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山苦茶抗氧化功能研究



全 文 :山苦茶抗氧化功能研究
闫 佳, 李跃萍, 闫庆峰, 韦 祎
(海南医学院,海南 海口 571101)
摘要: 在猪油中添加质量分数0.2%的山苦茶浸出物,在烘箱中以60℃贮存,POV 值表明,处理后的山苦茶比对照
可延长5 d;在猪油中添加质量分数0.02%抗坏血酸、0.02%柠檬酸和0.1%的山苦茶浸出物,有抗氧化协同增效作
用;山苦茶浸出物对超·OH,DPPH·和O2-·的清除率较好。
关键词: 山苦茶浸出物;POV 值;清除率
中图分类号: R285 文献标志码: A doi: 10.3969/jissn.1671-9646(X).2012.06.004
AntioxidantActivityofMalotusFuretianus
YANJia,LIYue-ping,YANQin-feng,WEIYi
(Hainan Medical College,Haikou,Hainan 571101,China)
Abstract:When mallotus furetianus extract is added 0.2% into Lard and store at 60℃,The POV value shows it compared to
the control can be extended by 5 d. 0.02% ascorbic acid and citric acid and 0.1% of Mallotus furetianus extract has antioxidant
synergism. Mallotus furetianus extract on·OH,DPPH·和O2-·ha be ter removal rate.
Keywords:mallotus furetianus extract;POV value;removal rate
文章编号: 1671-9646(2012) 06-0016-03
第6期(总第283期) 农产品加工·学刊 No.6
2012年6月 Academic Periodical of Farm Products Processing Jun.
0 引言
山苦茶系大戟科野生桐属,主要分布我国的海
南岛、中印半岛及苏门答腊岛。由于它的香味怡人,
富含多种矿物质,人体必需氨基酸含量高,有清热
解毒、利胆消食、降脂降血压的功效。海南人习惯
用晒干的山苦茶叶子泡制饮料,俗称为鹧鸪茶。所
以山苦茶是海南民间的一种具有浓郁地方特色和民
族特色的代茶饮料植物和重要的药用植物[1]。
植物的各个部位存在天然抗氧化物质,这些抗
氧化物质包括类胡萝卜素、维生素、酚类、类黄酮
和内生代谢物等[2]。抗氧化物质能有效清除内源性和
外源性自由基,有效防治自由基所导致各种疾病。
在机体正常的生理情况下,自由基会在体内不断生
成,又不断地被清除,维持着动态平衡,少量自由
基的生成是机体维持正常新陈代谢所必需的。但是,
过量的自由基会引起广泛的损伤效应。现已明确许
多疾病,如肿瘤、炎症、心脑缺血、动脉粥样硬化
等,都与自由基有关[3]。
近年来,国内外都在寻求高效、安全、价廉的
抗氧化剂。天然来源的抗氧剂与人工合成抗氧剂相
比,无毒副作用,因而备受关注[4]。本文对山苦茶抗
氧化功能进行研究,对其清除自由基及作为油脂抗
氧化剂的可能性进行了探讨。
1 材料与方法
1.1 试验材料与仪器
(1) 山苦茶浸出物:山苦茶100 g,在海南茶叶
店购买,粉碎后过50目筛,加入85℃纯净水浸泡
30 min,茶与纯净水的质量比为1∶100;用抽滤机
过滤,合并3次浸提茶汤,减压浓缩并烘干,得到5g
山苦茶浸出物;将浸出物装瓶,低温4℃冷藏。猪
油为新鲜猪板油熬制。
(2) 旋转蒸发器、分光光度计、抽滤机、电热
恒温培养箱、冰箱、电热恒温水浴锅等。
1.2 试验方法
1.2.1烘箱贮存法
将待测定的各种抗氧化剂按设计添加,加入30 g
猪油,放入50mL容量瓶中,摇匀,置于60℃±5℃
烘箱内,以后每隔24h搅拌1次,并交换它们在培养
箱中的位置,每隔一定时间测定过氧化值 (POV
值)。POV 值的测定方法按照国标 (GB/T5009.37—
1996)[5]猪油卫生标准(GB10146—88),当POV值≥
16mmol/kg时超标,终止试验。
收稿日期: 2012-02-28
基金项目: 海南省自然科学基金(310046)。
作者简介: 闫 佳,曾用名阎高峰(1968— ),女,山西人,博士,副教授,研究方向:营养及食品科学。
2012年第6期
图1添加不同浓度山苦茶浸出物猪油POV值
变化 ( 烘箱温度60℃)
1.2.2清除·OH能力的测定方法[6]
不同的抗氧化剂溶解后放于离心管中,定容至
1mL,加入0.5mL浓度12mmol/L的水杨酸钠,5mL
浓度 0.9 mol/L 的 FeSO4溶液,最后加入 l mL 浓度
18 mmol/L的 H2O2,启动反应,在 37℃下恒温水
浴反应l h后,经转速5 000 r/min离心10 min,取
上清液并稀释至10mL,用分光光度计在波长510nm
处测吸光度 A,根据以下公式计算·OH的清除率。
清除率=[{A-(A1-A2)}/A]×100%.
式中:A——不加抗氧化剂时体系吸光度;
A1——加入提取液后体系吸光度;
A2——提取液的本底吸光度。
1.2.3抑制DPPH自由基作用[7]
测定方法:取2 mL浓度2×10-4mol/L 的DPPH
溶液与2 mL无水乙醇混合液,用无水乙醇作参比测
定吸光度 Ac;取待测定液 2 mL,将 2 mL 浓度 2×
10-4mol/L 的DPPH溶液加入相同具塞试管中,摇匀,
30 min后测定吸光度Ai;同时测定2 mL待测定液与
2 mL无水乙醇混合液的吸光度Aj,根据下式计算测
定液对DPPH·的抑制率。
清除率={1-(Ai Aj)/Ac}×100%.
式中:Ac——未加测定液时DPPH溶液的吸光度;
Aj——测定液在测定波长510nm处的吸光度;
Ai——加测定液后DPPH溶液的吸光度。
1.2.4山苦茶浸出物对O2-·的抑制作用 [8]
采用邻苯三酚自氧化法,测定山苦茶浸出物对
O2-·的清除。取浓度 0.05 mol/L, pH 值为 8.2 的
Tris-HC1缓冲液4.5 mL,置于试管中,在25℃下水
浴预热25 min,分别加入0.1 mL一定浓度的待测定
液,浓度2.5 mmol/L的邻苯三酚0.4 mL,以蒸馏水
为空白对照,混匀后置于25℃水浴加热,准确反应
4 min,立即滴入2滴浓度8 mol/L的 HCl 溶液终止
反应,并在波长299 nm处,测其吸光度,清除率E
的计算如下。
E= A 对照-A 样品A 对照
×100%.
式中:A 对照——蒸馏水组的吸光度;
A 样品——加入山苦茶浸出物溶液的各组的吸
光度。
2 结果与分析
2.1 山苦茶浸出物添加量对抗氧化性对比
添加不同浓度山苦茶浸出物猪油POV值变化见
图1。
由图1可知,不同添加量山苦茶浸出物对猪油
的氧化均有一定的抑制作用,但比茶多酚的抗脂质
氧化能力弱些;茶多酚的抗氧化作用已被广泛应用。
随浸出物添加量的增加,其抗氧化能力逐渐增强。
当浸出物添加量增加到0.2%时,烘箱温度60℃贮
存到第10天时,POV 值为 15.9 mmol/kg,未失去食
用价值;而空白对照在第 5 天时,POV 值已达到
16.1 mmol/kg,失去了食用价值。可见,山苦茶浸出
物对猪油具有一定的抗氧化效果。
2.2 山苦茶浸出物与其他物质的协同抗氧化作用
将质量分数0.1%山苦茶浸出物与抗坏血酸、柠檬
酸配合添加到猪油中,测定油脂过氧化值(POV值)。
山苦茶浸出物与抗坏血酸和柠檬酸的协同抗氧
化作用见图2。
图2 山苦茶浸出物与抗坏血酸和柠檬酸的协同抗氧化作用
由图2可以看出,抗坏血酸、柠檬酸与山苦茶
浸出物配合使用后,均具有协同抗氧化增效作用,
且抗坏血酸的抗氧化性大于柠檬酸,协同效果均优
于山苦茶浸出物单独使用。以质量分数0.1%山苦茶
浸出物和质量分数0.02%的抗坏血酸剂量添加到猪油
中,在烘箱温度60℃贮存到第10天时,POV 值为
13.0 mmol/kg,低于山苦茶浸出物添加量 0.2%,贮
存到第10天的POV 值(15.9 mmol/kg);而空白对照
在第5天时,POV 值已16.1 mmol/kg,失去了食用价
值。可见,抗坏血酸 、柠檬酸与山苦茶浸出物配合
使用对猪油具有不错的抗氧化效果。
抗坏血酸是一种自由基清除剂,它通过逐级供
给质子而转变成半脱氢抗坏血酸和脱氢抗坏血酸以
闫 佳,等:山苦茶抗氧化功能研究 17· ·
农产品加工·学刊 2012年第6期
达到清除活性氧自由基,抗坏血酸也能与溶于油脂
中微量氧发生氧化还原反应,从而避免油脂的自动
氧化。此外,抗坏血酸作为酸性物质,能够钝化促
进自动氧化的金属离子,柠檬酸同样是作为酸性物
质,与油脂中的微量金属离子作用形成螯合物,降
低了这些离子的有效浓度,从而钝化了促进自动氧
化的金属离子,表现出对山苦茶浸出物的协同增效
作用。
2.3 山苦茶浸出物清除自由基效果研究
山苦茶浸出物对·OH和DPPH·的清除作用见图3。
图3山苦茶浸出物对·OH和DPPH·的清除作用
由图3可以看出,随着添加量的增加,山苦茶
浸出物对·OH和DPPH·的清除率在增强。当山苦茶
浸出物的加入量为 0.5%时,对·OH 的清除率达到
50.3%,对DPPH·的清除率达到43.5%。总体看来,
山苦茶浸出物有一定的清除·OH能力及清除DPPH·
能力。
茶多酚和山苦茶浸出物对O2-·的清除作用见图4。
图4 茶多酚和山苦茶浸出物对O2-·的清除作用
从图4可以看出,茶多酚和山苦茶浸出物随着
添加量的增加,对O2-·的清除率在增强。当茶多酚
的加入量为 40 mg/L 时,对 O2-·的清除率达到
94.7%,而添加同样剂量山苦茶浸出物对O2-·的清除
率达到51.0%;尽管浸出物对O2-·的清除率不及茶
多酚,但在这方面还是有一定的效果。
3 结论
(1) 山苦茶浸出物在猪油中添加量质量分数增
加到0.2%时,在烘箱温度60℃贮存到第10天时,
POV 值为15.9 mmol/kg,未失去食用价值,并超过了
国标值,保值期延长了 5 d;而空白对照在第 5 天
时,POV值达到16.1 mmol/kg。
(2) 添加量质量分数 0.02%的抗坏血酸、柠檬
酸与0.1%山苦茶浸出物配合使用均具有协同增效作
用。山苦茶浸出物对O2-·,·OH和DPPH·这3种由
基的清除率都能达到40%以上。可以考虑山苦茶浸
出物作为饲料的抗氧化添加剂使用。研究山苦茶浸
出物对体内自由基的清除能力大小还需要进一步做
动物实验。
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