全 文 :西北林学院学报 2004, 19( 2): 73~ 74
Journal of No r thw est Fo r estry Univ e rsity
金露梅嫩茎离体培养再生植株的研究
芦维忠 , 雷 颖 , 孙建波
(甘肃林业职业技术学院 园林系 ,甘肃天水 741020)
摘 要:以金露梅嫩茎为外植体进行簇生芽诱导 ,结果表明:诱导簇生芽时 ,以 MS+ 6-BA 2. 0
mg /L+ N AA0. 2 mg /L效果较好 ,分化率达 100% ;继代培养时以 MS+ 6-BA 1. 0 mg /L+ K T
0. 5 mg /L+ N A A 0. 1 mg /L增殖率较高 ,达 11. 7倍 ;再生苗在 1 /2M S+ N AA0. 1 mg /L的培
养基上生根效果较好。
关键词:金露梅 ;嫩茎切段 ;簇生芽 ;增殖 ;生根
中图分类号: S685. 990. 36 文献标识码: A 文章编号: 1001-7461( 2004) 02-0073-02
A Study on Rebuilding the Potentilla f ruticosa Plants by Tissue Culture
LU Wei-zhong, LEI Ying, SUN Jian-bao
( Departmen t of Landscape and Arch itecture, Gansu Forestry Col lege, Tianshu i ,Gansu 741020,Ch ina )
Abstract: It i s the bet ter w ay to induce cluster shoo t o f Potentil la f rut icosa during tenderstem cul ture by
using M S+ 6-BA2+ N AA0. 2; dif ferentiation rate of shoot can reach to about 100% ; propagation speed is
up to 11. 7 times of general in expand cul tiv ation by using M S+ 6-BA1+ KT0. 5+ N AA 0. 1. The ef fect of
rooting f rom rebuilded stem is bet ter in 1 /2M S+ N AA0. 1 cultiv ation medium.
Key words: Potentilla f ruticosa ; tender stem; cluster shoot; propagation; ro oting
金露梅 ( Potentil la f ruticosa )为蔷薇科萎陵菜
属落叶小灌木 ,高 0. 5~ 2. 0 m,花单生或伞房花序 ,
花瓣黄色 ,产于我国西北高海拔地区 ,花期 6~ 8
月 [1 ]。天水市自 2000年引种以来 ,生长良好 ,花期 4
~ 11月 ,是西北地区园林绿化的良好材料。 但由于
结实能力差 ,种子繁殖困难 ,通常采用分株育苗 ,速
度极慢。为此 ,以金露梅嫩茎切段为外植体进行诱导
试验研究 ,以期提高繁殖速率。
1 材料与方法
材料来源于甘肃林业职业技术学院野生花卉引
种驯化基地 ,取金露梅当年生嫩茎 (长 10~ 20 cm ) ,
剪去小叶 ,用流水冲洗干净 , 70%的酒精浸泡 10 s
后 ,转入 0. 1%的升汞溶液灭菌 6 min,然后用无菌
水冲洗 5次 ,将嫩茎切成 0. 5~ 1. 0 cm带节小段 ,接
种在诱导培养基上 [2, 3 ] 。
诱导簇生芽分化的培养基为 MS+ LH500 mg /
L+ 蔗糖 3%+ 琼脂 0. 8% , pH5. 0,附加不同浓度的
6-BA和 NAA(表 1) ;继代增殖培养基这 MS+ 蔗糖
3%+ 琼脂 0. 8% , pH5. 0,加入不同浓度的 6-BA、
KT和 NAA(表 2) ;生根培养基为 1 /2M S+ 蔗糖
3%+ 琼脂 0. 8% , pH5. 0,加入不同浓度的 NAA和
IBA(表 3)。培养基在压力 1. 5 kg /cm2、 121℃条件
下灭菌 20 min。培养室温度为 20± 2℃ ,每日光照 14
h,光照强度 2 000 lx [2, 3 ]。 本试验重复进行 3次。
2 结果与分析
2. 1 簇生芽的诱导
金露梅茎切段分化能力较强 ,培养 2周后从茎
节处逐渐分化出幼芽 , 30 d后簇生芽数为 3~ 5,长
约 1~ 3 cm ,试验表明 ,在 MS+ 6-BA2. 0 mg /L+
N AA0. 2 mg /L的培养基中簇生芽的分化数量最
收稿日期: 2003-10-18
基金项目:甘肃省“天保”工程科技支撑体系建设项目
作者简介:芦维忠 ( 1962-) ,男 ,甘肃永登人 ,副教授 ,主要从事森林培育的教学与研究。
多 ,质量最好 ,分化率达 100% ,而其它配比的培养
基上都有不同程度的分化 ,但都不及此组合。
表 1 不同激素配比对金露梅簇生芽分化的影响
Table 1 Effect of differ ent combinations o f hormones on
the differ entiation of cluste r shoo ts o f Potentilla f ruticosa
6-BA
/mg· L- 1
N AA
/mg· L- 1
接种数
/块 分化数
分化率
/%
1. 0 0 30 18 60
1. 0 0. 1 30 15 50
1. 0 0. 2 30 20 67
2. 0 0 30 27 90
2. 0 0. 1 30 26 86. 7
2. 0 0. 2 30 30 100
3. 0 0 30 24 80
3. 0 0. 1 30 23 77
3. 0 0. 2 30 16 53
4. 0 0. 2 30 3 10
2. 2 继代增殖培养
将初代培养所得的簇生嫩茎切成 1 cm长的小
段 ,转入增殖培养基上培养 , 4周后 ,增殖结果因激
素配比不同而异 (表 2) ,嫩茎增殖倍数随细胞分裂
素浓度的增高而增大 ,但 6-BA和 K T浓度超过 2. 0
mg /L时又会抑制芽苗的增殖 ,且有少量玻璃化现
象产生。统计结果表明 ,以 MS+ 6-BA 1. 0 mg /L+
KT0. 5 mg /L+ N A A 0. 1 mg /L的培养基中增殖倍
数最高 ,为 11. 7,且芽苗健壮。
表 2 再生嫩茎在不同激素培养基上的增殖
Table 2 Propaga tion o f reg enerat ed tender stem in
cultiv a tion medium with differ ent ho rmones
6-BA
/mg· L- 1
KT
/mg· L- 1
N AA
/mg· L- 1
接种数
/块
4周后
苗数 /株
增殖
倍数
0. 5 0 0. 05 30 86 2. 87
1. 0 0 0. 1 30 239 7. 97
2. 0 0 0. 1 30 248 8. 27
0 0. 5 0. 05 30 65 2. 17
0 1. 0 0. 1 30 127 4. 23
0 2. 0 0. 1 30 244 8. 13
0. 5 0. 5 0. 05 30 178 5. 93
1. 0 0. 5 0. 1 30 351 11. 71
0. 5 1. 0 0. 1 30 253 8. 43
1. 0 1. 0 0. 2 30 209 6. 97
2. 3 生根培养与移栽
将继代培养所得的嫩茎切下转入生根培养基中
培养 , 20 d后观察 ,以 1 /2M S+ N AA 0. 1 mg /L的
培养基生根效果最好 (表 3) ,每个嫩茎生根 3~ 5
条 ,长约 2~ 3 cm ,成为完整的再生植株。将生根后
的试管苗不开盖在温室中置 6 d后 ,开盖置 3 d,然
后移栽于蛭石与森林土 ( 1∶ 1)的基质中 ,用塑料薄
膜覆盖 , 2周后 ,成活率为 92% 。 20 d后将成活的幼
苗移至森林土与田园土 ( 1∶ 1)基质中 ,株行距为 10
cm× 15 cm, 30 d后成活率 98% ,当移栽苗高 15~
20 cm时 ,带土移栽至大田里 ,灌足水 ,缓苗 1周后
开始旺盛生长 [4 ]。
表 3 不同生长素组合对金露梅生根的影响
Table 3 Effec t o f different ho rmone combinations
on the r oo ting o f P . f ruticosa
N AA
/mg· L- 1
IBA
/mg· L- 1
接种数
块 平均根数 /条
生根率
/%
1. 0 0 30 18 60
0 0 30 1. 8 68. 6
0. 5 0 30 2. 8 82. 5
0 0. 5 30 3. 1 84. 7
0. 1 0 30 4. 5 100
0 0. 1 30 3. 0 100
0. 1 0. 1 30 2. 5 96. 3
3 结论与讨论
6-BA与 NAA的浓度配比对外植体的诱导具
有显著影响。 在金露梅分化培养阶段 , M S+ 6-BA
2. 0 mg /L+ N AA0. 2 mg /L对丛生芽的诱导率最
高 ,为 100% 。
在增殖培养阶段 ,对芽苗增殖产生明显影响的
因素是 6-BA,但当浓度较高时会使芽苗出现玻璃
化。
NAA对金露梅芽分化的影响并不十分明显 ,
但对根的发育有显著影响 ,再生嫩茎在 1 /2M S+
N AA 0. 1 mg /L的培养基中生根率达 100% ,且新
根发育良好。 再生后的完整植株苗形美观 ,色泽深
绿 ,移栽后生长良好。移栽过程中最重要的是土壤要
保持湿润 ,避免阳光直射 ,基质的 pH值不超过 6. 0。
参考文献:
[ 1 ] 姚德生 ,任继文 ,樊辉 . 甘肃野生花卉 [M ] .兰州: 甘肃科学技
术出版社 , 2001. 146.
[2 ] 谭文澄 ,戴策刚 .观赏植物组织培养 [M ]. 北京: 中国林业出版
社 , 1997.
[ 3 ] 曹孜义 ,刘国民 . 实用植物组织培养技术教程 (修定版 ) [ M ].
兰州: 甘肃科学技术出版社 , 1999.
[ 4 ] 刘敏 . 花卉组织培养与工厂化生产 [M ]. 北京: 地质出版社 ,
2002. 6.
74 西北林学院学报 19卷