全 文 ：　　　　　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　2009年 5月第 5期
和色谱条件均具有良好的精密度。
2.5　重现性实验:精密称取药品粉末 1.5g共 5份 , 按 “ 2.
3”项下样品溶液的制备操作 , 按 “ 2.1”项下条件连续进样 5
次 , 每次 10μl测定峰面积计算得槲皮素 RSD=0.94%、山
柰素 RSD=0.19%, 结果显示 ,该方法具有较好的重现性。
2.6　稳定性实验:在室温条件下 , 将样品按测定方法处理
后 , 分别在 0, 2.0, 4.0, 6.0, 10.0h每次进样 10μl, 测得峰面
积计算 , 槲皮素 RSD=0.84%、山柰素 =0.49%(n=5)。结
果表明 , 该溶液含量基本保持不变。
表 1　地锦草中槲皮素 、山柰素的含量
产地 槲皮素含量(%) 山柰素含量(%)
墨玉县 1 0.101 0.726
墨玉县 2 0.104 0.789
墨玉县 3 0.108 0.701
洛浦县 1 0.105 0.506
洛浦县 2 0.103 0.497
2.7　加样回收率实验:取已知含量地锦草粉末 5份 , 每份
约 0.1g精密称定 , 分别添加浓度为 0.2004mg/ml, 0.
2344mg/ml的槲皮素 , 山柰素对照品溶液 0.5ml、3ml按 2.3
项下供试品溶液制备方法制备并测定 、计算 , 槲皮素 、山柰
素的平均回收率分别为 98.0%、 99.8%;RSD分别为 0.
93%, 1.89%(n=5), 表明方法回收率较好。
2.8　样品的测定:供试液自动进样 10μl, 在 360nm处测定
峰面积 ,根据线性回归方程 ,计算含量见表 1。
3　讨　论
本实验利用高效液相法测定新疆栽培地锦草中槲皮
素 、山柰素的含量尚属首次 , 该方法简便 、准确 , 重现性好 ,
为地锦草药材的开发提供了质量控制标准。
参考文献
〔1〕国家药典委员会.中华人民共和国药典 〔S〕.北京:化学
工业出版社 , 2005.84.
〔2〕柳润辉 ,王汉波 , 孔令义.地锦草化学成分的研究〔J〕.中
草药 , 2001, 32(2):107.
〔3〕李肖玲 ,崔岚 , 祝德秋.正交试验法优选地锦草的提取工
艺〔J〕.中国中医药信息杂志 , 2005, 12(4):54.
2008年 12月 15日收稿
硬毛棘豆的生药学研究
内蒙古医学院 2008级硕士研究生(呼和浩特 010110)　乌兴荣　导师:那生桑
摘　要:目的:建立对硬毛棘豆进行生药学鉴别和总黄酮含量测定方法。方法:采用常规药材软化 、永久切片制作方法 、生药
学鉴别方法 、比色 -分光光度法。结果:确定了显微鉴别特征;首次检出硬毛棘豆还有生物碱类 、皂甙类成分总黄酮的含量
为 8.7625mg/g, RSD=0.98%, 平均回收率 97.59%。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于硬毛棘豆的质量控制。
关键词:硬毛棘豆;生药鉴定;总黄酮;含量测定
中图分类号:R291.2　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)05-0038-03
　　硬毛棘豆(OxytropishirtaBge.)为豆科棘豆属植物。全
草入蒙药(蒙药名:旭润 -奥日都扎), 能杀 “黏 、消热 、燥
“黄水”、愈伤 、生肌 、止血 、消肿 、通便。主治瘟疫 、发症 、丹
毒 、腮腺炎 、阵刺痛 、肠刺痛 、脑刺痛 、麻疹 、通风 、游痛症 、创
伤 、月经过多 、吐血 、咳嗽等症 〔1〕。化学成分研究表明 , 硬毛
棘豆地上部分中含有多种黄酮类成分 〔2〕 , 为了给该药材的
进一步研究和开发利用提供科学依据 , 本文对梗毛棘豆进
行了生药学鉴别研究 , 利用分光光度法对其地上部分的总
黄酮含量进行了测定 。
1　仪器及材料
仪器:UV755B水浴锅(上海精密科学仪器有限公司),
ZMD-2自动磨刀机(上海医械专机厂), LZ-4012-2型回
转式切片机(浙江金华无线电厂), 101-1型电热鼓风干燥
箱(上海泸南科学仪器联营厂), ZF-I型三用紫外分析仪
(上海顾村电光仪器厂), 生物显微镜(OLYMPUSJAPAN),
电子天平(AUY120广州市新英电器有限公司)。
材料:硬毛棘豆(OxytropishirtaBge.)采自内蒙古大兴
安岭五叉沟林业局浩森沟林场 , 经作者鉴定。对照芦丁由
北京药品生物制品鉴定所生产。
实验所用试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　药材性状鉴别 〔2〕:本品多断碎 , 根呈短圆锥状 , 长 2 ～
3cm,直径 0.5 ～ 1cm, 表面黑褐色 , 具粗网状纹理 , 难折断 ,
断面纤维性。根头残存基生叶柄 , 叶柄基部与托叶合生 ,有
较长硬毛。叶多从叶轴上脱落 , 较完整者可见小叶对生或
近对生:小叶卵状披针形或长随圆形 , 长 1.5 ～ 5cm, 宽 5 ～
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DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.05.016
2009年 5月第 5期　　　　　　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　
15mm,先端尖或稍钝 , 基部圆形 , 表面无毛或近无毛 , 背面
疏生长硬毛 , 边缘较密。总状花序呈长穗状 , 长 5 ～ 15cm,
总黄硬粗壮 , 花多而密。花长约 1.5cm, 苞片披针形或条状
披针形 , 比萼长或近等长 , 花萼筒状 , 长约 10 ～ 13cm, 宽 3.
5mm, 萼齿条形 ,花瓣 5, 浅棕色。荚果长卵形 ,坚硬 ,藏于萼
筒内 , 背长毛 ,顶端具短喙 , 内藏 2多数细小种子 ,肾形。
2.2　显微鉴别
2.2.1　茎横切面特征:表皮为 1列细胞 ,均匀排列 , 有角质
层。皮层细胞椭圆形 , 细胞间隙不明显 , 偶有腔隙分布;外
韧型维管束 , 韧皮纤维发达 ,断续的排列;形成层不明显 , 射
线细胞多列 ,木质部发达 ,导管大小不等;髓薄壁细胞较大 ,
排列紧密(见图 1)。
图 1　硬毛棘豆茎横切面图(×40)
1.表皮 2.皮层薄壁细胞 3.韧皮纤维 4.形成层
5.导管 6.髓射线 7.髓
2.2.2　叶横切面特征:上 、下表皮细胞排列紧密 , 外被角质
层和单细胞组成的非腺毛;气孔 , 气腔明显;栅栏组织细胞
柱状 , 海绵组织细胞类长方形 , 分界明显;维管束为外韧形 ,
韧皮部较小 , 形成层不明显 ,木质部稍宽 ,导管径向排列(见
图 2)。
图 2　硬毛棘豆叶横切面图(×10)
1.上表皮 2.下表皮 3.气孔 4.栅栏组织 5.海面组织
6.木质部导管 7.韧皮纤维 8.基本组织
2.2.3　粉末特征:粉末呈绿黄色。纤维多成束 ,碎断 , 淡黄
绿色 , 壁较厚 ,直径 10 ～ 38μm, 有的纤维周围的薄壁细胞
中含有草酸钙方晶形成晶纤维。叶上 ,下表皮细胞均匀 , 呈
多角形 , 垂直壁弯曲 , 具有不等式气孔 , 上表皮气孔略小。
非腺毛为单细胞 , 长约 88 ～ 438μm, 直径 13 ～ 44μm。腺毛
柄由 3个细胞组成 ,腺头由 5个细胞组成。茎表皮细胞类
长条形 ,气孔为不等式。导管为网纹 , 梯纹和具缘纹孔。直
径为 6.5 ～ 48μm, 淡黄色 ,具缘纹孔较密 ,长条形(见图 3)。
图 3　硬毛棘豆的粉末图(10×16)
1.表皮细胞 a.叶下表皮 b.叶上表皮 c.茎表皮 2.气孔
3.导管 a.网纹 b.梯纹 c.具缘纹孔 4.纤维 a.晶纤维 b.纤维
5.a.非腺毛 b.腺毛 6.草酸钙方晶
2.3　理化鉴别 〔5〕:黄酮类:取硬毛棘豆药材粗粉 4g, 加
40ml乙醇 ,放置 24h,过滤 , 水浴蒸干 ,乙醚和水(1:1)萃取 ,
作为供试品溶液。以苯:甲醇:丙酮:醋酸(18:2:2:1)为展
开剂 ,在 10×20cm的硅胶 G板上展开 , 取出 , 凉干 , 用三氯
化铝显色后置紫外灯下观察在 Rf=0.07、Rf=0.12、Rf=0.
24处有黄橙色荧光斑点。
盐酸 -镁粉反应:样品的乙醇提取液加入镁粉少许及
盐酸 2 ～ 3滴 , 显淡紫色。
生物碱类:取硬毛棘豆药材粗粉 1g, 加入氯仿 30ml及
浓氨水 0.4ml放置 24h, 过滤 ,作为供试品溶液。
生物碱沉淀反应:①与碘化铋钾试剂形成橙色沉淀。
②与碘 -碘化钾试剂形成褐色至暗褐色沉淀。 ③与磷钼酸
试剂在冰醋酸条件下形成白色沉淀 , 加入氨水后上层显淡
蓝色。
皂甙类:L-B反应:取本品 3g, 加 40ml乙醇 , 放置 24h,
过滤 ,水浴蒸干 , 加 1ml冰醋酸溶解 , 滴加硫酸接触面显红
色 ,最终变成绿色。
泡沫试验:取本品粉末 3g, 加 50ml水 , 放置 24h过滤 ,
水浸出液放入试管中激烈振摇 1min, 产生持久性泡沫 ,
10min内不消失。
溶血试验:硬毛棘豆水溶液中滴加 1滴血后血色迅速
变浅 ,扩散。
2.4　总黄酮的含量测定 〔3 , 4〕
2.4.1　最大波长的选择:以 60%乙醇为溶剂 , NaNO2 、Al
(NO3)3 、NaOH为显色剂分别作硬毛棘豆地上部分和芦丁
的吸收曲线 , 二者均在 500nm处有一个强吸收 , 故选择
500nm为测定波长。
2.4.2　标准曲线的制备:精密称取干燥至恒重的芦丁标准
品 20.20mg置 100ml容量瓶中 , 加 60%乙醇溶解并稀释至
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刻度 , 摇匀。吸取上述溶液 0.0、 1.0、2.0、 3.0、4.0、 5.0、 6.
0、7.0、8.0ml分别置于 25ml容量瓶中 , 各加入 5%NaNO2
溶液 1ml摇匀 , 放置 6min, 加 10%Al(NO3)3溶液 1ml, 摇
匀 , 放置 6min,加 4%NaOH溶液 10min,用 60%乙醇稀释至
刻度 ,摇匀 , 放置 15min。以 0号作空白 , 分别在 500nm处测
定吸收度 , 绘制标准曲线 , 得回归方程 C=0.0041 +0.
1125A, r=0.9997。
2.4.3　样品含量测定:取硬毛棘豆地上部分的粗粉约 1g
于 60℃干燥 6h,精密称定 , 用 40ml70%乙醇浸泡 12h, 加热
回流提取 3次 , 每次 2h, 抽滤 , 合并滤液 , 并用少量 70%乙
醇洗涤容器 , 洗液并入滤液中 , 在浴上蒸馏 , 除去醇液。提
取液用石油醚脱脂 3次 , 水液浓缩至浆状液 ,用 60%乙醇适
量溶解 , 过滤至 100ml容量瓶中 ,洗涤 ,合并滤液与洗液 ,用
60%乙醇定溶至刻度 , 摇匀。精密量取 5ml置 25ml容量瓶
中 , 按标准曲线制备项下自 “加入 5%NaNO2”起 , 依法操作。
测得硬毛棘豆地上部总黄酮平均含量为 8.7625mg/g,见表
1。
表 1　样品含量的测定
样品号 取样量(g) 含量(mg/g) X±S RSD(%)
1 1.0020 8.7438
2 1.0018 8.6875
3 1.0021 8.8563 8.7625±0.09 0.98
2.4.4　回收率实验:取样品提取液 3份 ×2ml, 分别置于
25ml容量瓶中 , 各加入标准品溶液 2ml, 然后自标准曲线制
备项下 “各加入 5% NaNO2 溶液 1ml”起依法操作 , 求得地
下部分的平均回收率为 97.59%, RSD=0.70%,见表 2。
表 2　样品回收率的测定
样品号加入量(mg)
样品量
(mg)
测得量
(mg)
平均回收
率(%) X±S
RSD
(%)
1 0.016 0.0174 0.0325 97.31
2 0.016 0.0149 0.0300 97.09
3 0.016 0.0145 0.0300 98.36 97.59±0.68 0.70
3　讨　论
研究结果表明 ,蒙药硬毛棘豆的显微鉴别特征明显;有
效成分含有生物碱类 、皂甙类 、黄酮类化学成分等 , 其中生
物碱类 、皂甙类成分首次检出报道。
含量测定结果表明 , 总黄酮的含量为 8.7625mg/g, RSD
=0.98%, 平均回收率为 97.59%。
本项目建立的方法简便 、准确 、重复性好 , 可用于硬毛
棘豆的质量控制。
参考文献
〔1〕内蒙古卫生厅.内蒙古蒙药材标准〔S〕.赤峰:内蒙古科
学技术出版社 , 1987.410.
〔2〕朱亚民.内蒙古植物药志(二卷)〔M〕.呼和浩特:内蒙
古人民出版社 , 1989.75.
〔3〕乔俊缠 ,任常胜 ,菅艳艳 , 等.蒙药多叶棘豆总黄酮含量
的测定〔J〕.中国民族医药杂志 , 1998, 2:47.
〔4〕敖力布 ,巴根那.蒙药多叶棘豆和硬毛棘豆总黄酮含量
的比较研究〔J〕.中国医药杂志 , 1998,增刊:66-67.
〔5〕郑大坤 ,姚革.中草药学〔M〕.南京:江苏科学技术出版
社 , 1987.22-24.
2008年 12月 8日收稿
藏药材猪殃殃质量标准研究
四川省中医药科学院(成都 610041)　陈　燕　刘倩伶　德　吉＊　刘云华　易进海＊＊
摘　要:目的:建立猪殃殃药材中绿原酸的薄层色谱鉴别与含量测定方法。方法:采用 TLC法对猪殃殃进行鉴别;采用 HPLC
法测定绿原酸含量 , 色谱条件为:色谱柱:PhenomenexLunaC18(4.6mm×150mm, 5μm);流动相:乙腈 -0.4%磷酸溶液(10:
90);检测波长:327nm;流速:1.0ml/min;柱温:35℃。结果:各批猪殃殃药材 TLC色谱中均能检出绿原酸;绿原酸 HPLC色谱
峰与其它色谱峰分离良好 ,进样量在 0.0892 ～ 0.4460μg范围内 , 呈良好线性关系(r=0.9997), 平均回收率为 96.99%, RSD
=1.17%(n=6)。结论:本法简便快捷 , 结果可靠 ,为控制猪殃殃药材的质量提供参考 。
关键词:猪殃殃;薄层色谱鉴别;绿原酸;高效液相色谱法
中图分类号:R291.4　文献标识码:B　文章编号:1006-6810(2009)05-0040-03
　　猪殃殃藏语名 “桑子嘎布”, 系茜草科 Rubiaceae植物猪
　　作者简介:陈燕(1964-),女 ,学生 , 副研究员 , 研究方向:中药新药研发工作。　＊西藏自治区藏医医院(拉萨 850000)　＊＊通讯作者:易进海(1963-),博士 ,研究员 ,研究方向:天然药物化学及新药研发工作。电话:028-85210843。 Email:yijinhai@Yahoo.com.cn
殃殃 GaliumaparineL.干燥全草 , 为藏族习用药材。猪殃殃
性寒 ,味辛 , 具有清热 ,消炎 , 利胆之功效 ,用于治疗胆病 、伤
口化脓 、骨病及脉热 、遗精等症 〔1〕。药材中主要含苯丙素
类化合物和环烯醚萜苷等化学成分 〔2 , 3〕 , 其中绿原酸为其主
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