全 文 ：中国执业药师·
乌墨（Syzygium cumini，Eugenia jambolana，Syzyni-
um jambolana）又名乌楣 、野冬青果 ，系桃金娘科
（Myrtaceae）蒲桃属植物 。 为高大乔木 ，高 6 ～
20 m，小枝圆柱形或稍压扁，叶片革质，宽椭圆形
至长圆状椭圆形 ，长 5 ～ 12 cm，宽 3 ～ 7 cm；
叶柄长 1.5 ～ 2 cm，圆锥花序通常生于落叶的腋
内，偶有顶生，长 8 ～ 11 cm，多花；花梗短；花白
色，芳香，常 3 ～ 5 朵生于花序小枝顶端；花蕾倒
卵形，长约 5 mm，萼管倒锥形 ，长约 5 mm；果实
卵形或壶形，长 1 ～ 2 cm，宽 0.5 ～ 1 cm；种子
基金项目：乐山职业技术学院科学研究计划项目（No KY2014019）
作者简介：张富东，男，硕士，助教。研究方向：内分泌代谢药理。E-mail：441445988@qq.com
乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究
张富东 1，2 李玲 3 牛艳芬 3 高丽辉 3 林华 3 刘旭 3
（1 乐山职业技术学院，四川 乐山 614000；2 乐山老年病专科医院；
3 昆明医科大学生物医学工程研究中心，云南 昆明 650500）
【摘要 】 目的 ：探讨乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法 ：通过建立体外 α-葡萄糖苷酶抑制模
型，对乌墨根部提取物进行活性筛选，并对化合物浓度与抑制活性关系进行研究。结果 ：粗提物 12，17，21 在体
外对 α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制活性，其中粗提物 21 的抑制活性（IC50 = 94.89 μg/mL），远高于阳性对照
阿卡波糖的抑制活性（IC50 = 1 095.65 μg/mL）。结论 ：乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶有抑制活性，具有一定
的潜在开发价值。
【关键词 】 乌墨；提取物；α-葡萄糖苷酶；抑制活性
doi：10.3969/j.issn.1672-5433.2014.12.007
Study on Inhibition Effect of Syzygium cumini Extracts on the Activity of α-glucosidase
Zhang Fudong1，2，Li Ling3，Niu Yanfen3，Gao Lihui3， Lin Hua3，Liu Xu3 （1 Leshan Vocational & Technical College，
Sichuan Leshan 614000，China；2 Leshan Specialized Hospital of Geriatric Disease；3 Biomedical Engineering
Research Center of Kunming Medical University，Yunnan Kunming 650500）
ABSTRACT Objective：To investigate the inhibition effect of the extracts from the root of Syzygium cumini on
the activity of α- glucosidase. Methods：By establishing α- glucosidase screen inhibitory model， the activity of ex-
tracts from the root of Syzygium cumini was screened. The relationship between the inhibitory ratio and the extract
concentration was also studied. Results： Compounds 12，17，21 showed a good inhibitory effect on the activity of
α- glucosidase， and the inhibitory effect of compound 21（IC50 = 94.89 μg/mL） was much higher than that of the pos-
itive control of acarbose （IC50 = 1 095.65 μg/mL）. Conclusion：The extracts from the root of Syzygium cumini
have inhibition effects on the activity of α- glucosidase， and presented a certain potential value in the development
and utilization.
KEY WORDS Syzygium cumini； Extract；α-glucosidase；Inhibitory Activity
论著
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China Licensed Pharmacist Dec. 2014，Vol. 11 No.12
合理用药 呵护公众健康
1 颗；花期 4 ～ 5 月，果期 6 ～ 8 月。 生长于海
拔 500 ～ 1 800 m 的山坡次生林内 ， 在云南南
部、广东、广西、海南、福建、台湾、中南半岛、喜马
拉雅山区诸国（尼泊尔等）、印度、印度尼西亚、澳
大利亚均有分布。 果实、茎皮、叶药用，具有润肺、
止咳 、平喘的功效 ，我国民间主要用于治疗肺结
核、寒性哮喘和过敏性哮喘 [1]。 而在印度民间，乌
墨则很早就被发现有治疗糖尿病的功效 [2]。
20 世纪 60 年代 ，法国科学家首次报道了乌
墨种子的乙醇提取物具有降低四氧嘧啶性糖尿病
大鼠血糖的作用。 目前，国内外学者对乌墨的种
子、果实、树皮和树叶的化学成分及抗糖尿病的作
用也进行了相关研究 [3-6]，但具体降糖机制还不是
太清楚。 而且大部分的活性研究仅停留在乌墨种
子、果实和树皮的粗提物上，缺乏对于活性单体的
研究，此外，对乌墨根部提取物的研究也较少。
结合国内外学者对乌墨降糖机制的研究报
道，笔者利用体外 α-葡萄糖苷酶抑制高通量筛选
模型对乌墨根部提取物进行活性筛选 ，以期为乌
墨根部提取物降糖机制研究和开发利用提供理
论依据。
1 实验材料
1.1 仪器
Multiskan MK3 酶标仪（美国 Thermo Electron
公司 ）；LRH-150 恒温培养箱 （上海 -恒科技有限
公司 ）；DELTA 320 型 pH 计 （梅特勒 -托利多仪
器有限公司）；电子天平（梅特勒-托利多仪器有限
公司 ）；LR4000 型旋转蒸发仪 （德国 Heidolph 公
司）；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司 ）；
CS-H1 型混合器 （北京博励阳科技公司 ）；96 微
孔板；各种移液器及枪头等。
1.2 试剂
α-葡萄糖苷酶 （α-glucosidase，EC3.2.1.20)、
4-硝基苯 -α-D-吡喃葡萄糖苷（4-N-trophenyl-α-D-
glucopyranoside，PNPG，026K1516）、阿卡波糖（Acar-
bose，Lot 16869，纯度≥95%）和二甲亚砜（DMSO）
均购自 Sigma 公司；乌墨根部提取物样品（共 7 个
单体化合物 ，17 个粗提物 ）是由昆明医科大学生
物医学研究中心提供，见表 1。
2 方法
2.1 α-葡萄糖苷酶活力的测定 [7]
40 μL磷酸钾缓冲液（pH 7.4），加入 0.025 U/mL
的 α-葡萄糖苷酶 20 μL、37 ℃恒温 10 min 后加
入 1.25 mmol/L 的 PNPG 20 μL，37 ℃恒温反应
15 min。 再加入 0.2 mol/L 的 Na2CO3 溶液 80 μL，
于 400 nm 波长下测光密度值（OD）。
2.2 乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶抑制活性的
测定
本检测在 96 孔板上进行，反应体系参照李婷
等 [7]的方法，探索最佳 α-葡萄糖苷酶和 PNPG 的
浓度，最佳反应时间以及最适缓冲液，实验条件优
化后为 ：磷酸钾缓冲液 （pH 7.4） 20 μL，加入
表 1 乌墨根部提取物的化学式及分子量
化合物 化学式 分子量
1 C30H50O 426.4
2 C30H52O 428.4
3 - -
4 - -
5 C30H50O2 442.4
6 C29H50O 414.4
7 - -
8 - -
9 - -
10 C30H48O5 488.4
11 - -
12 - -
13 - -
14 - -
15 C30H48O5 488.4
16 - -
17 - -
18 - -
19 - -
20 - -
21 - -
22 C15H10O7 302.0
23 - -
24 - -
注：“-”表示为粗提物
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中国执业药师·
0.025 U/mL 的 α-葡萄糖苷酶 20 μL，样品溶液
20 μL，37 ℃恒温 10 min，加入 1.25 mmol/L 的
PNPG 20 μL，37 ℃恒温反应 15 min，再加入 80 μL
0.2 mol/L 的 Na2CO3 溶液 ，于 400 nm 波长下测
OD 值。
实验共设 5 个组 ，每组 3 孔 ，分别为 ：a 对照
组（缓冲液＋酶液＋底物）；b 空白组对照组（缓冲
液）；c 样品测定组 （样品＋酶液＋底物 ）；d 样品
对照组（样品＋缓冲液）；e 阳性对照组（Acarbose＋
酶液＋底物）。
按下面方法计算抑制率，并用 GreatBasic 软件
求出相应 IC50值：
I% = [1 -（c - d）/（a - b）] × 100%。
3 结果
3.1 各提取物的抑制活性
乌墨根部各提取物在质量浓度为 200 μg/mL
时粗提物 12（13.56%），17（9.87%），21（87.58%）对
α-葡萄糖苷酶均表现出一定的抑制活性 ，特别是
化合物 21 的抑制率 （87.58% ）远高于阿卡波糖
（17.68%），表明乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶
有一定的抑制活性。 为进一步研究抑制活性的高
低，对化合物 21 的初筛终浓度依次对半稀释计算
IC50 值 ，算出 IC50 为 94.89 μg/mL，远远高于阳性
对照 Acarbose 的 IC50 （1 095.65 μg/mL）。 结果表
明，乌墨根部提取物具有一定的抑制活性，远大于
阿卡波糖的抑制活性。 乌墨根部提取物对 α-葡萄
糖苷酶的抑制活性见表 2。
3.2 提取物浓度对 α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响
粗提物 12，17，21 对 α-葡萄糖苷酶的抑制活
性均呈剂量依赖性 ，其中粗提物 21 在质量浓度
＜ 500 μg/mL 时，抑制率达到了最大值 100%，此
后再增加提取物浓度抑制率也不再变化 ，粗提物
12 和 17 在质量浓度＜ 1 000 μg/mL 时 ，抑制率
已分别达到了最大值 41.81%和 31.89%，此后再
增加提取物浓度抑制率也无任何变化，出现“平台
期”，其余提取化合物无论浓度高低对 α-葡萄糖
苷酶均未表现出抑制活性。 阿卡波糖在质量浓度
范围内，抑制率随质量浓度的增加而增大。说明乌
墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制
活性。 乌墨根部提取物不同浓度对 α-葡萄糖苷酶
活性的影响见图 1。
表 2 乌墨根部提取物对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性
样品
提取
溶剂
化合物
类型
初筛质量浓度
（μg/mL）
抑制率
（%）
IC50
（μg/mL）
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 13.56 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 9.87 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 0.00 -
200 87.58 94.89
200 0.00 -
200 0.00 -
阿卡波糖 200 17.68 1 095.65
2
5
6
10
15
22
4
7
8
9
11
12
13
14
16
17
18
19
20
21
23
24
200 0.00 -1
乌墨根部 甲醇 单体
200 0.00 -3
粗提物
图 1 不同浓度乌墨根部提取物对
α-葡萄糖苷酶活性的影响
论著
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合理用药 呵护公众健康
4 讨论
α-葡萄糖苷酶抑制剂是一种有效的口服降糖
药，对糖尿病及糖尿病并发症的预防和治疗有很
好的效果 ，此外 ，α-葡萄糖苷酶抑制剂还能抑制
蛋白及脂类糖基化 [8]，具有抗癌 、抗 HIV、抗动脉
粥样硬化等作用 [9]。 目前临床上广泛应用的 α-葡
萄糖苷酶抑制剂如阿卡波糖、伏格列波糖等都有
较好的疗效，但也有不尽如人意之处。 研究 [10-11]表
明植物中存在许多具有抑制 α-葡萄糖苷酶活性
的成分 ，如杜仲 [12]、穇子 [13]、印度鱼藤 [14]、大豆 [15]、
虎杖 [16]、知母 [17]等均有良好的抑制 α-葡萄糖苷酶
活性。由于药用天然产物大多数结构确定，作用温
和、缓慢与持久 [18]，因而，从药用植物中筛选天然
的 α-葡萄糖苷酶抑制剂成为国内外学者关注的
热点。
研究结果表明 ，乌墨根部提取物具有一定的
α-葡萄糖苷酶抑制活性，各提取物的抑制活性均
与浓度呈正相关性，说明其抑制活性具有剂量依
赖性。进一步的酶抑制作用的研究结果表明，粗提
物 21 的抑制活性最好 ，优于阿卡波糖的抑制活
性，说明可以对该提取物进行活性成分追踪，作进
一步研究，为乌墨根部提取物的降糖机制研究和
开发利用提供实验依据。
参考文献：
[1] 云南省药材公司 .云南中药资源名录 [M].北京 ：科学出版社 ，
1993.
[2] Helmstadter A.Syzygium cumini（L.）SKEELS（Myrtaceae）against
diabetes-125 years of research[J]. Pharmazie，2008，63（2）：91-101.
[3] Mahapatra PK，Pal M，Chaudhari AKN， et al. Preliminary stud-
ies on glycemic effect of Syzyginium Cumini seeks[J]. IRCS Medi-
cal Science Biochemistry，1985（13）：129-133.
[4] Teixeira CC， Pinto LP， Kessler FH， et al. The effect of Syzy-
gium cumini （L.） Skeels on post-prandial blood glucose levels
in non-diabetic rats and rats with streptozotocin-induced diabetes
mellitus[J]. J Ethanopharmacol，1997，56（3）：209-213.
[5] Prince PS，Menon VP，Pari L. Hypoglycemic activity of Syzigium
cumini seeds：effect on lipid peroxidation in alloxan diabetic rats
[J]. J Ethnopharmacol，1998，61（1）：1-7.
[6] Sharma SB，Nasir A，Prabhu KM，et al. Hypoglycaemic and hy-
polipidemic effect of ethanolic extract of seeds of Eugenia jam-
bolana in alloxan-induced diabetic rabbits[J]. J Ethnopharmacol，
2003，85（2-3）：201-206
[7] Li T，Zhang XD，Song YW，et al. A microplate- based screening
method for alpha-glucosidase inhibitors[J]. Chin J Clin Pharma-
col Ther，2005，10（10）：1129.
[8] Bertozzi CR，Kiessling LL. Chemical glycobiology[J]. Science，
2001，291（5512）：2357-2364.
[9] Baron AD.Postprandial hyperglycaemia and alpha-glucosidase in-
hibitors[J]. Diabetes Res Clin Pract，1998，40（S）：51-55.
[10] 季芳，肖国春，董莉，等 .药用植物来源的 α-葡萄糖苷酶抑制
剂研究进展[J].中国中药杂志，2010，30（12）：1633-1640.
[11] 焦晶晶，张英.黄酮类化合物在防治糖尿病及其并发症方面的
最新研究进展[J].中国药学杂志，2006，41（7）：481-484.
[12] Shobana S，Sreerama YN，Malleshi NG.Composition and en-
zyme inhibitory properties of finger millet （Eleusine coracana
L.） seed coat phenolics：Mode of inhibition of α-glucosidase
and pancreatic amylase[J]. Food Chemistry，2009，115（4）： 1268-
1273.
[13] Nakahara K，Kawabata S，Ono H，et al.Inhibitory effect of oo-
long teapolyphenols on glycosyltransferases of mutans Strepto-
cocci[J].Appl Environ Microbiol，1993，59（4）：968-973.
[14] Rao SA，Srinivas PV，Tiwari AK，et al.Isolation，characteriza-
tion and chemobiological quantification of alpha-glucosidase
enzyme inhibitory and free radical scavenging constituents
from Derris scandens Benth[J]. Journal of Chromatography B：
Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences，
2007，855（2）：166-172.
[15] Lee DS，Lee SH.Genistein，a soy isoflavone，is a potent al-
pha-glucosidase Inhibitor[J].FEBS Lett，2001，501（1）：84-86.
[16] 杨秀芳，吴明鑫.虎杖中 α-葡萄糖苷酶抑制剂的初步研究[J].
中成药，2008， 30（1）：10005-10007.
[17] Hiroyuki I，Osami T，Iwao S，et al.Inhibitory effects of com-
pounds from Anemarrhenae Rhizoma on a-glucosidase and al-
dose reductase and its contents by drying conditions[J].Journal
of Natural Medicines，2007，61（2）：146-153.
[18] 覃志成，柴可夫 .中药治疗糖尿病机制的研究进展 [J].浙江中
医学院学报，2004，28（1）：81-82.
（收稿日期 ：2014-08-21）
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