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海南山苦茶提取物对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响



全 文 :网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/46.1049.R.20120314.1036.002.html
[收稿日期]2012-03-06  [修回日期]2012-04-20  网络出版时间:2012-04-24 10:36
[基金项目]国家自然科学基金(30060088)
[作者简介]刘月丽 (1980-),女,河南上蔡人,讲师,硕士,电话:13617547436,电子信箱:lyl20041981@126.com。
[通讯作者]黄奕弟 (1981-),男,海南文昌人,助理实验师,电话:13976646630,电子信箱:huangyidi1981@yahoo.cn。
海南山苦茶提取物对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响
刘月丽,黄奕弟2,林连波1
(海南医学院1.药学院,2.理学院,海南 海口 571199)
  [摘要]目的:研究海南山苦茶提取物对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响。方法:120只小鼠随机分
为正常组、模型组、阳性药组(维生素E)及海南山苦茶高、中、低剂量组,除正常组外,其余各组小鼠颈背
部皮下注射D-半乳糖120mg/kg,连续8周,诱导衰老模型;同时,阳性药组小鼠灌胃给予维生素E 50
mg/kg,海南山苦茶高、中、低剂量组小鼠分别灌胃给予81、57、40mg/kg海南山苦茶提取物,正常组和
模型组小鼠灌胃给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠。8周后,处死小鼠,取脑组织,匀浆,测定脑组织
中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性以及丙二醛
(MDA)的含量。结果:模型组小鼠MDA含量较正常组明显升高(P<0.01),SOD、CAT、GSH-px活性
较正常组明显降低(P<0.01);维生素E组和山苦茶提取物高、中、低剂量组小鼠的 MDA含量较模型
组明显降低(P<0.01),CAT活性较模型组明显升高(P<0.01),山苦茶提取物高、中剂量组SOD和
GSH-px活性较模型组明显升高(P<0.01)。结论:海南山苦茶提取物能够提高衰老小鼠脑组织的抗
氧化能力。
[关键词]山苦茶;提取物;衰老;抗氧化
[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1007-1237(2012)07-0872-03
Efect of leave extract of Malotus furetianus cultivated in Hainan Island on anti-oxidation ca-
pacity in brain tissue of aging mice
LIU Yue-li 1,HUANG Yi-di 2,LIN Lian-bo1
(1.Pharmacy School of Hainan Medical University,Haikou571199;2.Science School of Hainan
Medical University,Haikou 571199)
[Foundation Project]:Fund supported by national natural science foundation of China(30060088)
[Author]:LIU Yue-li (1980-),Female,Shangcai Henan,Lecturer,M.M.Tel:13617547436,
Email:lyl20041981@126.com.
[Correspondence to]:Huang Yi-di(1981-),Male,Wenchang Hainan,assistant experimenter,M.
B.Tel:13976646630,Email:huangyidi1981@yahoo.cn.
Received:2012-03-06  Revised:2012-04-20  JHMC,2012;18(7):872-874
View from specialist:It is creative,and of certain scientific and educational value.
[ABSTRACT]Objective:To study effect of leave extract of Mallotus furetianus cultivated in Hainan
Island on anti-oxidation capacity in brain tissue of aging mice.Methods:Aging mice model was established
by injecting D-galactase 120mg/kg subcutaneously,leave extract of Mallotus furetianus was given at dif-
ferent concentration.After 8weeks,the mice were sacrificed to investigate activities of superoxide dis-
mutase(SOD),catalase(CAT),glutathione peroxidase(GSH-px)and the amount of malonaldehyde
(MDA)in brain tissue.Results:Leave extract of Mallotus furetianus could increase activities of SOD,
CAT,GSH-px and reduce amount of MDA.Conclusions:Leave extract of Mallotus furetianus can en-
278  
海南医学院学报 2012,18(7)
Journal of Hainan Medical University
DOI:10.13210/j.cnki.jhmu.2012.07.005
hance anti-oxidation capacity in brain tissue of aging mice.
[KEY WORDS]Mallotus furetianus;Leave extract;Aging;Anti-oxidation
   海南山苦茶 [Mallotus Furetianus(Baill)
Muell-Arg]为大戟科野桐属植物,又称为“鹧鸪茶、
禾姑茶、毛茶”,因其香味浓郁,又具有“清热解毒、利
胆消食”的作用,海南民间将其作为节日期间解油
腻、助消化的饮品[1]。Wei等[2]发现海南山苦茶叶
中富含多酚类物质,已知植物的抗氧化能力与多酚
的含量有直接的关系,本文主要探讨海南山苦茶对
D-半乳糖诱导的衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影
响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 健康雌性昆明种小鼠120只,体重
25~35g,由湖南省实验动物中心提供,许可证号:
SCXK(湘)2009-0012。
1.1.2 药品与仪器 海南山苦茶提取物由海南医
学院化学教研室提供;维生素E(上海金伴药业有限
公司);D-半乳糖(Amresco公司);羧甲基纤维素钠
(上海黄河制药厂);721分光光度计(上海第三仪器
分析仪器厂);TGL-16G台式高速冷冻离心机(上海
安亭科学仪器厂);LXJ-Ⅱ型高速离心机(上海医用
分析仪器厂)。
1.1.3 试剂 过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、
考马斯亮兰蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH-px)测定试剂盒,均由南京建
成生物工程研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 动物分组、模型建立与给药 小鼠按体重随
机分为正常组、模型组、阳性药组(维生素E)及海南
山苦茶高、中、低剂量组,除正常组外,其余各组小鼠
颈背部皮下注射D-半乳糖120mg/kg,连续8周,
诱导衰老模型[3];同时,阳性药组小鼠灌胃给予维生
素E 50mg/kg,海南山苦茶高、中、低剂量组小鼠分
别灌胃给予81、57、40mg/kg海南山苦茶提取物,
正常组和模型组小鼠灌胃给予等体积的0.5%羧甲
基纤维素钠。
1.2.2 指标检测 8周后,处死小鼠,迅速取出脑
组织,准确称取0.2g脑组织,冰冻生理盐水洗去血
污,制成10%的组织匀浆,3 000r/min离心10
min,取上清,硫代巴比妥法测定 MDA含量,黄嘌呤
氧化酶法测定SOD活性,可见光法测CAT活性,
NADPH偶联法测定GSH-px活性,具体检测方法
根据试剂盒说明进行。
1.3 统计学处理
数据以珚x±s表示,用SPSS13.0统计软件包进
行单因素方差分析,方差齐时,用LSD法,方差不齐
时用Tamhane′s T2法,P<0.05为差异有统计学
意义。
2 结果
模型组小鼠 MDA含量较正常组明显升高(P
<0.01),SOD、CAT、GSH-px活性较正常组明显降
低(P<0.01);维生素E组和山苦茶提取物高、中、
低剂量组小鼠的 MDA含量较模型组明显降低(P
<0.01),CAT活性较模型组明显升高(P<0.01),
山苦茶提取物高、中剂量组SOD和GSH-px活性较
模型组明显升高(P<0.01),见表1。
表1 海南山苦茶提取物对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响 (珚x±s)
组别 n
MDA
(nmol/mgprot)
SOD
(U/mgprot)
CAT
(U/mgprot)
GSH-PX
(U/mgprot)
正常组 20  4.25±0.46  42.85±4.69  9.27±0.54  132.70±9.04
模型组 20  5.18±0.32△ 35.70±3.71△ 5.90±1.03△ 111.30±7.26△
维生素E组 20  4.70±0.23* 43.90±2.69* 9.16±0.93* 118.90±5.64*
海南山苦茶高剂量组 20  4.09±0.15* 42.05±3.03* 9.90±0.80* 128.90±6.57*
海南山苦茶中剂量组 20  4.61±0.16* 40.35±3.66* 9.64±0.64* 120.80±5.64*
海南山苦茶低剂量组 20  4.90±0.31* 37.40±3.07  8.57±0.76* 116.55±4.07
   注:与正常组比较,△P<0.01;与模型组比较,*P<0.01。
3 讨论
山苦茶在海南省广泛分布,其野生植株多分布
在沿海山丘,以文昌铜鼓岭和万宁东山岭最为有名。
现代研究发现山苦茶提取物具有较强的清除氧自由
基、降血脂和维持动脉内皮功能、防治动脉粥样硬化
的作用[4,5]。
根据衰老的氧自由基学说,氧自由基产生增多
和机体抗氧化能力降低可以导致衰老。本研究通过
皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,8周后,小鼠出现
脱毛、行动迟缓、学习记忆能力减退等衰老的表
现[6]。D-半乳糖是正常的生理性物质,过量时可生
成过氧化氢或半乳糖醇,过氧化氢可以产生超氧阴
378刘月丽等.海南山苦茶提取物对衰老小鼠脑组织抗氧化能力的影响 
离子自由基,导致氧化应激;半乳糖醇不能在体内代
谢,可以导致细胞肿胀、线粒体功能障碍,导致衰
老[7,8]。
预防性灌胃给予衰老小鼠不同剂量的山苦茶提
取物,8周后,检测衰老小鼠脑组织抗氧化能力和脂
质过氧化产物 MDA的量。结果表明山苦茶提取物
高、中、低剂量均能减少衰老小鼠 MDA的产生量,
提高CAT的活性;山苦茶提取物的高、中剂量能够
显著提高SOD和GSH-px的活性。
山苦茶提取物富含多酚类物质,能够清除自由
基,提高抗氧化酶的活性,前期研究发现山苦茶提取
物可以改善衰老小鼠的学习记忆能力[6],这可能与
其提高衰老小鼠脑组织的抗氧化能力有关。
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(上接第871页)
  本研究为CCK促进坐骨神经再生提供了实验依据,进
一步从坐骨神经功能指数、组织学、腓肠肌湿重的恢复率等
方面进行较全面的观察、评价CCK对于大鼠坐骨神经再生
的作用,以及究竟多大剂量最有利于神经的保护和恢复,这
些研究有很好的现实意义。
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