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黔产金耳环不同提取部位镇痛抗炎作用研究



全 文 :黔产金耳环不同提取部位镇痛抗炎作用研究
赵鸿宾,王 恒,李雪营,魏学军,夏亚兰,余跃生
(黔南民族医学高等专科学校,贵州 都匀 558013)
【摘要】目的:探讨黔产金耳环不同提取部位镇痛抗炎作用效果,并初步筛选活性部位。方法:
采用乙酸扭体法实验研究不同部位提取物的镇痛作用;采用二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀模型研究不同部
位提取物抗炎作用。结果:金耳环不同部位提取物对乙酸诱发小鼠腹腔剧烈疼痛的镇痛均有一定的作
用,其中正丁醇提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用,而其他部位提取物抑制作用不明
显。结论:正丁醇提取液为抗炎的主要活性部位。
【关键词】金耳环;提取物;镇痛;抗炎
【中图分类号】R931. 71 【文献标识码】A 【文章编号】1008 -4983 (2016)02 -0088 -03
Analgesic and anti - inflammatory activities of extracts from
Asarum insigne D. in Guizhou province
ZHAO Hong - bin,WANG Heng ,LI Xue - ying,WEI Xue - jun,XIA Ya - lan,YU Yue - sheng
(Qiannan Medical College for Nationalities,Duyun 558003,China)
【Abstract】Objective:To study the analgesia effects of different fractions of Asarum insigne in Guizhou
province,so as to identify the effective constituents of Asarum insigne. Methods:The analgesic were ob-
served with the response of writhes tests,and the effect of anti - inflammatory were studied using mice inflam-
mation models induced by dimethylbenzene. Results:The extracts from different fractions of Asarum insigne
reduced the acetic acid - induced pain in mice ,among which the butanol extract showed more anti - inflam-
matory effect. Conclusion:The results of the mouse's ear edema by dimethylbenzene indicated the butanol
extract were better that other extracts from Asarum insigne.
【Key words】Asarum insigne D;Extracts;Analgesic;Anti - inflammatory
水药金耳环来源于马兜铃科植物金耳环
(Asarum insigne D. )的干燥全草,是贵州省水
族集聚地区常用药材。性味:辛,温,有小毒。
具有散寒、止咳、平喘、止痛等功效,主要用来
治疗风寒咳嗽、哮喘、腹中寒痛、龋齿痛、跌打
损伤、毒蛇咬伤[1]。目前,关于水药金耳环精
油抗炎症痛作用有研究报道[2],夏亚兰对水提
液的不同萃取部位的抗炎镇痛作用进行了相关研
究[3],考虑到提取溶剂的极性对活性成分的影
响,以 75%的乙醇作为溶剂进行提取,并通过
萃取分离得到四个不同极性部位,参照药理实验
方法学中的小鼠扭体实验和小鼠耳廓肿胀实验对
金耳环醇提物不同极性部位进行有效活性部位筛
选,为进一步研究提供基础。
1 材料
1. 1 药材水药金耳环来源于贵州省三都县,经黔
南民族医学高等专科学校药学系魏学军副教授鉴
定为马兜铃科植物金耳环 (Asarum insigne D.)。
基金项目:贵州省卫生厅 黔南民族医学高等专科学校科技联合基金项目 (gzwkj 2012 - 2 - 013 号) ;贵州省优秀科
技教育人才省长专项资金项目 [黔省专合字 (2010)156 号]。
作者简介:赵鸿宾 (1979 -) ,男,讲师,主要从事中药成分分析工作。E - mail:zhaohongbin139@ 163. com
通讯作者:魏学军 (1972 -) ,男,副教授,主要从事中药质量控制研究。E - mail:qndywxj@ 163. com
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第 29 卷 黔 南 民 族 医 专 学 报 第 2 期
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1. 2 药物阿司匹林肠溶片 (南京白敬宇制药有
限责任公司) ,规格 25 mg × 100 片,国药准字
H32026500;石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、1,2
-丙二醇、氯化钠、二甲苯和冰醋酸均为分析
纯,天津科密欧化学试剂有限公司;蒸馏水自
制;各种供试液均经过灭菌处理。
1. 3 动物昆明种小鼠,雌雄兼用,体质量约 20
g,购买于贵阳医学院实验动物中心,以颗粒状
小鼠饲料喂养,自由饮水和摄食。在动物房内
(室温:20 ± 5℃,湿度:65 ± 5%)饲养 3 d 后
根据具体要求将小鼠分组进行实验。
2 方法
2. 1 阿司匹林供试液配制精密称取阿司匹林对
照品适量,加蒸馏水配置成 15 mg·ml -1的溶
液,作为阳性对照试液。
2. 2 金耳环不同部位提取物的制备称取金耳环
药材约 500 g,以液固比 15:1 用量加入 75%乙
醇提取 2 次,合并提取液,减压浓缩至无醇味,
先后以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇作为萃取剂,
多次萃取,减压浓缩的浸膏,并将石油醚、乙酸
乙酯、正丁醇萃取部位浸膏通过减压干燥至恒
重。水部分浓缩后经冷冻干燥处理得粉末状固
体。分别取各部位提取物均以 1,2 -丙二醇为
溶剂溶解,配成含生药 1 mg·ml -1的供试液;
水部分浸膏以水溶解为含生药 1 mg·ml -1的供
试液。
2. 3 醋酸致小鼠扭体法实验取体重约 20 g 小鼠
60 只,随机分成 6 组,每组 10 只,分别设置生
理盐水组、阿司匹林组 (0. 3 g·kg -1)、石油醚
组 (0. 46 g· kg -1)、乙酸乙酯组 (0. 26 g·
kg -1)、正丁醇组 (0. 84 g·kg -1)、水部分浸膏
组 (0. 96 g·kg -1) ,实验结果见下表 1。连续灌
胃给药 6 d,1 次 /d,各组在末次给药 1 h后于小
鼠腹腔注射 0. 6%的冰醋酸 0. 3 ml /只。记录小
鼠注射后 15 min 内首次出现扭体反应的时间和
扭体次数。扭体抑制率 (%) = [(对照组扭体
反应次数 -给药组扭体反应次数) /对照组扭体
反应次数] × 100%[4]。统计数据以 x ± s 表示,
统计方法用 t检验法比较组间差异。
2. 4 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验取体重约 20 g
的小鼠 60 只,随机分成 6 组,每组 10 只,给药
剂量、给药途径及计算方式均同上。连续灌胃给
药 7 d,第 7 天给药 15 min 后,在小鼠右耳廓涂
擦二甲苯约 5 s致肿,左耳不涂,15 min 后处死
小鼠,以直径 8 mm 打孔器切下左右耳片,用电
子天平称重。按照公式:耳廓肿胀度 =右耳重量
-左耳重量;肿胀抑制率 (%) = [(对照组肿
胀度 - 给药组肿胀度) /对照组肿胀度] ×
100%[4],数据分析方法同上。
3 结果
3. 1 醋酸致小鼠扭体镇痛实验结果如表 1 所示,
其中石油醚组和水部分组与生理盐水组比较,组
间差异 P > 0. 05,不具统计学意义。而乙酸乙酯
组和正丁醇组具有一定的镇痛作用,小鼠扭体次
数相对减少,正丁醇提取物组与生理盐水对照组
比存在显著性差异 (P < 0. 01)。
表 1 金耳环不同提取物对乙酸诱发小鼠扭体反应的镇痛效果 (x ± s)
组别 剂量 (g. kg -1) 扭体次数 抑制率 (%)
生理盐水组 - 27. 4 ± 12. 4 -
阿司匹林组 0. 3 6. 4 ± 2. 9** 65. 6
石油醚组 0. 46 26. 5 ± 9. 9 3. 2
乙酸乙酯组 0. 26 25. 3 ± 18. 9* 7. 6
正丁醇组 0. 84 21. 6 ± 15. 2** 21. 1
水部分组 0. 96 24. 3 ± 11. 7 11. 1
注:与生理盐水组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
3. 2 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验结果见表 2 所 示,其中石油醚组、乙酸乙酯 (下转第 100 页)
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第 29 卷第 2 期 黔 南 民 族 医 专 学 报 Vol. 29 No. 2
2016 年 06 月 Journal of Qiannan Medical College for Nationalities Jun. 2016
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min B2 (riboflavin)in plasma by HPLC[J]. Clinica
chimica acta,2011,412(1) :38 - 43.
[15] 曹蕊,曹玉华,李楠,等 . 高效液相色谱法测定米
糠中的水溶性维生素[J]. 食品科技,2007,32
(11) :157 - 160.
[16] 杨波涛,陈凤香,莫文莲,等 . 我国食用植物油维
生素 E含量研究[J]. 粮油加工,2009 (9) :52 -
55.
[17] 牟朝丽,陈锦屏 . 紫苏油的脂肪酸组成、维生素 E
含量及理化性质研究[J]. 西北农林科技大学学
报 (自然科学版) ,2006,34(12) :195 - 198.
[18] 马为民,林小虎,马卫东,等 . 高效液相色谱法测
定蛋黄中维生素 E 含量[J]. 粮食与食品工业,
2009,16(4) :46 - 48.
(2015 - 12 - 07 收稿
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)
(上接第 89 页) 和水部分组与生理盐水组比
较,组间差异 P > 0. 05,不具统计学意义。正丁醇
提取物组与生理盐水对照组比存在显著性差异
(P < 0. 01)。其抑制率为 43. 1%,说明正丁醇提
取物具有较好的抗炎作用,虽较阿司匹林抗炎作
用弱,但比石油醚、乙酸乙酯萃取物和水部分的抗
炎强,其抑制率约为乙酸乙酯萃取物的 5 倍。
表 2 金耳环不同提取物对小鼠耳廓炎症抑制作用(x ± s)
组别 剂量(g. kg -1) 耳廓肿胀度(mg) 抑制率(%)
生理盐水组 - 19. 7 ± 5. 9 -
阿司匹林组 0. 3 8. 1 ± 3. 9** 58. 8
石油醚组 0. 46 15. 2 ± 7. 5 22. 8
乙酸乙酯组 0. 26 18. 0 ± 7. 9 8. 6
正丁醇组 0. 84 11. 2 ± 6. 0** 43. 1
水部分组 0. 96 15. 4 ± 5. 6 21. 9
注:与生理盐水组比较,**P < 0. 01,* P < 0. 05。
4 讨论
中药的化学成分组成相当复杂,其药理作用
是综合性的,某些成分具有治疗作用也有毒副作
用。金耳环属于马兜铃科细辛属植物,据文献报
道,马兜铃科细辛属植物中含有马兜铃酸,马兜铃
酸具有抗炎,解热镇痛作用,同时具有肾脏毒
性[5 - 8],因此,临床应用既要考虑增强药效,又要
兼顾减小毒副作用,进行科学地炮制减毒。
本实验采用经典的镇痛抗炎实验对金耳环醇
提物不同萃取部位进行了相关实验,初步筛选出
正丁醇萃取部位为金耳环镇痛抗炎活性部位,为
民间应用提供了理论依据,但其活性成分还不明
确,有待进一步研究。
参考文献
[1] 司有奇,陆龙辉 . 中国水族医药宝典[M]. 贵阳:贵
州民族出版社,2007:318.
[2] 王桂青,成桂仁 . 金耳环精油镇痛成分的研究[J].
广西植物,1987,7(2) :181 - 184.
[3] 夏亚兰,姚欣凯,许义红,等 . 水药骂广瓦镇痛抗炎
作用的实验研究[J]. 重庆医学,2013,42(23) :
2762 - 2764.
[4] 徐叔云,卞如濂,陈修 . 药理实验方法学[M]. 3 版
. 北京:人民卫生出版社,2002:1 - 15.
[5] 高玉桥,钟希文,梅全喜 . 马兜铃酸毒性作用的研
究进展[J]. 中国药业,2004,13(ll) :72.
[6] 严建业,王元清,王炜,等 . 细辛中马兜铃酸 A与黄
樟醚的炮制减毒方法研究[J]. 中草药,2015,46
(2) :216 - 220.
[7] 夏亚兰,魏学军,林先燕,等 . 水药骂广瓦水提液对
小鼠止咳化痰作用的实验研究[J],重庆医药,
2012,41(10) :966 - 967.
[8] 魏学军,林先燕,夏亚兰,等 . 超声提取黔产金耳环
总黄酮的工艺优化[J]. 贵州农业科学,2014,42
(2) :169 - 172.
(2016 - 06 - 14 收稿)
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