全 文 :黄果茄植物提取物的灭螺效果及对鱼类
和大鼠急性毒性试验研究
魏风华 1 ,徐兴建 1 ,刘建兵 1 ,戴裕海 1 ,李文新 2 ,赵利琴 2
( 1.湖北省血吸虫病防治研究所 ,湖北 武汉 430079; 2.华中师范大学生命科学院 ,湖北 武汉 430079)
[摘要 ] 目的 掌握和了解黄果茄植物提取物 ( SX )对钉螺的杀灭效果和对鱼类以及大鼠的急性毒性作用。
方法 进行了常规的灭螺试验和鱼类急性毒性试验以及大鼠急性经口毒性试验。 结果 SX浓度为 4. 32 mg /L
时浸泡湖北钉螺 , 24 h死亡率为 96. 7% , 48 h死亡率达 100% ; SX对鱼类稀有鱼句鲫的急性毒性试验 ,在 0. 27
mg /L浓度中 , 24 h的死亡率为 0,在 17. 28 mg /L浓度中 , 24 h死亡率为 100% ; SX对稀有鱼句鲫的 LC50为 2. 02
mg /L , 95%的可信限为 1. 33~ 3. 06 mg /L。 对大鼠急性经口毒性的绝对致死剂量为 2 150 mg /kg体重 , LD50为
794 mg /kg体重 , 95%可信限为 584~ 1 080 mg /kg体重。 结论 SX具有较好的灭螺效果 ,但对鱼类稀有鱼句鲫有
中等毒性作用 ,对大鼠的作用属低毒类。
[关键词 ] 黄果茄 ;提取物 ;杀灭钉螺 ;大鼠急性毒性试验
[中图分类号 ] Q949. 777. 7 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1000-4955( 2001) 06-0419-03
Study on the ef fect of killing snail and acute toxicity test of f ish and mouse with extract ion of Solanum
xanthocarpum
W EI Feng-hua1 , XU Xing-jian1 , L IU Jian-bing1 , DAI Yu-hai1 , L I Wen-x in2 , ZHAO Li-qin2
( 1. Hubei Institute of Schistosomiasis Control , Wuhan 430079, China; 2. Biology College of Central China
Normal University , Wuhan 430070, China)
Abstract: Objective To unde rstand the effect o f the killing snail and acute to xicity rela ted to the ex t raction
o f Solanum xanthoca rpum to fish and mouse. Methods The normal test o f killing snail and acute tox icity test to
fish and mouse we re car ried out in labo rato ry. Results The mo r tality of th e snail was 96. 7% wh en they w ere
immer sed in the so lution o f 4. 32 mg /L fo r 24 h, the mo r tality of 100% to the snail was under the solution o f
4. 32 mg /L for 48 h; the mo r tality o f SX to r ar e minnow ( Gobio cypris rarus) wa s zer o under the concentr ation
0. 27 mg /L for 24 h, and w as 100% under the concentr ation 17. 28 mg / L for 24 h. LC50 o f SX to rar e minnow w as
2. 02 mg /L, and the 95% confidence limits wa s 1. 33~ 3. 06 mg /L. The acute tox icity test on mor tality to mouse
w as 2 150 mg /kg bw by mouth, LD50 o f SX to mouse was 794 mg /kg bw, and the 95% confidence limits wa s 584
~ 1 080 mg /kg bw. Conclusions The finding s indicated SX no t only has a high effect to the killing snail and also
belong s to middle to xicity material to fish o f ra re minnow and low to xicity material of mouse.
Key words: So lanum xanthocarpum; Ex t raction; Killing snail; Acute tox icity test to mouse
[收稿日期 ]2001-03-13
[基金来源 ]卫生部 JRM C资助项目 ( 12-45) ;湖北省血吸虫病专家咨
询委员会资助项目 ( 1998-1999)
[作者简介 ]魏风华 ( 1967-) ,女 ,湖北孝感人 ,湖北血吸虫病防治研究
所副研究员 ,主要从事血吸虫病科研与防治。
湖北省血吸虫病防治研究所和华中师范大学生
命科学院共同筛选和研制的黄果茄 ( Solanum
xanthocarpum Schrad et W endl )植物提取物 (简称
SX) ,经对日本血吸虫中间宿主湖北钉螺初试证实
具有较好的杀螺效果 [ 1, 2]。为评价 SX用于灭螺的同
时对水生鱼类和哺乳动物有无影响 ,进行 SX灭螺
效果及对鱼类和大鼠的急性毒性试验 ,结果如下。
1 材料与方法
1. 1 药物 SX原粉 ,为淡黄色粉末 ,可溶于水 ,灭
螺有效成份含量为 5. 4%。 由本所提供。
1. 2 湖北钉螺 ( Oncomelania humpensis) 采集于
湖北监利县江滩。
1. 3 鱼苗 稀有鱼句鲫 ( Gobiocypris rarus Ye et Fu
1983) ,平均体长 2. 16 cm ,平均体重 0. 088 2 g,试验
前在实验室驯养 2周。中国科学院水生生物研究所
鱼室提供。
1. 4 大鼠 雄性初成年 Wista r大鼠 ,体重 186~
222 g。 湖北省医学实验动物中心提供。
1. 5 灭螺效果试验 取直径为 22 cm、高为 10 cm
玻缸 8只 ,称取 SX原粉 ,加去氯水 ,配制成试验浓
度分 别 为: 0. 067 5, 0. 135 0, 0. 270 0, 0. 540 0,
1. 080 0, 2. 160 0, 4. 320 0 mg /L的溶液各 2 L,另设
清水作为对照。向各玻缸投入钉螺 3袋 ,每袋装钉螺
·419·第 20卷 第 6期2001年 11月 中国地方病学杂志Chines e Journal of End emiolog y Nov. , 2001Vol. 20 No. 6
30只 ,浸泡在药液中 ,记录室温与水温 ,观察钉螺接
触药液 24, 48, 72 h的死亡率。
1. 6 鱼类急性毒性试验 试验水温为 ( 25± 1)℃ ,
试验浓度与浸杀灭螺的浓度基本一致。将 80尾稀有
鱼句鲫鱼苗随机分成 8组 ,每组 10尾 ,同时投至 7个
浓度组和 1个清水对照组 ,观察并记录不同时间、不
同浓度鱼苗的中毒症状与死亡情况 ,及时捞出死鱼。
观察时间为 1. 5, 3, 6, 12, 24, 48, 72, 96 h。判断鱼死
亡方法为:当鱼浮在水面无运动状态时 ,用镊子轻击
其尾柄部 ,若在 3 min内鱼不产生任何应激反应 ,即
可判断为死亡。用概率统计法计算稀有鱼句鲫的 LC50
及 95%可信限 [3 ]。
1. 7 大鼠急性经口毒性试验 将 20只大鼠随机分
为 4组 ,每组 5只。将受试样品 SX分别按 215, 464,
1 000和 2 150 mg /kg体重的水混悬液经口 1次灌
胃染毒 ,观察并记录中毒表现、症状出现和消失、死
亡时间及体重 ,连续观察 14 d。 用霍恩氏法计算
LD50及 95%可信限 [ 4]。
2 结果
2. 1 SX不同浓度不同时间的灭螺效果 在 4. 32
mg /L条件下 ,浸泡湖北钉螺 24 h死亡率为 96. 7% ;
浸泡 48和 72 h死亡率达 100% (表 1)。
表 1 SX不同浓度不同时间的灭螺效果
浓度 ( mg /L)
钉螺死亡率 (% )
24 h 48 h 72 h
0. 067 5
0. 135 0
0. 270 0
0. 540 0
1. 080 0
2. 160 0
4. 320 0
清水对照
0
13. 3
30. 0
46. 7
63. 3
80. 0
96. 7
0
0
26. 7
43. 3
70. 0
86. 7
93. 3
100
0
3. 3
40. 0
76. 7
90. 0
96. 7
100
100
0
注:室温 ( 25± 1)℃ ,水温 ( 23± 1)℃
2. 2 SX不同浓度对鱼类急性毒性 在 ( 25± 1)℃
条件下 ,试验鱼种稀有鱼句鲫在 0. 27 mg /L浓度中 ,
24 h死亡率为 0;在 17. 28 mg /L浓度中 , 24 h死亡
为 100%。 SX对稀有鱼句鲫的 LC50为 2. 02 mg /L,
95%可信限为 1. 33~ 3. 06 mg /L(表 2)。
2. 3 SX不同剂量对大鼠急性经口毒性作用 大鼠
经 1次灌胃 , 4 h后渐呈呆卧、少动、精神差、眯眼或
闭目等抑制性症状 ,终因呼吸、循环系统的抑制而死
亡。大鼠死亡发生在灌胃后 7 h至 3 d之间。未死亡
大鼠 , 2周内完全恢复 ,饮水进食正常。死亡大鼠心
脏、肝脏呈现淤血状 ,胃胀气 ,其它脏器未见明显改
变。 大鼠急性经口毒性的绝对致死剂量为 2 150
mg /kg体重 , LD50 794 mg /kg体重 , 95%可信限为
584~ 1 080 mg /kg体重 (表 3)。
表 2 SX不同浓度对鱼类急性毒性
浓度 ( mg /L) 试验鱼数 (尾 ) 24 h死亡率 (% )
0. 27
0. 54
1. 08
2. 16
4. 32
8. 64
17. 28
清水对照
10
10
10
10
10
10
10
10
0
10. 0
30. 0
60. 0
70. 0
90. 0
100. 0
0
注:室温 ( 25± 1)℃
表 3 SX不同剂量对大鼠急性经口毒性
剂量 ( mg /kg) 大鼠 (只 ) 死亡鼠数 (只 ) 死亡率 (% )
215
464
1 000
2 150
5
5
5
5
0
0
4
5
0
0
80
100
3 讨论
3. 1 近些年来 ,国内外研究较多的灭螺植物有
Camellia sinensis, Eupho rbia splendehs, Ambraosia
maritima, Endo以及茶皂素和商陆总皂甙等 [5 ]。 将
SX杀灭湖北钉螺的效果与上述灭螺植物进行比较 ,
显示出 SX具有灭螺剂量低、效果好、对动物毒性低
等明显优势。本研究对象黄果茄为茄科、茄属植物 ,
多年野生 ,在亚热带及长江中下游血吸虫病疫区分
布广泛 ,在任何荒地均可移栽 ,且存活率高 ,取材容
易。 国外报道从黄果茄果实中可提取的有效成份可
对猫、犬的心肌有增强收缩作用 [6 ] ,但未见有关黄果
茄有效成份灭螺以及对环境和动物植物的安全评价
等方面的研究报道 ,因此尽快研制开发出高效、低
毒、价廉的 SX植物灭螺剂势在必行。
3. 2 农药对鱼类毒性一般按 LC50 ( mg /L)的大小
分为 3级: > 10为低毒 , 1. 0~ 10为中毒 , < 1. 0为
高毒 [3 ] ;农药依大鼠急性经口 LD50 ( kg )的大小分为
4级: < 5为剧毒 , 5~ 50为高毒 , 50~ 500为中毒 , >
500为低毒 [4 ]。 结合本试验结果进行比较 , SX对稀
有鱼句鲫鱼的 LC50为 2. 02 mg /L,属中毒 ;对大鼠急性
经口 LD50为 794 mg /kg体重 ,属低毒。 SX对哺乳动
物毒性还应包括急性经皮毒性试验、急性吸入毒性
试验和皮肤及眼睛粘膜试验、蓄积毒性试验、致突变
试验等 ,这些尚需进一步研究 ,以便更全面了解该灭
·420· 中国地方病学杂志 第 20卷
螺物质的动物毒理及毒性特征。
(致谢:大鼠毒性试验由卫生部、农业部指定单位湖北省
卫生防疫站劳动卫生科协助完成 ,在此一并致谢 )。
[参考文献 ]
[1 ] 魏风华 ,徐兴建 ,刘建兵 ,等 .黄果茄植物灭螺成份的提取及灭
螺效果研究 [ J] .中国人兽共患病杂志 , 2000, 16( 6): 58-60.
[2 ] 徐兴建 ,魏风华 ,刘建兵 ,等 .黄果茄植物提取物对不同寄生虫
中间宿主贝类的生物效应测定 [ J] .动物学杂志 , 2001: 36( 3 ):
2-5.
[3 ] 国家环境保护局 .化学农药环境安全评价试验准则 [ M ]. 1989,
22.
[4 ] GB15670-1995.农药登记毒理学试验方法 [ S] .
[ 5] 张楚霜 ,周得红 ,朱金华 ,等 .茶皂素在血吸虫病防治上应用的
研究—茶皂素对血吸虫间宿主钉螺的杀灭效果 [ J] .茶叶科学 ,
1995, 15( 1): 65-70.
[ 6] Jos ek ut ty PS. Selectionand Characterization of v ariant Solan um
xanthocarpum cell line wi th augm ented s teroid metabolism
[ J ]. South African Journal of Botany, 1998, 64( 4): 238-243.
云南急性病毒性心肌炎发病期人群发硒水平分析
周 凯
(云南省克山病防治研究中心 ,云南 楚雄 675000)
[中图分类号 ] R542. 2 [文献标识码 ] D [文章编号 ]1000-4955( 2001) 06-0421-01
“云南急性病毒性心肌炎”在发病
上有别与其它的病毒性心肌炎 ,有集中
在一个自然村屯、寨子的 1~ 3户家庭
内发生 ;每年或间隔 1~ 3年又在该地
或邻近村寨发生 ;时间集中在 7~ 8月 ;
人群为青壮年多发等特点 [1 ] ,而且部分
发病点与克山病的发病点相互重叠。
因此 ,有人认为 “云南急性病毒性心肌
炎”除了病毒起作用以外 ,还存在某些
地区性 ,与克山病发病因素相似的条
件。 因此 ,在急性病毒性心肌炎发病
期 ,我们对永仁宜就和大姚鼠街两个与
克山病重叠的发病点的人群进行了发
硒水平的测定 ,以了解硒在急性病毒性
心肌炎发病中的作用 ,现报告如下。
1 材料与方法
1. 1 取样对象 共采集发样 120份 ,
其中 16~ 50岁未服硒者 80份 , < 15
岁服硒者 40份。
1. 2 测定方法 用 2, 3—二氨基奈荧
光法 [2 ]测定其硒含量。
2 结果
永仁宜就和大姚鼠街 ,服硒人群发
硒含量显著高于未服硒人群 ,服硒人群
在急性病毒性心肌炎发病期无病情 ,未
服硒人群则有心肌炎病情发生 ( P <
0. 01 ,见表 1)。
表 1 服硒和未服硒人群发硒含量与急性病毒性心肌炎发病期病情的关系
发病点 发病时间
服硒人群 ( x± s )
样品数 硒含量 ( mg /kg ) 心肌炎发生
未服硒人群 ( x± s )
样品数 硒含量 ( mg /kg ) 心肌炎发生 t P
永仁宜就
大姚鼠街
合计
1996年 7月
1998年 7月
30
10
40
0. 203± 0. 021
0. 239± 0. 015
0. 221± 0. 025
无
无
60
20
80
0. 122± 0. 015
0. 148± 0. 026
0. 135± 0. 018
有
有
21. 055
10. 199
21. 636
< 0. 01
< 0. 01
< 0. 01
[收稿日期 ]2001-12-05;
[修订日期 ]2001-09-10
[作者简介 ]周 凯 ( 1954-) ,男 ,云南南华人 ,云
南省克山病防治研究中心副主任检验技
师 ,主要从事克山病监测和防治。
3 讨论
近年来 ,在每年的 7~ 8月份 ,云南
的某些饮水和卫生条件差的山区、半山
区农村青壮年连续出现突然发病 ,突然
死亡病人 ,自觉症状不明显 ,但有家庭
聚集现象。经临床、流行病学、病理学和
病因学研究 ,初步证实为肠道病毒引起
的急性病毒性心肌炎。
由于“云南急性病毒性心肌炎”具
有在一定的区域内发病的特点 ,这就提
示了这种心肌炎的基本致病因素当中
有一种或几种仅存在于病区或仅在病
区范围内起作用 ,由于部分病区又与克
山病病区相重叠 ,表明 “云南急性病毒
性心肌炎”的基本致病因素当中的某一
种与克山病的基本致病因素相同。缺硒
已被大量实验和事实证明是克山病发
病的重要因素。 因此 ,我们在掌握了病
毒性心肌炎发病点与克山病发病点重
叠地区的硒背景水平以外 ,重点对两病
重叠地区的未发生心肌炎的 < 15岁服
硒儿童和 15岁以上的未服硒青壮年人
群发硒作了测定。 表明 ,与克山病发病
点重叠的病毒性心肌炎发病点的 15岁
以下服硒儿童发硒含量均在 0. 2
mg /kg以上 ,这部分人群未见发病 ;而
同一地区 15岁以上成人发硒为 0. 135
mg /kg。 有急性病毒性心肌炎发生。
由于内、外环境硒水平自然背景是
稳定存在的 ,低硒的自然因素也普遍地
存在于“云南急性病毒性心肌炎”流行
地区人群中 ,并可能成为引起该地区急
性病毒性心肌炎发病的一个基本因素 ,
因此 ,低硒和补硒在“云南急性病毒性
心肌炎”的流行和发病中的作用应引起
人们的高度重视。
[参考文献 ]
[1 ] 牛存龙 ,左文昌 ,侯龙才 .云南暴发性
病毒性心肌炎流行概况 [ J] .云南预防
医学杂志 , 2000, 5( 1): 25-26.
[2] 王光亚 ,周瑞华 ,孙淑庄 ,等 .发、血、尿
和其它组织痕量硒的测定 [ J] .营养学
报 , 1985, 7( 1): 39-45.
·421·第 6期 魏风华 ,等 .黄果茄植物提取物的灭螺效果及对鱼类和大鼠急性毒性试验研究