全 文 ：　第３４卷第２期
２０１６年５月
江苏师范大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．２
Ｍａｙ，２０１６
　
收稿日期：２０１５－０７－２３
基金项目：大学生实践创新训练计划项目（２０１３１０３２００３８）
作者简介：殷婷婷，女，硕士研究生，主要从事微生物分子生态学研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｔｔ８１０１５４６２２＠１６３．ｃｏｍ．
＊ 通讯作者：高霞莉，女，副教授，主要从事生态学研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｉａｌｉ＠ｊｓｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；温洪宇，男，副教授，博士，主要从事环境微生物学研
究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｅｎｈｙ２００７＠１２６．ｃｏｍ．
文章编号：２０９５－４２９８（２０１６）０２－００５６－０４
桂竹根际土壤细菌群落多样性的季节变化
殷婷婷，王国振，闫　妍，高霞莉＊，温洪宇＊
（江苏师范大学 生命科学学院，江苏 徐州２２１１１６）
摘要：土壤中微生物数量、多样性以及分布可作为评价其生态环境质量的重要指标．选取徐州市泉山森林公园的桂
竹（Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ　ｂａｍｂｕｓｏｉｄｅｓ）林作为样地，利用传统微生物培养方法，研究不同季节桂竹根际土壤微生物的种类、
数量和多样性特征．结果显示，４月独有的细菌为假蕈状芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ），６月为解淀粉芽孢杆
菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ），９月为产气肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）和松鼠葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｃｉ－
ｕｒｉ）（其中产气肠杆菌占有优势）；蜡样芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ）和Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ为４、６和９月共有的菌
种；３个月中，以９月份细菌群落多样性最高．
关键词：桂竹；土壤；细菌；群落结构；生物多样性
中图分类号：Ｑ９３８．１　　　文献标识码：Ａ　　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－４２９８．２０１６．０２．０１３
Ｓｅａｓｏｎａｌ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ　ｏｆ
Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ　ｂａｍｂｕｓｏｉｄｅｓ　ｆｏｒｅｓｔ
Ｙｉｎ　Ｔｉｎｇｔｉｎｇ，Ｗａｎｇ　Ｇｕｏｚｈｅｎ，Ｙａｎ　Ｙａｎ，Ｇａｏ　Ｘｉａｌｉ＊，Ｗｅｎ　Ｈｏｎｇｙｕ＊
（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ　２２１１１６，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ，ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ　ａｒｅ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ａｓｓｅｓｓｉｎｇ　ｓｏｉｌ　ｑｕａｌｉｔｙ．
Ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｎｕｍｂｅｒｓ，ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｔ　ｓｅａｓｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ　ｂａｍｂｕｓｏｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｑｕａｎ　Ｍｏｕｎｔａｉｎ　ｆｏｒｅｓｔ　ｐａｒｋ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ
Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ　ｗａｓ　ｏｎｌｙ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　Ａｐｒｉｌ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ　ｗａｓ　ｏｎｌｙ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　Ｊｕｎｅ，Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ
ａｅｒｏｇｅｎｅｓ　ａｎｄ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｃｉｕｒｉ　ｗｅｒｅ　ｏｎｌｙ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，ａｎｄ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ　ｗａｓ　ａｌｓｏ　ｔｈｅ　ｄｏｍｉ－
ｎａｔｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｉｎ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ．Ｔｈｅ　ｓｈａｒｅｄ　ｄｏｍｉｎａｔｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｓｅａｓｏｎｓ　ｗｅｒｅ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ　ａｎｄ　Ｂａｃｉｌ－
ｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　ｓｈｏｗｅｄ　ｍｏｒｅ　ｄｉｖｅｒｓｅ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｔｗｏ　ｍｏｎｔｈｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ　ｂａｍｂｕｓｏｉｄｅｓ；ｓｏｉｌ；ｂａｃｔｅｒｉａ；ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ；ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
０　引言
森林生态系统中的植物是生产者，土壤微生物
是分解者．微生物将土壤中的有机物分解为碳源、氮
源等供生态系统中的各个成员使用［１－３］．根际微生
物是在植物根系直接影响的土壤范围内生长繁殖的
微生物，其与植物和土壤微型动物的生长息息相关，
被认为是土壤微生物的子系统［４］，影响着植物定植、
生长和群落演替［５］．国内外的许多研究发现，根际微
生物在植物修复过程中也发挥着重要的作用［６］．
前人已对中国亚热带地区和寒温带地区森林根
际土壤微生物群落组成进行了大量研究，如：刘卜榕
等应用ＰＣＲ－ＤＧＧＥ方法对天目山和玲珑山的４种
典型森林土壤细菌群落结构进行了研究［７］；孟好军
等对祁连山的森林中不同植被进行了研究，分析了
不同森林植被类型土壤微生物的数量变化、垂直分
布、土壤呼吸强度和纤维素分解能力等的变化规律
和特征［８］．
随着社会的发展，环境污染范围以及程度不断
扩大，生态系统失衡的情况愈加严重，微生物的群落
构成也发生了较大变化．而微生物的变化能及早地
反映土壤养分及环境质量的变化，也反映土壤的污
染状况，它对污染物的生物反应要比动植物的敏
感［９］．许多研究发现，农药、过量施肥均对土壤微生
物多样性产生影响［１０］．将土壤微生物种群、数量以
及分布作为评价土壤生态环境质量的重要指标，越
来越受到重视［１１－１２］．因此，加快对自然条件下森林
中土壤微生物的研究具有重要意义．
江苏省徐州市属于暖温带地区，分布着多种乔
木树种，泉山森林公园作为江苏省自然保护区，生长
着多种禾本科植物，桂竹（Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ　ｂａｍｂｕｓｏ－
ｉｄｅｓ）作为主要植物，其根际土壤未受到环境污染，
可作为纯林土壤细菌群落组成的研究样地．本文通
过对桂竹林地根际土壤细菌群落组成及季节变化的
研究，为解析徐州地区自然土壤环境条件下的细菌
物种组成及其季节变化规律，深入研究桂竹林地土
壤根际细菌在碳、氮循环过程中的作用提供依据．
１　材料与方法
１．１　材料
桂竹，属被子植物门、单子叶植物纲、禾本目、禾
本科、刚竹属，又称五月竹等，因杆箨上有褐色斑点，
故又名斑竹，分布在黄河流域至长江以南各省区，此
竹成材早，产量高，轮伐周期短，坚硬而有弹性．
以徐州市泉山森林公园桂竹林地为样地，该林
地植被组成单一，桂竹密度为６．２５株／ｍ２，冠盖度
为８５％．分别于２０１４年４月、６月和９月对桂竹林
根际土壤取样，选取较为翠绿、竹龄较短的桂竹作样
本，除去土表枯落物，采用多点混合采集方法，即按
照对角线方式在桂竹周围设３个采样点，各点采集
１～１５ｃｍ土层内的根系，抖落大块土壤，取根系表
面的细粒土壤，装入保鲜袋内混匀，作为根际土壤．
用２ｍｍ×０．２５ｍｍ的土壤筛，去掉样品中植物残
体和可见土壤动物，装入新的保鲜袋封闭，保存于
４℃冰箱中．
细菌培养基为ＬＢ培养基，成分为：１０ｇ蛋白
胨，１０ｇ　ＮａＣｌ，５ｇ酵母粉，ｄｄＨ２Ｏ　１　０００ｍＬ．固体
培养基中另加入２０ｇ琼脂粉．１２１℃灭菌２５ｍｉｎ．
１．２　方法
１．２．１　桂竹根际土壤细菌的分离与纯化　土样用
孔径为２ｍｍ×０．２５ｍｍ的筛子过筛后，取１０ｇ加
入１００ｍＬ无菌水，摇床振荡８ｈ，静置３ｈ．采用平
板菌落计数法，在无菌室超净台上取０．５ｍＬ上清
液，对其作 １０倍梯度稀释，配制成 １０－１、１０－２、
１０－３、１０－４、１０－５、１０－６的梯度溶液，取每种梯度溶液
０．２ｍＬ于ＬＢ固体平板上，培养３ｄ．选出菌落数在
３０～３００个／皿范围内的各皿，根据菌落形态进行分
类，利用平板菌落计数法记录不同菌落的形态及数
目，并对菌落进行编号，用四区划线法多次对各菌落
进行纯化培养，得到纯种细菌．
１．２．２　１６ＳｒＤＮＡ序列的ＰＣＲ扩增、克隆与测序　
细菌总基因组提取：采用北京索莱宝科技有限公司
的细菌基因组ＤＮＡ提取试剂盒Ｄ１６００．
ＰＣＲ扩增采用细菌通用引物，正向引物Ｆ２７：
５′－ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＡＴＧＧＣＴＣＡＧ－３′；反向引物
Ｒ１４９２：５′－ＣＴＡＣＧＧＴＴＡＣＣＴＴＧＴＴＡＣＧＡＣ－３′［１３］．
ＰＣＲ条件：９４℃预变性３ｍｉｎ，变性４５ｓ，５５℃退火
４５ｓ，７２℃延伸２ｍｉｎ，３０个循环，最后７２℃延伸１０
ｍｉｎ．ＰＣＲ扩增产物于４℃保存．
连接、转化、蓝白斑筛选和测序：采用Ｓｈａｎｇｈａｉ
Ｇｅｎｅｒｙ　ｂｉｏｔｅｃｈ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ的Ｇｅｎ　Ｃｌｅａｎ琼脂糖凝胶
ＤＮＡ 回 收 试 剂 盒 ＧＫ２０４１ 进 行 胶 回 收 后，与
ｐＭＤ　１８－Ｔ　４℃连接１２ｈ，转化大肠杆菌ＪＭ１０９感
受态细胞，在含有Ｘ－Ｇａｌ、ＩＰＴＧ、Ａｍｐ的ＬＢ固体培
养基上进行涂布培养８ｈ，形成单菌落．挑取白色单
菌落接到含有Ａｍｐ的１ｍＬ　ＬＢ液体培养基中振荡
培养８ｈ．送往南京思普金生物科技有限公司测序．
１．２．３　细菌菌株的分类学分析　先从 ＥｚＴａｘｏｎ
Ｓｅｒｖｅｒ　２．１数据库中获得与目的菌株亲缘性较高的
模式菌株，采用 ＣｌｕｓｔａｌＸ１．８３ 软件对模式菌株
１６ＳｒＤＮＡ序列与目的菌株１６ＳｒＤＮＡ序列进行多
序列比对，再用 ＭＥＧＡ４．０ 软件包构建系统进
化树．
１．２．４　细菌多样性指数计算　本研究采用如下３
种α多样性指数．
１）丰富度指数．用 Ｍａｒｇａｌｅｆ指数［１４］（Ｒ１）评价，
Ｒ１ ＝Ｓ－１ｌｎ　Ｎ
，
式中Ｓ为物种数目，Ｎ 为调查样方中观察到的个体
总数（下同）．
２）优势度指数．采用Ｓｉｍｐｓｏｎ指数［１５］（Ｄ）及
Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｉｅｎｅｒ指数［１５－１６］（Ｈ′）评价，公式为
Ｄ＝１－∑Ｎｉ
（Ｎｉ－１）
Ｎ（Ｎ－１）
，　Ｈ′＝－∑Ｐｉｌｎ　Ｐｉ，
式中Ｎｉ为种ｉ的个体数，Ｐｉ＝Ｎｉ／Ｎ 为物种ｉ的相
对重要值．
３）均匀度指数．采用Ｐｉｅｌｏｕ指数［１５，１７］（ＪＳｉ）评价，
ＪＳｉ ＝
１－∑Ｐ２ｉ
１－１／Ｓｉ
，
式中Ｓｉ为种ｉ所在样方的物种数．
２　结果与分析
２．１　菌落种类及数量
将形态不同的菌落进行编号和计数，４月份编
号为 ４－１、４－３、４－４，样 品 的 菌 落 数 量 分 别 为
４．００×１０３／ｇ、８．６４×１０５／ｇ、１．００×１０４／ｇ，总数为
８．７８×１０５／ｇ．６月份编号为６－１、６－３、６－４，数量分别
为６．００×１０４／ｇ、９．４０×１０５／ｇ、２．００×１０４／ｇ，总数为
７５　第２期 殷婷婷，等：桂竹根际土壤细菌群落多样性的季节变化 　　
１．０２×１０６／ｇ．９月份编号为９－１、９－３、９－４、９－５，数量
分别为５．８０×１０４／ｇ、２．２０×１０５／ｇ、２．００×１０５／ｇ、
４．００×１０４／ｇ，总数为５．１８×１０５／ｇ．
２．２　细菌分类学分析
通过对分离纯化的细菌１６ＳｒＤＮＡ序列进行测
序后，对图谱进行分析，去除克隆载体序列，从图谱
中找出Ｆ２７与Ｒ１４９２的引物序列．测序结果表明，
１６ＳｒＤＮＡ序列图谱中没有杂峰和套峰，说明结果
真实可信，将细菌菌株引物两侧多余序列去除后，在
ＥｚＴａｘｏｎ　Ｓｅｒｖｅｒ　２．１数据库中找出亲缘关系最近的
模式菌株，构建系统进化树，结果见图１．
２．３　桂竹林地根际土壤细菌群落组成
由图１ａ知，菌株４－１、６－１、９－１同种，为蜡样芽胞
杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ），４－３、６－３、９－３同种，为Ｂａｃｉｌ－
ｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ．由图１ｂ知，４－４为假蕈状芽孢杆菌
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ），６－４为解淀粉芽孢杆菌
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ），９－４为产气肠杆菌
（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ），９－５ 为松鼠葡萄球菌
（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｓｃｉｕｒｉ）．
图１　基于１６ＳｒＤＮＡ基因序列构建的细菌系统发育树
Ｆｉｇ．１　Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ　ｔｒｅｅ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　１６ＳｒＤＮＡ　ｇｅｎｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ
２．４　桂竹林地根际土壤细菌数量变化
根据４月、６月和９月所统计的桂竹林地土壤
根际细菌种类和数量，对其进行比较（图２）．结果表
明，３个月份均分离出了Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ和
Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ，这２种菌为３个时期共有的．除此
之外，４月、６月和９月还出现了该月的独特菌种，其
中４月独特细菌为Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ，数量
较少；６月为Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ，数目也较
少；９月为Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ和Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃ－
ｃｕｓ　ｓｃｉｕｒｉ，前者数量较多，后者数量较少．
图２　４月、６月和９月细菌种类和数量的比较
Ｆｉｇ．２　Ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｓｏｉｌ　ｂａｃｔｅｒｉａ
ｉｎ　Ａｐｒｉｌ，Ｊｕｎｅ　ａｎｄ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ
由图２知，４月、６月的优势细菌均为Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ，９月的优势菌种除此以外，还有Ｅｎｔｅｒ－
ｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ．由此可见，在春季和夏季中，桂竹
林地土壤根际细菌总体变化不大，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂ－
ｈａｔｔａｉ为细菌群落中的优势物种，其他细菌数量很
少．秋季桂竹林地土壤细菌群落组成发生了较大变
化，除Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ外，出现了其他季节没
有的Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ，且数量较多，占总细菌
数目的３８．６１％，其余各种菌种较春夏２季数量也
有所增大．从图２还可看出，桂竹林地根际土壤６月
细菌数量最多，其次是４月，９月细菌数目最少．
２．５　桂竹林地根际细菌物种多样性变化
由４月、６月和９月细菌种类和数量的统计数
据，计算细菌群落丰富度指数、优势度指数和均匀度
指数，结果见表１．
表１　４月、６月和９月细菌群落物种多样性指数
Ｔａｂ．１　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎｄｉｃｅｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ
ｉｎ　Ａｐｒｉｌ，Ｊｕｎｅ　ａｎｄ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ
月份 Ｒ１ Ｄ　 Ｈ′ ＪＳｉ
４　 ０．１４６　 ０．０３１　 ０．０９１　 ０．０４７
６　 ０．１４５　 ０．１４７　 ０．３１９　 ０．２２０
９　 ０．２２８　 ０．６５２　 ０．９３８　 ０．６６１
　　表１表明，４月、６月的细菌丰富度指数相当，９
月最高；Ｓｉｍｐｓｏｎ指数、Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｉｅｎｅｒ指数和均
匀度指数从４月到６月再到９月依次递增，可以得
出，９月份的细菌群落多样性最高，均匀度较高．
３　结论
本文研究了４月、６月、９月桂竹林地根土壤细
菌群落物种组成及个体数量的变化．从３次取样中
共分离出６种细菌，３个月份中同时存在的种共有２
８５　　 江苏师范大学学报（自然科学版） 第３４卷　
个，分别是Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ和Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｅｕｓ，
且前者为优势菌种，４月份和６月份各单独出现１
个种，９月份单独出现２种，他们分属３个菌属：芽
孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、肠杆菌属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）和葡
萄球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）．其中，蜡样芽胞杆菌、
假蕈状芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｒｙ－
ａｂｈａｔｔａｉ均属于芽孢杆菌属，肠杆菌属中只有产气
肠杆菌，葡萄球菌属中仅有松鼠葡萄球菌．土壤中的
优势菌属为芽孢杆菌，这一结果与李潞滨等［１８］的研
究结果相似．由此可知，有些细菌物种为土壤微生物
群落中的优势物种，有些菌种变动较大，或分布很不
均匀．
从３个月的微生物多样性指数来看：Ｍａｒｇａｌｅｆ
指数４月份和６月份相近，而９月份最高；Ｓｉｍｐｓｏｎ
指数、Ｓｈａｎｎｏｎ－Ｗｉｅｎｅｒ指数和均匀度指数在９月份
最高，６月份次之，４月份最低．说明９月份物种个体
数目的分配状况较均匀，细菌群落的异质性较
大［１５］，而６月份和４月份的个体数目分配状况相对
不均匀．从３个月的气温状况看：６月温度（２６～３２
℃）较高，又是徐州的降雨季节，湿度等条件更适宜
细菌的生长；４月（１５～１８℃）和９月的温度（１９～２３
℃）较低，湿度也较低，不适宜土壤细菌繁殖生长，细
菌个体总数相比６月份较少；４月份、６月份均为单
优种，而９月份优势种优势不明显，所以９月份的物
种丰富度较高．李凤霞等［１９］研究发现细菌、真菌和
放线菌数量在不同季节上表现为６月大于８月，８
月大于９月，本研究结果与其基本一致．
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ广泛分布于人和动物
肠道、生活用水、污水和土壤中［２０－２１］，最适合生长于
温度３０℃，ｐＨ 为７的环境下．９月公园人流量较
大，动物活动较频繁，很多动物会在公园中排泄．因
此，公园中桂竹林根际存在的粪便较多，这可能是
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅ成为优势菌的原因．
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［责任编辑：史成娣］
９５　第２期 殷婷婷，等：桂竹根际土壤细菌群落多样性的季节变化