全 文 ：DOI:10． 13463 / j． cnki． cczyy． 2014． 06． 013
HPLC法测定紫芋中一种甾体皂苷的含量
刘云雪1，徐雅娟2* ，刘 悦2，解生旭2，司云珊2，张丁文1，关 欣1
(1．长春中医药大学，长春 130117;2．吉林省中医药科学院，长春 130021)
摘要:目的 建立紫芋 HPLC含量测定的方法。方法 通过 HPLC 法对紫芋中的一种甾体皂苷进行含量
测定及方法学的考察。结果 方法学考察的结果证明:该种甾体皂苷在 2. 0 ～ 10. 0 μg的范围内呈现出良好的
线性关系，精密度的 ＲSD为 1. 15%(n = 5) ;且稳定性良好，ＲSD为 2. 90%;重现性的 ＲSD为 2. 41%(n = 5) ;平
均回收率为 101. 80%，其 ＲSD为 2. 34%(n = 5) ;经过测定:该种甾体皂苷在紫芋中的含量为 0. 042 ～ 0. 044
mg /g。结论 该种方法操作简单，精密，专属性好，为紫芋的应用研究奠定了基础。
关键词:紫芋;甾体皂苷;含量测定;HPLC
中图分类号:Ｒ284. 1 文献标志码:A 文章编号:2095 － 6258(2014)06 － 0999 － 03
基金项目:科技部重大创制药物专项(2009ZX09103-447)。
作者简介:刘云雪(1987 －) ，女，硕士研究生，主要从事药物活性物质成分与结构研究。
* 通信作者:徐雅娟，电话 －(0431)86058690，电子信箱 － 1045758849@ qq． com。
Measurement of a steroidal saponin in colocasia tonoimo nakai by HPLC
LIU Yunxue1，XU Yajuan2，LIU Yue2，XIE Shengxu2，SI Yunshan2，ZHANG Dingwen1，GUAN Xin1
(1． Chang Chun Univercity of Chinese Medicine，Changchun 130117，China;
2． Jilin Academy of Chinese Medicine Sciences，Changchun 130021，China)
Abstract:Objective Using high performance liquid chromatography (HPLC)to determine the amount of steroidal
saponin for Colocasia tonoimo Nakai．Methods To measure the content of steroidal saponin in Colocasia tonoimo Na-
kai by HPLC and the methodological survey． Ｒesults Methodological survey shows，the Steroidal saponins has a good
linear relationship in the rage of 2． 0 ～ 10． 0 μg． The ＲSD in precision is 1． 15% (n = 5)with a good stability;ＲSD
was 2． 90%;reproducibility of ＲSD is 2． 41% (n = 5) ;average recovery rate is 101． 80% and its ＲSD is 2． 34% (n
= 5)． The amount of steroidal saponins in Colocasia tonoimo Naka is 0． 042 ～ 0． 044 mg /g． Conclusion The method
is simple，accurate and specific，thus lay the foundation for the application and research for Colocasia tonoimo Nakai．
Key words:colocasia tonoimo nakai;steroidal saponin;content determination;HPLC
紫芋(Colocasia tonoimo Nakai)为天南星科
(Araceae)芋属(Colocasia Schott)植物，味辛，性寒;有
散结消肿，祛风解毒之功效;主治乳痈，无名肿毒;可
用于治疗荨麻疹，疔疮，口疮，烧烫伤等疾病［1］。主
要分布于我国南方城市，生性喜阴，易适用于湿地上
的种植［2-3］，常被用作园林植物进行栽培［4］，广布于
河、湖沿岸，用于美化环境，以及作用于富营养化水体
的水质净化。紫芋中含有多糖类、皂苷类以及黄酮类
多种活性物质［5-6］，对于某些疾病具有显著的疗
效［7-8］。本文旨在对紫芋中替高皂苷 3-O-α-L-吡喃鼠
李糖基(1→2)-O-{β-D-吡喃木糖基-(1→2)-O-［β-D-
吡喃木糖基-(1→3) ］-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4) }-
β-D-吡喃半乳糖苷进行 HPLC法及方法学考察，以建
立该甾体皂苷的含量测定方法［9-13］。
—999—
第30卷第6期
2014 年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12，2014
1 实验仪器和试药
1. 1 仪器与试药 高效液相色谱仪，分析型 HPLC
谱仪，岛津 LC-2010 检测器(日本岛津公司) ，ELSD
2000ES蒸发光散射检测器 (美国 Alltech 公司) ，
CLSS-VP色谱工作站;电子天平 AG-245 (瑞士 Met-
tler Toledo 公司)。试药:色谱甲醇 (美国 Honey-
well) ，水为双蒸水 (实验室自制) ，对照品:甾体
皂苷 (实验分离得到，纯度 ＞ 98%) ，紫芋药材
(购买于广东省，自然干燥)。
1. 2 测定的条件 高效液相色谱仪:岛津 LC-2010。
色谱柱:Megres C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流
动相:甲醇-水 =(70∶ 30) ;流速:1. 0 mL /min;柱温:
25 ℃;检测器:ELSD 2000ES 蒸发光散射检测器，气
体流速:2. 8 L /min，温度:100 ℃。
2 方法与结果
2. 1 溶液制备
2. 1. 1 对照品(标准品)溶液的配制 取甾体皂苷
对照品适量，精密称定后，加甲醇微热溶解，摇匀，配
制成 1. 00 mg /mL的标准品溶液，备用。
2. 1. 2 供试品溶液的配制 取自然干燥后的紫芋药
材 18 g，精密称定后，置于 500 mL 的圆底烧瓶中，再
精密加入 50%乙醇 300 mL，进行提取，共回流提取 3
次，1 h /次，回收合并提取液(乙醇提取液)至无醇味
后，将回收后的水液上 D21 大孔树脂柱，用蒸馏水水
洗至洗脱液无色后，再用 70%乙醇洗至洗脱液无色，
将 70%乙醇洗脱液收集后，蒸干，残渣加入 95%乙醇
溶解，超声(溶解充分) ，转移至 5 mL量瓶中，并稀释
至刻度，定容，摇匀，即得。
2. 2 方法学考察
2. 2. 1 色谱柱的考察 精密吸取 20 μL 供试品溶液
注入液相色谱仪中，通过峰形，保留时间等条件的综合
选择后，确定出 2个色谱柱中色谱条件较佳的色谱柱。
本次实验最终确定:色谱柱 Megres C18柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm)的峰形和保留时间等都优于 Agilent
HC-C18柱(4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，为较佳的色谱
柱，故选用前者为含量测定的色谱柱。
2. 2. 2 流动相的考察 精密吸取 20 μL供试品溶液
注入液相色谱仪中，找出最适宜的流动相比例。综合
考察后流动相甲醇-水系统优于乙腈-水的洗脱系统，
故选用甲醇-水为此次考察的流动相洗脱系统，并且
流动相为甲醇-水 =(70∶ 30)的洗脱条件最为适宜，
为此次考察的最佳流动相，保留时间适宜，峰形良好。
2. 2. 3 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液
2. 0，4. 0，6. 0，8. 0，10. 0 μL，注入高效液相色谱仪，测
定色谱峰的峰面积，以浓度的常用对数 lgC 为横坐标
(X) ，以峰面积的常用对数 lgA为纵坐标(Y) ，制定标
准曲线。求得线性回归方程为 Y = 4. 449 + 1. 627X，r
= 0. 999 9，结果证明在 2. 0 ～ 10. 0 μg 范围内呈现出
良好的线性关系。
2. 2. 4 精密度的考察 精密吸取对照品溶液 2. 0
μL注入液相色谱仪，重复进样 5 次，测定其色谱峰的
峰面积，求得 ＲSD的数值为 1. 15%，说明仪器精密度
良好。
2. 2. 5 稳定性的考察 将配制好的供试品溶液分别
放置 0，2，4，6，8 h 进样，精密吸取供试品溶液 30 μL
注入液相色谱仪，测定其色谱峰的峰面积。求得其
ＲSD的数值为 2. 9%，说明供试品在 0 ～ 8 h内稳定性
良好。
2. 2. 6 重复性的考察 取供试品 5 分，精密称量，置
于圆底烧瓶中，精密称定后，放置于 500 mL的圆底烧
瓶中，按 2. 1. 2 项下制备样品，制得供试品 5 分，待
测。测得该种甾体皂苷的含量为 0. 044 2 mg /g，重复
性考察的 ＲSD数值为 2. 41%(n = 5) ，证明该提取方
法的重复性良好。
2. 2. 7 加样回收率的考察 精密称取已知含量的供
试品，加入一定量的对照品，按制备方法制备，按上述
的测定方法进行测定。进行加样回收率的考察。结
果平均回收率为 101. 80 %，ＲSD为 2. 34 %(n = 5)。
2. 3 紫芋中甾体皂苷的含量测定 取 5 分不同批次
的供试品，精密称定后，放置于 500 mL的圆底烧瓶中，
按 2. 1. 2项下制备样品，制得供试品 5 分，待测。经测
定紫芋中甾体皂苷的含量为 0. 042 ～0. 044 mg /g。
3 小结
本文采用高效液相色谱法对紫芋中甾体皂苷，替
高皂苷 3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-O-{β-D-吡喃木
糖基-(1→2)-O-［β-D-吡喃木糖基-(1→3) ］-β-D-吡喃
葡萄糖基-(1→4) }-β-D-吡喃半乳糖苷在紫芋药材中
的含量进行测定。通过测定方法的考察，确定了较佳
的色谱学考察条件，该方法操作简单，专属性好，测定
紫芋中该种甾体皂苷的含量为 0. 042 ～0. 044 mg /g。
本文在方法学考察的基础上，应用高效液相色谱
技术建立了紫芋中一种甾体皂苷的含量测定方法，并
对紫芋中该物质的含量进行了测定，本研究结果为紫
芋的质量标准制定提供了理论和实验依据。
—0001—
第30卷第6期
2014 年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12，2014
DOI:10． 13463 / j． cnki． cczyy． 2014． 06． 014
益肾康颗粒质量标准研究
樊 晖，田 原*
(辽宁中医药大学附属医院，沈阳 110032)
摘要:目的 研究建立益肾康颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱法对方中黄芪、丹参进行定性鉴别，
采用 HPLC法测定赤芍中芍药苷含量，Agilent TC-C18(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)色谱柱，乙腈-0. 3%冰醋酸(15
∶ 85)为流动相，流速 1. 0 mL /min，检测波长 230 nm，柱温 25 ℃。结果 薄层色谱斑点清晰、阴性液无干扰。
芍药苷在 0. 263 ～ 1. 315 μg范围内呈现良好的线性关系(r = 0. 999 6) ，平均回收率为 98. 83%(n = 6，ＲSD =
2. 1%)。结论 该方法准确、专属性强、重复性好，可以作为控制益肾康颗粒质量的方法。
关键词:益肾康颗粒;丹参;黄芪;芍药苷;高效液相色谱法;薄层色谱法
中图分类号:Ｒ284. 2 文献标志码:A 文章编号:2095 － 6258(2014)06 － 1001 － 03
基金项目:辽宁省科学技术计划项目(2010225034)。
作者简介:樊 晖(1979 －) ，女，硕士，主管中药师，主要从事中药制剂分析与新药开发研究。
* 通信作者:田 原，女，副主任药师，电子信箱 － 254276239@ qq． com。
Studies on quality standard for Yishenkang granules
FAN Hui，TIAN Yuan*
(Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110032，China)
Abstract:Objective To study and establish the quality standard for Yishenkang granules．Methods TLC was used to
identify Astragali Ｒadix、Salviae Miltiorrhizae Ｒadix Et Ｒhizoma． The contents of paeoniflorin in Ｒadix Paeoniae Ｒub

ra
参考文献:
［1］中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［M］．北
京:科学出版社，1979:68-74．
［2］宋雪红，蒋新元，赵梦婕． 7 种湿地水生植物厌氧发酵产沼
气试验［J］．广东农业科学，2012，39(3) :91-94．
［3］郑洁敏，牛天新，陈煜初，等．三十九种观赏挺水植物应用
于人工浮岛水质净化潜力的比较［J］． 北方园艺，2013，2
(6) :72-76．
［4］唐艺璇，郑洁敏，楼莉萍，等． 3 种挺水植物吸收水体
NH4 +、NO3 －、H2PO
4 －的动力学特征比较［J］．中国生态农
业学报，2011，19(3) :614-618．
［5］黄明发，张盛林．魔芋膳食纤维保健作用研究进展［J］．中
国食物与营养，2010(5) :75-77．
［6］王瑞兰，冯羽中，康大力．紫芋花色苷的抗氧化活性及其稳
定性研究［J］．怀化学院学报，2011(8) :23-25．
［7］邓伟，李新建，田小林，等．紫外分光光度法测定淫羊藿颗
粒中淫羊藿苷的含量［J］． 吉林中医药，2013，33(1) :72-
73．
［8］黄勇，张金亭，李金花，等．草珊瑚颗粒提取工艺优选及异
秦皮啶含量测定［J］．吉林中医药，2007，27(12) :65-66．
［9］赵珉，纪耀华，王秋香，等．茜草粗多糖的提取及总糖的含
量测定［J］．吉林中医药，2004，24(6) :55．
［10］汪涵源，王春福，董金香．心脑静胶囊质量标准研究［J］．
长春中医药大学学报，2007，23(4) :24-25．
［11］李春燕．三参贯脉颗粒中丹参酮ⅡA 的含量测定［J］．吉
林中医药，2010，30(4) :343-345．
［12］苗艳平，苗艳波，张宪平． HPLC 法测定返魂草中 4-羟基
苯乙酸的含量［J］． 长春中医药大学学报，2011，27(6) :
1050．
［13］耿虹，孙录，董世娜，等．高效液相色谱法测定敖东壮肾丸
中淫羊藿苷的含量［J］．吉林中医药，2012，32(10) :1045-
1047． (收稿日期:2014 － 05 － 20)
—1001—
第30卷第6期
2014 年 12 月
长 春 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Changchun University of Traditional Chinese Medicine
Vo1. 30
12，2014