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海南山苦茶提取物对衰老小鼠学习记忆能力的影响



全 文 :中国热带医学 2012年第 12卷第 1期 CHINA TROPICAL MEDICINE Vol .12 No.1 January 2012
(国家药典委员会 .中国药典[M].一部 .北京:化学工业出版社,
2005:59-60.)
[3]Zhang MF,Shen YQ . Anticancer activities of crude extracts of
licorice and its flavonoids[J]. Drugs & Clinic,2010,25(2):124-
128.(In Chinese)
(张明发,沈雅琴 .甘草粗提物及其黄酮类成分的抗肿瘤作用[J].
现代药物与临床,2010,25(2):124-128.)
[4] Li XH,Qi Y,Cai RL,et al. Studies on the Anti -inflammatory
Mechanism of Total Saponins of Radix Glycyrrhiza in Vitro[J].Chinese
Journal ofExperimental TraditionalMedicalFormulae,16(5):110-113.
(In Chinese)
(李晓红,齐云,蔡润兰,等 .甘草总皂苷抗炎作用机制研究[J].中
国实验方剂学杂志,16(5):110-113.)
[5]Liu JH,Wei HB,Yao Y,et al . Anti-tumor angiogenesis of four
different active ingredients from Glycyrrhiza[J]. Progress in modern
biomedicine,2010,10(14):2731-2734.(In Chinese)
(刘军花,魏华波,姚瑛,等 .四种不同甘草有效成分的抗肿瘤血管
新生作用[J].现代生物医学进展,2010,10(14):2731-2734.)
[6]Sui HX,Gao F,Xu HB,et al . The rapid screening test of licorice[J].
Journal of Toxicology,2005,19(3):254-255.(In Chinese)
(隋海霞,高芃,徐海滨,等 .甘草的快速筛选试验研究[J].毒理学
杂志,2005,19(3):254-255.)
[7]Chang ZF,Liu SM. Licorice and pharmacological study of clinical
profile [J] . Journal of Beijing University of Traditional Chinese
Medicine,1989,12(2):30.(In Chinese)
(常章富,刘树民 .甘草的临床应用与药理研究简介(综述)[J].北
京中医学院学报,1989,12(2):30.)
收稿日期:2011- 03- 02 编辑:吴中菲
海南山苦茶[Mallotus Furetianus(Baill)Muell- Arg]
为大戟科野桐属植物,又称为“鹧鸪茶、禾姑茶、毛
茶”,因其香味浓郁,又具有“清热解毒、利胆消食”作
用,海南民间将其作为节日期间解油腻、助消化的饮
品[1]。现代药理学研究表明,海南山苦茶具有清除氧自
由基、抗动脉粥样硬化、促进胆汁分泌等功效。D- 半
乳糖诱导的衰老模型存在氧自由基增多导致氧化应
激损伤出现学习记忆能力减退的特点[2,3],本文主要探
讨海南山苦茶对 D- 半乳糖诱导的衰老模型学习记忆
能力的影响。
海南山苦茶提取物对衰老小鼠学习记忆能力的影响
刘月丽,林连波
摘要:目的 探讨海南山苦茶提取物对衰老小鼠学习记忆能力的影响。 方法 颈背部皮下注射 D- 半乳糖
120mg/kg,连续 8周,建立衰老模型,预防性给予海南山苦茶提取物低、中、高剂量(40mg/kg、57mg/kg、81mg/kg)干预,水
迷宫、跳台实验和避暗实验测试衰老小鼠的学习记忆能力。 结果 海南山苦茶提取物能够缩短 D- 半乳糖诱导的衰
老小鼠在水迷宫实验中潜伏期、增加跨越平台次数,延长跳台和避暗实验中的训练和测验潜伏期、减少错误次数,且呈
现剂量依赖性。 结论 海南山苦茶提取物能够改善 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠学习记忆能力。
关键词:山苦茶;提取物;衰老;D- 半乳糖;学习记忆能力
中图分类号:R965 文献标识码:A 文章编号:1009- 9727(2012)1- 21- 03
Effects of leaves extract from Mallotus Furetianus cultivated on Hainan Is land on learning- memory ability in
aging mice. LIU Yue- li,LIN Lian- bo.(School of Pharmacy,Hainan Medical College,Haikou 571101,Hainan,P. R. China)
Abstract:Objective To study the effects of leaves extract from Mallotus furetianus cultivated in Hainan Island on the
learning- memory ability in aging mice. Methods Aging mice model was established by injecting D- galactase 120mg/kg
subcutaneously,leaves extract from Mallotus furetianus cultivated in Hainan Island was given to prevent the development of
aging. After 8 weeks,learning- memory ability of aging mice was tested by the way of morris water maze test,step down and
step through test. Results Leaves extract from Mallotus furetianus can shorten escape latency and increase platform-
crossing numbers in morris water maze test;lengthen latency and reduce error numbers in a dose dependent manner during the
process of training and test in step down and step through test of aging mice. Conclus ions Leaves extract from Mallotus
furetianus can improve the learning- memory ability of aging mice induced by D- galactase injection.
Key words : Mallotus furetianus; leaves extract;Aging; D- galactase; Learning- memory ability
基金项目:国家自然科学基金(No.30060088);海南医学院苗圃基金(No.200309)
作者单位:海南医学院药学院,海南 海口 571101.
作者简介:刘月丽(1980~),女,汉族,药理学硕士,讲师,主要从事心血管和神经药理研究.
·论 著·
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· 21·
DOI:10.13604/j.cnki.46-1064/r.2012.01.017
CHINA TROPICAL MEDICINE Vol .12 No.1 January 2012 中国热带医学 2012年第 12卷第 1期
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 动物 健康雌性昆明种小鼠 120 只,体重
25~35g,由湖南省实验动物中心提供,许可证号:
SCXK(湘)2009- 0012。
1.1.2 药品与仪器 海南山苦茶提取物由海南医学
院化学教研室提供;石杉碱甲分析标准品(阿拉丁公
司);D- 半乳糖(Amresco公司);羧甲基纤维素钠(上
海黄河制药厂);Morris水迷宫(上海吉量);WX- 2型
小鼠电光刺激条件反射跳台(中国医科院药物研究
所);WX- 2型小鼠避暗箱(中国医科院药物研究所)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组、模型建立与给药 小鼠按体重随机
分为正常组、模型组、阳性药组(石杉碱甲)、海南山苦
茶低、中、高剂量组;除正常组外,其余各组小鼠颈背
部皮下注射 D- 半乳糖 120mg/kg,连续 8周,诱导衰老
模型[4];同时,阳性药组小鼠灌胃给予石杉碱甲 0.40
mg/kg、海南山苦茶低、中、高剂量组小鼠分别灌胃给予
40mg/kg、57mg/kg、81mg/kg海南山苦茶提取物,正常组
和模型组小鼠灌胃给予等体积的 0.5%羧甲基纤维素
钠。8周后,测试各组小鼠的学习记忆能力。
1.2.2 水迷宫实验 8周后,参照张晓裕等[5]的方法用
Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力。前 5d训练
小鼠,记录第 5d的逃避潜伏期,作为学习成绩;隔 1d
后即第 7d上午撤去平台,任选一个入水点将小鼠面向
池壁放入水中,记录 60s内小鼠跨越原平台的次数,
作为小鼠的记忆成绩。
1.2.3 跳台实验 将小鼠放入反应箱中,自由活动
3min,适应环境后取出;箱底通电,将小鼠放入绝缘平
台上,记录将小鼠放入绝缘平台至第一次跳下平台的
时间及 5min内小鼠跳下平台遭受电击的次数,记录
为训练潜伏期和训练错误次数,作为小鼠的学习成
绩;24h后,重复操作一次,记录测验潜伏期和测验错
误次数,作为小鼠的记忆成绩。
1.2.4 避暗实验 训练时,先将小鼠放入反应箱中,
自由活动 3min,适应环境后取出;暗室通电,将小鼠背
对洞口放入明室,小鼠进入暗室就遭受电击;记录从
放入明室至进入暗室的时间及 5min内进入暗室被电
击的次数,记录为训练潜伏期和训练错误次数,作为
小鼠的学习成绩;24h后,重复操作一次,记录测验潜
伏期和测验错误次数,作为小鼠的记忆成绩。
13 统计学处理 结果以 x±s表示,采用 SPSS10.0
统计软件包进行单因素方差分析,计量资料采用组间
t检验(方差不齐时用 t’检验)。
2 结果
2.1 海南山苦茶提取物对 D- 半乳糖诱导的衰老小
鼠水迷宫实验中学习记忆能力的影响 D- 半乳糖诱
导衰老小鼠逃避潜伏期较正常组明显延长(P<0.01),
跨越平台次数较正常组明显减少(P<0.01),具有显著
性差异;石杉碱甲及海南山苦茶低、中、高剂量组小
鼠的逃避潜伏期较模型组明显缩短(P<0.01),跨越平
台次数明显增加(P<0.01),海南山苦茶对衰老小鼠在
水迷宫中学习记忆能力的改善作用呈剂量依赖性。见
表 1。
表 1 海南山苦茶提取物对 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠在水迷
宫实验中学习记忆能力的影响
Table 1 Effects of leaves extract from Mallotus furetianus on
learning- memory ability in aging mice tested induced by
D- galactse injection in the water maze test
注:与模型组比较 **P<0.01;与正常组比较 △△P<0.01。
2.2 对 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠跳台实验中学习
记忆的影响 D- 半乳糖诱导衰老小鼠在跳台实验中
训练和测验潜伏期较正常组明显缩短(P<0.01),训练
和测验错误次数较正常组明显增加(P<0.01),具有显
著性差异;石杉碱甲及海南山苦茶低、中、高剂量组小
鼠的训练和测验潜伏期较模型组明显延长(P<0.01),
训练错误次数较模型组明显减少(P<0.01),石杉碱甲
及海南山苦茶中、高剂量组小鼠的测验错误次数较模
型组明显减少(P<0.01),具有显著性差异。见表 2。
表 2 海南山苦茶提取物对 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠跳台学
习记忆的影响
Table 2 Effects of leaves extract from Mallotus Furetianus on
learning- memory ability in aging mice tested induced by
D- galactse injection in the step down test
注:与模型组比较(to model)**P<0.01;与正常组比较(to model)△△P<0.01。
2.3 对 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠避暗实验中学习
记忆的影响 D- 半乳糖诱导衰老小鼠在避暗实验中
组别 Group
正常 Normal
模型Model
石杉碱甲 HupA
海南山苦茶 Tea
剂量 Dose
(mg/kg)


0.40
0.40
0.57
0.81
逃避潜伏期
Latent(s)
37.35±5.02**
57.80±5.69△△
46.60±4.32**
49.35±4.77**
46.70±3.70**
43.45±4.12**
跨越平台次数
Time of jamp over
1.75±0.44**
0.50±0.51△△
1.35±0.59**
1.15±0.67**
1.20±0.77**
1.30±0.66**
剂量 Dose
(mg/kg)


0.40
40
57
81
训练 Train
56.30±4.12**
42.10±2.17△△
46.55±2.84**0
50.70±3.87**0
53.70±2.27**0
56.90±2.49**0
测验 Test
283.30±9.33**0
136.95±11.10**
249.00±8.68**0
157.35±7.21**0
181.45±12.23**
249.45±14.11**
训练 Train
1.45±0.51**
02.40±0.94△△
1.50±0.76**
1.95±0.89**
1.60±0.75**
1.50±0.69**
测验 Test
0.55±0.60**
01.85±0.93△△
0.70±0.47**
1.50±0.61**
1.10±0.45**
0.95±0.51**
潜伏期 Lalent(s) 错误次数 Error time
组别 Group
正常 Normal
模型Model
石杉碱甲 HupA
海南山苦茶 Tea
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中国热带医学 2012年第 12卷第 1期 CHINA TROPICAL MEDICINE Vol .12 No.1 January 2012
训练和测验潜伏期较正常组明显缩短(P<0.01),训练
和测验错误次数较正常组明显增加(P<0.01),具有显
著性差异;和模型组比,石杉碱甲及海南山苦茶低、
中、高剂量组小鼠的训练潜伏期明显延长,训练错误
次数明显减少(P<0.01),石杉碱甲及海南山苦茶中、高
剂量组小鼠的测验潜伏期明显延长,测验错误次数明
显减少(P<0.01),具有显著性差异。见表 3。
表 3 海南山苦茶提取物对 D- 半乳糖诱导的衰老小鼠在避暗
实验中学习记忆的影响
Table 3 Effects of leaves extract from Mallotus furetianus on
learning- memory ability in aging mice tested induced by D- galactse
injection in the step through test
注:与模型组比较(tomodel)**P<0.01;与正常组比较(tomodel)△△P<0.01。
3 讨论
衰老是多种因素共同作用的结果,衰老机理中较
为公认的是自由基学说,尽管,细胞中也存在抗氧化
系统来中和过多的活性氧,当细胞内氧自由基的产生
增多和消除减少时会导致氧化应激,最终产生衰老[6]。
D- 半乳糖是一种正常的生理性营养成份,可转化为
葡萄糖,参与葡萄糖的代谢。过量 D- 半乳糖在半乳糖
氧化酶的作用下生成乙醛糖和过氧化氢,使活性氧增
多、脂质过氧化,产生超氧阴离子自由基,进而导致机
体衰老;也可在醛糖还原酶的催化下还原成半乳糖
醇,而后者不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内,
影响正常渗透压,导致细胞肿胀和功能障碍,最终引
起衰老[2,7]。
本实验中,D- 半乳糖诱导的衰老小鼠出现学习
记忆能力减退,表现为水迷宫实验中潜伏期延长、跨
越平台次数减少,跳台和避暗实验中训练和测验潜伏
期缩短、错误次数增加。海南山苦茶能够缩短 D- 半乳
糖诱导的衰老小鼠在水迷宫实验中潜伏期、增加跨越
平台次数,延长跳台和避暗实验中训练和测验潜伏
期、减少错误次数,改善衰老小鼠的学习记忆能力,且
呈现剂量依赖性。
前期研究表明,海南山苦茶富含多酚类物质,能
够清除氧自由基,已有实验证明多酚类物质具有抗氧
化活性,其抗氧化活性呈现剂量依赖性[8,9],海南山苦
茶能够改善衰老小鼠的学习记忆能力,也呈现出剂量
依赖性,提示海南山苦茶改善衰老小鼠学习记忆能力
可能与其富含的多酚类物质有关,海南山苦茶可能清
除 D- 半乳糖诱导产生过多的氧自由基,减少氧化应
激对细胞的损伤,改善衰老小鼠学习记忆能力,其具
体机制有待进一步研究。
参考文献:
[1]Lin H,Zhou S . The Biological character and ecological distribution of
Mallotus furetianus in Hainan[J]. Natural Science Journal of Hainan
University,1992,10(4):32-34.(In Chinese)
(林海,周升 .海南山苦茶的生物学特性及其生态分布[J].海南大
学学报自然科学版,1992,10(4):32-34.)
[2]Ho SC,Liu JH,Wu RY . Establishment of the mimetic aging effect in
mice caused by D-galactose[J]. Biogerontology,2003,4(1):15-18.
[3]Chen CF,Lang SY,Zuo PP,et al . Effects of D -galactose on the
expression of hippocampal peripheral -type benzodiazepine receptor
and spatial memory performances in rats [J] . Psychoneuroendo -
crinology,2006,31(7):805-811.
[4] Li WB,Wei F,Fan M,et al . Mimetic brain aging effect induced
by D-galactose in mice[J],Chinese Journal of Pharmacology and
Toxicology,1995,9(2):93-95 .(In Chinese)
(李文彬,韦丰,范明,等 . D-半乳糖在小鼠上诱导的拟老化效应[J].
中国药理学与毒理学学杂志,1995,9(2):93-95.)
[5] Zhang XY,He LM,Hou JD,et al . Effects of Quchiling on learning
and memory and synaptophysin expression of brain in Alzheimer’s
disease (AD)model mice [J] . Chinese Journal of Gerontology,
2010,30(4):495-498.(In Chinese)
(张晓裕,何利明,侯军代,等 .去痴灵对 AD模型小鼠学习记忆及
脑内突触体素表达的影响[J].中国老年学杂志,2010,30(4):495-
498.)
[6]De La Fuente M . Effects of antioxidants on immune system ageing[J].
Eur J Clin Nutr,2002,56(3):S5-S8.
[7]Cui X,Wang L,Zuo P,et al . D-galactose-caused life shortening in
Drosophila melanogaster and Musca domestica is associated with
oxidative stress[J]. Biogerontology,2004,5(5):317-325.
[8]Wei K,Li W,Koike K,et al . Two new galloylglucosides from the
leaves of Mallotus furetianus[J]. Chem Pharm Bull(Tokyo)2004,52
(6):776-779.
[9]Ferreira IC,Baptista P,Vilas-Boas M,et al . Free-radical scavenging
capacity and reducing power of wild edible mushrooms from
northeast Portugal[J]. Journal of Food Chemistry,2007,100:1511-
1516.
收稿日期:2011- 10- 17 编辑:吴中菲
剂量 Dose
(mg/kg)


0.40
0.40
0.57
0.81
训练 Train
36.35±2.78**
26.85±3.36△△
35.55±1.61**
32.10±2.17**
38.90±3.06**
42.45±2.95**
测验 Test
274.70±11.49**
178.75±24.02**
252.65±10.17**
183.95±14.33**
220.85±16.77**
248.80±10.40**
训练 Train
1.25±0.44**
2.85±0.75△△
1.20±0.44**
1.80±0.62**
1.60±0.68**
1.40±0.50**
测验 Test
0.60±0.50**
1.90±1.07△△
0.70±0.66**
1.45±0.94**
1.20±0.70**
1.05±0.76**
潜伏期 Lalent(s) 错误次数 Error time
组别 Group
正常 Normal
模型Model
石杉碱甲 HupA
海南山苦茶 Tea
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