全 文 ：芦竹内生真菌 F0238对西红柿的生物保鲜研究
纪丽莲 , 张强华
(淮阴工学院生物工程系 ,江苏淮安 223001)
　　摘要:从黄海海岸芦竹中分离到一株木霉属的内生真菌 F0238。 研究结果表明 , F0238菌发酵 4 d后的发酵
液对西红柿的防腐保鲜作用与化学保鲜剂多菌灵和甲基托布津的混合液无显著差异 ,有良好的生物保鲜作用。
　　关键词:芦竹;内生真菌;西红柿;保鲜
　　中图分类号:S482.2+92　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1302(2005)04-0111-02
收稿日期:2005-02-26
基金项目:江苏省教育厅自然科学基金项目(编号:02KJD180010)。
作者简介:纪丽莲(1965—),女 , 福建厦门人 , 博士 ,副教授 ,主要从
事植物与微生物的功能与机制研究。 Tel:(0517)3591190;
E-mail:jl2863@vip.sina.com。
　　采用物理 、化学及生物学方法 ,抑制果蔬的采后
呼吸 ,减少水分散失 ,抑制微生物侵害 ,可大大延缓
果蔬的衰老 ,抑制腐败霉烂 ,延长保藏期。化学保鲜
方法作为一项常温下独立的保鲜技术和物理保鲜中
的辅助技术被广泛应用 ,虽然其成本较低 ,但残留的
化学药剂对人体健康和生态环境有较大危害。用生
物防治制剂对采后果蔬进行贮藏保鲜 ,可减轻或消除
果蔬残留化学药剂带来的危害[ 1] 。
国内外已有一些利用木霉对果蔬进行防病保鲜
的报道 。美国 、法国和英国都曾经利用多孢木霉对
洋梨 、蘑菇和苹果进行防病保鲜;赖建等[ 2]利用哈
茨木霉发酵液对采后茄子进行生物保鲜。本试验利
用从海岸盐生药用植物芦竹中分离纯化到的一株内
生真菌 F0238[ 3] ,研究该菌发酵液对采后西红柿的
生物保鲜效果。
1　材料与方法
1.1　材料
海岸低盐芦竹(Arundodonax),采自黄海海岸
浅水滩;供试西红柿为刚采摘的市售品。
1.2　方法
1.2.1　内生真菌 F0238的分离 、纯化与鉴定　取采
后不到 2 d的芦竹样品 ,自来水洗净 ,取其根 、茎 、
叶 ,依次用 75%乙醇消毒 1 min, 2.5%次氯酸钠处
理 15min, 75%乙醇消毒 1 min,最后用无菌水冲洗
2 ～ 3次。取 0.5g上述处理后的芦竹样品置于 2ml
无菌水中匀浆至糊状 ,取 1 ml糊状样品均匀混入
150ml熔化的 WA-抗生素培养基中 ,倒平板 , 25℃
下培养 14 d。根据菌落形成的时间 、菌落形态 、菌落
颜色的差异挑取各平板上的微生物菌落进行分离 。
挑取新形成的菌丝尖端 ,及时转接至新鲜 PDA培养
基上 ,采用菌丝顶端纯化法逐步纯化 ,将已纯化的菌
株编号后 ,转至 PDA斜面上 ,再于 28℃培养 7d后 ,
于 4 ℃冰箱保存 [ 4] 。菌种鉴定采用 Ainsworth等真
菌鉴定系统和方法 。
1.2.2　F0238菌发酵液的制备　将 F0238菌在
PDA培养基上活化 ,接菌丝块至含 400ml查氏液体
培养基的 1 000 ml锥形瓶中 , 28 ℃、165 r/min摇床
上培养 15 d。定期取培养液用尼龙布过滤除去菌丝
体 ,得到不同培养时间的 F0238菌发酵液。
1.2.3　F0238菌发酵液的毒性实验　按照文献 [ 5]
提供的方法测定小鼠对 F0238菌发酵液的 LD50。
1.2.4　F0238菌发酵液对西红柿的生物保鲜作用
研究　设 A、B两个组 ,每组设 5个处理 ,分别为处
理 1:阴性对照 ,处理液为纯净水;处理 2:阳性对照 ,
处理液为 250×10-6多菌灵 +250 ×10-6甲基托布
津组成的混合液 ,处理 3、4、5为 F0238菌分别培养
2d、4 d、6 d的发酵液 ,每个处理重复 3次 。将 A组
西红柿在处理液中浸渍 10 s,晾干 ,封存于聚乙烯袋
中扎紧 ,置于果箱中贮藏。 B组除不用聚乙烯袋密
封外 ,其他同 A组。试验果实均贮藏于温度为 20 ～
25℃、相对湿度为 85% ～ 95%的环境中 ,定期取样
测定贮藏效果较好组的果实总糖含量 、还原糖含量 、
总酸含量 、维生素 C含量及失重率等理化指标 。试
验结果用 Duncan的多重方差分析法 [ 5]测验。
1.2.5　果实指标的测定　果实保藏期中失重率变
化用干燥法测定;维生素 C含量用 2, 6-二氯靛酚
—111—江苏农业科学　2005年第 4期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2005.04.040
滴定法测定;总糖含量用蒽酮比色法测定;总酸含量
用酸碱滴定法测定[ 6] 。
2　结果与分析
2.1　F0238菌发酵液对西红柿贮藏效果的影响
由表 1可知 , A组效果总体比 B组好得多 ,因为
用聚乙烯袋密封果实可有效防止果实水分散失 ,进
而延缓果实劣变 。处理 4和 5(分别浸 F0238培养 4
d、6 d的发酵液)的失重率 、好果率等指标与阴性对
照(处理 1)差异显著 ,而与效果较好的化学保鲜剂
(处理 2)无显著差异 ,其果实色泽接近入贮前的状
态 ,果实硬度无明显变化 ,富有弹性。说明 F0238菌
发酵 4 ～ 6d产生的次生代谢产物能有效抑制西红
柿腐败菌的生长繁殖 ,进而抑制西红柿在贮藏过程
中的病变 ,达到防腐保鲜作用。 F0238培养 4 d与 6
d的发酵液对西红柿的保鲜效果差异不明显 ,而与
发酵 2d的差异显著 ,说明 F0238发酵 4d后其发酵
液抗菌作用才能满足需要 。
表 1　西红柿贮藏 30d后各处理样品的贮藏效果
试验
组号 处理号
失重率
(%)
好果率
(%)
腐烂率
(%) 果实色泽 果实硬度
A 1 8.25a 11 88a 暗紫 ,无光 软烂
2 1.96c 94 2c 鲜艳 ,光亮 硬 ,有弹性
3 7.82a 16 80a 暗紫 ,无光 软烂
4 2.12c 90 4c 鲜艳 ,光亮 硬 ,有弹性
5 2.39b 92 3c 较鲜艳 ,光亮 萎皱 ,弹性差
B 1 15.88a 0 100a 暗紫 ,无光 软烂
2 5.60b 71 16b 紫 ,无光 较软 ,有萎皱
3 13.27a 2 91a 暗紫 ,无光 软烂
4 5.18b 70 18b 紫 ,无光 较软 ,有萎皱
5 5.43b 70 20b 暗紫 ,无光 软烂
　　注:同组同列数据后字母不同者表示差异显著(P<0.05)。表 2
同。
2.2　F0238菌发酵液对贮藏期西红柿生化指标的
影响
表 2为 A组西红柿贮藏 30 d后各项生化指标
的变化情况 。凡是用化学保鲜剂和 F0238菌培养 4
d后的发酵液处理的果实 ,其生化指标与阴性对照
差异显著;经 F0238菌培养 4 ～ 6 d的发酵液和化学
保鲜剂处理的样品与入贮前样品相比生化指标的变
化不显著 ,表明 F0238菌培养 4 d的发酵液对西红柿
的保鲜效果良好 ,且与化学保鲜剂效果相当 。
3　讨论
F0238菌培养 4 d后的发酵液对西红柿的生物
表 2　A组西红柿贮藏 30d后各生化指标的变化
处理号 总糖含量(%)
还原糖含量
(%)
总酸含量
(%)
维生素 C含量
(mg/100g)
入贮前 3.376a 1.832a 0.596a 8.973a
1 2.650b 1.326b 0.325b 3.330b
2 3.359a 1.601a 0.524a 8.416a
3 2.895b 1.339b 0.368b 3.959b
4 3.402a 1.647a 0.501a 8.122a
5 3.418a 1.690a 0.527a 8.217a
保鲜作用与常用化学防腐剂保鲜效果类似 ,这为开
发果蔬生物保鲜剂奠定了良好的研究基础。毒理学
实验表明 , F0238菌发酵液为无毒级别;菌种鉴定表
明 , F0238菌为木霉菌属(Trichoderma)。为了研究
F0238菌发酵液防腐保鲜的功能因子 ,以便于进行
工业生产 ,我们对 F0238菌所产代谢产物的不同极
性部位进行了生物活性追踪及成分分离 ,通过 TLC、
HPLC和 LC-MS技术对所分离的单体进行了结构
鉴定 ,鉴定出了 cibaricacid、曲酸和 ergosterol等单
体化合物 。文献已有报道 , cibaricacid和曲酸具有
抗菌的生物功能 ,并已作为抗菌剂在应用 [ 7, 8] 。但
进一步的试验表明 ,这几种单体化合物的抗菌活性
远不如 F0238菌发酵液大 ,说明主要的功能因子尚
未鉴定出 ,这项分离工作目前还在进行中。
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