全 文 ：·生物技术· 北方园艺 2007(10):188～ 189
作者简介:汤洁(1964-),女 ,副教授,主要从事植物遗传 、花卉栽培
繁殖等教学及科研工作。 E-mail:Tangjie8286@126.com。
收稿日期:2007-05-30
长寿花叶片的组织培养与快速繁殖研究
汤 　洁
(抚顺师范高等专科学校,辽宁 抚顺 113006)
　　摘　要:选用长寿花叶片作为外植体 ,在附加有不同激素(细胞分裂素 6-BA 和生长素
NAA)的MS培养基上进行培养 ,研究激素对长寿花叶片愈伤组织和不定芽增殖的影响。结果表
明:不同浓度和种类的激素对长寿花愈伤组织及不定芽增殖的影响不同 ,最适宜的培养基为:
MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.3 mg/ L。
关键词:长寿花;叶片;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S 681.903.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2007)10-0188-02
　　长寿花(Kalanchoe blossfeldiana)又称圣诞伽蓝菜 、
寿星花 ,景天科伽蓝菜属多年生肉质草本植物[ 1] 。茎直
立 ,株高 10 ～ 30cm;叶片肉质交互对生 ,椭圆状长圆形 ,
深绿色有光泽 ,边略带红色。冬春开花 ,圆锥状聚伞花
序 ,花多数 ,花色有红 、橙红 、粉红、绯红 、桃红 、黄多
种[ 2 , 3] ,花期长2 ～ 3个月[ 4] ,花朵细密拥簇成团 ,整体观
赏效果好。植株的大小 、花色和花期常因品种不同有较
大的变化。用扦插和播种法繁殖。生长势强健 ,耐干
旱 ,喜阳光充足 ,容易栽培 ,是优良的冬春季室内观赏盆
花[ 5] ,深受人们的喜爱。长寿花开花不能结实 ,主要靠
扦插繁殖[ 6] 。借助于组织培养技术[ 7] ,可以迅速地繁殖
出所需要的大量花卉新品种种苗[ 8] ,以满足大批量现代
化温室生产的需求 ,并能使其在质量上达到更高标准。
1　材料和方法
1.1　材料
供试材料为花卉市场所购买的优质长寿花。
1.2　培养基及培养条件
　　愈伤组织诱导及继代培养基:①MS +6-BA
1mg/L+NAA 0.2 mg/L;②MS+6-BA 1 mg/L+NAA
0.1mg/L;③MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L。继代
培养基:MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L。生根培养
基:④1/2 MS+NAA 0.5mg/L。
上述培养基均附加蔗糖30 g/L ,琼脂 7.5 g/L , pH
5.8 ,培养温度 25 ～ 27℃,光照时间 12 h/d ,光照度约为
1 500 lx 。
1.3　外植体接种
长寿花叶片的组织培养以嫩叶为外植体 ,选择健康
无病的叶片剪下 ,放入大烧杯中加入少量洗涤剂 ,然后
用自来水冲洗 20 ～ 40min后 ,放到滤纸上吸干水分 ,置
于超净工作台上进行常规消毒。先用 75%的酒精浸泡
0.5min ,取出投入装有12%次氯酸钠溶液的广口瓶中消
毒 8min(消毒时盖上瓶盖),然后用无菌水冲洗 3～ 5次 ,
放在消毒滤纸上吸去表面水分。把已灭菌的叶片剪成
1 cm
2的小块 ,接种到愈伤组织诱导培养基上。接种后每
天观察、记录愈伤组织生长及增殖的情况 ,直至30 d左右。
1.4　快速繁殖
长寿花叶片接种后4～ 5 d时叶片卷起 ,约15 d左右
切口处出现白色 、淡绿色或绿色突起即愈伤组织 ,一个
月后愈伤组织上长出绿色的不定芽。将不定芽切成小
块 ,转接到继代培养基中继续培养 ,幼苗生长良好 ,不断
伸长加粗 ,并萌生出芽丛 ,经30 d左右就长满培养瓶 ,即
可再继代培养。
1.5　生根
当所诱导的芽长到2 ～ 3 cm高时 ,将生长健壮的芽
丛取出分离成单株 ,转接到生根培养基上培养。经过7 d
左右就有根不断生成 ,生根率达 100%,15 ～ 20 d即可达
到移栽要求。
1.6　驯化及移栽
当根长 1 cm 时可以进行移栽 ,先将培养瓶放到温
室内培养2 ～ 3 d ,再将瓶口纸打开 ,倒入少量水适应锻炼
2 ～ 3 d ,然后取出生根苗 ,洗净根部培养基 ,移栽到装有
珍珠岩的穴盘中培养 ,注意遮光 ,成活率可达90%以上。
2　结果与分析
2.1　不同培养基对叶片愈伤组织的诱导率不同
从表 1中可以看出 ,不同培养基对长寿花叶片愈伤
组织的诱导情况不同。经过 20 d左右的培养 ,长寿花叶
片切块在不同培养基中都有愈伤组织形成 ,并随着培养
天数的增加 ,逐渐增多 ,其中 ,第③组培养基愈伤组织诱
导率最高 ,达到 100%,第②组培养基愈伤组织诱导率其
次 ,达到92.1%,而第①组培养基愈伤组织诱导率只达
到 82.9%。
2.2　不同培养基对愈伤组织 、不定芽生长的影响
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北方园艺 2007(10):188 ～ 189 ·生物技术 ·
　　表 1　不同培养基对长寿花愈伤组织诱导情况
培养
基
接种
数
产生愈伤
组织数
诱导率
/ %
愈伤组织分化
不定芽数
分化
率/ %
① 41 34 82.9 34 100
② 38 35 92.1 35 100
③ 42 42 100 42 100
　　接种培养 40 d后对各组培养基中的愈伤组织生长
情况进行比较。第③组培养基诱导的愈伤组织生长最
好 ,第②组培养基其次 ,诱导的愈伤组织生长较好 ,第①
组培养基稍差。将不同生长质量分成四个等级:一级:
愈伤组织生长健壮 ,浓绿 ,产生不定芽多;二级:愈伤组
织生长较好 ,色绿 ,产生不定芽较多;三级:愈伤组织生
长较慢 ,色淡黄 ,产生不定芽少;四级:愈伤组织生长缓
慢 ,色黄 ,分化差。各组愈伤组织生长情况比较见表2。
　　表 2　　　长寿花愈伤组织生长情况
生长质量培 养 基 质量一级 质量二级 质量三级 质量四级
统计数
/瓶
① 4 5 1 10
② 2 5 4 10
③ 3 5 2 10
　　从表 2中可以看出 ,在不同培养基中愈伤组织的生
长和不定芽分化生长的情况是不同的 ,其中第③组培养
基好于第②组和第①组 ,诱导的愈伤组织生长质量较
好 ,不定芽分化早 ,说明这些培养基适合于长寿花生长 ,
对愈伤组织和不定芽的诱导有促进作用。培养试验中
发现 ,长寿花在所接种的附加 1 ～ 2 mg/L 6-BA 和
0.1 ～ 0.3mg/L NAA试验培养基中都能生长 ,随培养时
间的增加而表现不同(见表 3),在③培养基上生长最好 ,
因此 ,长寿花不定芽培养的适宜培养基为 MS +
BA 2 mg/ L+NAA 0.3mg/L。但随着培养时间的增加 ,
培养瓶内的营养物质渐渐缺乏 ,生长状态变差 ,应及时
转接到新鲜培养基中 ,以保持其旺盛的生长力。
　　表 3　　不同培养基对不定芽生长的影响
培养基 组成/mg·L-1 芽生长情况
① MS+6-BA 1+NAA 0.2 生长缓慢,长势中
② MS+6-BA 1+NAA 0.1 生长较慢,叶片出现淡褐色
③ MS+6-BA 2+NAA 0.3 生长快 ,叶色淡绿,长势好
3　结论
3.1　在长寿花叶片组织培养过程中 ,使用 12%次氯酸
钠溶液消毒8 min效果良好。但注意对成熟度不同的叶
片掌握好消毒时间 ,不足则消毒效果不好 ,过之则使外
植体受到伤害 ,愈伤组织及不定芽的诱导受到影响。次
氯酸钠溶液是目前国内常用的强力杀菌剂 ,它具有广
谱 、高效 、快速的消毒效果 ,并且安全 、无毒 ,对植物及人
体无毒副作用 ,去除容易[ 9] ,价格便宜 ,可降低组培成本 ,
有利于环境的保护。
3.2　在 MS培养基中同时添加1 ～ 2mg/L的 6-BA和
0.1～ 0.3mg/L的 NAA都能诱导长寿花叶片产生愈伤
组织和不定芽 ,其中 2mg/L 6-BA与 0.3mg/L NAA的
配比是良好选择 ,诱导率高 ,长势好。这个组合对于以
长寿花其他器官为外植体的诱导 ,是否具有同样的效
果 ,还有待于进一步的研究与探索。
3.3　无菌苗的生根诱导较易 ,这与陈玉梁等研究一致。
在长寿花叶片组织培养中 ,根的诱导都能达到 100%,
NAA对根发生的促进作用明显可见 ,但要掌握好 NAA
的量 ,过多则不利于以后生长。同时长寿花本身的遗传
特性决定其生根较易 ,因此生长健壮的不定芽有可能在
瓶外经生根处理后直接进行移栽 ,这样能简化组培程
序 ,缩短繁殖时间。
3.4　长寿花为多年生常绿花卉 ,枝繁叶茂 ,以叶片作为
外植体 ,取材方便 ,一年四季都可进行 ,无时间限制 ,而
且长寿花在合适的培养基中 ,可直接形成芽丛 ,能极大
地提高繁殖系数 ,缩短繁殖周期 ,为现代化的规模生产
提供了前提和保障。
参考文献
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研究[ J] .中国农学通报, 2004, 20(5):33-34, 89.
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Kalanchoe bloss feldiana Leaves
TANG Jie
(Fushun teachers College , Fushun Liaoning 113006 ,China)
Abstract:Choose kalanchoe blossefeldiana leaves as explant , Carried on development in the affixture up dif ferent hor-
mone(cytokinin 6-BA and auxin NAA)MS.Studied the effect of hormone to the harm organization of Kalanchoebloss-
f eldiana;Leaves and untertain bud propagate.As a result different density and hormone of categoly had different effect
on Kalanchoe blossfeldiana leaves harm organization and untertain bud propagate.The most saitable davelopement is
MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.3 mg/L.
Keywords:Kalanchoeblossfeldiana;Leaves;Tissue Culture;Rapid Propagation
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