免费文献传递   相关文献

金球桧挥发油成分的GC-MS分析



全 文 :第 42 卷 第 4 期
2 0 1 5年 1 2月
福 建 林 业 科 技
Jour of Fujian Forestry Sci and Tech
Vol. 42 No. 4
Dec.,2 0 1 5
doi:10. 13428 / j. cnki. fjlk. 2015. 04. 021
金球桧挥发油成分的 GC -MS分析
林 立,金华玖,岑佳乐,付 涛
(宁波城市职业技术学院、宁波市园林植物开发重点实验室,浙江 宁波 315502)
摘要:采用水蒸气蒸馏法提取金球桧叶片挥发油,利用 GC - MS 联用技术结合化学计量方法对其化学成分进行分析和鉴
定,用面积归一法测定各组分的相对质量分数,并对该挥发油抑制大肠杆菌效果进行研究。结果表明:金球桧挥发油中共
检出了 46 种化学成分,以烯萜类化合物为主,相对含量占总成分的 98. 75%。挥发油中含量较高的成分有香桧烯
(16. 88%)、松油烯-4-醇(9. 84%)、D-柠檬烯(7. 38%)、δ-杜松烯(7. 45%)和乙酸龙脑酯(7. 33%)等,其中一些成分是医药
或化工行业的重要原料。该研究未发现金球桧挥发油对大肠杆菌有抑制作用。本研究结果可为进一步开发利用金球桧资
源提供参考。
关键词:金球桧;挥发油;化学成分;气相色谱 -质谱(GC - MS)
中图分类号:S791. 44;Q946. 8 文献标识码:A 文章编号:1002 - 7351(2015)04 - 0098 - 04
Chemical Constituents of Essential Oil from Sabina chinensis Ant. cv. Aureoglobosa by GC -MS
LIN Li,JIN Hua-jiu,CEN Jia-le,FU Tao
(Ningbo City College of Vocational Technology,Ningbo Key Laboratory of Landscape Plant Development,
Ningbo 315502,Zhejiang,China)
Abstract:The essential oils of Sabina chinensis Ant. cv. Aureoglobosa were obtained by hydrodistillation from fresh leaves,which
were analyzed by gaschromatography mass spectrometry (GC - MS) ,and the relative content of each component was determined by
area normalization. Escherichia coli were used for testing the sterilization and bacteriostasis of the essential oils. The result showed
that totally 46 compounds were indentified,comprising 98. 75% of the total oil,and most of which were ene and terpenoids. The rela-
tive content of some constituents were high,such as sabinene,terpinen-4-ol,D-limonene,δ-cadinene and bornyl acetate,accounting
for 16. 88%,9. 84%,7. 38%,7. 45% and 7. 33% of the total compositions,and some consitituents of the essential oils were valua-
ble for pharmaceutical and for the production of spices. we have not found that the essential oils have good effect of the sterilization
and bacteriostasis on Escherichia coli. Our analysis on the compositions and their relative contents of essential oils in this species,
which would build foundation for further utilization of this plant.
Key words:Sabina chinensis Ant. cv. Aureoglobosa;essential oil;chemical constituents;GC - MS
挥发油又称精油,是植物体分泌的一类具有芳香气味的、在常温下能挥发的油状液体的总称。其组成
成分复杂,一般以萜类化合物最为常见,有些还含有脂肪族化合物和小分子芳香族化合物[1]。据调查,我
国有 56 科 136 属植物含挥发油,其中菊科(Asteraceae)、芸香科(Rutaceae)、樟科(Lauraceae)、唇形科
(Lamiaceae)、柏科(Cupressaceae)等植物中含量较丰富[2]。挥发油一般存在于植物的腺毛、油室、油管、分
泌细胞或树脂道中,大多数以油滴状存在,也有些与树脂、粘液质共同存在。目前,许多植物的挥发油已被
应用于医药、化工、香料、生物杀虫剂和保健品等多种行业,显示出了具大的市场应用价值[3 - 4]。今后,更
多植物种类挥发油的研究和开发工作也将会是生物学研究领域的重要内容之一。
金球桧(Sabina chinensis Ant. cv. Aureoglobosa)又名金球柏或五彩柏,隶属于圆柏属(Sabina) ,为圆柏
(S. chinensis)的栽培变种。该植物为小型灌木,具有异性叶,叶片初为金黄色后渐变为绿色,是园林绿化
中常见的植物种类。目前,有关柏科植物的研究报道主要集中于栽培管理、园林造景等方面[5],也有少量
研究表明一些柏科植物的挥发油含有一些抑菌、杀虫或具有药用价值的成分[6 - 8],但相关研究涉及的柏科
收稿日期:2014 - 11 - 03;修回日期:2015 - 01 - 03
基金项目:宁波城市职业技术学院校内科研青年专项 A类课题(ZZX13034)
作者简介:林立(1985—) ,男,浙江丽水人,宁波城市职业技术学院助理实验师,博士研究生,从事植物生物化学与分子
生物学研究。E-mail:linli851111@ 126. com。
第 4 期 林立,等:金球桧挥发油成分的 GC - MS分析
植物种类有限,并且许多挥发油成分未被鉴定。本研究拟对华东地区常见柏树种类———金球桧的挥发油
进行成分和含量分析,为该植物在医药以及城市保健型绿化林建设等方面的利用提供参考。
1 材料与方法
1. 1 材料、仪器和试剂
材料:2014 年 8 月于宁波奉化市采集金球桧叶片为试验材料,剪切后备用。仪器:7890A /5977 型
GC - MS联用仪(美国 Agilent公司生产)。试剂:无水硫酸钠(AR) ,乙酸乙酯(HPLC)。
1. 2 方法
1. 2. 1 挥发油的提取 根据《中国药典》2005 年版一部附录 XD挥发油测定甲法[9],准确称取 500 g切碎
叶片于 1000 mL圆底烧瓶中进行水蒸气蒸馏,得到具有特殊香味的黄色油状液体,重复 2 次后混合所得液
体。称取挥发油质量,计算收油率:收油率 =挥发油质量 /叶片总质量 × 100%。
1. 2. 2 GC - MS条件
1)气相色谱条件:色谱柱为 HP-5MS毛细石英柱(30 m × 0. 25 mm × 0. 25 μm) ;GC 自动进样器,进样
量为 1. 0 μL,分流比 5∶1;载气为高纯氦气,恒流速度为 1. 2 mL·min -1;进样口、连接口温度 250 ℃;柱温
初始温度为 40 ℃,以 4 ℃·min -1的速度升至 140 ℃,保持 2 min,再以 2 ℃·min -1的速度升到 225 ℃,保
持 5 min。
2)质谱条件:离子源 EI;电离能 70 eV;离子源温度 230 ℃;四极杆温度 150 ℃;质量扫描范围 15 ~ 500
amu;溶剂延迟时间为 1. 0 min。通过工作站的 NIST 08 图谱库进行初步检索,结合相关研究[8,10]确定化合
物成分,根据峰面积归一化法计算每种成分的相对含量。
1. 2. 3 挥发油的抑菌试验 用滤纸法进行大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌试验。在装有 LB 培养基的无
菌培养皿中倒入 200 μL预培养 2 h的大肠杆菌菌液,用无菌玻璃珠摇动使菌液在 LB 培养基表明均匀分
布,后分别放入浸有挥发油和无菌水的 1 cm直径圆形滤纸,放入 37 ℃人工气候箱中培养 10 h 后观察菌
落生长状况。实验所需用品都经过高压灭菌处理。
2 结果与分析
2. 1 挥发油收油率
水蒸气蒸馏方法提取金球桧的得油率达 0. 36%,表明该方法适用于提取柏科植物的挥发油。
2. 2 挥发油成分分析
根据金球桧总离子流图鉴定了 46 种化合物(表 1) ,检出成分含量占总成分的 98. 75%,主要为烯烃
类,有 31 种。其它化合物种类有醇类(9 种)、酯类(2 种)、酸(1 种)、酚(2 种)和酮(1 种)。进一步分析
各成分的化学结构,表明各成分基本上都属于萜类化合物,其中半萜类 1 种(相对含量 1. 56%) ,单萜类 21
种(相对含量 60. 96%) ,倍半萜类 21 种(相对含量 34. 97%) ,二萜类 2 种(相对含量 0. 35%) ,只有 4,14-
Retro-retinol不属于萜类,表明金球桧挥发油主要以单萜类和倍半萜类为主,相对含量达 95. 93%。图 1 为
金球桧总离子色谱图。
图 1 金球桧挥发油的总离子色谱图
·99·
福 建 林 业 科 技 第 42 卷
对金球桧挥发油中各成分的含量进行分析,发现其中含量最高的是香桧烯(16. 88%) ,其次是松油烯-
4-醇(9. 84%)和 δ-杜松烯(7. 45%)。其余相对含量大于 1% 的有:3-己烯-1-醇(1. 56%)、β-蒎烯
(3. 72%)、D-柠檬烯(7. 38%)、γ-松油烯(1. 19%)、乙酸芳樟酯(2. 19%)、乙酸龙脑酯(7. 33%)、丁香油
酚(1. 28%)、甲基丁香油酚(6. 08%)、β-荜澄茄油烯(2. 03%)、α-依兰油烯(1. 10%)、γ-杜松烯(1. 12%)、β-
榄香烯(4. 39%)、异喇叭烯(4. 40%)、雪松醇(3. 32%)和香榧醇(5. 92%)等 15种。
表 1 金球桧挥发油的分析结果
编号 保留时间 /min 化合物 相对含量 /% 分子式 分子量
1 7. 832 3-己烯-1-醇 1. 56 C6H12O 100
2 10. 713 β-侧柏烯 0. 32 C10H16 136
3 10. 941 α-蒎烯 0. 45 C10H16 136
4 12. 682 香桧烯 16. 88 C10H16 136
5 13. 494 β-蒎烯 3. 72 C10H16 136
6 14. 445 顺式-4-蒈烯 0. 57 C10H16 136
7 14. 951 D-柠檬烯 7. 38 C10H16 136
8 15. 830 α-罗勒烯 0. 63 C10H16 136
9 16. 186 γ-松油烯 1. 19 C10H16 136
10 16. 492 β-松油烯 0. 33 C10H16 136
11 17. 348 α-松油烯 0. 82 C10H16 136
12 17. 710 3-蒈烯 0. 38 C10H16 136
13 17. 865 乙酸芳樟酯 2. 19 C11H18O2 182
14 18. 555 3-甲基-3-丁烯基-异戊酸 0. 26 C10H18O2 170
15 19. 312 β-水芹烯 0. 38 C10H16 136
16 20. 290 龙脑 0. 31 C10H18O 154
17 20. 774 松油烯-4-醇 9. 84 C10H18O 154
18 21. 242 α-松油醇 0. 42 C10H18O 154
19 21. 870 檀香三烯 0. 20 C10H16 136
20 24. 668 乙酸龙脑酯 7. 33 C12H20O2 196
21 27. 048 丁香油酚 1. 28 C10H12O2 164
22 28. 188 γ-古芸烯 0. 18 C15H24 204
23 28. 628 甲基丁香油酚 6. 08 C11H14O2 178
24 29. 051 异丁子香烯 0. 30 C15H24 204
25 30. 124 蛇麻烯 0. 19 C15H24 204
26 30. 892 γ-依兰油烯 0. 25 C15H24 204
27 31. 053 β-荜澄茄油烯 2. 03 C15H24 204
28 31. 520 α-古巴烯 0. 37 C15H24 204
29 31. 743 α-依兰油烯 1. 10 C15H24 204
30 32. 260 γ-杜松烯 1. 12 C15H24 204
31 32. 655 δ-杜松烯 7. 45 C15H24 204
32 33. 161 α-杜松烯 0. 29 C15H24 204
33 33. 650 β-榄香烯 4. 39 C15H24 204
34 33. 917 别香橙烯 0. 81 C15H24 204
35 34. 690 异喇叭烯 4. 40 C15H24 204
36 35. 180 瓦伦烯 0. 32 C15H24 204
37 36. 064 异水菖蒲酮 0. 77 C15H24O 220
38 36. 993 γ-桉叶醇 0. 34 C15H24 204
39 37. 460 δ-雪松醇 3. 32 C15H26O 222
·001·
第 4 期 林立,等:金球桧挥发油成分的 GC - MS分析
表 1(续)
编号 保留时间 /min 化合物 相对含量 /% 分子式 分子量
40 37. 766 α-菖蒲醇 0. 22 C15H24 204
41 38. 028 香榧醇 5. 92 C15H24 204
42 38. 556 α-布藜烯 0. 98 C15H24 204
43 39. 501 柏木烯 0. 22 C15H24 204
44 51. 404 阿替西烯 0. 18 C20H32 272
45 56. 610 贝叶烯 0. 17 C20H32 272
46 65. 359 4,14-Retro-retinol 0. 91 C19H26O2 286
“+”、“ -”分别为滤纸浸有挥发
油、无菌水
图 2 大肠杆菌抑菌实验图片
2. 3 金球桧挥发油对大肠杆菌的抑菌效果
一些研究表明柏科植物挥发油具有较好的抑菌作用,但不同植物
对细菌的抑制作用具有物种差异性[7]。本实验中浸有金球桧挥发油的
滤纸与浸有无菌水的滤纸其边缘大肠杆菌菌落结构相似,未见明显差
异(图 2) ,表明金球桧挥发油对大肠杆菌的生长无抑制效果。
3 结论与讨论
研究结果显示,使用水蒸气蒸馏,具有提取时间短、操作简单等优
点。提取的金球桧的挥发油具有化合物组成比较简单、成分相对含量
差异大、化合物以烯萜类为主的特点。鉴定的 46 种化合物中包含了多
种药用成分,如龙脑,具有去翳明目、消肿止痛、提神名目等作用;D-柠
檬烯具有良好的祛痰、镇咳效果[11];β-榄香烯具有一定的抗肿瘤药
性[12];依兰油烯是三七、田七、金银花等药用植物的重要成分。其中也
含有一些抑菌成分,如乙酸龙脑酯、α-菖蒲醇、β-水芹烯等,杀菌、杀虫
效果明显[13]。香桧烯、乙酸芳樟酯、松油烯-4-醇等成分则是合成天然香精、香料的重要原料。因此,金球
桧不仅具有重要的药用开发价值,其抑菌、杀虫效果也可用于研制生物杀菌剂和杀虫剂,并且适合于学校、
幼儿园、医院等特殊场所的绿化。
本研究发现金球桧挥发油对大肠杆菌无抑制作用,其原因可能为该植物挥发油中不具有抑制大肠杆
菌的成分,或是水蒸气法提取的金球桧挥发油中含有抑菌成分较少,未能起到较好的抑制大肠杆菌的效
果。相关挥发油的功能和药效作用有待深入研究。
参考文献:
[1]Regnault R. C. The potential of botanical essential oils for insect pest control[J]. Integrated Pest Management Reviews,1997,2
(1):25 - 34.
[2]隋晓恒 . CO2 超临界流体萃取法根茎类药材中挥发性成分的共性技术研究[M]. 长春:长春中医药大学,2011.
[3]罗海,李玉峰,刘瑶 . 超临界 CO2 流体萃取法提取姜黄素的研究[J]. 现代食品科技,2010,26(4):400 - 405.
[4]申鸽 . 十一种植物精油及其混剂对致倦库蚊的熏蒸活性研究[M]. 湖南:中南林业科技大学,2012.
[5]李洪妹 . 浅谈铅笔柏的繁殖栽培管理[J]. 中国园艺文摘,2009,25(9):167 - 168.
[6]王淳凯,瞿伟菁,孙伟,等 . 地中海柏挥发油抗氧化、抑肿瘤及其化学表征[J]. 天然产物研究与开发,2008(20):223 -
228.
[7]崔艳秋,南蓬,林满红,等 . 园柏和龙柏主要挥发物及其抑菌和杀菌作用[J]. 环境与健康杂志,2006,23(1):63 - 65.
[8]扶巧梅 . 五种柏科植物精油对蚊虫的生物活性[M]. 湖南:中南林业大学,2012.
[9]国家药典委员会 . 中华人民共和国药典附录 XD[M]. 北京:中国医药科技出版社,2005.
[10]郝德君,张永慧,戴华国,等 . 气相色谱 /质谱法分析柏树叶挥发油的化学成分[J]. 色谱,2006,24(2):185 - 187.
[11]刘恩乾,张枝润,邓媛元,等 . 雪菊挥发性成分的 GC - MS分析[J]. 广西植物,2014,34(5):706 - 709.
(下转第 111 页)
·101·
第 4 期 罗娅,等:不同坡位和施肥对思茅松幼林生长的影响
[3]赵平,孙谷畴,彭少麟 . 植物氮素营养的生理生态学研究[J]. 生态科学,1998,17(2):37 - 42.
[4]蒋云东,李思广,李明,等 . 思茅松人工林幼林期施肥试验研究[J]. 林业科技,2005,30(3):16 - 19.
[5]中国科学院南京土壤研究所 . 土壤理化分析[M]. 上海:上海科技出版社,1978.
[6]中国土壤学会农化专业委员会 . 土壤农业化学常规分析方法[M]. 北京:科学出版社,1989.
[7]卢漫,吴立潮,吴建平 . 泡桐幼龄林配方施肥的初步研究[J]. 中南林业科技大学学报,2010,30(6):55 - 59.
[8]丁晓纲,李吉跃,张方秋,等 . 林木营养诊断及施肥研究进展[J]. 广东林业科技,2010,26(4):66 - 71.
[9]田赟,王海燕,孙向阳,等 . 三倍体毛白杨人工林施肥与营养诊断研究进展[J]. 西北林学院学报,2009,24(6):83 - 87.
[10]蒋云东,李思广,杨忠元,等 . 土壤化学性质对思茅松人工幼林生长的影响[J]. 东北林业大学学报,2006(1):25 - 27.
[11]蒋云东,李思广,张快富 . 思茅松人工林幼林期林地土壤肥力状况的研究[J]. 西北林业科学,2007,36(3):11 - 15.
[12]何俊 . 思茅松人工林土壤肥力维护对策研究[J]. 思茅师范高等专科学校学报,2007,23(6):4 - 8.
(上接第 97 页)
[18]辛营营,韦新良 . 青山湖针阔混交林优势树种竞争的数量研究[J]. 浙江农林大学学报,2011,28(4):601 - 606.
[19]王意锟,金爱武,朱强根,等 . 施肥对毛竹种群不同年龄分株间胸径大小关系的影响[J]. 植物生态学报,2014,38 (3):
289 - 297.
[20]庄若楠,金爱武 . 施肥对毛竹秆型特征的影响[J]. 中南林业科技大学学报,2013,33(1):80 - 84.
[21]林桂明 . 毛竹混交林林分生长状况和结构特征研究[J]. 世界竹藤通讯,2012,10(2):18 - 23.
[22]王成伟 . 几种酚酸类物质协同作用对优良杉木无性系化感效应研究[D]. 福州:福建农林大学,2009.
[23]曹永慧,肖江华,陈双林,等 . 竹阔混交林阔叶树下土壤养分对毛竹生长的影响[J]. 南京林业大学学报,2007,31(6):
43 - 47.
[24]邓英英 . 天目山近自然毛竹纯林的空间结构研究[D]. 临安:浙江农林大学,2011.
[25]曹光球 . 杉木自毒作用及其与主要混交树种化感作用的研究[D]. 福建:福建农林大学,2006.
(上接第 101 页)
[12]顾洪丰,翟延晖 . β-榄香烯抗肿瘤机理研究进展[J]. 湖南中医学院学报,2002,22(4):64 - 65.
[13]葛丽娜,韩雪,任珂珂,等 . 火棘花挥发油化学成分的 GC - MS 分析及抗氧化活性研究[J]. 植物研究,2014,34(2):
276 - 281.
·111·