作 者 :李修岭;韩庆香;Organ-单位: 临沂师范学院生命科学学院;
期 刊 :临沂师范学院学报 2009年 06期 页码:71-75
关键词:海菜花;ISSR;反应体系;优化;
摘 要 :以渐危植物海菜花基因组DNA为研究对象,筛选引物UBC-818[序列为(CA)_8G]研究并确定了该引物适宜的退火温度,对影响ISSR扩增效果的主要参数进行筛选和优化,确定了海菜花的ISSR分析的最佳反应体系:15μL反应体系中含25 ng模板DNA,0.2 mmol·L~(-1)引物,0.2μmol·L~(-1)dNTPs,2.0mmol·L~(-1)Mg~(2+),0.5 UTaq酶,1.5μL 10×PCR Buffer Mg~(2+)(-)[100 mmol·L~(-1)Tris-HCl(pH 8.3),500 mmol·L~(-1)KCl].