全 文 ：芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病的防治作用
纪丽莲
(淮阴工学院生物工程系 ,江苏淮安 223001)
　　摘要:从黄海岸芦竹(Arundo donax)中分离得到一株木霉属的内生真菌 F0238,在皿内及盆栽苗上对该菌防
治烟草赤星病(Alternarina a lterna te)的作用进行了试验研究。皿内的对峙培养结果表明 , F0238对烟草赤星病菌
有较强的营养竞争作用;盆栽试验表明 , F0238在 1010个 /m l孢子浓度下对烟草赤星病的预防能力达 90%以上 ,
108 ～ 109个 /m l孢子浓度下对烟草赤星病的治疗效果达 50%以上 ,表明该菌具有潜在的防治烟草赤星病的能力。
　　关键词:芦竹;内生真菌;烟草赤星病;防治作用
　　中图分类号:S482. 2+92　　文献标识码:A　　文章编号:1002 -1302(2005)02 - 0054 -02
收稿日期:2004 - 10 - 08
基金项目:江苏省教育厅自然科学基金项目(编号:02KJD180010)。
作者简介:纪丽莲 (1965— ),女 , 福建厦门人 , 博士 ,副教授 ,主要从
事植物与微生物的功能与机制研究。 Tel:(0517) 3591190;
E -m ail:j112863@ vip. sin a. com。
　　烟草赤星病 (Alternarina alternate)自 1892年首
次报道以来 ,至今已成为全球范围的地方性灾害 。
20世纪 90年代以来 ,烟草赤星病的发生逐年上升
并成为主要病害 。烟草赤星病是烟草生长中后期发
生的叶斑病 ,主要危害烟株的叶片 、茎秆和蒴果等部
位 。最初在叶片上出现黄褐色圆形小点 ,后逐渐转
为深褐色 ,病斑呈明显的同心轮纹 ,发病严重时病斑
相互交汇 ,造成烟叶焦枯脱落 ,对烟叶的产量和质量
影响很大[ 1 ～ 2] 。
生物农药与生物防治是解决植物病菌抗药性及
环境问题的极具潜力的手段。我们课题组从黄海海
岸浅水滩的低盐芦竹 (Arundo donax)中分离到一株
具生物活性的内生真菌 (编号为 F0238),经鉴定属
于木霉属(Trichoderma)。我们已研究发现该菌具广
谱和高效的抗植物病原真菌活性 ,其抑制黄瓜灰霉
病菌的作用与机制也已得到证实[ 3, 4] 。为挖掘该株
芦竹内生真菌在农业生防方面的应用潜力 ,拓宽生
物农药与生物防治的资源 ,我们进一步系统地研究
了芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病 (菌 )的防治
作用。
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　海岸低盐芦竹　采自黄海海岸浅水滩。
1. 1. 2　芦竹内生真菌及其培养　F0238的分离与
鉴定见文献 [ 3 ～ 4] 。将斜面保藏的 F0238菌挑出
几环 ,以无菌水制成孢子浓度为 108个 /m l的菌悬液
备用 。
1. 1. 3　烟草赤星病菌及其培养　烟草赤星病菌由
南京大学生物科学学院微生物室提供 ,用 PDA培养
基于 28℃下培养活化后 ,挑取几环供试斜面上的菌
丝 ,用无菌水洗下 ,制成 108个 /m l的烟草赤星病菌
悬液备用 。
1. 2　方法
1. 2. 1　生长竞争作用的测定　采用两点对峙培养 ,
即分别将 F0238和烟草赤星病菌的菌悬液接种于
PDA平板上 , 25℃下培养 3 d后 ,各切取 9 mm直径
的菌丝块 。将病菌菌丝块放在半径为 9 cm的 PDA
平板一侧的中间 (距板边缘 3 cm处 ),同时在相对
一侧的中间放置同样大小的 F0238菌丝块 ,将该平
板置于 28℃下恒温培养 14 d,每日观察测量菌落的
生长及相互影响情况。相同试验重复 3次 [ 4, 5] 。
1. 2. 2　室内盆栽试验
1. 2. 2. 1　F0238对烟草赤星病的预防作用　选择
生长势相同 、苗龄 50 d的红大烟苗 ,移栽至盆内。
将 F0238菌在 PDA培养基上培养 7 d后 ,用无菌水
洗下其分生孢子 ,分别配成 106个 /m l、107个 /m l、108
个 /m l、109个 /m l、1010个 /m l浓度梯度的孢子悬浮
液 ,喷在烟苗上 ,风干后立即接种直径 3mm的烟草
赤星病菌菌丝块。以清水代替 F0238孢子悬浮液作
为对照。一个处理取 30株苗 ,设 3次重复。早晚保
湿 , 3 d后观察烟苗的发病情况。
1. 2. 2. 2　F0238对烟草赤星病的治疗作用　先在
—54— 江苏农业科学　2005年第 2期DOI牶牨牥牣牨牭牳牳牴牤j牣issn牣牨牥牥牪牠牨牫牥牪牣牪牥牥牭牣牥牪牣牥牪牥
烟苗上接种直径 3 mm的烟草赤星病菌菌丝块 ,早
晚保湿 3 d,出现黄褐色病斑后立即测量病斑大小 ,
然后喷洒 1. 2. 2. 1所述浓度梯度的 F0238孢子悬浮
液 。保湿 3 d后再测病斑大小。对照与重复的设置
与 1. 2. 2. 1同 。
2　结果与分析
2. 1　芦竹内生真菌 F0238与烟草赤星病菌的生长
竞争作用
对峙拮抗培养试验结果(图 1)表明 ,在 PDA培
养基上芦竹内生真菌 F0238的平均生长速度 (R a )
是烟草赤星病菌生长速度 (R f)的 3 ～ 5倍 。两菌接
种约 4 d后 , F0238开始包围 、覆盖病菌菌落 ,从而
使烟草赤星病菌生长受到抑制 ,其菌落的生长半径
R f明显低于对照生长半径 RO ,进入第 6 d后 ,病菌
菌落开始逐渐萎缩。这说明芦竹内生真菌 F0238具
有良好的营养竞争能力 ,从而使病原菌受到明显的
抑制 ,整个平板最终为 F0238所占据 ,并形成大量的
绿色孢子。此外 ,在两菌的相交界面处可观察到一
条清晰的拮抗带 ,说明产生了某种抗生素物质 。
2. 2　F0238对烟草赤星病的预防作用
由表 1可知 , F0238对烟草赤星病有着很强的
预防作用。接种 3 d后 ,对照组的烟苗病斑面积已
达到 3. 12 cm2 ,试验组的病斑面积都极显著减小 。
不同浓度的 F0238对烟草赤星病的预防效果差异较
显著 ,浓度越高 ,预防效果越好 。
2. 3　F0238对烟草赤星病的治疗作用
接种烟草赤星病菌的烟苗保湿培养 3 d发病
后 ,喷施不同浓度的 F0238孢子悬浮液进行 3 d的
治疗处理 , 结果 (表 2)发现 , 108 ～ 109个 /m l的
F0238对病株有 50%以上的抑制率 ,此两种浓度产
生的效果差异不显著;106 ～ 107个 /m l的 F0238对病
株产生了 30% ～ 40%的抑制率 ,且这两种浓度的效
果差异不显著。但并非防治菌的浓度愈大愈好 ,
10
10个 /m l的 F0238对病株仅有 31. 23%的抑制率。
因此 ,一旦植株被感染后 ,用浓度为 108 ～ 109个 /m l
的 F0238孢子悬浮液进行治疗处理 ,效果最好。
表 1　芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病的预防效果
F0238浓度
(个 /m l)
接种后 3 d病斑
面积(cm2)
预防效果
(%)
1010 0. 24 92. 28 a
109 0. 65 79. 03 a
108 1. 56 50. 10b
107 1. 92 38. 44b
106 2. 50 20. 59 c
CK(清水) 3. 12 —
　　注:表中不同字母表明 LSD分析差异显著。
表 2　芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病的治疗效果
F0238浓度
(个 /m l)
处理前病斑
面积(cm2)
处理后 3 d病斑
面积(cm 2)
防治效果
(%)
1010 0. 59 4. 44 31. 23 a
109 0. 54 3. 20 50. 45 a
108 0. 64 3. 09 52. 07 a
107 0. 50 3. 81 40. 89b
106 0. 52 4. 13 36. 00b
CK(清水) 0. 62 6. 46 —
　　注:表中不同字母表明 LSD分析差异显著。
3　小结与讨论
本研究结果揭示了芦竹内生真菌 F0238对烟草
赤星病菌有良好的拮抗作用 ,这种作用来自于内生
菌细胞及其代谢产物的协同效果;芦竹内生真菌生
长速度快 ,具较强的营养竞争能力 ,生长竞争力强 ,
在萌发和生长过程中能占据绝大部分营养空间 ,从
而抑制病菌的生长 。
芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病有较强的生
防作用 , 1010个 /m l的浓度预防病害的能力达到
90%以上 ,显示该菌潜在的预防烟草赤星病的能力 。
芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病有较强的治
疗作用 ,但并非浓度愈高愈好。过量的防治菌一则
会产生大量的抗生素类物质 ,影响植株的正常生长;
二则大量孢子在萌发时进行营养与空间竞争而内
耗 ,反而不利于对付植物病菌。 108 ～ 109个 /m l的
F0238孢子治疗烟草赤星病的效果最好 。
芦竹内生真菌 F0238在皿内及盆栽苗上对烟草
赤星病菌良好的拮抗作用已得到试验证明 ,但处于
大田生长的烟草与盆栽苗有一定的区别 ,芦竹内生
(下转第 56页)
—55—纪丽莲:芦竹内生真菌 F0238对烟草赤星病的防治作用
江苏棉田烟粉虱发生危害及防治
周福才 1, 2 , 杜予州 1 , 王　勇1 , 任顺祥 2
(1.扬州大学农学院 ,江苏扬州 225009;2.华南农业大学 ,广东广州 510846)
　　摘要:通过对江苏棉田烟粉虱的发生危害情况的多年系统调查研究发现 , 江苏省棉田烟粉虱初入侵虫源主
要来自温室(大棚)中的越冬蔬菜 、花卉 , 棉田烟粉虱成虫 7月中旬前后始见 , 10月下旬随着气温下降田间成虫逐
渐消失。北部棉区烟粉虱发生高峰期略早 ,发生量明显重于苏中棉区。越冬条件的改善 ,越冬虫量丰富是近几年
江苏棉田烟粉虱暴发危害的重要原因 , 控制越冬虫源是棉田烟粉虱防治的关键措施之一。
　　关键词:棉花;烟粉虱;发生规律;控制技术
　　中图分类号:S435.622　　文献标识码:A　　文章编号:1002 - 1302(2005)02 -0056 - 03
(上接第 55页 )
真菌 F0238对烟草赤星病菌良好的防治效果能否在
大田中保持 ,如何强化这种防治效果 ,这是我们下一
步要做的工作。
参考文献:
[ 1]朱亚滨 ,方晓宇. 我国烟草病害及抗赤星病育种研究进展 [ J] .
现代化农业, 2004, (5):7～ 8.
[ 2]于　莉 ,李　赤 ,李文健 ,等. 烟草赤星病菌生物学特性的研究
[ J] .吉林农业大学学报 , 1994, 16(2):31～ 35.
[ 3]纪丽莲 ,张强华 ,崔桂友. 芦竹内生真菌 F0238对植物病原菌的
拮抗作用 [ J] .微生物学通报 , 2004, 31(2):82～ 86.
[ 4]纪丽莲. 一株芦竹内生真菌对黄瓜灰霉病菌的抑制作用研究
[ J] . 江苏农业科学 , 2004, (6):80 ～ 82.
[ 5]王　革 ,李梅云 ,段玉琪 ,等. 木霉菌对烟草黑胫病菌的拮抗机制
及其生物防治研究 [ J] .云南大学学报 (自然科学版), 2001, 23
(3):222～ 226.
　　烟粉虱 [ Bem isia tabaci(Gennadius)]又叫棉粉
虱 ,属同翅目粉虱科小粉虱属 ,是一种多食性的小型
昆虫。烟粉虱在我国危害棉花的报道始见于 1953
年的台湾省 [ 1] , 20世纪 80年代末以前 ,云南 、海南 、
湖北 、上海等地有烟粉虱危害棉花的报道 ,但发生危
害较轻 ,发生范围局限在部分区域 [ 2, 3] 。 20世纪 90
年代中期以来 ,我国棉田烟粉虱发生范围迅速扩大 ,
危害逐步加重 ,并迅速成为棉田的重要害虫 [ 4 ～ 7] 。
江苏棉田 2001年 7月首次发现烟粉虱 [ 8] ,此后全省
多个地区棉田先后发现烟粉虱 ,种群密度迅速上升 ,
严重影响棉花产量和品质。为此 , 2002年起我们在
对江苏地区烟粉虱普查的基础上 ,对中部和北部棉
区棉田烟粉虱进行了系统调查研究 ,以期为棉田烟
粉虱的有效控制提供依据 。
收稿日期:2004 - 11 - 30
基金项目:江苏省教育厅自然科学基金项目(编号:03K JB21056);扬
州大学自然科学基金项目(编号:HO111215)。
作者简介:周福才 (1964— ),男 , 江苏靖江人 , 博士 ,副研究员 , 主要
从事昆虫生态及农业害虫综合治理研究。 Te l:(0514)7979234;E
-m ail:fczhou@ yzu. edu. cn。通讯作者:任顺祥 , E -m ai l:shxren@
scau. edu. cn。
1　江苏棉田烟粉虱发生危害特点
1. 1　发生危害概况
烟粉虱是一种刺吸式口器害虫 ,在棉花上主要
刺吸叶片背面的韧皮部 ,吸食叶片维管束汁液 ,大量
消耗棉花同化产物 ,导致棉株衰弱 ,严重时甚至可使
植株死亡 ,造成棉花大幅度减产 。烟粉虱在江苏棉
田一年发生 5 ～ 6代 ,但由于发育历期较短 ,加之成
虫产卵期相对较长 ,因此世代重叠严重 ,在棉田较难
严格区分发生世代 。
江苏棉田自 2001年发现烟粉虱以来 , 发生范
围 、危害面积 、危害程度迅速上升 。目前全省各主要
棉花产区均发现烟粉虱 ,但发生危害程度呈现明显
的差异。从总体上看 ,苏北地区棉田烟粉虱发生量
明显高于苏中地区 。如 2002年扬州郊区棉田烟粉
虱成虫最高虫量 77. 33头 /百叶 ,而丰县棉田高达
600多头 /百叶 ,是扬州的 7. 8倍;2003年扬州郊区
棉田烟粉虱成虫最高虫量 80头 /百叶 ,而丰县棉田
为 580头 /百叶 ,是扬州的 7. 25倍。从局部区域来
看 ,靠近蔬菜 、花卉种植区 ,特别是周围保护地较多
的棉田 ,发生危害相对较重。
—56— 江苏农业科学　2005年第 2期