全 文 ：3　讨论
脂质体的包封率与被包封药物的性质密切相
关 。因为苦参素是强水溶性药物 ,分布在水相中较
多 ,用普通磷脂包封效果不是很好 ,添加 PEG2000-
DSPE后增加了脂质体的空间稳定性 ,提高了水溶
性药物的包封率 。文献中很少见到苦参素脂质体的
制剂学研究 ,本研究尝试用乙醇注入法制备 Marine-
SSL,制备过程中通入 N2除去乙醇 ,在乙醇挥发的
同时脂质分散进入水相形成脂质体。该法制得的脂
质体粒径适宜 ,工艺简单可行〔3〕 ,且避免了有毒的
有机溶剂 ,适于工业化生产 。
　　研究脂质体电势 ,对于防止脂质体微粒聚集 、融
合 ,以及脂质体与药物之间的作用方面有一定的作
用 。荷电脂质体微粒之间存在斥力 ,能够减少相互
间的聚集和融合 ,增加稳定性。 ξ电位是衡量电荷
多少的一个重要指标 ,当 ε≥30 mV时 ,荷电粒子比
较稳定 ,不易聚集。而对于表面 PEG修饰的微粒 , ε
≥10 mV时荷电粒子稳定〔4〕。本实验中 , Marine-
SSL的电位为(-39.0 ±3.06)mV,表明实验中所
制备的 Marine-SSL是很稳定的 。
　　本实验在传统的乙醇注入法的基础上 ,通过加
入 PEG2000-DSPE,制得了包封率较高 、稳定性较好
的 Marine-SSL。随着 PEG2000-DSPE用量的增加 ,
包封率显著增加 ,从 65.27%到 86.31%。优选得到
的脂质体处方和制备工艺合理 、稳定 ,其体外释放具
有缓释特点 ,脂质体具有较好的稳定性 。本课题将
建立血浆中 HPLC测定苦参素的方法 ,动物体内药
物动力学和体内组织分布实验正在进行中 ,以开发
具有空间稳定和长循环特性的苦参素新型制剂。
参 考 文 献
[ 1] 王新峰 , 李磊 , 韩国柱 .苦参素药理作用的研究进展
[ J] .医药导报 , 2005, 6(6):483-485.
[ 2] MaedaH, FangJ, InuzukiT, etal.Vascularpermeability
enhancementinsolidtumors:variousfactors, mechanisms
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2003, 3(3):319-329.
[ 3] PonsM, FomdadaM, EstelrichJ.Liposomesobtainedby
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[ 4] HeurtaultB, SaulnierP, PechB, etal.Physico-chemical
stabilityofcolloidallipidparticles[ J] .Biomaticrials, 2003,
24:4283-4300.
收稿日期:2010-12-09＊通讯作者:葛发欢 , Tel:13825151042, E-mail:gefahuan@ 163.com。
超临界 CO2 萃取老挝产鸡蛋花挥发油的研究
肖新玉 1 ,崔龙海 1 ,周欣欣1 ,吴　燕 2 ,葛发欢 1, 2＊
(1.广州中医药大学 ,广东 广州 510405;2.中药提取分离过程现代化国家工程研究中心 , 广东 广州
510240)
　　摘要　首次采用正交试验设计对老挝产鸡蛋花挥发油的超临界 CO2萃取工艺提取进行优化 ,并与水蒸气蒸馏
法进行比较 , 得最佳萃取条件为:萃取压力 25MPa, 萃取温度 45 ℃;分离釜 I压力 12 MPa,温度 55 ℃;分离釜Ⅱ压
力 6 MPa,温度 30 ℃,在此工艺条件下的收率为 5.8927%。应用气相色谱-质谱联用技术对鸡蛋花挥发油化学成分
进行鉴定 , 用归一化法测定其相对含量。超临界萃取物主要成分有橙花叔醇 、柳酸苄酯 、邻苯二甲酸二异丁酯等 53
种化学成分 , 其中邻苯二甲酸二异丁酯含量高达 66.11%, 与水蒸气蒸馏法有较大差异。
关键词　鸡蛋花;挥发油;超临界 CO
2
流体萃取法;气相色谱-质谱
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2011)05-0789-06
ResearchoftheEssentialOilofPlumeriarubravar.actifoliafrom
LaosbySupercriticalCarbonDioxideExtraction
XIAOXin-yu1 , CUILong-hai1 , ZHOUXin-xin1 , WUYan2 , GEFa-huan1, 2
(1.GuangzhouUniversityofTCM, Guangzhou510405, China;2.NationalEngineeringResearchCenterforModernizationofExtraction
andSeparationProcessofTCM, Guangzhou510240, China)
Abstract　Theorthogonaltestandthesupercriticalcarbondioxidefluidextractionwereusedforoptimizingtheextractionofthe
·789·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2011.05.040
essentialoilfromPlumeriarubravar.actifoliaforthefirsttime.Comparedwiththesteamdistilation, theoptimaloperationparameterof
extractionwasasfolows:extractionpressure25MPa, extractiontemperature45 ℃;separatorⅠ pressure12 MPa, separatorⅠ tempera-
ture55℃;separatorⅡpressure6MPa, separatorⅡtemperature30 ℃.Underthisconditiontheyieldoftheessentialoilwas5.8927%.
ThecomponentswereseparatedandidentifiedbyGC-MS.53 componentsofPlumeriarubravar.actifoliameasuredbySFEmethod
wereidentifiedanddeterminedbynormalizationmethod.Themaincomponentswere1, 6, 10-dodecatrien-3-ol, 3, 7, 11-trimethyl, benzo-
icacid, 2-hydroxy-, phenylmethylester, 1, 2-benzenedicarboxylicacid, bis(2-methylpropyl)ester, etc..1, 2-Benzenedicarboxylicacid,
bis(2-methylpropyl)este.tookup66.11% ofthetotalamount, andtherewasmuchdifferenceoftheresultsfromSDmethod.
Keywords　PlumeriarubraL.var.actifoliaBailey;Essentialoil;SFE-CO2;GC-MS
　　鸡蛋花是夹竹桃科鸡蛋花属落叶小乔木或灌木
鸡蛋花 PlumeriarubraL.var.actifoliaBailey的花 ,
别名缅桅 、擂捶花 、大季花 、蛋黄花 ,花开五瓣。鸡蛋
花原产南美洲 ,现广泛种植于世界各热带地区 ,我国
广东 、福建 、广西 、云南等地均有栽培 〔1〕。鸡蛋花有
清热利湿 、润肺止咳 、消暑解毒的功效 ,可治湿热下
痢 、里急后重 ,云南西双版纳和广西 、广东一些地方
民间用鸡蛋花作保健茶 , 鸡蛋花也是 “王老吉凉
茶 ”、“和其正 ”凉茶以及香港 “五花茶 ”的主要组成
原料〔2, 3〕。鸡蛋花香气袭人 ,可提取香精作高级化
妆品 、香皂和食品添加剂 。本文首次采用超临界
CO2萃取工艺提取老挝产鸡蛋花挥发油 ,同时应用
气相色谱-质谱联用技术分析其挥发油化学成分 ,为
鸡蛋花的综合开发利用提供科学依据 。
1　仪器与试药
1 L超临界萃取装置(HA-221-50-06),自行设
计 ,由南通华安超临界萃取有限公司公司制造;安捷
伦 GC6890 /5973MS气相色谱-质谱联用仪 ,美国 Ag-
ilent公司;电子天平 , BS200s-WEI,德国 sartorius;所
用 CO2购自广州氮肥厂 ,纯度 >99.9%;所用试剂
均为分析纯 ,水为蒸馏水;鸡蛋花为老挝产鸡蛋花干
花 ,经笔者鉴定为夹竹桃科鸡蛋花属植物鸡蛋花
PlumeriarubraL.var.actifoliaBailey的花。
2　方法
2.1　鸡蛋花挥发油的提取
2.1.1　超临界 CO2萃取鸡蛋花挥发油的正交试验
设计:预试验结果表明 ,超临界 CO2萃取鸡蛋花挥
发油得率远高于传统的水蒸气蒸馏法 ,且影响超临
界萃取鸡蛋花挥发油的主要因素为萃取压力 、萃取
温度 、分离釜 Ⅰ压力 、分离釜 Ⅰ温度。正交设计中 ,
固定药材投料量为 50.0 g,以萃取压力 A、萃取温度
B、分离釜 Ⅰ压力 C、分离釜 Ⅰ温度 D为因素 ,设 3
个水平 ,以 L9(34)正交试验表设计 ,因素水平设计
见表 1。
　　称取一定量经粉碎的鸡蛋花干花 ,投入萃取釜 ,
固定分离釜 Ⅱ压力为 6 MPa、温度为 30 ℃、流量为
30 kg/h,按表 1设定的工艺参数进行萃取 ,待萃取
温度 、压力达到设定值后开始计时 ,动态循环 2h,得
特殊香味的黄色油状浸膏 ,称重 ,计算收率。
　表 1 　超临界萃取正交试验因素水平
水平
因素
萃取压力/MPa 萃取温度/℃
分离釜I压力/MPa
分离釜I温度/℃
1 20 40 9 50
2 25 45 12 55
3 30 50 15 60
2.1.2　水蒸气蒸馏法:称取一定量粉碎的鸡蛋花
干花 ,常压下水蒸气蒸馏 8 h,提取液用适量乙醚萃
取 ,乙醚层用无水硫酸钠除水分后过滤 。滤液减压
蒸除乙醚后 ,获得具有特殊气味的黄色油状物 ,得率
为 0.0916%。
2.2　GC-MS分析条件　色谱柱:安捷伦 HP-5MS
毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:
起始温度 60℃,保持 5min,升温速度 5 ℃/min,达
到 150℃后保持 10min,再以 1℃/min升到 220 ℃,
保持 10 min;分流进样 ,分流比 20∶1,进样口温度
220 ℃。 MS条件:EI离子源 ,电子能量 70 eV,离子
源温度 230 ℃,四极杆温度 150 ℃;GC-MS接口温
度 280 ℃;扫描范围 m/z30 ～ 550。
　表 2 　正交试验结果
实验号 A/MPa B/℃ C/MPa D/℃ 得油率 /%
1 1 1 1 1 0.7340
2 1 2 2 2 5.7310
3 1 3 3 3 1.7316
4 2 1 2 3 3.7710
5 2 2 3 1 5.6390
6 2 3 1 2 0.4844
7 3 1 3 2 4.7628
8 3 2 1 3 1.9496
9 3 3 2 1 2.7248
K1 1.366 1.545 0.527 1.516
K2 1.649 2.219 2.038 1.830
K
3 1.572 0.823 2.022 1.241
R 0.283 1.396 1.511 0.589
·790· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月
3　结果与分析
3.1　正交试验　鸡蛋花超临界 CO2萃取工艺正交
试验结果及方差分析见表 2、3。由表 2可知 ,影响
因素大小顺序为:C>B>D>A,各因素最优的水平
组合为 A2B2C2D2 ,即萃取压力 25 MPa,萃取温度
45 ℃,分离釜 I压力 12MPa,温度 55℃。最佳萃取
工艺条件下 ,萃取率平均值为 5.8927%。
　表 3 　方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 0.128 2 0.064 1.000
B 2.922 2 1.461 22.828 ＊
C 4.518 2 2.259 35.297 ＊
D 0.520 2 0.260 4.063
误差 0.13 2
　　注:F0.05(2, 2)=19.000, ＊P<0.05
3.2　鸡蛋花挥发油化学成分的 GC-MS分析　超临
界 CO2流体萃取法与水蒸气蒸馏法提取的鸡蛋花
挥发油 GC-MS图分别见图 1、2。
　　超临界 CO2萃取物鉴定出 53种化合物 ,水蒸
气蒸馏法提取物鉴定出 72种化合物。鉴定方法采
用计算机数据系统检索 ,综合分析鉴定结构 ,峰面积
归一化法计算各化合物相对含量 ,结果见表 4。
图 1　鸡蛋花超临界 CO2萃取物 GC-MS图谱
图 2　鸡蛋花水蒸气蒸馏物 GC-MS图谱
　　表 4 鸡蛋花超临界 CO2萃取法和水蒸气蒸馏法挥发油化学成分
编号 化合物
超临界 CO2萃取
分子式 相对含量 /%
水蒸气蒸馏
分子式 相对含量 /%
1 3, 7-二甲基-1, 3, 7-辛三烯 C10H16 0.01
2 1, 3-二甲基金刚烷 C10H20 0.02
3 苯甲醛 　　 　　 C7H60 0.21
4 壬酸 C9H18O2 0.05 　　
5 ＊氧化芳樟醇 C10H18O2 2.84 　　
6 芳樟醇 　　 　　 C10H18O 9.91
7 玫瑰醚 　　 　　 C10H18O 0.08
8 波斯菊萜 　　 　　 C10H14 0.07
9 3, 5-二叔丁基苯酚 C14H22O 0.02 　　
10 反式-橙花叔醇 C15H26O 0.38 　　
11 alpha-松油醇 　　 　　 C10H18O 2.28
12 ＊十六烷 C16H34 0.39 　　
13 1, 5, 6-四甲基二氢茚 　　 　　 C13H18 0.22
14 8-十七碳烯 C17H34 0.34 　　
15 香芹聪醇 　　 　　 C10H16O 0.17
16 橙花醇 　　 　　 C10H18O 1.01
17 (R)-(+)-beta-香茅醇 　　 　　 C10H20O 2.09
18 橙花醛 　　 　　 C10H16O 0.51
19 ＊正十七烷 C17H36 0.14 　+ 2.16
·791·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月
续表
编号 化合物
超临界 CO2萃取
分子式 相对含量 /%
水蒸气蒸馏
分子式 相对含量 /%
20 香叶醇 　　 　　 C10H18O 3.37
21 柠檬醛 　　 　　 C10H16O 1.01
22 3, 7, 11-三甲基-2, 6, 10-十二烷三烯醛 C15H24O 0.56 　　
23 3, 5-二叔丁基-4-羟基苯甲醛 C15H22O2 0.09 　　
24 ＊金合欢醇 C15H26O 0.29 　+ 7.72
25 肉豆蔻酸乙酯 C16H32O2 0.17 　　
26 1, 1, 6-三甲基-1, 2-二氢萘 　　 　　 C13H16 0.05
27 垅牛儿酸 　　 　　 C10H16O2 2.39
28 植酮 C18H36O 0.21 　+ 0.35
29 2, 4, 6-三叔丁基苯酚 C18H30O 0.08 　　
30 垅牛儿基垅牛儿醇 　　 　　 C20H34O 0.09
31 柳酸苄酯 C14H12O3 1.26 　+ 4.15
32 邻苯二甲酸二异丁酯 C16H22O4 66.11 　+ 1.37
33 香叶基丙酮 　　 　　 C13H22O 0.30
34 β-金合欢烯 　　 　　 C15H24 0.13
35 ＊十九碳烯 C19H38 0.27 　+ 2.19
36 3-甲基-3H-萘-(1, 2-E)-吲哚-10-醇 C17H13NO 0.06 　　
37 正十九烷 C19H40 1.95 　+ 1.05
38 邻苯二甲酸二丁酯 C16H22O4 0.31 　　
39 β-甜没药烯 　　 　　 C15H24 0.09
40 α-金合欢烯 　　 　　 C15H24 0.11
41 法尼基丙酮 C18H30O 0.22 　+ 0.62
42 3, 7-二甲基-6-辛烯-1-醇乙酸酯 C12H22O2 0.15 　　
43 棕榈酸甲酯 C17H34O2 0.15 　　
44 异水菖蒲烯 　　 　　 　- 0.11
45 3, 7, 11, 15-四甲基-1-十六碳烯-3-醇 C20H40O 0.20 　　
46 柏木脑 　　 　　 C15H60 0.24
47 1-十八烷烯 C18H36 0.15 　　
48 1-氨基-4-羟基蒽醌 C14H9NO3 0.06 　　
49 顺式一三甲基甲酸 　　 　　 　- 0.08
50 正二十烷 C20H42 0.43 　+ 0.22
51 十五烯 　　 　　 C15H30 0.25
52 ＊红没药醇 　　 　　 C15H26O 0.74
53 十五烷酸 C15H30O2 0.12 　　
54 2, 3-二氢金合欢醇 　　 　　 C15H28O 0.36
55 反式-金合欢醛 　　 　　 C15H24O 1.91
56 橙花叔醇 C15H26O 1.16 　+ 9.12
57 ＊棕榈酸 C16H32O2 0.05 　+ 2.76
58 (E)-丁酸-3, 7-二甲基-2, 6-辛二烯酯 C14H24O2 0.20 　　
·792· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月
续表
编号 化合物
超临界 CO2萃取
分子式 相对含量 /%
水蒸气蒸馏
分子式 相对含量 /%
59 苯甲酸苄酯 　　 　　 C14H12O2 0.55
60 肉豆蔻酸 　　 　　 C14H28O2 0.33
61 十八烷 　　 　　 C18H38 0.19
62 亚油酸甲酯 C19H34O2 0.08 　+ 0.27
63 正二十一烷 C21H44 3.97 　+ 2.77
64 正十九烷 　　 　　 C19H40 1.05
65 13-十四烷二烯醋酸盐 C14H26 0.28 　　
66 亚油酸乙酯 C20H36O2 0.87 　+ 0.23
67 14-甲基十五烷酸甲酯 　　 　　 C17H34O2 0.29
68 丙酸叶醇酯 　　 　　 C13H22O2 0.23
69 硬脂酸 　　 　　 C16H32O2 0.94
70 油酸乙酯 C20H38O2 0.71 　　
71 S-(Z)-3, 7, 11-三甲基-1, 6, 10-十二烷三烯-3-醇 　　 　　 C15H26O 3.58
72 惹烯 C18H18 0.16 　　
73 ＊ 1-二十烯 　　 　　 C20H40 0.46
74 二十酸 C20H40O2 0.06 　　
75 正二十二烷 C22H46 0.16 　　
76 1-氯-十九烷 　　 　　 C19H39Cl 0.32
77 十四醛三聚物 C14H28O 0.29 　　
78 1, 13-十四烷二烯 　　 　　 C14H26 0.49
79 (E)-3-二十碳烯 　　 　　 C20H20 0.17
80 1, 19-二十碳烯 　　 　　 C20H38 0.46
81 顺式-9-二十三烯 C23H46 0.12 　+ 0.12
82 正二十四烷 C24H50 1.31 　+ 0.12
83 ＊木蜡酸甲酯 C25H50O2 0.88 　　
84 正三十四烷 C34H70 0.09 　　
85 9-甲基十九烷 　　 　　 C20H42 0.18
86 1, 2-二甲基环十六烷 　　 　　 　- 0.36
87 正二十七烷 C27H56 0.37 　+ 0.41
88 正二十烷 C20H42 0.15 　+ 0.22
89 角鲨烯 C30H50 1.16 　+ 3.22
　　注:＊表示同分异构体化合物的总称 ,其相对峰面积为总量;+共有成分;-表示无共有成分 ,或尚查找不到分子式的化合物
4　小结与讨论
　　通过实验研究 ,超临界 CO2流体萃取鸡蛋花挥
发油的最佳工艺条件为:萃取压力 25 MPa,萃取温
度 45 ℃, 分离釜 I压力 12 MPa, 分离釜 I温度
55 ℃。在此条件 下萃取物 得率的平 均值为
5.8927%,远远高出水蒸气蒸馏法提取物的得率
(0.0916%)。
本文所用鸡蛋花为老挝产鸡蛋花 ,超临界萃取
物的 GC-MS分析鉴定出 53种成分 ,其中主要芳香
成分为橙花叔醇 、柳酸苄酯 、邻苯二甲酸二异丁酯
等 ,两种提取方法的收集物均含有较多量的芳香酯
类和脂肪醇类化合物 ,水蒸气蒸馏法的相对较高 ,但
超临界萃取物中分子量较大的酯类成分相对含量却
很高 ,其中邻苯二甲酸二异丁酯含量高达 66.11%。
另外还分离鉴定广泛应用于化妆品 、医药 、食品行业
的重要生物活性物质 ———角鲨烯 〔4〕。这与林敬明
等〔3〕报道的国产鸡蛋花挥发油化学成分有差异 ,这
可能是因为老挝产鸡蛋花与国产鸡蛋花产地不同所
·793·JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月
致 ,有待进一步研究。
参 考 文 献
[ 1] 林秀香 .鸡蛋花及其栽培技术 [ J] .广西农业科学 ,
2006, 37(2):194-195.
[ 2] 高尚士 .南国奇葩鸡蛋花 [ J] .国土绿化 , 2004, (12):
35.
[ 3] 林敬明 , 许寅超 , 冯飞跃 , 等 .鸡蛋花超临界萃取物的
GC-MS分析 [ J] .中药材 , 2002, 24(4):276-277.
[ 4] 官波 , 郑文诚 .角鲨烯提取 、纯化及其应用 [ J] .粮食与
油脂 , 2010, (2):44-46.
收稿日期:2010-12-08作者简介:胡娟(1981-),女 ,硕士 ,助教 ,主要从事药物化学方向及药物分离纯化研究;Tel:13880598357, E-mail:sisly8@ 163.com。
枇杷花总三萜提取工艺研究
胡　娟 1, 2 ,黄　欢 2, 3 ,张　宏 2 ,杨必坤 2
(1.四川广播电视大学 ,四川 成都 610073;2.四川师范大学生命科学学院 ,四川 成都 610068;3.成都地
奥集团 ,四川 成都 610073)
　　摘要　目的:优化枇杷花总三萜提取工艺。方法:以总三萜为考察指标 ,通过单因素及 L9(34)正交试验优选枇
杷花总三萜的提取工艺。结果:确定在 40℃、超声功率 800 W、超声间歇时间为 10/3s条件下 , 以 1∶12的料液比提
取 2次 , 每次 15 min为最佳提取条件。结论:本实验采用的方法和指标适合于枇杷花总三萜的提取 , 为将其开发成
为现代中药成方制剂提供了科学依据。
关键词　枇杷花;总三萜;超声波提取
中图分类号:R944.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2011)05-0794-04
　　枇杷花为蔷薇科枇杷属植物枇杷 Eriobotryaja-
ponica(Thunb.)Lindl的干燥花蕾及花序 ,在我国浙
江 、江苏 、四川 、广西等地大规模种植 。枇杷花主要
含有黄酮类 〔1〕、三萜化合物类 、半萜类 、多酚类 、糖
苷类及挥发油。目前 ,枇杷花中含有的三萜酸类 〔2〕
物质因具有多种生物活性而成为研究热点 。本课题
组研究发现枇杷花中富含熊果酸 、齐墩果酸 〔3〕等三
萜类化合物 。本实验采用超声波提取法从枇杷花中
提取总三萜化合物 ,并确定了其最佳工艺条件 ,为枇
杷花三萜类化合物的应用奠定了理论基础 。
1　材料与仪器
1.1　材料　枇杷花采自四川浦江 ,由四川师范大
学生命科学学院植物教研室鉴定为啬薇科枇杷属植
物枇杷 Eriobotryajaponica(Thunb.)Lindl的花 。熊
果酸对照品(批号:10742-200516)由中国药品生物
制品检定所提供 。
1.2　仪器　紫外 -可见分光光度计(日本岛津 UV-
1700);高速中药粉碎机(山东青州市精诚机械有限
公司 , WK21000A型);双频多用途恒温超声提取机
(北京弘祥隆生物技术开发有限公司 , SYR-2000
型);数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司 , KQ5200DE型)。
2　方法
2.1　总三萜的测定方法
2.1.1　枇杷花总三萜的含量测定:枇杷花总三萜
含量测定的常规方法 〔4〕是以熊果酸等三萜化合物
为对照品 ,用冰醋酸-香草醛和高氯酸为显色剂 ,用
紫外 -可见分光光度计法测定总三萜的含量 。
2.1.2　枇杷花总三萜标准曲线的绘制:取熊果酸
对照品 2.635 mg,定容于 25 mL乙酸乙酯中 ,混合
均匀得标准溶液。分别吸取 0.00、 0.10、 0.20、
0.40、0.60、0.80、1.00和 1.20 mL标准溶液 ,水浴
蒸干后加入 0.40mL5%香草醛-冰乙酸溶液和 1.00
mL高氯酸 ,于 60℃水浴中加热 15 min后移入冰水
浴中 ,再加入 5.00 mL冰乙酸 ,摇匀后置于室温 。 15
min后用紫外 -可见分光光度计在 548 nm波长下测
定其吸光度 ,根据测定结果绘制标准曲线。熊果酸
在 0 ～ 2.6 mg范围内与吸光度值呈良好的线性关
系 ,其线性回归方程为 Y=0.0338X+2.4286,相关
系数 r=0.9996。
2.1.3　样品含量测定:精密量取供试液 1.0mL,按
“2.1.2”项方法测定 ,外标两点法计算总三萜含量。
2.2　总三萜的提取方法
2.2.1　单因素样品制备:精密称取枇杷花样品 5.0
·794· JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 34卷第 5期 2011年 5月