全 文 ：第48卷第1期
2009年1月
农 药
AGROCHEMICALS
Vol. 48, No. 1
Jan. 2009
黄果茄生物碱与氯硝柳胺联用的抑螺增效作用
李娟娟，李文新，祁 超，邓灵福，余 蔚
(华中师范大学 生命科学院，武汉 430079)
摘要：从黄果茄(Solanum xanthocarpum：SX)果实中提取分离的3种新生物碱SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ，其纯度分别为
97.89%、98.71%、96.12%，使用浸泡法试验生物碱的抑螺和与氯硝柳胺(niclosamide：NM)联用的抑螺增效作
用。 在室温(23±1) ℃浸泡24 h，SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ均有抑螺效应，SXⅡ8.0 mg/L抑螺率为100%，抑螺活性分别
是SXⅠ、Ⅲ的12.5、25倍，NM 0.25、0.5、1.0 mg/L抑螺率均为0，但在NM的3种质量浓度中分别加入SXⅠ
50 mg/L时，NM抑螺活性均提高60%；当分别加入SXⅢ67 mg/L时，NM抑螺活性均增至100%。 试验结果为
NM高效低毒新剂型研究提供物质基础。
关键词：黄果茄；氯硝柳胺；生物碱；抑螺；增效作用
中图分类号：TQ482.3 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2009)01-0062-02
Synergistism Function on Oncomelania Snails of Combined Use of
the Alkaloid from Solanum xanthocarpum and Niclosamide
LI Juan-juan, LI Wen-xin, QI Chao, DENG Ling-fu, YU Wei
(College of Life Science, Hua Zhong Normal University, Wuhan 430079, China)
Abstract: SXⅠ,Ⅱand Ⅲ were new alkaloid which extraced from Solanum xanthoca pum fruit and the purity
were 97.89, 98.71 and 96.12%. The effect on oncomelania snails of the alkaloid and the combined synergistism
function of niclosamide and the alkaloid were obtained by immersion method. SXⅠ,Ⅱand Ⅲ all show inhibiting
effect in oncomelania s ails. Inhibiting rate of SXⅡwas 100% when the concentration was 8 mg/L which was 12.5 nd
25 times than SXⅠand SXⅢ. Inhibiting rate all were 0 when the snails under the concentration of niclosamide
were 0.25, 0.5 and 1 mg/L for 24 h. When niclosamide combined used SXⅠ(50 mg/L) and SX Ⅲ(100 mg/L) respectively,
inhibiting rate of niclosamide increased 60 and 100%.
Key words: Solanum xanthocarpum; niclosamide; alkaloid; snail-inhibiting; synergistism function
钉螺是日本血吸虫的惟一中间宿主，杀灭钉螺是预防
血吸虫病流行的有效方法。 钉螺属水陆两栖软体动物，
药物接触时垂直或水平爬行的逃逸行为直接影响了药物的
效果，以致增加药物的用量、成本及对环境压力。 NM是
WHO惟一推荐使用、国内惟一登记注册批准的化学杀
螺药物，1 mg/L浸杀钉螺上爬率和鱼苗死亡率均达到
40%以上，因此NM与其他成分联用增加NM抑螺上爬
效应研究具有应用意义。 SX是李文新等从40余种甾体生物
碱中筛选的新灭螺植物[1]，其果实的150 mm粉粒125 mg/L室
内(23±1) ℃浸杀1 h抑螺率达到100%，果实的乙醇提取总
生物碱0.30 mg/L与NM 0.25 mg/L联用，使NM抑螺率提高
90%以上，试验显示SX果实总生物碱联合NM使用具有灭
螺增效作用，但其生物碱单体抑螺增效作用并不清楚。
作者已从SX果实总生物碱提取分离出3种生物碱单体，本
文研究其单剂及其与NM联用的抑螺增效作用。 此成果为
NM新剂型研究积累物质基础。
1 实验材料、试剂及设备
1.1 材料
钉螺：使用湖北钉螺指名亚种(Oncomelania hupensis
hupensis)肋壳钉螺株的阴性成螺，采自湖北省荆州市李埠
镇沟渠，用清水洗净后于室内饲养待用。
SX生物碱：用酸水(pH值4.5~5.0)法从SX成熟果实中提
取分离SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ，经HPLC-ELSD色谱分析其纯度分
别为97.89%、98.71%、96.12%，使用AP12000LC/MS质谱
分析其相对分子质量分别为883、863、721，推定其结构
属含澳洲茄胺骨架的生物碱(详细结构正在剖析中)。
NM：化学名为5,2-dichloro-4-nitro-salicylie anilide，英
文名为Niclosamide Tablets，相对分子质量为327.1，纯度
为99%，购于南京艾森精细化工有限公司，常温保存。
1.2 仪器设备与试剂
电子天平(R2OOD，德国SARTORIUS GMBH
GÖTTINGEN公司)，电热恒温水浴锅(HW·SYH-K4，北
京市长风仪器仪表公司)。 乙酸(AR，中南化工厂)，去氯
收稿日期：2008-09-29，修返日期：2008-10-25
基金项目：863计划专项资助项目(2004AA2Z3550)
作者简介：李娟娟(1984—)，女，湖北当阳人，硕士研究生，从事灭螺药物研究。 E-mail ：leejuandwb@163.com。
通讯作者：余蔚。 E-mail ：weiyu1984@yahoo.cn。
应用技术-
第1期 63
水(自来水在室外放置7 d后备用)。
2 试验方法
2.1 生物碱抑螺活性测定
分取SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ，用适量1%乙酸溶解后加去氯水
定量至400 mg/L作为母液，再等比稀释至200、100、50、
25、12.5、6.25 mg/L的药液各30 mL。 使用18 mm×180 mm
指形试管，各生物碱溶液均加至150 mm处，置于25 ℃水浴
槽，待试管内、外温度平衡后每试管投放个体大小相近钉
螺20只，并设去氯水作对照。 浸泡24 h观察记录钉螺上爬
数，连续浸泡96 h后用针刺法判断其死亡并计算死亡率。
2.2 生物碱与NM联用抑螺活性测定
1)NM母液：称取定量NM加去氯水配制4.0 mg/L溶
液，再等比稀释至2.0、1.0、 .5 mg/L各500 mL作为母液。
2)生物碱母液：经预试得知SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ的抑螺率100%的
质量浓度分别为100、8、200 mg/L，因而SXⅠ的1/2和1/3的
质量浓度分别为50、33.3 mg/L。 先配制SXⅠ50、33.3 mg/L
各500 mL作为母液。 按同样方法和步骤分别配制SXⅡ、Ⅲ
的母液备用。 3)NM与生物碱的复方液：先从50 mg/L SXⅠ
母液和2.0 mg/L NM中分取15 mL混合，得含50 mg/L SXⅠ和
含NM 2.0 mg/L的复方液，再用50 mg/L SXⅠ溶液等比稀
释1.0、 .5、0.25 mg/L NM溶液，其中SXⅠ质量浓度均为
50 mg/L，则NM质量浓度为变数(梯度)。 按同样方法和步
骤配制SXⅡ、Ⅲ与NM的复方液。 4)复方液抑螺活性测定
方法：与2.1相同。 5)生物碱抑螺增效活性：联合使用抑螺
率-单剂使用抑螺率。
3 试验结果
3.1 生物碱浸泡抑杀钉螺效应
经浸泡预试验得知SXⅠ、SXⅡ和SXⅢ抑制钉螺上爬及
其毒死效应，发现生物活性差异较大。 在室温(23±1) ℃，
浸泡法抑制并杀死钉螺的生物活性见表1。 以量效(抑螺率/
质量浓度)作比较，可见SXⅡ抑螺活性最高，分别是SXⅠ、
Ⅲ的12.5、25倍。 浸泡96 h均无钉螺上爬，且死亡率达
100%。
3.2 生物碱与NM联用的抑螺增效活性
各生物碱的2个质量浓度与NM的4个质量浓度联用，在
室温(23±1) ℃，24 h浸泡抑螺上爬效应见表2。 1)NM 0.25、
0.50、1.0 mg/L抑螺率均为0，但其分别与生物碱联用均显著
提高抑螺活性，且3种生物碱抑螺增效作用存在明显差异。
2)在NM 0.25、0. 0、1.0 mg/L中加入SXⅠ50 mg/L时，
NM抑螺活性均提高60%，即在SXⅠ50 mg/L时，NM抑
螺增效与NM质量浓度无关(无量效关系)；当加入SXⅢ
100、67 mg/L时，NM抑螺活性均增至100%，同样显示在
SXⅢ100、67 mg/L时，NM抑螺增效与NM质量浓度无
关。 3)但以生物碱抑螺增效的平均质量浓度(抑螺增效
率/质量浓度)作比较，SXⅡ提高NM抑螺活性的作用最
大，其2.7 mg/L能使NM抑螺活性提高60%。
表1 生物碱浸泡抑杀钉螺效应
生物碱 质量浓度/ 24 h抑制钉螺上爬率/ 96 h钉螺死亡率/
(mg·L-1) % %
SXⅠ 12.5 0 0
25.0 20 20
50.0 40 40
100.0 100 100
SXⅡ 2.0 0 0
4.0 30 30
6.0 50 50
8.0 100 100
SXⅢ 125.0 0 0
150.0 20 20
175.0 60 60
200.0 100 100
表2 3种生物碱与NM联用的抑螺率 (%)
NM/ SXⅠ SXⅡ SXⅢ
(mg·L-1) 50 330 4.0 2.70 100 67 0
1.00100(60)4 (14)0 70(40)60(50)0100(100)100(100)0
0.50100(60)4 (14)0 50(20)20(10)0100(100)100(100)0
0.25100(60)010(-20)10(0)100(100)100(100)0
0 40 26　 0 30 100 0 0 0
注：括号内数为联合使用抑螺增效率(%)。
4 讨论
近年来，用化学合成物或天然产物与NM复配，以减
少NM的用量和降低其对鱼毒性的研究是新型灭螺药物研
究的热点之一。 何昌浩等[2]使用从槟榔种子中提取分离的
槟榔碱(N-甲基-2,5,6-三氢-3-3吡啶甲酸甲酯)100 mg/L与
NM 0.125 mg/L的溶液，浸泡1 h钉螺上爬附壁率由81.1%降
至35.0%，经时24 h后，钉螺开厣率由47.8%增至66.7%，死
亡率却由1.0%增至66.7%(P＜0.01)。 张爱华等[3]使用槟榔碱
的氢溴酸盐0.0061 mg/L与NM 0.4 mg/L联用，2 d龄鳙苗
死亡率由80%降至4%(P＜0.01)。 上述研究证实了槟榔碱
具有灭螺增效和减少鱼毒性的生物效应。 李文新等[4]从
SX成熟果实中分离出澳洲茄胺骨架的生物碱(22-imdo-3-
[4-(6-deoxy-a l-mannoside)-β-D-glucoside]-5-dehydro
spiro stan：LS)0.58 mg/L，浸杀钉螺72 h的死亡率为100%，
李洲等[5]从SX中分离到边缘茄碱(a-2-solamar-argine)0.2 mg/L，
浸杀钉螺48 h的死亡率为100%，但其抑螺和抑螺增效的生
物活性均不清楚。 本文供试生物碱是从SX果实总生物碱
中分离纯化的单体化合物SXⅠ、Ⅱ、Ⅲ，推定是含有澳
洲茄骨架但不同于澳洲茄碱和边缘茄碱的新化合物。 本
文首例报道澳洲茄类生物碱抑制钉螺上爬及其增加NM抑
螺活性，与SX果实总碱的生物试验结果一致，成果对研
究NM的环境友好型新剂型具有重要意义，但SXⅠ、Ⅱ、
Ⅲ的联合或其抑螺活性的研究结果具有一致性。
(下转第73页)
李娟娟，等： 黄果茄生物碱与氯硝柳胺联用的抑螺增效作用
第1期 73
2,4-滴丁酯；预防组Ⅱ：施芸苔素内酯5 d后再施2,4-滴丁
酯；治疗组：施2,4-滴丁酯叶片稍萎蔫后施芸苔素内酯；
防治组Ⅰ：施芸苔素内酯10 d后再施2,4-滴丁酯，叶片稍
萎蔫后喷施芸苔素内酯；防治组Ⅱ：施芸苔素内酯5 d后
再施2,4-滴丁酯，叶片稍萎蔫后喷施芸苔素内酯；对照
组：清水。 病害统计方法：使用2,4-滴丁酯10 d以后，分
别剪下各植株的干燥叶片，将干燥叶片和新鲜叶片(去除
叶柄)放置在阴凉处阴干，分析天平称重。 采用“原干燥
叶片重/总干叶片重”表示病害发生程度。
2 结果与讨论
芸苔内酯按说明书剂量使用，考虑生产成本，6-苄氨
基嘌呤只采用10 mg/kg剂量。 从表1可以看出：对于芸苔内
酯应用效果：防治5 d组>防治10 d组>预防5 d组>预防10 d组>
治疗组，各组与对照组相比均达到显著水平；6-苄氨基嘌
呤也显示相似效果，2种植物生长调节剂可以达到“有害预
防，无害增产”的目的，为五味子药害的预防提供了科学
的理论基础。 2,4-滴丁酯主要用于大田玉米4~5叶期和水稻
分蘖期，东北地区基本为5月中下旬，恰为五味子药害的敏
感期，由于农田施药时间较为集中，为五味子药害针对性
预防提供可能。 但由于有效的预防期限仅为10 d左右，对
五味子药害的预防也要适时掌握周围田地的农药使用情况
或采用2次施药防治进行预防。 2种植物生长调节剂防治效
果相近，芸苔内酯使用方便，价格低廉，应用浓度范围较
大，用药安全，可广泛应用五味子栽培。
表1 芸苔内酯和6-苄氨基嘌呤对五味子2,4-滴丁酯药害的预防结果
组别 芸苔素内酯(BR) 6-苄氨基嘌呤(6-BA)
病害干叶重量/g 植株干叶总重量/g 发病程度 病害干叶重量/g 植株干叶总重量/g 发病程度
防治组Ⅰ 42±14 144±32 233±921) 106±182 143±31 308±1971)
防治组Ⅱ 46±19 209±34 179±661) 45±18 236±66 164±631)
预防组Ⅰ 70±24 80±29 461±1221) 68±22 176±152 327±1401)
预防组Ⅱ 64±23 99±25 394±141) 119±175 102±24 431±1801)
治疗组 70±23 80±20 461±1201) 83±35 88±23 480±1221)
对照组 230±313 58±26 634±199
注：1)与对照组相比，差异显著。
2,4-滴丁酯属于于苯氧乙酸类激素除草剂，几乎影
响双子叶植物所有的代谢功能。 五味子受害24 h以后叶
片自叶尖开始沿边缘萎蔫变干，对叶片造成的药害为不
可逆的，光合面积的降低势必严重影响五味子的开花和
坐果。 因此，防止药害的发生是解决五味子药害问题的
最佳途径之一。
芸苔内酯和6-苄氨基嘌呤是2种促进植物生长的植物
生长调节剂。 芸苔内酯为甾体类化合物，具有提高植物
的抗逆性(抗旱性、抗冷抗寒性、抗热性、抗盐性、抗药
性、抗毒性)的作用以及对植物衰老的调节作用，其机理
通过促进新陈代谢、调节含水量、细胞保护酶活性、脯氨
酸累积、光合作用、丙二醛和细胞膜透性等抗逆性指标方
面来实现[2-3]，实践中应用除抗逆性以外还可增加植物叶绿
素含量、提高坐果率等作用，而且使用浓度范围较宽，在
大田农作物中主要应用于花期和花前期，具有较好的增产
效果。 6-苄氨基嘌呤具有细胞分裂素的活性，能够诱导雌
性性状，抑制核酸和蛋白质分解，延缓衰老，近些年来在
农作物中也有较多应用，具有促进植物生长、打破休眠、
促进开花和坐果等效应。 多种农作物应用2种植物生长调节
剂具有较好的增产效果，尤其是在果树中的应用。
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孟祥才，等： 2,4-滴丁酯对五味子药害的防治