全 文 ：H-26), 3.98(1H , m , H-3), 4.77(2H , m , H-16), 5.01
(1H , d, J=5.0Hz, H-6);13 CNMR(75MHz, pry idine-
d5)数据见表 1、表 2。其数据与 3-O-[ β-D-葡萄吡喃
糖 (1→4)] -β-D-葡萄吡喃糖-薯蓣皂苷元的文献 〔1〕
报道相一致 。故化合物 5被鉴定为 3-O-[ β-D-葡萄
吡喃(1→ 4)] -β-D-葡萄吡喃糖-薯蓣皂苷元 (3-O-
[ β-D-glucopy ranosy l(1→ 4)] -β-D-g lucopy ranosy l-di-
osgenin)。
化合物 6:白色针状结晶 , mp201-202℃;易溶氯
仿 、甲醇 、乙醇。1HNMR (300MHz, CHC l3 ):0.79
(3H , s, H-18), 1.10(3H , s, H-19), 1.01(3H , d, J=
5.5Hz, H-27), 1.59(3H , d, J=6.0Hz, H-21), 3.37
(2H , m , H-26), 3.73(1H , m , H-3), 4.73(2H , m , H-
16), 5.35(1H , d, J=5.0H z, H-6);13CNMR(75MHz,
CHC l5)数据见表 1。其数据与薯蓣皂苷元的文献 〔4〕
报道一致。故化合物 6被鉴定为薯蓣苷元 (diosge-
nin)。
参 考 文 献
[ 1] Dharam C. Jain. An tifeedant ac tive saponin from Balanites
roxburghii S tem Bark. Phy tochem istry, 1987, ( 2698):
2223-2225.
[ 2] Kazu tomo O., Yosh ihioM im aki KyokoM ito, et al. Ja tro-
pham De riv atives and Ste roidal Sapon ins from the Bulb s of
L ilium hansonii. Phy to chem istry, 1992, 31(8):2767-
2775.
[ 3] 康阿龙 , 孙文基 ,汤迎爽 .薄层扫描法测定盾叶薯蓣中
盾叶新苷和薯蓣皂苷的含量 .药物分析杂志 , 2003, 23
(1):59-60.
[ 4] 刘承来 , 陈延镛 .鲜盾叶薯蓣中原始皂苷的分离和鉴
定 .植物学报 .1985, 27(1):68-74.
(2006 - 05 -10收稿)
Study on Steroidal Compounds from Dioscorea zing iberensis
Q IAN Shi-hu i1 , YUAN Li-hong2 , YANG Nian-yun1 , OUYANG Ping-kai2
(1. Jiang su P rov inc ia l Academy o f T ra itional Chinese M edicine, Nanjing 210028, China;2. Nan jing Industry University, Nanjing
210009, China)
Abstrac ts　Ob jec tive:To study the chem ical constituen ts o fD ioscorea zingiberensis. M ethod:M an ifo ld chrom atography m e thods
w ere used to separa te the chem ica l constituents, and the chem ica l stuctu res w ere determ ined by spec tra l analyses. Result:6 com-
pounds w ere iso la ted from D ioscorea zing iberensis and identified as de ltonin, pro tode lton in, zing iberensis new saponin, dioscin, 3-O-[ β-
D-g lucopy rano sy l(1→ 4)] -β-D-g lucopy ranosy l-d io sg enin, diosgen in. Conclusion:De ltonin and protode ltonin we re iso la ted from this
p lant fo r the first time.
K ey words　D ioscorea zingiberensis;S te ro idal com pounds;S tructure dete rm ina tion
绵萆薢中甾体皂苷的分离鉴定
谭大维 1 ,康利平 1 ,吕　宁2 ,张　洁 1, 3 ,马百平 1*
(1.军事医学科学院放射与辐射医学研究所 ,北京 100850;2.首都医科大学附属北京中医医院 , 北京
100010;3.河南中医学院 ,河南郑州 450008)
　　摘要　目的:分离 、鉴定绵萆薢根茎中的甾体皂苷类化合物。方法:采用溶剂提取 、硅胶柱色谱及 ODS柱色谱
进行分离纯化 , 通过化学和光谱分析鉴定化合物结构。结果:分离得到 3种甾体皂苷类化合物 , 分别鉴定为:薯蓣
皂苷(Ⅰ ),原薯蓣皂苷(Ⅱ ), 原纤细薯蓣皂苷(Ⅲ )。结论:化合物Ⅱ , Ⅲ为首次从绵萆薢中分离得到的呋喃型甾体
皂苷。
关键词　绵萆薢;甾体皂苷;分离纯化;结构鉴定
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)11-1176-04
*通讯作者:马百平 ,研究员 ,硕士生导师 ,从事中药有效成分研究与开发 , Te l:(010)66930265, E-mai l:m a-bp@ sohu. com。
　　绵萆薢是薯蓣科植物绵萆薢 (D ioscorea septem-
loba Thunb)或福州薯蓣 (D ioscorea futschauensis
U line)的块茎 ,主要含有皂苷 、酯类等成分 ,具有祛
风 、利湿之功 ,临床上作为利水渗湿药应用 ,用于治
1176 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牰牣牨牨牣牥牪牨
疗风湿顽痹 、腰膝疼痛 、小便不利 、淋浊 、遗精 、湿热
疮毒等 。近代药理研究表明绵萆薢具有抗心肌缺
血 、抗肿瘤 、降血脂 、预防动脉粥样硬化等作用 ,其有
效成分主要为甾体皂苷类〔1〕。为了进一步研究其
有效成分 ,我们主要对绵萆薢中的水溶性甾体皂苷
进行了较系统的研究 ,从中分离得到了三个化合物 。
根据理化性质和光谱分析分别鉴定为薯蓣皂苷
(Ⅰ ),原薯蓣皂苷(Ⅱ ),原纤细薯蓣皂苷 (Ⅲ)。化
合物Ⅱ 、Ⅲ均为首次从绵萆薢中分离得到的呋喃型
皂苷。
Fig 1 Structures of com poundsⅠ ～ Ⅲ
Ⅰ R=-β-D-G lc-[ (2→ 1)-α-L-Rha] -(4→ 1)-α-L-Rha
Ⅱ R=-β-D-G lc-[ (2→ 1)-α-L-Rha] -(4→ 1)-α-L-Rha
Ⅲ R=-β-D-G lc-[ (2→ 1)-α-L-Rha] -(3→ 1)-β-D-G lc
1 　仪器 、材料与试剂
高效液相色谱仪为W ate rs 2695A lliance Separa-
tionsM odu le, Empowe r Pro工作站;色谱柱:APOLLO
C18柱 (5 μm , 250×4.6 mm ), Phenomenex C18柱 (8
μ, 250×10mm);检测器:A lltech ELSD 2000,温度:
100℃,气流量:2.4 L /m in。质谱为 M ic romass Zab-
Spec高分辨磁质谱仪 。核磁共振谱为 VarianUN ITY
INOVA600超导核磁共振谱仪 , 氘代吡啶为溶剂 。
柱色谱大孔吸附树脂为 SP825(日本三菱公司产);
开放 C18柱色谱填料为 ODS-A(120 °A , 50 μm ,日本
YMC公司生产);薄层色谱用硅胶板 GF254(青岛海
洋化工厂产 );展开剂系统:氯仿-甲醇-水 (65∶35∶
10)下层;薄层显色:Ehrlich试剂 (对二甲氨基苯甲醛
乙醇溶液 ), 10%硫酸乙醇液。所用试剂均为分析
纯 。
绵萆薢药材购自河北省安国药材市场 ,经北京
中医药大学黄建梅老师鉴定为 Dioscorea septem loba
Thunb。
2 　提取分离
绵萆薢药材 1 kg, 60%乙醇回流提取 3次 (分别
为药材重量的 8、6、6倍量 ),过滤 ,合并滤液 ,减压
回收乙醇至无醇味 ,加水混悬 ,水饱和正丁醇萃取 5
次 ,合并正丁醇液 ,减压回收正丁醇至干 ,得绵萆薢
总皂苷 61 g。取 25 g进行加压硅胶柱层析(Υ8×75
cm),氯仿-甲醇-水梯度洗脱 (50∶1∶0.1;25∶1∶0.1;
10∶1∶0.1;5∶1∶0.2;65∶30∶10;3∶3∶1),分份收集 ,
TLC检测 ,合并 60-63份 ,浓缩后重结晶得化合物 1
(1200 mg);合并 69-79份 ,浓缩后进行 SP825大孔
吸附树脂柱色谱 ,依次用水 、15%、25%、35%、45%
丙酮-水梯度洗脱 ,分部收集 ,舍弃水及 15%丙酮部
分 ,得 A、B、C三部分 ,取 B部分 2 g用 25%丙酮溶
解 ,进行反相 C18加压柱色谱 (Υ3×25 cm),用 28%
丙酮 (2700 m l), 30%丙酮 (3000 m l)和 33%丙酮
(3000 m l)梯度洗脱 , HPLC检测 , 30%丙酮洗脱部
分得到化合物Ⅱ (610 mg), 33%丙酮洗脱部分得到
化合物Ⅲ (168 mg)。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ :无色针状结晶 (E tOH),易溶于吡啶 ,
可溶于甲醇 、乙醇 ,难溶于水 。 Lieberm ann-Burchard
反应呈阳性 , Molish反应呈阳性 。正离子 FAB-MS
(m /z):891.3(M +Na)+, 869.5(M +H )+, 723.5
(M +H-146)+, 577.4(M +H-146-146)+, 415.4(M
+H-146-146-162)+ ,提示化合物 Ⅰ至少含有三个
糖 ,其中一个为六碳糖 ,两个为甲基五碳糖。1H-NMR
(C5D5N)δ:0.69(3H , d, J=5.7Hz, CH3-27), 0.82
(3H , s, CH3-18), 1.04(3H , s, CH3-19), 1.13(3H , d,
J=6.9Hz, CH3-21)分别为苷元上的四个甲基质子
的特征化学位移;δ1.62(3H , d, J =6.0Hz, CH3-
rha), 1.76(3H , d, J=6.2H z, CH 3-rha)分别为两个
甲基五碳糖的甲基质子的信号:δ4.94(1H , d, J=
7.5H z), 5.85(1H , s), 6.39(1H , s)分别为三个糖的
端基质子信号;δ5.30(1H , br s, H-6)为 5、6位双键
的特征信号 。13 C-NMR(C5D5N)δ:100.3, 102.0,
102.9为三个糖的端基碳;δ16.3, 19.4, 15.0, 17.3
分别为苷元上四个甲基的信号 , δ18.5和 18.7为甲
基五碳糖的甲基信号;具体碳谱数据见 Tab le 1,以
上数据与文献 〔2, 3〕报道的薯蓣皂苷 (dioscin)一致 ,
确定化合物Ⅰ的结构为薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠
李糖基(1→2)-[ α-L吡喃鼠李糖基 (1→4)] -β-D-吡
喃葡萄糖苷。
化合物 Ⅱ:白色粉末 ,易溶于水和吡啶 ,可溶于
甲醇 、乙醇。 Liebermann-Bu rchard反应呈阳性 , Mol-
ish反应呈阳性 。 Ehrlich反应呈阳性 ,说明化合物
Ⅱ为一呋喃型甾体皂苷 。正离子 FAB-MS(m /z):
1031.0(M +H-H2O)+ , 869.2(M +H-H 2O-162)+,
723.2(M +H-H2O-162-146)+, 577.2 (M +-H2O-
162-146-146)+, 415.3 (M +H-H2O-162-146-146-
162)+ ,说明化合物 Ⅱ含有两个六碳糖和两个甲基
五碳糖。1H-NMR(C5D5N)δ:0.88(3H , s, CH3-18),
0.97(3H , d, J=6.6Hz, CH3-27), 1.04(3H , s, CH3-
19), 1.31(3H , d, J=6.8Hz, CH3-21)分别为苷元上
1177 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
的四个甲基质子的信号 , 1.61(3H , d, J=6.3Hz,
CH 3-rha), 1.75(3H , d, J=6.2H z, CH 3-rha)分别为
两个甲基五碳糖的甲基质子的信号;δ4.80(1H , d, J
=7.7Hz), 4.93(1H , d, J=7.2Hz), 5.83(1H , s),
6.39(1H , s)分别为四个糖的端基质子信号 , 5.28
(1H , brs, H-6)。13 C-NMR(C5D 5N)δ:100.3 , 102.0,
102.9, 105.0分别为四个糖的端基质子;δ16.5,
19.4, 16.5, 17.5分别为苷元上四个甲基的信号 ,
δ18.5和 18.7为甲基五碳糖的甲基信号;具体 13 C-
NMR数据见 Tab le 1。用 β-D-葡萄糖苷酶酶解化合
物 Ⅱ ,得到了化合物 Ⅰ和葡萄糖 。以上数据与文
献 〔4, 5〕报道的原薯蓣皂苷 (protodioscin)一致 ,确定
化合物 Ⅱ的结构 26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-25(R)-
22-羟基-呋甾-Δ5(6)-烯-3β , 26-二羟基-3-O-α-L-吡喃
鼠李糖基-(1→2)-[ α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)] -β-
D-吡喃葡萄糖苷 。
　Tab le 1　　13C-NMR chem ica l sh ifts of compound
Ⅰ ～ Ⅲ (δ in pyr id ine-d5)
Ag lycone Ⅰ Ⅱ Ⅲ Suga r Ⅰ Ⅱ Ⅲ
3G lc
1 37.5 37. 5 37.5 1 100.3 100. 0
2 30.2 30. 2 30.1 2 78.1 78. 1 78.7
3 78.7 77. 8 77.7 3 77.0 77. 0 89.6
4 39.0 39. 0 38.7 4 78.0 78. 6 69.6
5 140.8 140. 8 140.8 5 77.8 77. 8 77.9
6 121.9 121. 9 121.9 6 61.3 61. 3 62.4
7 32.2 32. 4 32.4 2Rha
8 31.9 31. 7 31.7 1 102.0 102. 0 102.2
9 50.3 50. 4 50.4 2 72.5 72. 6 72.8
10 37.2 37. 2 37.2 3 72.7 72. 8 72.5
11 21.1 21. 1 21.1 4 74.2 74. 2 74.1
12 39.9 40. 0 40.0 5 69.5 69. 5 69.6
13 40.5 40. 8 40.8 6 18.5 18. 5 18.7
14 56.7 56. 6 56.6 4Rha 4Rha 3G lc
15 32.3 32. 5 32.5 1 102.9 102. 9 104.6
16 81.1 81. 1 81.1 2 72.6 72. 6 75.0
17 62.9 63. 9 63.9 3 72.8 72. 9 78.5
18 16.3 16. 5 16.5 4 73.9 74. 0 71.5
19 19.4 19. 4 19.3 5 70.4 70. 4 77.0
20 42.0 40. 7 40.7 6 18.7 18. 7 62.9
21 15.0 16. 5 16.9 26G lc 26G lc
22 109.3 110. 7 110.7 1 105. 0 105.0
23 31.7 37. 2 37.2 2 75. 3 75.2
24 29.3 28. 4 28.4 3 78. 5 78.6
25 30.6 34. 3 34.3 4 71. 7 71.7
26 66.9 75. 2 75.3 5 78. 0 77.9
27 17.3 17. 5 17.5 6 62. 9 62.9
　　化合物Ⅲ:白色粉末 ,易溶于吡啶和水 ,可溶于
甲醇 、乙醇。 Liebermann-Bu rchard反应呈阳性 , Mol-
ish反应呈阳性 。 Ehrlich反应呈阳性 ,说明化合物
Ⅲ为一呋喃型甾体皂苷 。正离子 FAB-MS(m /z):
1047.6(M +H-H2O)+ , 885.5(M +H-H 2O-162)+,
739.5(M +H-H2O-162-146)+, 723.2(M +H-H2O-
162-162)+, 577.4 (M +H-H2O-162-146-162)+,
415.4(M +H-H2O-162-146-162-162)+,提示化合物
Ⅲ含有三个六碳糖和一个甲基五碳糖。1H-NMR
(C5D5N)δ:0.88(3H , s, CH3-18), 0.96(3H , d, J=
6.6H z, CH3-27), 1.04(3H , s, CH3-19), 1.32(3H , d,
J=6.6Hz, CH3-21)分别为苷元上的四个甲基质子
的信号 , 1.74(3H , d, J=6.6H z, CH3-rha)为甲基五
碳糖上甲基质子的信号;δ4.80(1H , d, J=7.8Hz),
4.94(1H , d, J=7.8H z), 5.10(1H , d, J=7.8Hz),
6.39(1H , s)分别为四个糖的端基质子信号 , 5.29
(1H , b r s, H-6)。13 C-NMR(C5D5N)δ:100.0 , 102.2,
104.6 , 105.0分别为四个糖的端基质子;δ16.5,
19.3, 16.9, 17.5分别为苷元上四个甲基的信号 ,
δ18.7为甲基五碳糖的甲基信号;具体 13 C-NMR数
据见 Table 1。用 β-D-葡萄糖苷酶酶解化合物 Ⅲ ,得
到了纤细薯蓣皂苷 (g racillin)和葡萄糖。以上数据
与文献〔4, 5〕报道的原纤细薯蓣皂苷(pro tog racillin)一
致 ,确定化合物 Ⅲ的结构为 26-O-β-D-吡喃葡萄糖
基-25(R)-22-羟基-呋甾-Δ5(6)-烯-3β , 26-二羟基-3-
O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[ β-D-吡喃葡萄糖基-
(1→3)] -β-D-吡喃葡萄糖苷。
参 考 文 献
[ 1] 李雪征 , 金光洙 .萆薢的研究进展 .中国野生植物资
源 , 2002, 21(5):8-10.
[ 2] 陈昌祥 , 银慧新 .闭鞘姜根中的甾体皂苷 .天然产物研
究与开发 , 1995, 7(4):22-27.
[ 3] Sing S B, TakurR S. P lan t sapon ins. Pa rt 3. Costuso side-
Ⅰ and Costu so side-J, tw o new furostano l saponins from the
seeds o fCostusspeciosus. Phy to chem istry, 1982, 21(4):
911-915.
[ 4] Hu K, Dong A J, Yao X S, e t a l. A furo stano l g ly co side
from rhizomes o fD ioscorea colletll va r. hypg lauca. Phy to-
chem istry, 1997, 44(7):1339-1342.
[ 5] Aqu ino R, B cher I, Simone F, et al. Furo stano l o ligosides
from Tam us communis. Journa l o f the Na tura l P roduc ts,
1986, 49(6):1096-1099.
(2006 - 05 -10收稿)
1178 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
Study on Steroidal Saponins ofDioscorea septem loba Thunb
TAN Da-w e i1 , KANG Li-p ing1 , LÜN ing2 , ZHANG Jie1 , 2 ,MA Bai-ping1
(1. Institu te o f Radia tion M ed ic ine, Academ y of M ilitary M edical Science s, Be ijing 100850, China;2. Be ijing H ospita l o f TCM ,
Cap ita lM edica lUniversity, Beijing 100010, China;3. H enan C ollage o f T raditiona l Chine seM edic ine, Zhengzhou 450008, China)
Abstrac t　Objective:To iso late and identify ste ro idal saponins from the rhizomes ofD ioscorea septem loba Thunb. M ethods:The
compounds w ere iso lated by so lven t ex traction, co lum n ch rom a tog raphy on silica gel and ODS, and the ir strcture s w ere elucida ted on
the base o f chem ica l and spec tral ana ly ses. Resu lts:Three steroidal sapon ins w ere iso la ted from the rhizomes o fD ioscorea septem loba
Thunb, and the ir structu res w ere detem ined as diosc in (Ⅰ ), p ro todiosc in (Ⅱ ), p ro tog racillin (Ⅲ ). Conc lusion:Com pound Ⅱ and
Ⅲ w ere ob ta ined from the rhizomes ofD ioscorea septem loba Thunb fo r the first time.
K ey words　D ioscorea septem loba Thunb;Steroida l saponins;Purifica tion;S tructure identifica tion
姜黄与片姜黄挥发油色谱指纹图谱的比较
方洪壮 ,任淑清 ,沈德凤
(佳木斯大学药学系 ,黑龙江佳木斯 154007)
　　摘要　为了解姜黄及片姜黄挥发油色谱指纹图谱中的化学成分的异同 , 应用改进窗口目标检验因子分析法对
指纹图谱的色谱-光谱数据进行了比较分析。经比较 ,至少有 10种化学成分在姜黄挥发油的色谱指纹图谱中存在
而在片姜黄图谱中未被检出 ,至少有 9种化学成分在片姜黄中存在而在姜黄中未见 , 姜黄与片姜黄挥发油指纹图
谱中共有的化学成分有 9种。
关键词　姜黄;片姜黄;挥发油;指纹图谱
中图分类号:O657.7;R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)11-1179-04
作者简介:方洪壮 ,男 ,教授 ,研究方向:计算药物分析 , Te l:0454-8611265, E-m ail:fh z-ch jm s@ 163. com。
　　姜黄 Rhizoma Curcumae Longae与片姜黄 Rhizo-
maWenyu jin C oncisum 现收载在中国药典一部中 ,
前者为姜黄属植物姜黄 Curcuma longa L.的干燥根
茎 ,后者为同属植物温郁金 Curcuma wenyujin Y. H.
Chen et C. Ling的干燥根茎 ,两者的性味归经相同 ,
功能主治接近 〔1〕。由于它们的名称相似 、来源相
近 ,使用中时有混淆。揭示这二种药物的内在化学
成分本质的差异 ,对相关的药学研究与临床使用有
重要的意义 。中药色谱指纹图谱是一项新的中药现
代质量控制技术 ,可在整体上与本质上反应中药内
在的化学成分差异〔2〕 ,运用化学计量学方法解析指
纹图谱色谱-光谱二维数据有助于完善和提升中药
色谱指纹图谱的质控技术 。改进窗口目标检验因子
法是在窗口目标检验因子分析基础上形成的一新的
化学计量学方法 〔3, 4〕 ,已被用于不同产地的大蒜及
大蒜的不同部位的挥发油指纹图谱的 GC-MS二维
数据解析 〔5〕。本文应用改进窗口目标检验因子法
对姜黄和片姜黄挥发油指纹图谱的 HPLC-DAD二
维数据进行分析比较 ,发现姜黄挥发油色谱中与片
姜黄挥发油色谱中共有的化学成分有 9种 ,姜黄中
有 10种化学成分在片姜黄挥发油中未见存在 ,片姜
黄中有 9种化学成分在姜黄中未见存在 。
1　仪器 、药品与试剂
高效液相色谱仪:HP1100型 ,包括 Ag ilent1100
四元泵 , HP1100二极管阵列检测器 , HP色谱化学工
作站 ,美国安捷伦科技公司。
姜黄购于北京兴中中药饮片厂 ,产地广西;片姜
黄购于北京兴中中药饮片厂 ,产地浙江 ,两药材饮片
均经佳木斯大学生药教研室史权教授鉴定 ,符合中
国药典 2005版一部相关项下的规定。牻牛儿酮对
照品 (111665-200401):中国药品生物制品检定所 。
乙腈 、甲醇:色谱纯;无水硫酸钠 、磷酸为分析
纯。
2　方法与结果
2.1　供试品制备
2.1.1　挥发油制备:取经粉碎过 30目筛的姜黄粗
粉 10 g与片姜黄粗粉 100 g,分别置 250 m l与 2000
m l圆底烧瓶中 ,分别加 8倍量的水浸泡过夜 ,按中
1179 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月