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药
研
究
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气相色谱法测定山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物的含量
★ 聂鹏1 孙萍2 刘旭海2 李家荣3 李诒光2 卢建中2 (1．江西中医学院 南昌 330004;2．江中药业
股份有限公司 南昌 330096;3．江西中医学院科技学院 南昌 330025)
摘要:目的:建立用气相色谱法测定山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物中桉叶素的方法。方法:色谱条件:HP-5 弹性石英毛细管柱
30 m × 0． 32 mm;柱温:程序升温，初始温度 60 ℃，以 5 ℃ /min的速率升至 230 ℃;FID 检测器:进样口温度 250 ℃，检测器温度
280 ℃;分流比为 5∶ 1。结果:气相色谱法测定山蜡梅叶挥发油线性范围 0. 036 6 － 0． 183 0 mg /ml，r = 0． 999 5;加样回收率为
100． 23%，RSD = 2． 01(n = 6)。结论:本方法简单、快速、精密度、重现性好，可以作为山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物质量控制方
法。
关键词:山蜡梅叶;挥发油;气相色谱;含量测定;桉叶素
中图分类号:R 927． 2 文献标识码:B
Determination of volatile oil of Folium Chimonanthi Nitentis in β-CD clathrate by GC
NIE Peng SUN Ping LIU Xu-hai，LI Jia-rong，LI Yi-guang，LU Jiang-zhong
1． Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330004;
2． Jiangzhong pharmaceutical Co． Ltd，Nanchang 330096;
3． Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，science and technology college，Nanchang
櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴櫴
330025
以使它们都带上电荷，从而达到分离。考察了 pH
值 8． 6，8． 7，8． 9，9． 0，发现在 8． 7 处基线最平坦，分
离达最佳，故 pH值为 8． 7。
3． 3 分离电压的选择
分离电压影响出峰时间和峰形，分离电压小，出
峰时间延迟，峰展宽;分离电压大，出峰时间缩短，峰
形窄。分别考察了 10，12，16，22，25 kV，发现随着
分离电压的加大，反丁烯二酸的峰形逐渐变窄，对
称，当分离电压达 25 kV 时达最佳。故分离电压为
25 kV。
3． 4 检测波长的选择
异秦皮啶在 200 － 210 nm 和 340 nm 处都有最
大吸收，而反丁烯二酸在 200 － 210 nm 处有最大吸
收，在 200 nm处噪音吸收比较大，故检测波长选择
210 nm。
3． 5 进样量
进样量太大，分离不好，进样量太小，吸收值太
低。在 0． 4 psi压力下，考察了 3 s，4 s，5 s，8 s，发现
3 s下，分离最好，响应值也较高。
3． 6 提取方法的考察
本试验分别考察了加热回流、索氏提取和超声
提取三种方法，结果显示加热回流中异秦皮啶和反
丁烯二酸的得率均较高;考察提取溶剂分别为水、
95%乙醇和 70%的乙醇，结果显示水作为提取溶剂
较好;考察了提取时间 1 h、2 h和 3 h，结果显示 2 h
提取的得率较高且时间适中。故提取方法为以水为
溶剂加热回流 2 h。
3． 7 不同产地草珊瑚药材中异秦皮啶的含量相差
不大
大部分在 0. 030% － 0. 042%，江西省崇义县乐
洞乡草珊瑚药材中异秦皮啶的含量格外高，达
0. 064%，是其他的 2 倍;不同产地草珊瑚药材中反
丁烯二酸的含量差异较大，大部分在 0． 119% －
0. 386%，广西省来宾市荔浦草珊瑚药材中反丁烯二
酸的含量格外低，只有 0. 004%;综合比较，江西省
崇义县乐洞乡草珊瑚药材中异秦皮啶和反丁烯二酸
的含量均是最高的。这可能与基因型有关，可以对
其进行基因上的研究，以期寻找到优良品种。
参考文献
［1］中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 一部． 北京:化
学工业出版社，2005． 182．
(收稿日期:2010-06-16)
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江 西中医学院学报 2 0 1 0年 1 0月第 2 2卷第 5期
JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM2010 Vol. 22 No. 5
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Abstract:Object:To establish a GC method for determining the volatile oil of Folium Chimonanthi Nitentis in β-CD clathrate． Method:
The condition of GC:HP-5 Elastic quartz capillary column 30 m × 0． 32 mm;The temperature of Chromatographic column:Process was
warming up，The initial temperature was 60℃，while the temperature was rising to 230 ℃ with the rate of 5℃ /min;Detector of FID:
The temperature of Injector was 250 ℃;The temperature of Detector was 280℃;Diversion ratio was 5∶ 1． Results:The method of GC
to determine volatile oil of Folium Chimonanthi Nitentis，with good linear range of 0. 036 6 mg /ml － 0． 183 0 μg / ml (r = 0． 999 5) ，
average recovery was 100． 23%，RSD was 2． 01% (n = 6)． Conclusion:This method is simple，rapid，precision，good repeatability，
which can be used as method to control the quality of Chimonanthus nitens Oliv volatile oil
Key words:Volatile oil;GC;Content determination
山蜡梅叶为蜡梅科 Calycanthaceae 植物 Chimo-
nanthus nitens． Oliv的叶。又名香风茶(安徽) ，毛山
茶、秋蜡梅(江西) ，铁筷子(贵州)。主要产于江西
省德兴大茅山区，婺源县怀玉山区及安徽省徽州地
区齐云山一带，为山坡、路边、溪边、疏林中的野生
品。《中国药典》(1977 年版)有记载。性凉、味辛
微苦。具有解表祛风、清热解毒之功效，对于防治感
冒、流行性感冒有良好的疗效。我们采用气相色谱
法，对山蜡梅叶挥发油包合物中桉叶素进行含量测
定方法研究，该方法简便快速、准确可行，可用于山
蜡梅叶挥发油 β-CD包合物的质量控制。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 挥发油提取器(药典规格) ;Agilent
7890 气相色谱仪;DZF-6050 型真空干燥箱，上海三
发科学仪器有限公司;DF-101T 集热式恒温磁力搅
拌器，巩义市宁华仪器有限公司;ZXZ-1 型真空泵，
临海市谭氏真空设备有限公司;SK5200H 型超声波
清洗器，上海科导超声仪器有限公司。
1． 2 试药 桉油精(含量测定用，中国药品生物制
品检定所，批号:110788-9202)其它均为分析纯，水
为超纯水。
2 方法与结果
2． 1 挥发油的提取与纯化
称取山蜡梅叶 100 g加水适量浸泡 1 h，采用水
蒸气蒸馏法收集挥发油，将所得挥发油经过无水硫
酸钠脱水干燥，挥发油平均收率为 2． 8% (n = 3，
RSD% =1． 5%)。
采用以上提取方法提取收集山蜡梅叶挥发油，
转移至具塞锥形瓶中，加入等量无水乙醇溶解制成
挥发油乙醇溶液，密闭备用。
2． 2 山蜡梅叶挥发油包合物的制备
采用饱和溶液法:取 β-CD 6 g 加适量蒸馏水于
50℃制成饱和溶液，置恒温磁力搅拌器上，缓缓滴加
2 ml上述挥发油乙醇溶液，恒温搅拌 1． 5 h，冷却至
室温，放入 4℃冰箱冷藏 24 h，抽滤，包合物用少量
水洗后再用石油醚 20 ml 洗涤三次，于 40℃真空干
燥 4 h，即得 β-CD包合物。
2． 3 挥发油包合物桉油精含量测定
2． 3． 1 色谱条件 HP-5 弹性石英毛细管柱 30 m ×
0． 32 mm;柱温:程序升温，初始温度 60℃，以每分钟
5℃的速率升至 230℃;FID 检测器，进样口温度
250℃，检测器温度 280℃，分流比为 5∶ 1。
2． 3． 2 测定方法 取一定量的山蜡梅叶挥发油 β-
CD包合物置 500 ml 圆底烧瓶内，加 100 ml 蒸馏水
加热溶解，参照 2005 年版《中国药典》Ⅰ部附录 XD
挥发油测定法甲法收集挥发油，将所得挥发油加入
无水硫酸钠脱水，转移至具塞锥形瓶中，精密称取用
无水硫酸钠干燥后的山蜡梅叶挥发油溶液约 0． 2 g
置 100 ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀、
滤过，精密量取续滤液 1 μl，注入气相色谱仪，记录
色谱图;精密称取桉油精对照品约 10 mg，置 25 ml
容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得对照
品储备溶液，取对照品储备溶液 2 ml 至 10 ml 容量
瓶中，加乙醇稀释至刻度即得对照品溶液，同法测
定，按外标法，以浓度和其相对应的峰面积计算含
量。
2． 3． 3 线性关系的考察 分别吸取桉叶素对照品
贮备溶液 1． 0、2． 0、3． 0、4． 0、5． 0 ml 置 10 ml 量瓶
中，再以无水乙醇稀释至刻度摇匀。分别去上述五
种溶液 1 μl，注入气相色谱仪，以峰面积为纵坐标，
浓度为横坐标线性回归，线性方程回归方程为:Y =
2 636． 6X + 7． 34，r = 0． 999 5，线性范围为 0. 036 6
－ 0． 183 0 mg /ml。
2． 3． 4 精密度实验 取同一份样品溶液，重复进样
5 次，测得出峰面积，结果峰面积的 RSD为 1． 07%。
2． 3． 5 溶液稳定性考察 取山蜡梅叶挥发油供试
品溶液分别于 0，2，4，6，12 h 进行测定，测得峰面积
RSD = 1． 86%，结果表明，样品溶液 12 h内稳定。
2． 3． 6 重现性试验 取同一样品 5 份，按 2． 3． 2 方
法操作，依法测定结果，桉叶素平均含量为
38. 44%，RSD为 1． 82%。
2． 3． 7 加样回收试验 精密称取 6 份用无水硫酸
钠干燥后的山蜡梅叶挥发油溶液约 0． 1 g，分别加入
桉叶素对照品储备溶液 2 ml，照 2． 3． 2 项下制备样
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江西中医学院学报 2010 年第 22 卷第 5 期
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品，测定回收率，平均回收率为 100． 23%，RSD%为
2． 01%。
3 山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物样品含量测定
3． 1 包合物的测定 按照 2． 3． 2 项下方法，采用上
述气相色谱法测定三批山蜡梅叶挥发油 β-CD 包合
物中桉叶素含量，结果山蜡梅叶挥发油 β-CD 包合
物中桉叶素平均含量为 5． 36% (n = 3，RSD% =
2. 4%) ，见下表 1。
表 1 山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物样品含量测定结果
批号 桉叶素含量 /% 平均 /% RSD /%
081101 5． 26
081102 5． 37 5． 36 1． 87
081103 5． 46
3． 2 包合物的物相鉴别实验 分别取山蜡梅叶挥
发油的石油醚溶液、β-CD石油醚溶液以及山蜡梅叶
挥发油与 β-CD混合物(比例与包合物制备方法相
同)三份样品，采用 2 项下桉叶素气相色谱方法对
上述四种石油醚溶液进行检测，结果 β-CD 石油醚
溶液未检测出桉叶素，其余均检出桉叶素。表明本
工艺条件制备山蜡梅叶挥发油包合物确已形成，而
非山蜡梅叶挥发油与 β-CD 混合物。色谱图见图 1
－ 4。
图 1 桉叶素对照品
图 2 山蜡梅叶挥发油与 β-CD混合物
图 3 山蜡梅叶挥发油的石油醚溶液样品
图 4 山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物样品
4 讨论
山蜡梅叶中挥发油含量较高，其具有很强的药
理活性，将其制成 β-CD包合物，一方面减少了山蜡
梅叶挥发油的挥散和氧化，降低挥发油的刺激性，增
加了稳定性，另一方面便于制备成制剂，保证了山腊
梅制剂的疗效。本实验采用包合溶液法进行挥发油
包合，操作简单，条件要求不苛刻，而且包合物收得
率高，适用于工业化生产。
挥发油 β-CD包合物大多数采用经典的挥发油
提取器测定总挥发油量，但不能测定某单一组分的
含量，本实验采用气相色谱法直接测定了山蜡梅叶
挥发油中桉叶素的含量，并将其运用到山蜡梅叶挥
发油 β-CD包合物测定当中，具有方法准确，精密度
高，样品用量少等特点，是山蜡梅叶挥发油 β-CD 包
合物中挥发油定量的可行方法，有利于更好地控制
山蜡梅叶挥发油 β-CD 包合物质量，从而为山蜡梅
叶制剂含量测定提供良好的参考依据。
参考文献
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(收稿日期:2010-01-15)
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聂鹏等:气相色谱法测定
山蜡梅叶挥发油 β-CD包合物的含量