全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(3):344 ～ 346 　　
程序时的吸光度 。结果表明 ,干燥升温程序为 50℃
60 s
140℃时 ,分析灵敏度和精确度都较好。
1. 2. 5 　灰化温度的选择 　为了对干燥后的固体
残留物进行碳化 、热解 ,确保有机和无机基体的分解
和除去 ,提高硒元素与基体干扰物质的分离 ,减少基
体干扰 ,对灰化过程采用了升温程序。参考 “1. 2.
1”项条件 ,测定供试品溶液在不同灰化升温程序的
吸光度 。结果表明灰化温度在 50 s,从 140℃升至
1. 2×103℃时 ,分析灵敏度和精确度都较好 ,背景吸
收最低 。
1. 2. 6　标准曲线的制备　精密量取硒标准溶液
适量 ,用 0. 1 mol L -1硝酸溶液稀释成 1 mg L -1的
硒标准工作溶液。精密量取此溶液 0、1、2、3、4 、5
m l,分别置 50 m l量瓶中 ,加入 3 m l混合基体改进
剂 ,用 0. 1 mo l L -1硝酸溶液定容 ,摇匀 。按 “1. 2.
1” “1. 2. 3”项条件 ,测定吸光度 ,绘制标准曲线 。其
回归方程为:Y =3. 58 ×10-3X +1. 50 ×10-3 (r =
0.9996)。硒离子在 20 ～ 100 μg L -1的范围内 ,浓
度与吸光度的线性关系良好。
1. 2. 7　精密度的考察　取 “1. 2. 6”项下 40μg L -1
的标准溶液。按 “1. 2. 1” “1. 2. 3 ～ 1. 2. 5”项条件 ,测
定 6次 ,计算吸光度的 RSD =2. 16%(n=6)。
1. 2. 8　检出限与定量限的考察 　按 “1. 2. 1”“1. 2.
3”项条件 ,对空白溶液进行 10次测定 ,分别以 3倍
和 10倍标准偏差除以工作曲线的斜率 ,得硒的检出
限与定量限分别为 1. 2、5. 0 μg L - 1。
1. 2. 9　重复性的考察 　取同一批多种微量元素注
射剂 6份 ,按 “1. 2. 1”“1. 2. 3 ～ 1. 2. 5”项条件 ,重复测定
6次 ,结果平均值为 0. 042mo l m l-1 , RSD =2. 85%。
1. 2. 10　回收率试验 　取缺硒的空白样品 ,分别加
入相当于制剂含量 80%、100%、 120%的单元素硒
溶液 ,按 “ 1. 2. 1”项条件 ,每浓度水平测定 3份 ,共 9
份 ,进行回收率试验 ,计算平均回收率。其平均回收
率为 99. 71%, RSD =1. 30%。
1. 2. 11　样品的含量测定 　取 3批样品 ,按 “1. 2.
1”项条件 ,进行硒含量的测定。样品中硒的含量分
别为 0. 041 、0. 044、0. 043mo l m l-1(n=3)。
2　讨论
由于硒是一种极易挥发的元素 ,用石墨炉原子吸
收光谱法测定时 ,在热解过程中如果不加基体改进剂 ,
即便在较低温度下灰化 ,也可能引起硒的逸失 ,导致误
差较大。选择合适的混合基体改进剂和灰化温度 ,可
减少化学干扰和防止灰化过程中硒的挥发 ,提高分析
灵敏度。作者曾试验了多种基体改进剂 ,结果表明 Pd
-Mg(NO3)2混合基体改进剂效果较好 ,不仅提高了样
品的灰化温度 ,消除其共存元素的干扰;减少硒的灰化
损失 ,提高硒的原子化效率;而且对石墨炉也有一定的
保护作用。由于样品基体复杂 ,故对干燥升温程序和
灰化升温程序进行了优化 , 降低了背景吸收。
参考文献:
[ 1] 　 汤淳东. 花旗参中西硒含量的光度法测定 [ J] .广东微量元
素科学 , 2001, 8(5) :44 - 45.
[ 2] 　 中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会. 食品中
硒的测定 [ S] . 北京:化学工业出版社 , GB /T5009, 93 - 2003.
收稿日期:2007 - 01
作者简介:杨林(1976-),男 ,四川成都 ,药师 ,正在职攻读生药学专业的硕士学位 ,现在华西医院药剂科工作。
*通讯作者(Correspondent author), E -m ail:hxydyl@ sohu. com
HPLC鉴别西藏黄连和云南黄连中的生物碱
杨　林 1 , 陈　璐 2 ,王天志 1* , 杨　兵 1
(1.四川大学华西药学院 ,四川 成都 610041;2. 四川生殖卫生学院 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　建立鉴别西藏黄连和云南黄连的方法。方法　采用 HPLC法 ,色谱柱为 Diam onsil C18(150 mm ×6 mm , 5 μm),
流动相为乙腈 -0. 02 mo l L - 1KH
2
PO
4
溶液(30：70,内含 SDS 1. 275 g L- 1), 流速 1 m l m in- 1 , 检测波长 268 nm ,柱温 30℃。
结果　云南黄连中非洲防己碱 、药根碱和巴马汀的含量明显高于西藏黄连 , 且含少量的表小檗碱 , 西藏黄连中表小檗碱的含
量未达检测限。结论　非洲防己碱 、药根碱和巴马汀可以作为鉴别西藏黄连与云南黄连的特征性成分。
关键词:西藏黄连;生物碱;云南黄连;高效液相色谱
中图分类号:R917　　　　　　文献标识码:A　　　　　　　　　　　文章编号:1006 - 0103(2007)03 - 0344 - 03
Content identification of alkaloids in Coptis tee ta andC. teetoides by HPLC
YANG Lin
1 , CHEN Lu2 , WANG Tian - zh i1* , YANG B ing1
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牫牣牥牬牬
(1. West China School of Pharmacy, S ichuan University, Chengdu 610041, China;2. S ichuan ReproductiveHealth Institute, Chendu 610041, China)
Abstrac t:OBJECTIVE　To identify Coptis teeta andC. teetoides. METHODS　HPLCm e thod was adopted w ith D iam onsilC18 co l-
um n(150 mm ×6 mm, 5 μm). The mobile phase consisted o f ace tonitrile - phospha te (30：70) and the flow rate w as 1. 0 m l
m in- 1. RESULTS　The contents of co lum bam ine, ja tro rrhizine, pa lm atine in rhizome o fC. teetoides C. Y. Cheng we re obv iously
highe r than tho se in rh izom e o fC. teeta W al.l C. tee toide s which conta ined a sm a ll am oun t of epibe rberine on ly, and it didn’ t reach
the lim it of de tection o fC. teeta. CONCLUSION　Co lum bam ine, ja tro rrhizine and pa lm a tine cou ld be considered a s the characteristic
components for iden tification ofCoptis teeta and C. teetoides.
K ey words:Coptis teeta;C. teetoides;HPLC;A lka loids
CLC num ber:R917 D ocum ent code:A A rtic le ID:1006 -0103(2007)03 - 0344 -03
　　西藏黄连产于西藏南部 ,云南黄连产于云南西北
部。对于两种黄连的分类 、地位目前尚存争议 [ 1] 。我
们采集和购买了几种西藏黄连与云南黄连 ,并用高效
液相色谱分析其生物碱部分 ,发现二者有明显差异 ,
所建立的鉴别方法重复性好 ,结果稳定可靠 。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
高效液相色谱仪包括 LC -10A泵 、SPD - 10A紫
外可见光检测器 、CTO -10A柱温箱 、C -R7Ae plus色
谱数据处理器(日本岛津);超声振荡清洗仪(天津室恒
奥科技有限公司);LG15 -W高速离心机(北京医用离
心机厂)。乙腈为色谱纯;水为重蒸水;其余试剂均为
分析纯;小檗碱 、巴马汀 、黄连碱 、表小檗碱、药根碱 、非
洲防己碱和 G roenlandicine等对照品 (自制)经紫外光
谱分析及1HNMR确证 , HPLC检测纯度大于 98%;黄连
样品 1 ～ 3号采自西藏察隅 , 4 ～ 8号采自云南 , 9号样品
是味连(巿售)。因味连的生物碱含量高 ,故用其进行
色谱条件的优化。以上 9份样品经华西药学院王天志
教授鉴定 ,药材碎粉后过 40目筛 ,备用。
1.2　方法与结果
1.2.1　溶液的制备　称取 1 ～ 9号过 40目筛的样
品各 0. 05 g,加入甲醇 -盐酸 (100：1)25 m l,冷浸
过夜 ,超声提取 30 m in;补足减失的重量 ,量取 1 m l
离心(1×104 r m in- 1)30 m in , 上清液用微孔滤膜
过滤 ,即得供试品溶液 。分别取微量小檗碱 、巴马
汀 、黄连碱 、表小檗碱 、药根碱 、非洲防己碱和 G roen-
landic ine对照品 ,用适量甲醇溶解即得对照品溶液。
1.2.2　色谱条件与系统适用性　通过对检测波长 、
流动相 、柱温的考察 ,最终选定的色谱条件为 D ia-
monsilC18(150 mm ×6 mm , 5 μm)色谱柱;流动相
为乙腈 -0. 02mo l L -1KH2 PO4溶液 (30：70 ,内含
SDS 1. 275 g L - 1),流速 1. 0 m l m in- 1 , 检测波长
268 nm ,柱温 30℃。在此色谱条件下 , 9号样品的色
谱图见图 1。 1 ～ 7号峰分别为 G roen landicine、非洲
防己碱 、药根碱 、表小檗碱 、黄连碱 、巴马汀和小檗
碱 ,其保留时间分别为 21. 17、28. 82、30. 11、31. 58、
36. 41、45. 56、52. 15 m in。按小檗碱峰计算 ,色谱系
统的理论板数为 1. 13×104。测得 G roenlandicine与
非洲防己碱 、非洲防己碱与药根碱 、药根碱与表小檗
碱 、表小檗碱与黄连碱 、黄连碱与巴马汀 、巴马汀与
小檗碱之间的分离度分别为 5.9、 1.2、 1.4、 3.0、
4.3、2.3,可完全分离 。
图 1　9号样品的色谱图
F ig 1　HPLC chrom atogram of sam ple 9#
1.2.3　精密度试验　取 9号样品 ,按 “ 1. 2. 1”项下
方法制备供试品溶液。在 “ 1. 2. 2”项条件下 ,连续
进样 5次 ,每次 10μl,记录 G roenlandicine、非洲防己
碱 、药根碱 、表小檗碱 、黄连碱 、巴马汀 、小檗碱 7个
组分的峰面积 , 其 RSD 分别为 1. 27%、 1. 07%、
1. 14%、0. 90%、0. 97%、0. 84%、0. 73%。
1.2.4　重复性试验　取约 0. 05 g 9号样品细粉 ,精
密称定 ,共 5份 ,其余操作按 “ 1. 2. 3”项进行 ,记录
G roen landicine、非洲防己碱 、药根碱 、表小檗碱 、黄连
碱 、巴马汀和小檗碱 7个组分的峰面积 ,计算峰面积
的 RSD 分别为 1. 87%、 1. 70%、 1. 86%、1. 85%、
2. 03%、1. 56%、1. 41%。
1.2.5　稳定性实验 　按 “1. 2. 3”项方法 ,取 9号供
试品溶液分别于制样后 0、2、4、6、8、10 h进样 ,每次
10 μl,记录 G roenlandicine、非洲防己碱 、药根碱 、表
小檗碱 、黄连碱 、巴马汀 、小檗碱 7个组分的峰面积 ,
计算其峰面积的 RSD 分别为 1. 46%、 1. 35%、
1. 54%、1. 38%、1. 57%、1. 22%、1. 15%。
1.2.6　样品分析　分别取0. 05 g1 ～ 8号样品的干
燥细粉 ,按 “1. 2. 3”项下操作 ,吸取 10 μl进样 ,所得
色谱图见图 2。
345第 3期 杨　林 , 等。 HPLC鉴别西藏黄连和云南黄连中的生物碱 　　　
华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(3):346 ～ 347 　　
图 2　1 ～ 8号样品的色谱图
F ig 2　HPLC chroma togram s of sample 1#～ 8#
2　讨论
因味连中各种生物碱的含量均较高 ,故选用味
连作为优化色谱条件的样品。从图 2可见 , 3个西
藏黄连样品的 HPLC图谱非常相似 ,各生物碱的色
谱峰面积无明显差异 , 5个云南黄连样品的图谱也
非常相似 ,各生物碱的峰面积亦无明显差异 ,表明种
群内具有良好的相似性和稳定性 ,而种群间各生物
碱的峰面积则有明显差异 。同时 ,两种黄连中黄连
碱的含量差别不大 ,但云南黄连中非洲防己碱 、药根
碱和巴马汀的含量明显高于西藏黄连 ,平均峰面积
分别约为西藏黄连的 7、1. 5、16倍 , G roenland icine
和小檗碱的含量也略高于西藏黄连。云南黄连中还
含有少量的表小檗碱 ,而西藏黄连中表小檗碱的峰
面积低于检测限。结果表明非洲防己碱 、药根碱和
巴马汀可以作为区别西藏黄连与云南黄连的特征性
成分 。
参考文献:
[ 1] 　 张浩 ,王天志 ,方忻平 , 等.西藏黄连和云南黄连原植物研究
[ J] .中国中药杂志, 1990, 15(6):6 -8.
收稿日期:2007 - 02
作者简介:任丽建(1981 -),女 ,吉林松原 ,正攻读药剂学专业的硕士学位。 E -mai l:leannren lijian@yahoo. com. cn
*通讯作者(Correspondent author), E -m ail:syyin@ybu. edu. cn
不同炮制工艺对何首乌中二苯乙烯苷含量的影响
任丽建 1 ,裴莲花 2 ,尹寿玉1*
(1.延边大学医学院 ,吉林 延吉 133000;2. 延边大学护理学院 , 吉林 延吉 133000)
摘要:目的　考察炮制工艺和炮制时间对何首乌中 2, 3, 5, 4′-四羟基二苯乙烯 - 2 -O - β -D -葡萄糖苷 (二苯乙烯苷)含
量的影响。方法　将何首乌分别采用黑豆汁拌蒸 0、2、4、6、8、10 h和传统工艺(九蒸九晒)炮制后 , 用 HPLC测定炮制饮片中
二苯乙烯苷的含量。结果　不同炮制工艺的饮片中二苯乙烯苷含量顺序为传统工艺炮制品 >生品 >黑豆汁拌蒸品。用黑豆
汁拌蒸 , 二苯乙烯苷的含量先逐渐上升而后下降 , 以 6 h为峰。结论　应规范何首乌饮片的炮制时间 。
关键词:何首乌;炮制;二苯乙烯苷;
中图分类号:R917　 　文献标识码:A　 　文章编号:1006 -0103(2007)03 - 0346 - 02
E ffects of d ifferent processingm ethods on the tetrahydroxystilbene contents inRad ix Polygoni
M ultiflori
REN Li - jian
1 , PE I Lian - hua2 , Y IN Shou - yu1*
(1. College ofPharmacy, Yanbian University, Yan ji, 133000, China;2. School of Nursing , Yanbian Un iversity, Yan ji 133000, Ch ina)
Abstrac t:OBJECTIVE　To investig ate the diffe rent effec t o f pro ce ssing m ethods and the change o f chem ica l components 2, 3, 5,
4′- te trahyd roxy - stilbene g lucoside in Polygonum mu ltiflorum . METHODS　 The samp les w ere steamed w ith black bean sauce fo r
0, 2, 4, 6, 8, 10 h, respective ly or p repa red by traditiona lm ethod. HPLC was used to de te rm ine the content o f 2, 3, 5, 4′- te trahydroxy
- stilbene g luco side. RESULTS　 In the pro ce ss w ith black bean sauce steam ing, the content o f 2, 3, 5, 4′- stilbene g luco side in-
creased w ith processing tim e. It reached h ighest at 6 hou r and then dec reased. CONCLUSION　The processing o fPolygonum M ulti-
florum shou ld be standard ized to avo id significan t va riation of chem ica l contents.
K ey words:Rad ix Polygonum m ultiflorum;P rocessing;2, 3, 5, 4′- te trahydroxy - stilbene g luco side
CLC num ber:R917 D ocum ent code:A Artic le ID:1006 - 0103(2007)03 -0346 - 02
　　何首乌为蓼科植物何首乌 Polygonum multiflorum
Thunb.的干燥块根。生何首乌具有解毒 、消痈 、润肠
通便之功效。经炮制后的制首乌具有补肝肾 、益精
血 、乌须发 ,增强免疫 、改善记忆障碍及抗衰老等功