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地丁草提取物对桃蚜的生物活性



全 文 : 2010 , 36(6):132-134 P lant Protection
收稿日期: 2009-11-03   修订日期: 2010-04-28基金项目: 河北省自然科学基金项目(C2006000486)*通信作者 E-mail:liu shun156@163.com
地丁草提取物对桃蚜的生物活性
张 玲 ,  赵 媛 ,  何运转 ,  秦秋菊 ,  刘 顺*
(河北农业大学植物保护学院 , 保定 071001)
摘要 以地丁草的全草为试材 , 在室内测定了不同提取方法和不同溶剂提取的地丁草提取物对桃蚜的生物活性。
结果表明:不同提取方法和不同溶剂的提取物对桃蚜的毒力有显著差异。组合中以石油醚为溶剂的地丁草索氏提
取物对桃蚜触杀活性最高 , 在浓度为 100 g/ L时 , 12 、24、48 h 的校正死亡率分别达 80.00%、96.67%、98.33%, 24 h
的致死中浓度 LC50达 22.50 g/ L;忌避作用试验表明 ,处理 24 、48 、72 h 后 , 地丁草索氏提取物对桃蚜的忌避率分别
为 88.75%、83.33%、83.33%。表明以石油醚为溶剂的地丁草索氏提取物对桃蚜有较高的触杀和忌避活性。
关键词 地丁草; 提取物; 桃蚜; 生物活性
中图分类号: S 436.621.21  文献标识码: A  DOI: 10.3969/ j.issn.0529-1542.2010.06.030
Bioactivity of the extracts from Corydalis bungeana againstMyzus persicae
Zhang Ling ,  Zhao Yuan ,  He Yunzhuan ,  Qin Qiuju ,  Liu Shun
(College of Plant Protection , Hebei Agricultural University , Baoding 071001 , China)
Abstract The bioactivity of Corydalis bungeana extr acts by selecting diff erent extr action methods and solvents to
Myzus persicae was investiga ted in the laboratory.The results showed th at the contac t toxicity of extr acts to M .
persicae was signif icant diff eren t between dif fer ent extr action methods and solvents.The petroleum e ther extr act
by soxhle t extr action had the highest contact toxicity aga inst M .persicae.The corr ected mor tality r eached
80.00%, 96.67% and 98.33%, respectively , a t the concen tr ation of 100 g/ L at 12 h , 24 h and 48 h af ter tr ea t-
ment.The LC 50 to M .persicae was 22.50 g/ L at 24 h.The results showed th at the deter rent r ates were 88.75%,
83.33% and 51.79%, r espec tively , at the concentr ation of 100 g/ L a t 24 h , 48 h and 72 h af te r tre atment.I t sug-
gested tha t petr oleum ether extr act of C .bungeana by soxhlet extr action method had the highest contact and
deter rent bioac tivity to M .persicae .
Key words Corydalis bungeana ; extr act; Myzus persicae; bioac tivity
  桃蚜[ Myz us persicae (Sulzer)]属同翅目 ,蚜
科 ,是世界范围内的重要害虫之一 ,其以成蚜 、若蚜
群集于寄主的叶背 、嫩茎及芽上刺吸汁液 ,排出大量
蜜露 ,诱发煤污病 ,同时还可传播病毒病 ,经常给作
物造成严重损失 。目前对该害虫的防治主要以化学
药剂为主 ,但化学农药的长期使用导致了桃蚜的抗
药性提高和农药残留等问题 ,严重地威胁着人类自
身和环境的安全。因此 ,寻找和研发控制桃蚜的高
效 、环境相容性好的新型药剂 ,对当前严重危害蔬
菜 、果树的桃蚜的无公害治理具有重要意义。植物
源杀虫剂具有与环境良好的相容性 、害虫不易产生
抗药性 、不污染环境及对人畜等非靶标生物安全等
优点 ,其研究和开发已成为近年来农药的研究热
点[ 1-3] 。目前已有冰草 、红蓼和银杏等植物粗提物对
桃蚜作用研究的相关报道[ 4-7] 。
地丁草(Corydal is bungeana Turcz)又名苦丁 、
苦地丁 ,属罂粟科植物 ,生长于山沟 、溪流及平原 、丘
陵草地及疏林下 , 主要分布于山东 、河北 、山西 、陕
西 、内蒙古等地 。中医用于清热解毒 ,活血消肿 ,治
疗感冒 、咳嗽 、肝炎及多种炎症 ,尤其对风湿病 、心肌
炎有较好疗效[ 8] 。目前国内对地丁草的研究主要是
在医用化学成分的测定和医学药理方面[ 9-11] ,尚未
有关于在农业害虫方面的研究报道 。
本研究室进行 40种中药植物对桃蚜杀虫活性
36 卷第 6 期 张玲等:地丁草提取物对桃蚜的生物活性
筛选试验时发现地丁草对桃蚜有较高的杀虫活
性[ 12] 。因此 ,作者拟进一步研究地丁草杀虫活性物
质的最佳提取溶剂和最佳提取方法 、对桃蚜的触杀
毒力及忌避活性 ,以便为地丁草的进一步研究与开
发提供理论依据和应用基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物与昆虫
地丁草(Corydalis bungeana)购于河北省安国
市中药材市场 。用电动粉碎机粉碎 ,干粉密封于保
鲜袋中 ,4 ℃冰箱中保存备用 。桃蚜(Myzus persi-
cae)采于河北农业大学标本园内 ,室内自然条件下
饲养 ,繁殖数代后供试验使用[ 13] 。
1.1.2 供试溶剂
丙酮 、甲醇 、氯仿 、石油醚 、95%乙醇 、乙酸乙酯
(分析纯 天津新通精细化工有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 植物提取方法
采用超声波提取法 、索氏提取法和冷浸法 ,获取
不同提取溶剂的提取液后用旋转蒸发仪浓缩至膏
状 ,用丙酮将提取物溶解至每毫升含 1 g 干物质 ,置
于 4 ℃冰箱保存备用 。
1.2.2 触杀活性测定
采用浸渍法[ 14] 。先将提取物用水加乳化剂(吐
温-80 在测定液中含量为 0.8%)稀释成浓度为
100 g/L 的测定液 ,筛选出对桃蚜毒力最高的提取
组合 ,然后将该组合提取的地丁草提取物用水稀释
成 5个浓度梯度 ,测定其对桃蚜的毒力 ,并以相同浓
度的丙酮稀释液作为对照 。挑取生长发育一致的无
翅孤雌成蚜浸渍在药液中 , 5 s后取出 ,用滤纸将其
表面药液吸干 ,放入培养皿中新鲜甘蓝叶上。每皿
20头 ,每处理重复 3次 。检查 12 、24 、48 h死亡情况
并记录死亡个体数 ,用 A bbot t 公式计算校正死亡
率。用 DPS 进行数据分析 ,算出致死中浓度 LC50 ,
毒力回归方程。
1.2.3 忌避作用测定
将白菜叶片带中脉剪成直径 4 cm 的圆片 ,沿对
称线剪成两半叶片 。将叶片正面朝下贴在盛有 1%
琼脂直径 9 cm 的培养皿中 ,两半叶片之间用宽为
0.5 cm 的滤纸隔开。叶背的一侧用不同浓度的地
丁草提取物涂布均匀 ,另一侧用与地丁草提取物等
量的丙酮加水涂布作为对照 ,待叶片晾干形成药膜 ,
在滤纸条上挑入数目相等 、生长发育一致的无翅成
蚜 ,用保鲜膜盖住皿口 , 置于培养箱中 。记录 24 、
48 、72 h 各叶片上的蚜虫数 。每皿 20头 ,每处理重
复 5次 。
2 结果与分析
2.1 不同提取方法和不同提取溶剂的地丁草提取
物对桃蚜无翅成蚜的毒力
  由表 1可知 , 3 种不同提取方法和 6 种不同提
取溶剂的地丁草提取物对桃蚜的触杀活性存在显著
差异。对表中各处理 12 、24 、48 h后的结果进行方
差分析可知 ,以石油醚为溶剂和以乙酸乙酯为溶剂
的索氏提取物 ,以 95%乙醇为溶剂的超声波提取物
对桃蚜无翅成蚜的毒力较高 ,48 h 的校正死亡率分
别达到98.33%和83.33%及 90.00%。其中以石油
醚为溶剂的索氏提取物对桃蚜触杀活性最高 , 12 、
24 、48 h死亡率分别为 80.00%、96.67%、98.33%。
表 1 不同提取方法和不同提取溶剂的地丁草
提取物对桃蚜无翅成蚜毒力测定结果1)
提取方法 溶剂 12 h校正死亡率/ %
24 h校正
死亡率/ %
48 h校正
死亡率/ %
超声波提取 丙酮 15.00 efg 16.67 gh 16.67 kl
甲醇 15.00 defg 16.67 gh 16.67 jkl
氯仿 26.67 cdef 33.33 efg 41.67 fghi
石油醚 38.33 cd 61.67 bcde 78.33 bcd
95%乙醇 80.00 a 86.67 ab 90.00 b
乙酸乙酯 31.67 cde 35.00 efg 36.67 ghij
索氏提取 丙酮 51.67 bc 51.67 def 58.33 defgh
甲醇 68.33 ab 68.33 bcd 68.33 cde
氯仿 50.00 bc 56.67 cde 65.00 def
石油醚 80.00 a 96.67 a 98.33 a
95%乙醇 13.33 fg 25.00 fgh 35.00 ghij
乙酸乙酯 80.00 a 80.00 abc 83.33 bc
冷浸提取 丙酮 43.33 bc 58.33 cde 63.33 defg
甲醇 5.00 g 5.00 h 6.67 l
氯仿 8.33 fg 16.67 gh 20.00 ijkl
石油醚 48.33 bc 70.00 bcd 75.00 bcde
95%乙醇 18.33 defg 31.67 efg 31.67 hijk
乙酸乙酯 36.67 cd 46.67 def 53.33 efgh
对照 0 0 0
 1)以上各处理的质量浓度为 100 g/ L 。方差分析中数据进行了反
正弦转换。纵列数据后标不同字母表示在 5%水平差异显著。
2.2 地丁草索氏提取物对桃蚜无翅成蚜的毒力
从表 2中可知地丁草的石油醚索氏提取物对桃
蚜的触杀活性随着浓度的升高 ,处理时间的延长而
增强 ,在浓度为 20 、25 、33.3 、50 、100 g/ L 时 ,24 h的
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校正 死 亡 率 为 38.98%、 57.62%、 69.49%、
88.13%、96.61%, 48 h的校正死亡率为 41.38%、
60.34%、70.69%、93.10%、98.27%。对地丁草提
取物对桃蚜的触杀活性进行回归分析(表 3),由结
果可知 , 12 、24 、48 h的 LC50分别为 31.48 、22.50 、
21.56 g/L 。
表 2 石油醚为溶剂的地丁草索氏提取物
对桃蚜无翅成蚜毒力测定结果
浓度 g/ L 12 h校正死亡率/ %
24 h校正
死亡率/ %
48 h校正
死亡率/ %
100 80.00 96.61 98.27
50 71.67 88.13 93.10
33.3 51.67 69.49 70.69
25 48.33 57.62 60.34
20 26.67 38.98 41.38
CK 0 0 0
表 3 石油醚为溶剂的地丁草索氏提取
物对桃蚜触杀活性的回归分析
处理
时间/ h
毒力回归方程
(y=) 相关系数(R)
LC50(95%置
信区间)/ g· L -1
12 2.070 0+1.951 9 x 0.861 7 31.48(26.55~ 37.33)
24 0.845 6+3.059 5 x 0.835 1 22.50(19.92~ 25.42)
48 0.550 8+3.323 8 x 0.870 6 21.56(19.40~ 24.15)
2.3 地丁草提取物对桃蚜的忌避作用
由表 4可知 ,在一定的时间范围内 ,地丁草对
桃蚜的忌避活性大小随处理液浓度的降低 、处理时
间的延长而下降 。浓度为 100 g/ L时 ,地丁草提取
物对桃蚜具有较高的忌避活性 ,处理 24 、48 、72 h
后忌避率分别为 88.75%、83.33%、51.79%,由此
看出 , 48 h后提取物对桃蚜的忌避活性下降显著 。
表 4 石油醚为溶剂的地丁草索氏提取物
对桃蚜的忌避作用结果1)
浓度/
g· L-1
24 h
平均
居留
虫数/头
忌避
率/ %
48 h
平均
居留
虫数/头
忌避
率/ %
72h
平均
居留
虫数/头
忌避
率/ %
100 处理 2.0 88.75 a 2.8 83.33 a 6.4 51.79 a
对照 18.0 17.2 13.6
50 处理 6.0 53.21 ab 7.8 25.68 b 8.4 25.73 a
对照 14.0 12.2 11.6
33.3 处理 7.2 34.89 ab 9.2 5.56 b 9.4 6.82 a
对照 12.8 10.8 10.6
25 处理 7.6 24.59 b 8.0 25.43 b 8.6 13.82 a
对照 12.4 12.0 11.4
20 处理 9.2 12.06 b 7.8 29.33 b 8.2 20.90 a
对照 10.8 12.2 11.8
 1)方差分析中数据进行了反正弦转换。同列数据后标不同字母
表示在 5%水平差异显著。
3 小结和讨论
在本试验 18个提取组合中 ,以石油醚为溶剂的
索氏提取的地丁草提取物对桃蚜的毒力最高 ,初步
表明石油醚索氏提取法为地丁草较佳的提取方法。
提取物浓度为 50 、100 g/L 时 , 48 h的校正死亡
率分别达到 93.10%、98.27%;24 h 的致死中浓度
LC50达 22.50 g/L;在浓度为 100 g/ L 时 ,地丁草提
取物对桃蚜还表现出了较强的忌避活性 , 24 h的忌
避率达 88.75%。初步表明地丁草可作为桃蚜的杀
虫植物进一步深入研究。
吕惠子 、黄阁 、郑建芳等研究表明 ,地丁草全草
中含有多种生物碱 、甾体化合物 、酚性物质等多种化
学成分 ,其中主要有效成分为生物碱[ 9-11] 。目前植
物生物碱杀虫活性方面有不少报道 。如周琳等在室
内测定了雷公藤总生物碱对几种害虫的生物活性 ,
证实了雷公藤总生物碱具有较广的杀虫谱和较强的
杀虫活性[ 15] 。刘长仲等也发现苦豆子和乌头生物
碱对桃蚜有较高的毒力[ 16] 。苦参中的生物碱已经
被加工成制剂作为杀螨剂[ 17] 。本次试验中没有对
地丁草提取物活性组分进行分离 、提纯 、鉴定 ,尚需
今后对其进一步研究 。
曹挥等研究冰草粗提物对桃蚜内吸生物活性时
发现 ,冰草粗提物处理桃蚜后 ,对桃蚜体内的蛋白
酶 、谷胱甘肽-S-转移酶活性均有明显抑制作用 ,这
可能使蚜虫的正常解毒代谢受到抑制 ,从而使有毒
物质在体内积累 ,引起其中毒死亡[ 4] 。地丁草提取
物对桃蚜的作用机理是否与上述一致还有待于今后
进一步深入研究 。
参考文献
[ 1]  郝乃斌 ,戈巧英.中国植物源杀虫剂的研制与应用[ J] .植物学
通报 , 1999 , 16(5):495-503.
[ 2]  臧二乐 ,李萍.植物源杀虫剂研究现状[ J] .农药 ,1994 ,33(4):5-7.
[ 3]  马志卿 , 张兴.植物源杀虫物质的作用特点[ J] .植物保护 ,
2000 , 26(2):37-39.
[ 4]  曹挥 ,李秀岚 ,张慧荣 ,等.冰草提取物对桃蚜的杀虫活性及对
体内两种酶活性的影响[ J] .山西农业大学学报 , 2002 , 22(4):
291-294.
[ 5]  周琼 ,梁广文 ,曾玲 ,等.多种植物乙醇提取物对桃蚜和萝卜蚜
试验种群的控制作用[ J] .中国农业科学 , 2002 , 35(11):
1356-1360.
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有采取套袋措施 , 在 7 月底梨果被害率就高达
74%,到采收期则高达 95%。2007年 、2008年不套
袋梨区及 2009年 ,7月中旬在地面即可见落果 , 7月
底落果率分别为 40%、30%和 60%, 8月中旬落果
率分别达 80%、60%和 90%以上 ,从不套袋梨区捡
回部分新鲜落果 ,均能从中育出柑橘小实蝇成虫。
此外 ,不套袋梨区 7月上旬梨果转色至成熟期 ,裸露
梨果受鸟雀和金龟子的为害也较严重。
  表 2 套袋和不套袋区树上梨果被害率 (浙江大学果园)
年份 梨区 被害率/ %采收前(7月底) 采收期(8月中旬)
2007 套袋梨区 0 0
不套袋梨区 43 88
2008 套袋梨区 0 0
不套袋梨区 37 78
2009 整个梨园不套袋 74 95
3 结论与讨论
3年的性诱瓶监测和田间调查结果表明 ,梨园
套袋梨区与不套袋梨区间柑橘小实蝇的虫口数量和
危害程度相差甚大 ,2007-2008年诱虫量后者比前
者多 5.35倍;套袋梨区在梨果采收前诱虫量很少 ,
仅占总诱虫量的 0.25%,梨果成熟期避开了柑橘小
实蝇成虫盛发期 ,且梨袋阻止了梨果芳香味的散发
和柑橘小实蝇的产卵 ,梨果几乎不遭受柑橘小实蝇
为害;而不套袋梨区梨果采收前诱虫量占总诱虫量
的比例是套袋梨区的 24倍 ,成虫盛发期也比套袋梨
区提早 1个多月 ,并覆盖着梨果的整个转色至成熟
采收期 ,梨果被害率高;在果实转色期裸露梨果被鸟
雀及金龟子为害也严重。这些结果表明 ,采用套袋
保护梨果是控制柑橘小实蝇为害的一项有效措
施[ 3-8] 。随着梨果的不断成熟 ,梨果散发出来的水果
芳香味引诱了鸟雀及金龟子为害 ,受害果的伤口又
大大增加了水果芳香味的散发 ,引诱更多的柑橘小
实蝇成虫产卵为害 ,这可能是在不套袋梨区诱虫量 、
梨果被害率高于套袋区的一个原因 。不套袋梨区梨
落果出现时间早 、量大 ,其中的柑橘小实蝇幼虫经发
育 ,最后变成成虫 ,这些成虫多数停留在这个种植区
域内活动 、为害 ,这可能是在不套袋梨区诱虫量 、梨
果被害率高于套袋区的另一个原因 ,同时也是梨果
采收后在一段时间内诱虫量居高不下的原因之一 。
因此 ,及时捡拾落果并加以妥善处理 ,从而有效降低
果园的虫口密度 ,也是控制柑橘小实蝇的一项安全 、
环保的有效措施 。
参考文献
[ 1]  梁光红 ,陈家骅 ,杨建全 ,等.桔小实蝇国内研究概况[ J] .华东
昆虫学报 , 2003 , 12(2):90-98.
[ 2]  林进添 ,曾玲 ,陆永跃 ,等.桔小实蝇的生物学特性及防治研究
进展[ J] .仲恺农业技术学院学报 , 2004 , 17(1):60-67.
[ 3]  欧剑峰 , 黄鸿 , 吴华 , 等.柑橘小实蝇综合防治概述[ J] .中国
植保导刊 , 2007 , 27(10):28-29.
[ 4]  陈茹花.橘小实蝇综合防治措施[ J] .植物检疫 , 2006 , 20(5):
328-328.
[ 5]  黄素 ,韩日畴.桔小实蝇的研究进展[ J] .昆虫知识 , 2005 , 42
(5):479-484.
[ 6]  陈景辉.桔小实蝇综合防治技术的初步研究[ J] .华东昆虫学
报 , 2004 , 13(1):107-110.
[ 7]  顾云琴 ,李云明 ,项顺尧.温岭市柑橘小实蝇危害柑橘的特点和
防控技术[ J] .植物检疫 , 2009 , 23(3):54-55.
[ 8]  祁力言 ,封兴华 ,刘勇.橘小实蝇在无锡地区的发生与防治试
验[ J] .江苏农业科学 , 2008(1):96-97 , 128.
(上接 134页)
[ 6]  李友莲 ,李秀岚 ,魏清霞.红蓼提取物对桃蚜的杀虫活性研究
[ J] .山西农业大学学报 , 2004 , 24(3):234-236.
[ 7]  郑许松 ,俞晓平 ,吕仲贤 ,等.银杏叶粗提物对桃蚜种群的抑制
作用[ J] .浙江农业学报 , 2002 , 14(5):260-264.
[ 8]  江苏新医学院.中药大辞典[ M] .上海:上海科学技术出版社 ,
1985:1290.
[ 9]  吕惠子 ,崔兴目 ,王广录.地丁草的化学成分与药理[ J] .中国野
生植物资源 , 2002 , 21(4):54-55.
[ 10] 黄阁 ,李发美.地丁草中紫堇灵和乙酰紫堇灵的制备和 HP LC
测定[ J] .中国中药杂志 , 2003 , 28(4):346-348.
[ 11] 郑建芳 ,秦民坚.地丁草生物碱的化学成分[ J] .中国药科大学
学报 , 2007 , 38(2):112-114.
[ 12] 刘顺 , 张风国 , 何运转 ,等.40种中药植物对桃蚜杀虫活性筛
选[ J] .中国农学通报 2007 , 23(6):501-503.
[ 13] 刘树生.介绍一种饲养蚜虫的方法—新的叶子圆片法[ J] .昆虫
知识 , 1987(2):113-115.
[ 14] 姚晓宝 ,刘银泉 ,吴晓琴 ,等.毛竹 、杭白菊粗提物对桃蚜和小菜
蛾的生物活性测定[ J] .浙江农业学报 , 2004 , 16(3):156-158.
[ 15] 周琳, 冯俊涛 ,张锦恬 ,等.雷公藤总生物碱对几种昆虫的生物
活性[ J] .植物保护 , 2007 , 33(6):60-64.
[ 16] 刘长仲 ,王国利 ,康天芳.苦豆子和乌头碱对桃蚜的毒力测定和
防效试验[ J] .植物保护 , 2000 , 26(6):20-22.
[ 17] 陈修会 ,张清春.0.8%苦参碱.内酯防治梨二叉蚜 、桃瘤头蚜药
效试验[ J] .农药 , 2002 , 41(12):46.
·150·