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散尾葵提取物成分分析及其抑菌作用



全 文 :0 引言
散尾葵(Chrysalidocarpus lutescens H.Wendl),别名
黄椰子,棕榈科(Palmaceae),散尾葵属(Chrysalidocar⁃
pus),为丛生常绿灌木或小乔木。叶清幽雅致、茎金黄
刚劲,是室内绿化装饰的高档观叶花卉之一,给人以清
凉、宁静之感,已成为世界各地广泛栽培的观赏植物。
该花卉叶片微苦涩、性阴凉,阴干入药具有止血功能。
植物内含物、挥发物杀菌、抑菌特性虽有研究,但未见
散尾葵次生代谢物质抑菌功能的报道,此文利用超声
波提取和气质联用技术对散尾葵内含物进行了分析,
并对10种常见菌种进行了抑菌性测定。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、
动性球菌(Planococcus)、葡萄球菌(Staphylococcus sp.)、
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、绿脓杆菌(Pseudomo⁃
基金项目:黑龙江省攻关项目资助(GB08B202)。
第一作者简介:焦念新,男,1985年出生,内蒙古乌兰浩特人,硕士,主要从事植物保护的研究。通信地址:150040黑龙江省哈尔滨市和兴路26号,
E-mail:jiaonianxin@yahoo.cn。
通讯作者:王志英,东北林业大学教授,研究方向:森林病虫害防治。Tel:0451-82191512,E-mail:zyw0451@sohu.com。
收稿日期:2009-07-20,修回日期:2009-08-28。
散尾葵提取物成分分析及其抑菌作用
焦念新 1,王志英 1,温矩胜 2,谢淑萍 2
(1东北林业大学,哈尔滨 150040;2海林市林业局,黑龙江海林 157100)
摘 要:利用超声波提取和气质联用分析法,对散尾葵的提取物进行了组分和含量分析。结果表明,提
取物含酸类化合物2种,占提取物总量的1.20%;醇类化合物3种,占提取物总含量1.78%;酯类化合物5
种,占提取物总量的7.11%;烷类化合物5种,占提取物总量的13.27%;醚类化合物2种,占提取物总含
量3.36%;酮类化合物1种,占提取物总含量0.41%。利用散尾葵提取物对10种居室空气中收集的细菌
进行了抑菌性测定,对其中7种具有抑菌活性,而对放线菌、动性球菌、冷杆菌无抑制作用。对葡萄球
菌和枯草芽孢杆菌抑菌力最强,125 mg/ml浓度提取液抑菌率达到100%。
关键词:散尾葵;提取物;空气浮游菌;抑菌力
中图分类号:S3 文献标识码:A 论文编号:2009-1468
Extract from Chrysalidocarpus lutescens: Ingredients
and Inhibition to Air Microoganisms
Jiao Nianxin1, Wang Zhiying1, Wen Jusheng2, Xie Shuping2
(1Northeast Forestry University, Harbin 150040; 2Hailin Forestry Bureau, Hailin Heilongjiang 157100)
Abstract: The composition and their content of the supersonic extract from the flower, Chrysalidocarpus lutes⁃
cens, were determined by GC-MS. The results showed that there were 2 acid compounds in the extracts ac⁃
counting the total content for 1.20%, and 3 alcohol compounds accounting for 1.78%, 5 ester compounds ac⁃
counting for 7.11%, alkyl compounds accounting for 13.27%, 2 ether compounds accounting for 3.36%, 1 ke⁃
tenes accounting for 0.41%. Ten species of microorganisms residing in air was used to test the inhibition of the
extract above. Seven kinds of which have antibacterial activity, while the Actinomycete, Planococcus, Psychro⁃
bacter pulmonis without inhibition. Of which the strongest antibacterial power occurred to Staphylococcus au⁃
reus and Bacillus subtitles, 100% inhibitory rate occurred to either with a concentration of 125 mg/L.
Key words: Chrysalidocarpus lutescens, extract, air bacteria, antibacterial power
中国农学通报 2009,25(24):374-377
Chinese Agricultural Science Bulletin
nas aeruginosa)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、放线
菌(Actinomycete)、微球菌 (Micrococcus sp.)、冷杆菌
(Psychrobacter pulmonis)、短杆菌(Brevibacterium sp.)由
森林病虫害生物学国家林业局重点实验室(东北林业
大学)提供。
1.1.2 培养基 牛肉蛋白胨培养基用于培养供试菌种。
1.2 植物提液的制备
分别称取植物粉末100 g加入500 ml 85%乙醇和
丙酮中,常温浸泡过夜。超声提取2次,每次浸提时间
为30~40 min。提取后过滤除去植物纤维及残渣,将所
得滤液置于旋转蒸发仪中减压浓缩制成 2000 mg/ml
的提取液(即 1 ml提取液含 2000 mg植物干物质的提
取物)。提取液经微孔滤膜 (0.22 μm)滤菌后贮于冰箱
中冷藏保存备用[1-3]。
1.3 菌液的制备
将供试菌种用斜面培养基活化,以无菌生理盐稀
释成106~107 cfu/ml个细菌的菌悬液(现配现用)。
1.4 抑菌实验
1.4.1 抑菌率的测定 分别吸取 50 μl各供试菌悬液加
入平皿培养基上,用无菌玻璃三角涂棒将菌悬液涂布
均匀,滴加含量为2000 mg/ml的提取液1 ml为试验样
片,每浓度 3次重复,以接菌悬液的LB固体培养基为
对照。置于37℃培养24 h后观察,按下列公式计算抑
菌率[4]:
抑菌率(%)=(对照菌落数-处理菌落数)/对照菌
落数×100%
1.4.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定 采用液体倍比稀释
法测定MIC,浓度分别为 1000、500、250、125、62.50、
31.25 mg/ml提取液,每一浓度培养基接一种对数生长
期菌液,每浓度 3个重复,不接菌为空白对照,置适宜
温度培养,观察生长情况,琼脂平板法测定MIC[5]。
1.4.3 最低杀菌浓度(MBC)的测定 将提取液的浓度高
于MIC(包括MIC)的各提取液中吸取 0.1 ml培养物分
别接种于培养皿中培养 24 h,以无菌生长的添加量为
该提取液的最低杀菌浓度(MBC)。
2 结果与分析
2.1 散尾葵GC/MS成分及含量分析
经气相-质谱分析,得到散尾葵提取物总离子流图[6-7]
(图 1),各组分的图谱经计算机检索数据库与标准谱
图进行核对,得到相应分子结构。将总离子色谱图中
的各峰面积进行归一化,得到散尾葵提取物各组分的
相对含量(表1)。通过质谱数据库检索并参照标准谱
图共鉴定出18种化合物,酸类化合物2种,占提取物总
量的1.20%;醇类化合物3种,占提取物总含量1.78%;
酯类化合物 5种,占提取物总量的 7.11%;烷类化合物
5种,占提取物总量的 13.27%;醚类化合物 2种,占提
取物总含量 3.36%;酮类化合物 1种,占提取物总含量
0.41%[8-10]。
2.2 葵提取液对10种微生物的影响
利用散尾葵两种提取液的6个不同浓度分别与10
种细菌共培养,测定抑菌率,抑菌结果见表2和图2。
表2表明,乙醇提取液比丙酮提取液效果更佳,提
取液对枯草芽孢杆菌(图2)、葡萄球菌、短杆菌具有明
显抑制效果,125 mg/ml浓度时抑菌率达100%,对放线
菌、动性球菌和冷杆菌物无抑制效果(表2)。
2.3 取液最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)
的测定
对散尾葵两种提取液的抑菌效果测定表明,提取
液对葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制力最强,最低抑菌
浓度和最低杀菌浓度分别为 62.5 mg/ml、125 mg/ml;
对微球菌和地衣芽孢杆菌抑菌力次之,对绿脓杆菌和
短小芽孢杆菌抑制力最弱。而对放线菌、动性球菌、冷
焦念新等:散尾葵提取物成分分析及其抑菌作用 ·· 375
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表1 散尾葵提取物组分分析
峰号
3
4
5
6
7
8
10
11
14
15
16
17
18
19
29
30
31
33
相对百分含量
1.10
0.41
0.44
0.42
0.24
0.41
2.16
0.98
4.93
7.14
0.43
0.37
1.25
0.39
2.11
0.71
0.77
2.87
相似系数
89
84
86
78
82
90
93
84
82
92
85
79
84
83
84
83
83
96
分子式
C6H12O2
C16H48O6Si7
C18H36O
C14H42O5Si6
C9H20O
C5H10O
C16H22O4
C16H22O4
C7H16O2
C4H12Si
C6H5COOH
C14H42O5Si6
C8H18O4
C3H9BO3
C12H26O6
C3H9BO3
C20H40O2
C24H38O4
化合物
二丙酮醇
十四甲基六硅氧烷
油醇
十四甲基六硅氧烷
2,6-二甲基-2-庚醇
3-戊酮
邻苯二甲酸二异丁酯
邻苯二甲酸二丁酯
二丙氧甲烷
四甲基硅烷
苯甲酸
十四甲基六硅氧烷
三甘醇二甲醚
硼酸三甲酯
五亚乙基乙二醇二甲醚
硼酸三甲酯
二十酸;花生酸
邻苯二甲酸二辛酯
保留时间/min
8.781
14.130
16.230
16.443
16.883
16.933
17.275
17.350
20.009
20.179
21.003
21.143
21.209
21.527
26.212
26.541
27.508
31.559
表2 散尾葵提取液对10种细菌的抑菌率测定
提取液
种类
丙酮
提取液
乙醇
提取液
提取液
种类
丙酮
提取液
乙醇
提取液
浓度/(mg/ml)
31.25
62.50
125
250
500
1000
31.25
62.50
125
250
500
1000
浓度/(mg/ml)
31.25
62.50
125
250
500
1000
31.25
62.50
125
250
500
1000
抑菌率/%
枯草芽孢杆菌
28.57
64.29
100
100
100
100
35.71
71.43
100
100
100
100
抑菌率/%
绿脓杆菌
0
0
0
34.45
81.21
100
0
0
12.83
42.15
92.62
100
葡萄球菌
10.24
53.01
100
100
100
100
23.24
63.78
100
100
100
100
微球菌
0
0
36.87
86.52
100
100
0
0
68.82
100
100
100
地衣芽孢杆菌
0
0
27.08
64.58
100
100
0
8.23
75.41
100
100
100
冷杆菌












放线菌












短杆菌
0
33.11
87.58
100
100
100
14.29
67.86
100
100
100
100
动性球菌












短小芽孢杆菌
0
0
13.93
53.95
74.26
100
0
18.64
56.94
81.77
100
100
注:“一”表示无抑菌作用。
·· 376
杆菌未表现出抑制作用。从最低抑菌浓度和最低杀
菌浓度比较也表现为醇提液的抑菌效果好于丙酮提
取液(表3)。
3 讨论
(1)GC/MS分析结果表明,散尾葵提取物以烷类
和酯类化合物为主,分别占提取物总量的 13.27%和
7.11%,其次为酸类、醇类、醚类和酮类物质。
(2)散尾葵提取物对10种供试细菌中的7种具有
抑制作用,对其余 3种无抑制作用。由于细菌种类不
同而对提取物的敏感性存在一定差异,葡萄球菌和枯
草芽孢杆菌对提取液最为敏感,125 mg/ml浓度时抑
菌率达到 100%。而放线菌、动性球菌和冷杆菌对散
尾葵提取物具有较强的抗性。
(3)通过提取物成分分析和抑菌力测定,证明散
尾葵作为现代居室常见栽培植物,不仅具有装饰居
室、美化环境和调节情绪的功能,同时其次生代谢物
质具有改善空气质量和抑制环境微生物的作用。
参考文献
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图2 散尾葵提取液对枯草芽孢杆菌的抑制作用
注:A:对照;B:31.25mg/ml浓度处理;C:62.5mg/ml浓度处理;D:125mg/ml浓度处理。
A B C D
表3 植物提取液对微生物的最小抑菌浓度、
最低杀菌浓度(mg/ml)
供试菌种
枯草芽孢杆菌
葡萄球菌
地衣芽孢杆菌
放线菌
动性球菌
绿脓杆菌
微球菌
冷杆菌
短杆菌
短小芽孢杆菌
丙酮提取液
MIC
62.50
62.50
250


500
250

125
500
MBC
125
125
500


1000
500

250
1000
乙醇提取液
MIC
62.50
62.50
125


500
125

62.50
250
MBC
125
125
250


1000
250

125
500
焦念新等:散尾葵提取物成分分析及其抑菌作用 ·· 377