全 文 ：22 • 实验研究 • October 2016, Vol.14, No.29 Guide of China Medicine
薯莨鞣质粗提物体外抗霉菌作用及对人肿瘤细胞生长的影响
邓先扩    陈  明    许义红    张林甦*
（贵州省黔南民族医学高等专科学校药学教研室，贵州 都匀 558000）
【摘要】目的  考查薯莨水提物的化学成分及其鞣质粗提物的体外抗霉菌等药理作用。方法  经典鉴定方法鉴定薯莨的化学成分；纸片法考
查薯莨鞣质粗提物对大肠杆菌 TG1、黑霉、黄曲霉、木霉的作用；MTT 法检测其对人肺癌细胞 A549、人卵巢癌细胞 A2780、人胃癌细胞
SGC-7901 生长的影响。结果  薯莨水溶性成分包括蛋白类、糖类或苷类、鞣质和有机酸等，未检测到生物碱；薯莨鞣质粗提物对大肠杆菌
TG1、黑曲霉及木霉均有一定的抑菌作用，对黑霉没有抑制作用；薯莨鞣质粗提物在体外对人肺癌细胞 A549 和人胃癌细胞 SGC7901 有刺
激作用，对人卵巢癌细胞 A2780 生长没有影响。结论  薯莨鞣质粗提物具有一定的抗霉菌活性，对某些肿瘤细胞有刺激作用，作用机制还
有待深入研究。 
【关键词】薯莨；成分分析；细菌；癌
中图分类号：R282.710.5；R73 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2016）29-0022-02
薯莨（Dioscorea cirrhosa Lout.）是薯蓣科薯蓣属的一种多年生藤
本野生植物，分布在我国中、南部地区，药用其块茎。薯莨的化学成
分主要是鞣质，还含有酚类，苷类及蛋白质、糖类、黏液等成分，具
有止血、抗菌、抗氧化和清热化瘀等功效，也有抗辐射和延缓衰老作
用。但有关其药理活性研究也仅基本上局限于传统的民间用法，有效
部位、有效成分尚不明确[1]。为了深入研究薯莨的药理活性，我们对
其鞣质粗提物的抗霉菌、对肿瘤细胞生长的影响作用进行了研究。
1 资料与方法
1.1 资料
1.1.1 药材：薯莨（干药材）由贵州青草堂药业有限责任公司提供，
品种鉴定由贵阳医学院药学院覃容贵教授完成。
1.1.2 供试菌种及肿瘤试剂：大肠杆菌TG1、黑霉、黄曲霉、木霉菌种
由贵州大学生命学院韩丽珍副教授惠赠。人肺癌细胞A549、人卵巢癌
细胞A2780、人胃癌细胞SGC-7901由中国医学科学院药用植物研究所
药理中心提供。
1.1.3 试剂与仪器：YX-400智能型全自动不锈钢立式电热高压灭菌
锅，常州诺基有限公司生产；DHP-2000型电热恒温培养箱，天津市
华北试验有限公司；RE-52AA型旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；
HWS-24型电热恒温水浴锅，上海一恒科技仪器有限公司；VERT.A1
倒置显微镜，ZEISS公司；HF 151UV二氧化碳培养箱，由上海力申科
学仪器有限公司；VICTOR X3型酶标仪，PerkinElmer公司；无菌操作
台，江苏苏州洁净技术研究所。噻唑蓝（MTT）和胰蛋白酶为Sigma
公司产品，PRMI-1640培养基GIBCO公司产品，胎牛血清杭州四季青
公司产品，胰蛋白胨，酵母提取物，琼脂粉为国产微生物培养用，氯
化钠、乙酸锌、氨水、氯化铵、乙二胺四乙酸二钠（EDTA•2Na）、
铬黑T、乙醇等其余试剂均为国产分析纯。
1.2 方法 
1.2.1 薯莨水提物性质鉴定：薯莨块10 g磨粉加水浸没，浸泡过夜，得
水提物，按常规方法检测氨基酸、蛋白质，糖类、多糖、苷、皂苷、
有机酸、生物碱、鞣质等项目。
1.2.2 提取与分离：薯莨块100 g粉碎成粗粉，加75%的酒精250 mL，
4 ℃下浸泡2 d，过滤，得乙醇滤液220 mL，用旋转蒸发仪50 ℃浓缩，
60 ℃水浴过夜，得干燥的深红色鞣质粗提物17.33 g。
1.2.3 测定鞣质含量：采用络合滴定法[2]测定，利用锌离子只与鞣质反
应的特性，用锌离子沉淀溶液中的鞣质，剩余锌离子以铬黑T作指示
剂，用EDTA-Na溶液滴定。称取样品适量50 mg，置100 mL量瓶中，
精密移取配制好的0.05 mol/L的锌滴定液10 mL及氨一氯化铵缓冲溶
液（pH=10）10 mL，加入100 mL量瓶中，以蒸馏水定容至100 mL，
超声3 min，待沉淀稳定后过滤，精密吸取续滤液10 mL，置锥形瓶
中，加配制好的氨一氯化铵缓冲溶液（pH=10）10 mL、铬黑T指示剂
适量，用0.05 mol/L的EDTA-Na滴定液滴定至溶液显蓝绿色，即为终
点。测得鞣质纯度为78.4%。
1.2.4 抗霉菌实验
1.2.4.1 薯莨鞣质粗提物用水溶解，配制成高剂量（100 mg/mL）和低
剂量（25 mg/mL）组。
1.2.4.2 菌液的制备：将大肠杆菌TG1、黑霉、黄曲霉、木霉菌种的单
个菌落分别接种于培养基中，37 ℃恒温增菌培养18～24 h，用无菌水
配制成1×106～1×107 CFU/mL的菌液（OD590=0.6）。
1.2.4.3 药敏纸片法：制作含有不同浓度薯莨且直径为10 mm的药敏纸
片。将不同的菌种100 µL涂布于琼脂培养基，当培养基表面干燥后，
将纸片贴于培养基表面，37 ℃培养24 h后，观察并测定抑菌环直径。
1.2.5 体外抗肿瘤实验：按文献方法培养细胞至对数生长期，调节细胞
浓度为1×105个/mL，各取100 µL加入96孔板，置5% CO2培养箱37 ℃
培养48 h，加入不同浓度供试品，将薯莨鞣质用DMSO溶解成高剂量
100 µg/mL和低剂量20 µg/mL组，每组设3个平行，继续培养48 h，每
孔加入10 µL 0.5 g/L MTT，4 h后终止反应，倾弃培养液，加入100 µL 
DMSO，酶标仪上490  nm处测吸光值A，按下式计算细胞生长抑制
率：细胞生长抑制率={[（阴性组OD值的平均值一空白组OD值的平均
值）一（实验组OD值的平均值一空白组OD值的平均值）]/（阴性组
OD值的平均值一空白对照组OD值的平均值）}×100%。
2 结 果
2.1 薯莨化学成分鉴定结果：薯莨水溶性物质含有蛋白类、糖类或苷
类、鞣质和有机酸，未检测到生物碱类成分。
2.2 薯莨主要成分鞣质抑菌结果：薯莨鞣质粗提物对大肠杆菌TG1、
黑曲霉及木霉均有一定的抑菌作用，呈现剂量依赖性，但是对黑霉没
有抑制作用。
2.3 薯莨主要成分鞣质体外抗肿瘤实验结果：MTT法检测薯莨鞣质
基金项目：贵州省黔南州科技基金
*通讯作者：E-mail:linsuzhang009@163.com
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2016.29.015
• 实验研究 • 232016 年 10 月第 14 卷 第 29 期 中 国 医 药 指 南
粗提物对肿瘤细胞生长的影响，薯莨鞣质粗提物在高剂量时对人肺
癌细胞A549和人胃癌细胞SGC7901有刺激作用，而对人卵巢癌细胞
A2780没有影响。低剂量组对以上三种细胞的影响都不显著（数据未
展示）。
3 讨 论
从薯莨鞣质粗提物对大肠杆菌TG1、黑霉、黄曲霉、木霉菌的抗
菌作用来看，其对大肠杆菌TG1、黄曲霉、木霉菌有一定抗菌作用，
而大肠杆菌TG1、黑霉、黄曲霉、木霉菌均与食品保鲜有关，这进一
步证实薯莨可用于食品保鲜，其有效部位可能是鞣质。当然薯莨鞣质
粗提物需进一步分离纯化，抗菌有效部位需进一步确定，抗菌机制也
需阐明，有报道认为薯莨鞣质能与蛋白质作用，凝固微生物体内的原
生质而具有抑菌作用，这有待进一步探明[1-2]。
薯莨抗肿瘤作用目前未见报道，我们对薯莨鞣质粗提物进行了体
外抗肿瘤实验探索，实验结果证实一定剂量薯莨鞣质粗提物在体外对
A549人肺癌细胞株及人胃癌细胞株SGC-7901有刺激生长的作用，而
对人卵巢癌A2780细胞株的生长则无明显影响。鞣质具有一定的抗癌
活性[2]，但薯莨鞣质粗提物表现出刺激A549人肺癌细胞株及人胃癌细
胞株SGC-7901生长作用，究竟是薯莨鞣质引起还是其他成分引起，或
者是对哪些肿瘤细胞有抗癌活性，哪些肿瘤细胞没作用这有待进一步
研究。各种肿瘤细胞生长的微环境不同，受到不同因子的影响从而不
断生长。目前的认知中，鞣质作为可以直接与蛋白作用的物质，可能
可以更加直接参与影响信号通路中的某些因子，从而刺激了某些肿瘤
细胞的生长。
参考文献
[1]  王庆蓉,马丽,雷呈祥.薯莨的药用价值[J].职业与健康,2009,25
(6):647-649.
[2]  安静波,郭健,宋文东等.薯莨提取物止血效果及化学成分的初
步研究[J].食品工业科技,2013(12):344-346.
Vitros5600测定血浆肌钙蛋白I ES稳定性及假阳性的分析
左  军    宋晓冬    徐建华 
（吉林省长春市一汽总医院（吉林大学第四医院），吉林 长春 130011）
【摘要】目的  探讨 Vitros5600 测定肌钙蛋白 I（CTNI）中存在的假阳性及不稳定因素。由于心肌肌钙蛋白特异地分布于心肌组织，作为心
肌损伤的高敏感和特异性标志物，心肌肌钙蛋白对于检测急性冠状动脉综合征患者心肌缺血及危险分级具有重要意义。目前测定肌钙蛋白
的方法很多如电化学发光免疫检测法（ECLIA）、酶联荧光分析法等。方法   Vitros5600 测定血浆肌钙蛋白 I 定量检测已被广泛应用，它采
用的是 intelliccheck 技术（化学发光法）应用特异性免疫测定单克隆抗体（-CTnI）。结果  其敏感度很高，其线性范围在 0.003~66.7 μg/L
其测定结果的稳定性显得尤为重要。结论  本文主要探讨关于使用 Vitros5600 测定血浆肌钙蛋白 IES 时，测定中发现的不稳定及其假阳性
的一些问题，以示在报告结果时应该加以注意，防止误报。
【关键词】CTnI；不稳定性；假阳性
中图分类号：R446.1；R541 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2016）29-0023-02
1 材料与方法
1.1 检测仪器：Vitros5600生化免疫分析仪。
1.2 试剂：vitros提供测定试剂及定标液，质控品。
1.3 测定方法：在经过仪器调试定标完成之后，进行质控测定并且通过
后进行样本检测[1-2]。采集患者新鲜无溶血、乳糜、黄疸的全血4 mL，
离心。用血清进行直接测定。
2 结 果
在我院使用5600这两年期间检测患者CTnI我们选取今年5月份不
断出现重复性差，假阳性的一共20例样本进行比较分析，研究发现有
些样本首次检测结果偏高，有的甚至达到危急值，而当再次复检后结
果正常了或者略高，与第一次检测结果相差甚远，结果见表1。
3 讨 论
3.1 从表1中可以看出在使用5600一段时间后检测患者血清CTnI某一阶
段频繁出现重复性差，稳定性差以及假阳性，而质控和批量检测对比
竟然没有明显变化。其中，在今年5~6月份检测的1200分样本中假性
增高总数为50例占4.12%最为明显。而真正有心肌梗死问题的和其他
心脏疾病方面引起的增高占35%。其余为正常结果，经过二次复检得
以证实。为什么会出现首次检测结果与再次复检存在较大差异呢。对
此我们考虑是不是由于试剂批号不同所引起的差异，试剂对血清样本
与质控品之间存在差异，然而，我们对此也用正常患者血清进行了比
对，也没有发现很大的差异。连续进行样本的重复性检测结果显示稳
定。还是记过用不同批号的试剂进行比对也没有发现明显差异，之后
我们考虑是不是由于仪器设备本身的因素比如光源，检测模块，吸样
针，吸样量等多方面因素的查找，更换也没有发现具体引起这种现象
的主要因素。
3.2 从标本采集开始我们仔细研究是不是由于采血量不够和离心力及
离心时间不够或者由于纤维蛋白凝块或者有极微小的凝块所致，我
们对每一分样本离心后采用手工方式彻底分离血清以达到减少微凝方
面的最低程度，此外同样选取无溶血，无乳糜，无黄疸的样本进行测
定，同时也考虑到药物方面的影响，以及临床护士采集标本时的一些
影响因素，经过分离血清用测试小杯将血清分离进行测试，但还是或
多或少，不定期的出现两次测定结果不符及假阳性的现象。
3.3 之后我们觉得过多的分离步骤也许会有影响结果的重复性及稳定
性，我们采用增加标本采集量每份标本采血量不少于4 mL，离心时间
不少于8 min离心速度不低于4000转/分，待血清完全离好后直接上机
测定经过这些尝试后虽然出现假阳性频率略低但还是有。
3.4 经过和厂家技术人员共同分析以及从他们那儿得到的经验我们考
虑到室内环境的尘埃是不是也会影响到结果的稳定性，对此我们经常
清洁空调，并且在机房内加装空气净化器以减少对检测时的影响。
综合上诉各种原因，我们认为造成这种重复性差，假阳性以及不
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2016.29.016