营养杯假植”称为三步假植育苗法 , 具有
成活率高 、操作简便 、成本低 、速度快和扩繁系数大
等优点。特别是对组培苗假植苗和嫩枝扦插假植苗
实行多轮的嫩枝扦插 , 迅速扩繁种苗数达 10 倍以
上。有些研究[ 5-7] 采用的扦插基质成本较高 ,还要进
行预处理 , 扦插后霉烂严重 ,与生产应用还有一定的
距离。我们创新应用“三步假植育苗法” , 基质以沙
和红泥为主 , 基质使用前不需预处理 ,插穗也不用生
根剂处理 , 直接扦插 ,霉烂干枯一般只有 2%~ 5%,
其余的全部能够长根成活 , 这可能与我们良好的湿
度控制有关。
参 考 文 献
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扦插生根育苗试验[ J] .中外葡萄与葡萄酒 , 2001
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(责任编辑:李治飞)
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