全 文 ：［收稿日期］ 20130130(001)
［基金项目］ 国际科技合作项目(S2013ZＲ0211) ;国家自然科
学基金项目(81160391)
［第一作者］ 宋煌旺，从事天然药物化学研究，Tel:0898-
65889422，E-mail:993528218@ qq． com
［通讯作者］ * 宋鑫明，硕士，实验师，从事天然药物化学研究，
Tel:0898-65889422，E-mail:sxm8646@163. com
喙果皂帽花挥发油 GC-MS分析及活性研究
宋煌旺，宋鑫明* ，韩长日，杨路佳，邓文，段红叶，孙丽君
( 海南师范大学省部共建-热带药用植物化学教育部重点实验室，化学与化工学院，海口 571158)
［摘要］ 目的:提取喙果皂帽花新鲜叶挥发性成分，进行抗菌，抗肿瘤活性测试，为进一步研究开发喙果皂帽花提供实验
依据。方法:利用水蒸气蒸馏法制备喙果皂帽花叶挥发油，计算收率，并结合 GC-MC 分析化学成分;用纸片琼脂扩散法和
MTT比色法分别研究喙果皂帽花叶挥发油抗菌和抗肿瘤活性。结果:水蒸气蒸馏法提取喙果皂帽花新鲜叶挥发油收率为
1. 54%，得到 91 个化合物，鉴定出 73 个;喙果皂帽花叶挥发油浓度较高时对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌具有中等
强度的抑菌活性;对白血病细胞(K-562)、肝癌细胞(BEL-7402)具有抑制活性，IC50分别为 10. 47，47. 2 mg·L
－1。结论:首次从
皂帽花属植物中提取挥发油并鉴定化学成分，主要为烯类化合物;喙果皂帽花挥发油中含有很多活性成分，喙果皂帽花挥发
油对 K-562，BEL-7402 具有抑制活性，为喙果皂帽花开发利用提供了科学依据。
［关键词］ 喙果皂帽花;挥发油;化学成分;活性研究
［中图分类号］ Ｒ284． 1;Ｒ285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)16-0132-05
［doi］ 10． 11653 /syfj2013160132
GC-MS Analysis and Bioactivity of Essential Oil from
Dasymaschalon rostratum
SONG Huang-wang，SONG Xin-ming* ，HAN Chang-ri，YANG Lu-jia，DENG Wen，DUAN Hong-ye，SUN Li-jun
(Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education，College of Chemistry
and Chemical Engineering，Hainan Normal University，Haikou 571158，China)
［Abstract］ Objective: To study the chemical constituents and bioactivity of essential oil from
Dasymaschalon rostratum． Method:The essential oil was extracted by hydrodistillation and separated by capillary
GC． The chemical constituents were determined by normalization and were identified by MS． Ｒesult:Ninty-one
chromatographic peaks were detected and seventy-three compounds were identified，which was 90. 25% of the total
essential oil． The essential oil from D． rostratum showed inhibitory activity against Staphyloccocus aureus
Ｒosenbach，Escherichia coli，Bacillus subtilis，exhibited higher activity to restrain Leukemia cells (K-562)and
Liver cancer cells (BEL-7402) ，with IC50 values of 10. 47，47. 2 mg·L
－1 respectively． Conclusion:It is first
time to extract volatile oil from Dasymaschalon and identify the compunds，most of which were alkene compunds．
Many active ingredients were contained in the essential oil from D． rostratum，the experiment basis were provided
for the further research of D． rostratum．
［Key words］ Dasymaschalon rostratum;essential oil;chemical constituents;bioactivity
番荔枝科植物是目前国内外学者寻找天然抗癌
药物的热点。从该科几十个属百余种植物中分离得
到番荔枝内酯类化合物数百个，其显著的生物学活
性，包括抗菌、抗疟、抗肿瘤、杀虫等作用引人瞩目。
喙果皂帽花 Dasymaschalon rostratum 为该科喙果皂
帽花属 Dasymaschalon 植物［1］。近年来药理筛选表
明其具有很好的生物活性，从其茎中分离得 3 个 A
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第 19 卷第 16 期
2013 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 16
Aug．，2013
环具醛基黄酮类化合物和 1 个氧化阿朴啡类生物碱
均具有抗肿瘤活性［2］。本实验通过水蒸气蒸馏法
提取喙果皂帽花新鲜叶挥发油，采用 GC-MS［3-4］对
喙果皂帽花挥发油进行了成分分析，归一化法测定
了各成分相对含量［5］，同时进行抗菌和抗肿瘤活性
测试，为探索喙果皂帽花开发利用提供理论依据。
1 材料
喙果皂帽花新鲜叶采自海南昌江市霸王岭国家
森林保护区，由海南师范大学生命科学学院钟琼芯
教授鉴定，标本存放于海南师范大学热带药用植物
化学省部共建教育部重点实验室。
5975B /6890N型气相色谱-质谱联用仪:美国安
捷伦公司;金黄色葡萄球菌(Staphyl occocus aureus
Ｒosenbach)ATCC25923、大肠埃希菌(Escherichia
coli)ATCC25922、枯 草 杆 菌 (Bacillus subtilis)
ATCC6633 由中国医学科学院药用植物研究所提
供;肝癌细胞(BEL-7402)、白血病细胞(K-562)、胃
癌细胞(SGC-7901)、肺癌细胞(SPCA-1)为中科院
上海生物所提供;ＲPMI 1640 培养液(Gibco 公司) ，
胰酶(Gibco公司) ，四甲基偶氮唑蓝(MTT，Sigma 公
司) ，超级新生牛血清(杭州四季青生物科技有限公
司) ，二甲基亚砜(DMSO) (天津市化学试剂二厂)。
2 方法
2. 1 挥发油的制备 取喙果皂帽花新鲜叶 240 g，
分 2 批按 2010 年版《中国药典》一部附录 XD 挥发
油测定法 (不加二甲苯) ，水蒸气蒸馏法提取 6 h，用
乙醚萃取 3 次，乙醚层用无水硫酸钠干燥后于 35 ℃
水浴回收，计算提取率。
2. 2 GC-MS 分析条件 进样条件:样品瓶温度
100 ℃，定量环(1. 0 mL)温度 110 ℃，传输线温度
120 ℃，气相平衡时间 5. 5 min，样品平衡时间 7. 0
min，样品瓶加压时间 0. 1 min，定量环增量时间 0. 5
min，样品环平衡时间 0. 05 min，进样时间 1. 0 min。
GC条件:石英毛细管柱 HP-FFAP (0. 25 μm ×
0. 25 mm，30 m) ，起始温度 40 ℃，以 5 ℃·min －1升
温速率升温到 200 ℃维持 5 min，再以 8 ℃·min －1升
温速率升温到 280 ℃维持至完成分析，载气为 He
(99. 99%) ，柱流量 1. 0 mL·min －1，进样口温度
250 ℃，分流比 50 ∶ 1。EI 电离源，70 eV;离子源温
度 230 ℃，四极杆温度 180 ℃，溶剂延迟 2. 5 min，扫
描质量范围 m/z 50 ～ 550。
2. 3 抗菌活性测试 按纸片琼脂扩散法观察抗菌
活性。细菌培养基配方:18 g营养肉汤，1. 5 g琼脂，
100 mL 蒸馏水;活化菌种，用接种环从斜面上划取
一环菌苔，将其溶于 10 mL 的无菌水中，配成菌悬
液，移取 0. 2 mL菌悬液于平板上，用涂布器均匀涂
好，每个菌种制 2 个平板。将挥发油配成 20，40，
60 g·L －1的乙醚溶液以及未稀释的溶液，然后取滤
纸片(Φ 1. 0 cm，已灭菌)浸没于以上溶液中，使其
充分饱和，略微风干后，接于上述制作好的含菌培养
皿中，每个组分对测试菌分别作 2 个重复，乙醚作为
空白对照。将制好后的培养皿在 28 ℃恒温培养
48 h后观察真菌，细菌培养皿在 37 ℃恒温培养 24 h
后观察，测量其抑菌圈的大小，根据抑菌圈大小判断
抑菌活性［6］。
2. 4 抗肿瘤活性测试 收集对数期细胞，用含
10% 新生小牛血清的 ＲPMI 1640 培养液配制细胞
悬液，调整其细胞密度为 10 000 个 /mL，于 96 孔板
中每孔加入 180 L 该密度细胞悬液，铺板。将孔板
放入培养箱，37. 0 ℃，5% CO2 饱和湿度条件下，培
养 8 ～ 12 h。加入用 PBS配制的浓度梯度的挥发油
(1，10，100 mg·L －1)20 L，继续培养44 h。再加入
50 L MTT溶液 (1 g·L －1，PBS 配制) ，继续培养 4 h
后，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。每孔加入
150 L DMSO，振荡 10 min，使甲瓉结晶物充分溶解，
显出蓝紫色。在酶联免疫检测仪上选择 570 nm，调
零，测定各孔的吸光值，记录结果，计算抑制率［7］。
3 结果与讨论
3. 1 挥发油化学成分分析 利用水蒸气蒸馏法制
备喙果皂帽花挥发油得到特殊香气的浅黄色油状物
3. 7 g，提取率 1. 54%。用毛细管色谱法对挥发油样
品进行测定，GC共分离出 91 个组分，经色谱峰面积
归一化法测得挥发油中各组分的相对百分含量，根
据 GC-MS联用所得的质谱信息，经用标准质谱检索
库计算机检索，共鉴定出 73 个化学成分，占挥发油
总质量的 90. 25%，其中烯类 37 个(64. 55%) ，醇类
21 个(12. 48%)。相对质量分数较高的组分双环杜
鹃烯 15. 63%，丁子香烯 7. 95%，香叶烯 6. 94%，香
柠檬烯 5. 07%，四甲基环癸二烯甲醇 4. 79%，异麝
香草酚甲基醚 4. 71%，见表 1。
3. 2 活性测试结果分析 利用琼脂扩散法观察喙
果皂帽花挥发油抗菌活性，低浓度时对大肠埃希菌、
金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等 3 种细菌的抑制活性
均较弱，高浓度时具有中等强度抑菌活性(表 2)。
采用 MTT比色法对挥发油进行抗肿瘤活性研究(表
3) ，发现其对白血病细胞 K-562 具有很好的抑制活
性，IC50 10. 47 mg·L
－1，而对肝癌细胞 BEL-7402 具
有中等强度的抑制活性。
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宋煌旺，等:喙果皂帽花挥发油 GC-MS分析及活性研究
表 1 喙果皂帽花叶挥发油化学成分及其相对含量
No． tＲ /min 化合物 分子式 相对分子质量 相对质量分数 /%
1 4. 30 叶醇 3-hexen-1-ol C6H12O 100 0. 20
2 4. 51 正己醇 1-hexanol C6H14O 102 0. 03
3 5. 87 1Ｒ-α-蒎烯 1Ｒ-α-pinene C10H16 136 3. 41
4 6. 19 莰烯 camphene C10H16 136 1. 01
5 6. 79 β-水芹烯 β-phellandrene C10H16 136 0. 14
6 6. 90 β-蒎烯 β-pinene C10H16 136 1. 95
7 7. 20 β-月桂烯 β-myrcene C10H16 136 0. 91
8 7. 56 α-水芹烯 α-phellandrene C10H16 136 0. 34
9 7. 87 松油烯 δ-terpinene C10H16 136 0. 66
10 8. 08 邻异丙基甲苯 2-isopropyltoluene C10H14 134 0. 27
11 8. 18 右旋柠檬烯 D-limonene C10H16 136 0. 19
12 8. 26 桉叶醇 eucalyptol C10H18O 154 1. 01
13 8. 72 罗勒烯 ocimene C10H16 136 1. 72
14 9. 02 (1S)-(+)-3-蒈烯 (1S)-(+)-3-carene C10H16 136 1. 23
15 9. 24 乙酰苯 acetophenone C8H8O 120 1. 03
16 9. 78 异松油烯 terpinolene C10H16 136 0. 05
17 10. 00 苯甲酸甲酯 methyl benzoate C8H8O2 136 0. 01
18 10. 15 芳樟醇 linalool C10H18O 154 0. 14
19 10. 21 壬醛 nonanal C9H18O 142 0. 10
20 12. 31 萜烯醇 terpenol C10H18O 154 0. 22
21 12. 70 α-松油醇 α-terpineol C10H18O 154 0. 32
22 13. 53 (Z)-香芹醇 (Z)-carveol C10H16O 152 0. 52
23 14. 13 异麝香草酚甲基醚 isothymol methyl ether C11H16O 164 4. 71
24 14. 45 香叶醇 geraniol C10H18O 154 0. 58
25 15. 23 乙酸龙脑酯 bornyl acetate C12H20O2 196 0. 12
26 15. 77 香芹酚 carvacrol C10H14O 150 2. 52
27 16. 65 δ-榄香烯 δ-elemene C15H24 204 2. 47
28 16. 91 α-毕澄茄烯 α-cubebene C15H24 204 0. 11
29 17. 07 乙酸瑞香酯 thymyl acetate C12H16O2 192 0. 50
30 17. 29 乙酸橙花酯 nerol acetate C12H20O2 196 0. 17
31 17. 35 环异洒剔烯 (+)-cycloisosativene C15H24 204 0. 10
32 17. 52 异喇叭烯 isoledene C15H24 204 0. 26
33 17. 62 古巴烯 copaene C15H24 204 0. 53
34 18. 10 β-榄香烯 β-elemene C15H24 204 2. 81
35 18. 44 异丁子香烯 isocaryophillene C15H24 204 0. 16
36 18. 51 α-古芸烯 α-gurjunene C15H24 204 0. 14
37 18. 74 香柠檬烯 bergapten C15H24 204 5. 07
38 18. 93 丁子香烯 caryophyllene C15H24 204 7. 95
39 19. 04 β-毕澄茄烯 β-cubebene C15H24 204 0. 49
40 20. 22 γ-毕澄茄烯 γ-cubebene C15H24 204 1. 57
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第 19 卷第 16 期
2013 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 16
Aug．，2013
续表 1
No． tＲ /min 化合物 分子式 相对分子质量 相对质量分数 /%
41 20. 43 香叶烯 geraniolene C15H24 204 6. 94
42 20. 95 双环杜鹃烯 bicyclogermacrene C15H24 204 15. 63
43 21. 06 α-石竹烯 α-caryophyllene C15H24 204 0. 87
44 21. 36 δ-毕澄茄烯 δ-cubebene C15H24 204 0. 98
45 22. 11 四甲基环癸二烯甲醇 hedycaryol C15H26O 222 4. 79
46 22. 16 γ-榄香烯 γ-elemene C15H24 204 0. 23
47 22. 29 β-蛇麻烯 β-humulene C15H24 204 0. 35
48 22. 77 (-)-斯巴醇 (-)-spathulenol C15H24O 220 2. 24
49 22. 88 雅榄蓝烯 eremophilene C15H24 204 1. 71
50 23. 05 (+)-白千层醇 (+)-melaleuca alternifolia C15H26O 222 0. 60
51 23. 13 愈创木醇 guaiol C15H26O 222 0. 76
52 23. 44 别香橙烯 alloaromadendrene C15H24 204 0. 58
53 23. 50 榄香醇 elemol C15H26O 222 0. 27
54 23. 67 水菖蒲烯 calerene C15H24 204 1. 34
55 23. 91 δ-桉醇 δ-eudesmol C15H26O 222 1. 07
56 24. 13 τ-杜松醇 τ-cadinol C15H26O 222 0. 62
57 24. 25 δ-杜松醇 δ-cadinol C15H26O 222 0. 77
58 24. 83 绿花烯 viridiflorene C15H24 204 1. 11
59 25. 02 α-甜没药萜醇 α-bisabolol C15H26O 222 0. 12
60 25. 78 金合欢醇 farnesol C15H26O 222 0. 12
61 25. 83 新异长叶烯 neoisolongifolene C15H22 202 0. 27
62 26. 07 长叶醛 longifolenaldehyde C15H24O 220 0. 11
63 26. 81 β-桉叶烯 β-eudesmene C15H24 204 0. 54
64 27. 00 α-榄香烯 α-elemene C15H24 204 0. 46
65 27. 31 Z-α-反式-香柠檬 Z-α-trans-bergamotol C15H24O 220 0. 11
66 28. 22 乙酸金合欢醇酯 farnesol acetate C17H28O2 264 0. 25
67 28. 90 水杨酸苄酯 nenzyl salicylate C14H12O3 228 0. 05
68 29. 76 金合欢基丙酮 farnesyl acetone C18H30O 262 0. 12
69 29. 86 棕榈酸甲酯 methyl palmitate C17H34O2 270 0. 07
70 33. 40 叶绿醇 phytol C20H40O 296 0. 25
71 33. 98 7-十五炔 7-pentadecyne C15H28 208 0. 32
72 38. 65 己二酸二辛酯 bis(2-ethylhexyl)adipate C22H42O4 370 0. 09
73 42. 83 邻苯二甲酸二异辛酯 diisooctyl phthalate C24H38O4 390 0. 79
表 2 喙果皂帽花挥发油抑菌活性(珋x ± s)
挥发油质量浓度
/ g·mL －1
抑菌圈直径 /mm
枯草杆菌 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌
20 7. 81 ± 0. 63 7. 76 ± 0. 92 8. 98 ± 0. 59
40 11. 36 ± 0. 46 13. 22 ± 0. 41 12. 18 ± 0. 76
60 18. 81 ± 0. 51 19. 57 ± 0. 36 19. 13 ± 1. 12
表 3 喙果皂帽花挥发油抗肿瘤活性
IC50 /mg·L －1
SPC-A-1 BEL-7402 SGC-7901 K-562
－ 47. 2 － 10. 47
4 结论
经过 GC-MC分析喙果皂帽花叶挥发油得到 91
个化合物，鉴定了 73 个化合物，占总含量的
90. 25%，主要成分为烯类化合物。喙果皂帽花叶挥
发油中含有很多活性成分，β-榄香烯能有效抑制多
种肿瘤细胞的增殖，抑制肿瘤细胞核酸合成，诱导
肿瘤细胞凋亡和分化，而且能增强肿瘤的免疫原
性［8］。α-石竹烯可强烈诱导小鼠肝和小肠中的解毒
酶谷胱苷肽 S-转移酶活性而对化学致癌起抑制作
用［9］，质量浓度 32 mg·L －1对人乳腺癌细胞系 MCF-
7 增殖抑制率为 50%［10］。斯巴醇对金黄色葡萄球
菌生长有抑制作用［11］，酶 I 具有中等程度抑制作
用［12］。因此喙果皂帽花叶挥发油浓度高时具有一
定的抑菌活性，并对白血病细胞 K-562 和肝癌细胞
BEL-7402 具有较好的抑制活性，这为喙果皂帽花开
发利用提供科学依据。
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宋煌旺，等:喙果皂帽花挥发油 GC-MS分析及活性研究
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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［责任编辑 邹晓翠］
［收稿日期］ 20120509(015)
［第一作者］ 莫小宇，医师，从事女性生殖器官肿瘤的中医药防治研究
［通讯作者］ * 麦景标，药师，从事有效成分筛选研究，E-mail:maijingbiao168@ 163. com
臭椿皮乙酸乙酯部位化学成分研究
莫小宇1，麦景标2*
( 1. 中山市陈星海医院，广东 中山 528415; 2. 广东三才石岐制药有限公司，广东 中山 528415)
［摘要］ 目的:研究臭椿皮中乙酸乙酯部位的化学成分。方法:采用硅胶和 Sephadex LH-20 等柱色谱对乙酸乙酯萃取部
分进行分离，通过波谱数据分析进行结构鉴定。结果:从乙酸乙酯部位分离 6 个化合物，分别鉴定为 3-甲氧基-4-羟基苯甲酸
(1) ，延胡索乙素(2) ，马兜铃酸内酰胺 AⅡ(3) ，槲皮素(4) ，阿魏酸(5) ，齐墩果酸(6)。结论:化合物 1 ～ 4，6 为首次从该植物
中分离得到。
［关键词］ 苦木科;臭椿皮;乙酸乙酯部位;化学成分
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)16-0136-03
［doi］ 10． 11653 /syfj2013160136
Chemical Constituents of Ethyl Acetate Extract from Ailanthus altissima
MO Xiao-yu1，MAI Jing-biao2*
(1. CHEN Xinghai Hospital Guangdong Zhongshan，Zhongshan 528415，China;
2. Guangdong Sancai the Shiqi Pharmaceutical Co． Ltd．，Zhongshan 528415，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents of the ethyl acetate extract from Ailanthus
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第 19 卷第 16 期
2013 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 16
Aug．，2013