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不同引发处理对朝天椒种子活力的影响



全 文 :收稿日期:2011 - 11 - 08 修回日期:2012 - 06 - 29
作者简介:宁书菊(1963 -) ,女,副教授,硕士生导师.研究方向:种子生理生化. Email:shujuning@ 163. com.通讯作者魏道智(1960 -) ,男,
教授,博士生导师.研究方向:作物分子生理学. Email:weidz888@ sohu. com.
不同引发处理对朝天椒种子活力的影响
宁书菊1,曾夏安1,魏道智2
( 1.福建农林大学作物科学学院,2.福建农林大学生命科学学院,福建 福州 350002)
摘要:以日本朝天椒(Capsicum frutescens var.)为材料,采用不同含量的聚乙二醇(PEG)、NaCl和不同时间进行浸种处理,探
讨不同引发处理对朝天椒种子活力相关生理生化指标的影响.结果表明:适当增加 PEG、NaCl含量和延长引发时间,可以提
高朝天椒种子的各项活力指标,20% PEG和 0.1 g·L -1 NaCl处理可以显著提高朝天椒种子的发芽势和发芽率,与对照组
相比,分别提高 21.99%、29.50%和 12.9%、16%;PEG处理可以显著降低种子浸出液的相对电导率及种子中丙二醛(MDA)
含量,且与 PEG含量呈正相关;NaCl处理后的朝天椒种子 MDA含量均低于对照组,0.1 g·L -1 NaCl 处理可使相对电导率
和 MDA含量达到最低,脱氢酶活性最高.朝天椒种子的发芽率、发芽势、种子指数与脱氢酶活性之间呈显著正相关,与相对
电导率及 MDA含量呈显著负相关.因此,采用适宜含量的 PEG和 NaCl处理朝天椒种子,可显著提高其活力.
关键词:朝天椒;引发处理;萌发;生理特性
中图分类号:R282.2 文献标识码:A 文章编号:1671-5470(2012)05-0469-06
Effects of different priming treatments on the germination and physiological
characteristics of Capsicum frutescens seeds
NING Shu-ju1,ZENG Xia-an1,WEI Dao-zhi2
(1. College of Crop Science,Fujian Agriculture and Forestry University;2. College of Life Science,
Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Fujian 350002,China)
Abstract:The Japanese pepper (Capsicum frutescens var.)was used as material to study effects of the different contents of polyeth-
ylene glycol (PEG)and NaCl pre-soaking with different time on seed germination and physiological characteristics. Results showed
that PEG and NaCl increased all seeds vigor with priming treatment concentration and time,20% PEG and 0.1 g·L -1 NaCl had a
significant promotion to germination energy and percentage,comparing with control,increased by 21.99%,29.50%,and 12.9%,
16% respectively. The different contents of PEG treatment could significantly reduce relative electrical conductivity and MDA con-
tent in seeds,which correlated positively with PEG content. MDA content in seed treated with NaCl was lower than control,the rel-
ative electrical conductivity,MDA content were the lowest and the dehydrogenase activity was the highest in 0.1 g·L -1 NaCl treat-
ment. There was a significantly positive correlation of the germination percentage,germination energy,germination index to the de-
hydrogenase activity,and a significant negative correlation of them to the relative electrical conductivity and MDA content. There-
fore,the suitable content of PEG and NaCl could significantly improve the viability of the pepper seeds.
Key words:Capsicum frutescens var.;priming treatment;germination;physiological characteristics
种子引发(seed priming)是指控制种子缓慢吸收水分使其停留在种子吸水的第二阶段,让种子进行预
发芽的生理生化代谢和修复作用,促进细胞膜、细胞器、DNA 的修复和酶的活化,使种子处于准发芽的代
谢状态,但防止胚根的伸出.种子引发处理能有效地提高种子质量,加速种子萌发,提高种子的发芽率,增
强种子对不利环境条件的适应能力[1 - 10].
辣椒(Capsicum anmuum L.)是一种重要的茄果类蔬菜作物和调味品,营养丰富,风味独特,深受人们
喜爱.中国是世界上最大的辣椒生产和消费国,也是辣椒的出口大国,常年种植面积超过 1.3 × 106 hm2,年
用种量超过 1.5 × 106 kg[11,12].在自然贮藏过程中,辣椒种子的活力会不断下降.因此,提高辣椒种子的发
芽率和发芽势对辣椒种子生产和利用具有重要意义.本研究运用种子引发技术处理朝天椒种子,探讨提高
朝天椒种子活力的有效途径,以期为蔬菜生产和种子引发处理提供依据.
福建农林大学学报(自然科学版) 第 41 卷 第 5 期
Journal of Fujian Agriculture and Forestry University (Natural Science Edition) 2012 年 9 月
DOI:10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2012.05.015
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 朝天椒 供试材料为郑州神牛种苗有限公司生产的日本朝天椒(C. frutescens var.).
1.1.2 试剂与仪器 DDS-11A型电导率仪(上海卓爵仪器设备有限公司) ,752 型分光光度计(上海棱光
技术有限公司) ,TG16-WS台式高速离心机(上海比朗仪器有限公司) ,聚乙二醇(PEG)、氯化钠(NaCl)、
三氯乙酸(TCA)、硫代巴比妥酸(TBA、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)、丙酮等试剂均为分析纯.
1.2 方法
1.2.1 人工引发处理 设置 15%、20%、25%(体积分数)的聚乙二醇处理组和 0. 1、0. 5、1. 0 g·L -1的
NaCl处理组,蒸馏水处理作为对照.将种子浸于一定量的引发剂中并密封,在 25 ℃黑暗条件恒温培养箱
中引发处理 12 h、24 h、48 h.取出种子,洗净,晾干备用.
1.2.2 发芽试验 按国家农作物种子检验规程进行[13],重复 3 次,每次 50 粒,每日定时统计种子发芽情
况,补足水分,到第 14 天为止.第 7 天计发芽势,第 14 天计发芽率.
发芽率测定:发芽率(G)/% =萌发种子数 /种子总数 × 100;
发芽势测定:发芽势 /% =(规定天数内发芽种子数 /供试验种子总数)× 100;
发芽指数(GI)=∑(Gt /Dt).式中,Gt是 t日的发芽数,Dt是相应的发芽日数.
1.2.3 电导率测定 选取不同处理的朝天椒种子,分别取 30 粒辣椒种子,重复 3 次.用蒸馏水冲洗干净,
置 100 mL锥形瓶中,加重蒸馏水 30 mL,加塞静置于 35 ℃恒温培养箱中处理 24 h,在室温条件下,用电导
率仪测定种子初浸出液电导值,测定后将锥形瓶放在电炉上煮沸 2 min,冷却后测定终浸出液电导值,然后
计算各处理的相对电导率[14].
相对电导率 /% =(初电导率 -空白电导率)/(终电导率 -空白电导率)× 100
1.2.4 丙二醛含量测定 预先将各处理种子在蒸馏水中室温下浸泡 20 h,用吸水纸吸干后,称取 1.00 g
种子,3 次重复,加入 10%三氯乙酸(TCA)2 mL 和少量石英砂,研磨至匀浆,加入 8 mL 10% TCA 溶液进
一步研磨.匀浆离心 10 min(4000 r·min -1) ,上清液为样品提取液.吸取上清液 2 mL(对照加 2 mL 蒸馏
水) ,加入 2 mL 0.6%硫代巴比妥酸(TBA)溶液,混匀于沸水浴上反应 15 min,迅速冷却后,离心 10 min
(4000 r·min -1) ,取上清液,测定 532、600 和 450 nm波长下的吸光度[14].
C(μmol·L -1)= 6.45(D532 nm - D600 nm)- 0.56 × D450 nm
C为 MDA的含量,D532 nm、D600 nm、D450 nm分别代表 532、600、450 nm波长下的吸光度.
1.2.5 脱氢酶活性的测定 称取各处理辣椒种子 0.50 g,3 次重复,在 20 ℃条件下萌发 3 天,在 30 ℃恒
温箱中用 10 mL 0.5% TTC溶液浸泡 3 h,取出后用蒸馏水清洗,吸干种子表面水分,加入 10 mL 丙酮研
磨,室温提取 9 h,离心 10 min(5000 r·min -1) ,提上清液于 490 nm处测吸光度[14].
2 结果与分析
图 1 不同含量 PEG不同时间引发处理
朝天椒种子的发芽势
Fig. 1 Effects of different content of PEG and priming time on
germination energy of C. frutescens seeds
2.1 引发处理对朝天椒种子活力的影响
2.1.1 不同含量 PEG引发处理对朝天椒种子活力的影
响 从图 1 可以看出,经 15%、20%、25% PEG 引发处
理 12、24 和 48 h 后,朝天椒种子的发芽势随着 PEG 含
量和处理时间的增加而提高,20% PEG处理的朝天椒种
子发芽势最高.不同时间处理对朝天椒种子发芽势的影
响不显著.
当处理时间相同时,随着 PEG 含量的增加,朝天椒
种子发芽率先提高后降低;当 PEG 含量相同时,随着处
理时间的延长,朝天椒种子发芽率呈提高趋势(图 2).
其中,20% PEG处理 48 h的发芽率最高.
·074· 福建农林大学学报(自然科学版) 第 41 卷
不同含量 PEG处理朝天椒种子,其发芽指数之间具有显著差异(图 3).在 15% PEG 处理 48 h 时,朝
天椒种子发芽指数最高;当处理时间为 12 和 24 h时,20% PEG处理的朝天椒种子发芽指数最高.
表 1 不同含量 PEG引发处理对朝天椒种子活力的影响1)
Table 1 Effects of difference concentration of PEG on seed
vigour of C. frutescens %
PEG含量 发芽势 发芽率 发芽指数
0 29.33 ± 0.00cC 69.33 ± 2.00dD 24.73 ± 0.97bA
15 30.22 ± 0.77cBC 85.56 ± 3.01bB 29.71 ± 4.69aA
20 35.78 ± 0.39aA 89.78 ± 2.70aA 29.89 ± 0.86aA
25 31.78 ± 0.77bB 79.55 ± 3.67cC 26.07 ± 3.20abA
1)表中数字为同一含量 3 组引发时间数据之和;同列不同大写字母
表示差异极显著,不同小写字母表示差异显著.
2.1.2 不同含量 NaCl引发处理对朝天椒种子活
力的影响 20%和 25% PEG 处理组的朝天椒种
子发芽势与对照组差异极显著(表 1).其中,20%
PEG处理组的朝天椒种子发芽势最高;与对照组
相比,经 20% PEG 引发处理的种子发芽率和发
芽势分别提高 21.99%和 29.50%;发芽指数与发
芽势、发芽率结果一致,说明适当含量 PEG 能显
著提高朝天椒种子的活力,与马卉等[15]、钱森和
等[16]的研究结果一致.
从图 4 和图 5 可以看出,对照组和 0.1 g·L -1 NaCl处理朝天椒种子 12 和 24 h,其发芽势和发芽率表
现出含量效应,0.1 g·L -1 NaCl处理时,发芽势和发芽率均最高,然后降低.不同含量 NaCl引发处理 48 h
朝天椒种子,其发芽势呈下降趋势,发芽率变化不明显.与李艳茹等[17]的研究结果一致.
从图 6 可以看出,处理时间相同的情况下,随着 NaCl含量的增加,朝天椒种子的发芽指数先升高后降
低.其中,0.1 g·L -1 NaCl处理朝天椒种子 48 h时,发芽指数最高.与邢燕等[18]的研究结果一致.
从表 2 可以看出,0.1 g·L -1 NaCl处理组的发芽势高于对照组,0.5 g·L -1和 1.0 g·L -1 NaCl处理组
的发芽势显著低于对照组. 0.1 g·L -1 NaCl 处理的发芽势、发芽率分别显著高于对照组 12.9%和 16%;
0.5 g·L -1 NaCl处理具有增大发芽指数作用;1.0 g·L -1 NaCl处理则抑制发芽指数.
·174·第 5 期 宁书菊等:不同引发处理对朝天椒种子活力的影响
图 6 不同含量不同时间NaCl处理朝天椒种子的发芽指数
Fig. 6 Effects of different content of NaCl priming time on
germination index of C. frutescens seeds
表 2 不同含量 NaCl引发处理对朝天椒种子活力的影响1)
Table 2 Effects of different concentration of NaCl on
the vigor of C. frutescens seeds g·L -1
NaCl含量 发芽势 发芽率 发芽指数
0 31.33 ± 3.46abAB 69.33 ± 2.00bB 24.73 ± 0.97bBC
0.1 35.34 ± 3.06aA 80.44 ± 6.81aA 30.71 ± 3.54aA
0.5 27.78 ± 0.77bcAB 73.11 ± 2.14bAB 26.81 ± 1.00bAB
1.0 25.78 ± 2.04cB 71.33 ± 1.76bAB 20.03 ± 1.71cC
1)表中数字为同一含量 3 组引发时间数据之和;同列不同大
写字母表示差异极显著,不同小写字母表示差异显著.
2.2 引发处理对种子相对电导率的影响
2.2.1 不同含量 PEG引发处理对朝天椒种子相对电导率的影响 由图 7 可知,朝天椒种子的电导率随
PEG含量和处理时间的增加而递降,表明较高含量 PEG 和长时间处理有利于保护朝天椒种子细胞,与张
海旺等[19,20]的研究结果一致.
2.2.2 不同含量 NaCl引发处理对朝天椒种子相对电导率的影响 朝天椒种子由 0.1、0.5 和 1.0 g·L -1
NaCl 处理 12 h,以及由 0.1 g·L -1 NaCl处理 24 和 48 h,其相对电导率都低于对照组(图 8). 0.5 g·L -1和
1.0 g·L -1 NaCl处理 24 和 48 h,朝天椒种子的相对电导率高于对照组.与徐本美等[21]的研究结果一致.
2.3 引发处理对种子的脱氢酶活性的影响
2.3.1 不同含量 PEG引发处理对朝天椒种子脱氢酶活性的影响 种子脱氢酶活性反映种子内部的氧化
还原反应能力,是种子活力的重要生化指标,有研究表明,种子活力与其脱氢酶活性相一致[8 - 18]. 由图 9
可以得知,当 PEG含量为 0%、15%和 20%时,随着 PEG处理含量的增加和引发时间的延长,朝天椒种子
的脱氢酶活性不断提高. 25% PEG处理组的种子脱氢酶活性低于 20% PEG处理组,而且随着处理时间的
延长,25% PEG处理组的种子脱氢酶活性逐渐降低.
2.3.2 不同含量 NaCl引发处理对朝天椒种子脱氢酶活性的影响 NaCl 含量为 0 和 0.1 g·L -1时,随着
处理时间的延长,朝天椒种子的脱氢酶活性不断提高;当 NaCl含量为 0.5 和 1.0 g·L -1时,脱氢酶活性降
低,但引发处理的种子脱氢酶活性都显著高于对照组.
2.4 引发处理对种子的MDA含量的影响
2.4.1 不同含量 PEG引发处理朝天椒种子的 MDA含量 MDA 是生物膜组成脂肪酸发生氧化降解的主
要产物[20],是反映细胞膜质过氧化作用强弱和质膜破坏程度的重要指标[21]. 从图 11 可知,经过不同时
间、不同含量 PEG引发处理,随着时间和处理含量的增加,朝天椒种子的 MDA含量显著减少,且与处理时
间和处理含量成正比.
2.4.2 不同含量 NaCl引发处理朝天椒种子的 MDA含量 经过不同含量 NaCl,不同时间处理朝天椒种子
·274· 福建农林大学学报(自然科学版) 第 41 卷
的 MDA含量都低于对照组,随着处理时间的延长 MDA含量不断降低(图 12).当 NaCl 含量为 0.1 g·L -1
时,朝天椒种子的MDA含量最低,说明0.1 g·L -1 NaCl较长时间处理对于朝天椒种子具有较好的引发作用.
2.5 朝天椒种子各生物学指标之间的相关关系
从表 3 可以看出,朝天椒种子的发芽势与发芽率之间,发芽指数与发芽势、发芽率之间,脱氢酶活性与
发芽势、发芽率之间,MDA含量与相对电导率之间均呈极显著正相关关系.
表 3 朝天椒种子各种生物学指标之间的相关分析1)
Table 3 Correlation analysis between different biological indexes of C. frutescens seeds
相关系数 发芽率 发芽指数 相对电导率 脱氢酶活性 MDA含量
发芽势 0.65** 0.59** - 0.43* 0.55** - 0.2700
发芽率 0.61** - 0.53** 0.86** - 0.49*
发芽指数 - 0.55** 0.49* - 0.3800
相对电导率 - 0.55** 0.82**
脱氢酶活性 - 0.59**
1)* 表示显著水平;**表示极显著水平.
3 讨论与结论
本研究表明,朝天椒种子的发芽率、发芽势、种子指数与脱氢酶活性之间呈显著正相关,与相对电导率
及 MDA含量呈显著负相关;相对电导率与 MDA 含量呈极显著正相关.这些相关关系反映了朝天椒种子
生理与细胞生理变化的一致性.
PEG和 NaCl都具有刺激和增加朝天椒种子脱氢酶活性,降低种子中脂肪过氧化作用,从而提高朝天
椒种子的发芽率、发芽势和发芽指数.但是二者的含量和处理时间不同,0% - 20% PEG 对朝天椒种子的
各项活力指标都具有促进作用,25% PEG较短处理时间具有正向积极作用,较长处理时间具有部分副作
·374·第 5 期 宁书菊等:不同引发处理对朝天椒种子活力的影响
用.当 NaCl含量为 0 和 0.1 g·L -1时,随着 NaCl含量的增加,对朝天椒种子的各项活力指标都具有促进
作用;0.5 和 1.0 g·L -1 NaCl的较短处理时间对朝天椒种子的各项活力指标具有正向作用,而处理时间延
长具有明显副作用.因此,选择适宜含量的 PEG和 NaCl处理,对于朝天椒种子具有正向引发作用.
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