全 文 ：第 1期
2005年 3月
山 西 林 业 科 技
SHANXI　 FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
No. 1
Mar. 2005
文章编号: 1007-726X ( 2005) 01-0008-02
长寿花叶片再生体系的研究
张瑞姿 ,郭晓霄
(山西省林业厅实验苗圃 , 山西　太原　 030031)
摘　要: 以长寿花红色品种“ Rako”为试材 ,研究建立叶片的离体再生体系。结果表明:激素配比影
响叶片的再生能力 ;叶片背面接触培养基比正面接触培养基更有利于分化再生 ;用新生幼叶作外植
体 ,再生频率为 70%以上 ,瓶苗生根率为 95% ,移栽成活率为 98% 。
关键词: 长寿花 ;离体叶片 ;再生体系 ;组织培养
中图分类号: S681　　　文献标识码: A
收稿日期: 2004-12-07; 修回日期: 2005-01-05
作者简介:张瑞姿 ( 1972-　 ) ,女 ,山西盂县人 , 1998年毕业于山西财经大学 ,助理工程师。
　　长寿花为景天科伽蓝菜属多年生短日照多浆植
物 ,作为盆花栽培的多为矮生性状较强的园艺杂交
品种 ,花有红色、粉红色、橙黄色、黄色、白色等 ,是优
良的室内观赏花卉。一般不结种子 ,靠扦插繁殖。本
试验旨在建立长寿花叶片再生体系 ,并对影响叶片
再生的因素进行探讨 ,以便为种苗的快速繁殖奠定
基础。
1　材料与方法
试验以长寿花红色品种“ Rako”为试材 ,自盆花
取植株幼叶 ,流水冲洗 0. 5 h以上 ,置于超净工作台 ,
用 75%酒精消毒 20 s,无菌水冲洗 2次 ,再用 0. 1%
升汞消毒 5 min,无菌水冲洗 5次～ 7次 ,吸干叶片上
水分 ,将叶片切成 1 cm2左右的小块 ,分别按正面和
背面接种在培养基上。离体再生培养基为 M S添加不
同浓度的 BA和 NAA, pH值为 5. 8。 培养室的光照
强度为 2 000 Lx ,光照时间 12 h· d- 1 ,温度为 23± 2
℃。
2　结果与分析
2. 1　不定芽的发生动态
接种后 30 d,叶片明显膨胀 ,叶片厚度可达到原
来的 2倍～ 3倍 ,叶片切口处产生少量愈伤组织 ,其
结构密实 ,生长缓慢。接种后 45 d左右 ,愈伤组织处
分化出绿色小芽 ; 55 d后 ,不定芽发生频率迅速上
升 ,平均再生不定芽数也迅速增加形成簇生芽 ,叶片
再生率达 70%以上 ,平均再生不定芽数最高可达
30个。 将这些不定芽转接到分化培养基上 ,进行试
管苗分化培养。
2. 2　激素配比对叶片再生的影响
芽的分化和增殖取决于细胞分裂素与生长素类
的相对比例 ,而 BA是叶片再生所必需的 ,不添加
BA的培养基上叶片不能分化不定芽。选择 BA与生
长素 ( N AA或 IBA)配比 ,在接种数为 20个 ,接种时
间为 50 h的条件下 ,比较它们的出芽率见表 1。
表 1　激素配比对叶片再生的影响
激　素　浓　度
/mg. L- 1
BA N AA IBA
分化数
/个
再生频率
/%
1. 0 0. 1 - 9 45
1. 0 0. 5 - 16 80
2. 0 0. 1 - 7 35
2. 0 0. 5 - 6 30
1. 0 - 0. 1 8 40
1. 0 - 0. 5 13 65
2. 0 - 0. 1 6 30
2. 0 - 0. 5 7 35
结果表明 , BA与生长素 ( N A A或 IBA)配比显
著提高了叶片的再生频率 ;低浓度 BA( 1. 0 mg·
L- 1 )更适宜诱导长寿花叶片再生 ,在最适的 BA浓
度 ( 1. 0 mg· L- 1 )时 ,添加低浓度 ( 0. 1 mg· L- 1 )
　　　NAA或 IBA再生频率分别为 45%和 40% ,而添
加高浓度 ( 0. 5 mg· L- 1 )的 NAA或 IBA,再生频率
分别为 80%和 65% ,说明 , N AA更适合长寿花不
定芽的诱导分化。 因此比较适宜长寿花叶片诱导的
培养基为: M S+ BA1. 0 mg· L- 1+ N AA0. 5 mg·
L
- 1 ,分化系数达 16。
2. 3　叶片放置方式对叶片再生的影响
试验各选 30个幼叶为外植体 ,分别按正面和背
面接种于最适培养基上。 接种 30 d时 ,叶片正面和
背面接触培养基的形态变化无明显差异 ; 40 d后 ,
背面接触培养基的叶片最先分化出小芽。 50 d后统
计结果见表 2,由表 2可以看出 ,叶面的背面接触培
养基 ,其分化数、再生频率及平均再生不定芽数都明
显高于叶片正面接触培养基 ,说明叶片背面放置方
式更有利于叶片再生。
表 2　叶片放置方式对叶片再生的影响
培　养　基 接触面 分化数
/个
再生频率
/%
不定芽数
/个
M S+ BA1. 0+ NAA0. 5
背面 23 72 10
正面 15 50 4
2. 4　叶龄对叶片再生的影响
试验选 30个完全展开叶作外植体 ,与新展开叶
作比较 ,表 3结果表明 ,外植体的叶龄影响再生频
率 ,新生幼叶外植体好于完全展开的老叶外植体。
表 3　叶龄对叶片再生的影响
培　养　基
新展开叶 完全展开叶
再生频率
/%
不定芽数
/个
再生频率
/%
不定芽数
/个
M S+ BA1. 0+ NAA0. 5 71 6. 4 20. 3 1. 3
2. 5　试管苗的生根
由叶片分化得到的不定芽 ,在增殖培养基上培
养 3周 ,切取有效苗转入以 1 /2 M S为基本培养基
的生根培养基中 , 15 d后 ,统计生根情况见表 4。由
表 4可以看出 , 8个配方的生根培养基上 ,都有根系
生出。相同浓度下 , IBA的效果好于 NAA,诱导的根
大多白色健壮且呈辐射状 ,因此 ,长寿花生根的最佳
培养基为 1 /2 M S+ IBA0. 1 mg· L- 1。
2. 6　试管苗的移栽
表 4　生长素对生根的影响
生长素浓度
/mg· L- 1
N AA IBA
生根率
/%
生根时间
/d
平均根数
/个
平均根长
/cm
0. 1 -
0. 5 -
1. 0 -
2. 0 -
- 0. 1
- 0. 5
- 1. 0
- 2. 0
50 18 4 0. 5
40 20 5 0. 5
30 20 5 0. 3
30 20 5 0. 3
100 15 7 1
90 15 8 1
80 15 7 1
80 15 7 0. 8
试管苗移栽前 ,先将瓶苗移入温室进行炼苗
10 d～ 15 d,出瓶前 2 d～ 3 d开瓶盖降湿。移栽时取
出小苗 ,洗去培养基 ,将小苗栽入以泥炭土: 河沙
( 2∶ 1)为基质的移植盘中 ,基质在栽苗前用 0. 1%
甲基托布津喷淋消毒。移栽后 ,湿度保持在 90%以
上 ,半月后逐步降低到温室正常湿度。 温度控制在
20℃左右。 每隔 7 d叶面喷 1 /2 M S大量元素营养
液 , 30 d后进入常规管理。依以上方法进行试管苗的
移栽 ,成活率可达 98%以上。
3　结论
1) 长寿花叶片为最佳外植体 ,以叶片可建立再
生体系。
2) 叶片接种方式、叶龄等都影响叶片的再生频
率。叶面的背面接触培养基 ,再生频率高达 72%。新
生幼叶外植体再生频率为 71% 。
3)最佳分化增殖培养基为: M S+ BA1. 0mg·
L
- 1
+ N AA0. 5mg· L- 1 ,分化系数达 16,分化增殖
速度非常快。
4)最佳生根培养基为 1 /2M S+ IBA0. 1 mg·
L- 1 ,生根率达 100% ,平均每株生根 8条。
5)生根瓶苗的根长在 1. 0 cm左右时 ,移入温
室进行 7 d闭瓶炼苗 ,然后再开瓶炼苗 ,温度在 20
℃左右 ,湿度在 90% ,移栽成活率可达 98%以上。
参考文献:
[ 1]　韦三立 . 花卉组织培养 [ M ]. 北京:中国林业出版社 ,
2001.
[ 2]　陈超 ,王桂兰 . 长寿花胚性愈伤组织的诱导及胚状体
再生 [ J]. 园艺学报 , 2004, 31( 2): 249-251.
[3 ]　程丽芬 . 阴生观叶植物试管苗工厂化生产移栽技术研
究 [ J]. 山西林业科技 , 2000( 2): 34-37.
(下转第 14页 )
9第 1期　　　　　　　　　　　　　　　张瑞姿 ,等: 长寿花叶片再生体系的研究 1　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　从表 2看出 ,扶芳藤秋插苗的成活率明显高于
春插苗的成活率。 5月份的扦插苗虽然搭了塑料棚 ,
设了遮荫网 ,并且增加了喷水次数 ,但由于 6, 7月份
温度过高 ,影响了苗木成活 ,故成活率不高。
秋插苗相比较 ,由于 2002与 2003年使用了喷
灌设备浇水 ,所以比 2001年的扦插苗成活率高。
3. 4　塑料棚秋插苗成活情况调查分析
经试验观察 , 2001年塑料棚内的秋插苗 ,北面
的苗成活率高于南面的苗。 塑料棚南面由于太阳的
直射 ,温度过高 ,苗木死亡 20% ,成活率大大低于北
面的苗 ,故应在塑料棚的外面适当遮荫。
据观察 ,嫩枝成活率高于嫩梢。故插穗应选取木
质化程度高的嫩枝 ,不宜选嫩梢。
3. 5　扶芳藤越冬观察
扶芳藤适应太原地区的气候 ,能够安全越冬。
4　小结
1)扶芳藤能适应太原地区的生态环境 ,可在太
原地区安全越冬。在秋冬季叶色变红 ,非常美观。
2)红叶扶芳藤的成活及生长情况优于绿叶扶
芳藤。扦插扶芳藤的适宜时间为 8月。 插穗应选取
木质化或半木质化的嫩枝 ,不宜选嫩梢。
3)扦插前期应多浇水 ;后期插穗生根后 ,应减
少浇水。 扦插后置于大树下管理 ,可降低成本 ,节省
开支。
5　扶芳藤在太原市的应用
目前 ,扶芳藤已经在太原市西北环高速公路两
侧、森林公园、龙潭公园等处种植 18万 m2 ,并逐渐
在园林绿化工程中得到广泛应用。
参考文献:
[ 1]　孙可群 ,张应麟 ,龙雅宜 ,等 . 花卉及观赏树木栽培手
册 [M ]. 北京:中国林业出版社 , 1985.
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山西林业科技 , 2002( 2): 18-20.
[3 ]　独军 ,刘小林 ,李平英 . 天水小陇山林区适宜垂直绿化
的藤本植物 [ J]. 中国花卉盆景 , 2000( 3) .
Experiment on Raising Seedling in Nutrition-pocket forEuonymus fortunei
GAO Jian-yu1 ,MA Jing1 , FAN Ming-rui1 ,WANGMei-qin1 , LI Yang-sheng2
( 1. Forest ry Research Institute of Ta iyuan , 030003 Taiyuan ,China;
2. Forest Managing Bu reau of Zhong tiao Mountain , 043000 Houma ,China )
Abstract: This paper studied the propagation o f Euonymus fortunei , including the cut ting in nutritio n-pocket and transplanting
fr om pocke t to field. The results indicated that cutting tim e of Euonymus fortunei was in August in Taiyuan; The xy lem o r
semi-xy lem shoot w as available fo r cutting. Taiyuan is suitable fo r Euonymus fortunei to g row .
Key words: Taiyuan; Euonymus f ortunei; r aising seedling in nutritio n-pocket
(上接第 9页 )
Study on Regeneration of Vitro Leaf of Kalanchoe bloss feldiana
ZHANG Rui-zi, GUO Xiao-xiao
(Ex perimental Nurser y of Shanx i Forestr y Depa rtment , 030031 Taiyuan ,China )
Abstract: Using Kalanchoe blossfeldiana` Rako’ va rie ty as a ma teria l, the reg enera tion system o f vitr o leaf is studied. The
r esults show that: The content and propo rtion o f ho rmone in medium affect r egenera tion o f vitr o lea f; It is more ea sily to
produce differentia tion cells for low er-epidermis of lea f contacting culture medium than upper-epide rmis o f leaf contacting
cultur e medium. Tender lea f is used a s explants, 70% of which may regener ate, meanw hile, roo ting rate of r eg enera tion system
is 95% , and surviv al ra te of transplantation is 95% .
Key words: Kalanchoe blossf eldiana; vitr o leaf; reg ener ation system; tissue culture
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