全 文 :第 32卷第 4期
2009年 8月
云南中医学院学报
JournalofYunnanUniversityofTraditionalChineseMedicine
Vol. 32No. 4
8.2009
云南栽培胡黄连与野生胡黄连有效成份分析*
杨少华1 , 徐中志 1 , 孙 蓉 2 , 郭承刚1 , 谢民秀 2 , 康平德1 , 陈 翠 1■
(1.云南省农业科学院高山经济植物研究所 , 云南丽江 674100;2.昆明中药厂有限公司 , 云南昆明 650228)
摘 要:目的:探讨云南不同栽培条件下的胡黄连与野生胡黄连质量的异同。方法:采用高效液相色谱法
测定了 13批野生及不同栽培条件下胡黄连药材中胡黄连甙Ⅰ和胡黄连甙Ⅱ的含量。结果:相同栽培环境不同栽
培年限 , 胡黄连甙Ⅰ和胡黄连甙 Ⅱ的含量有随年限增长而上升趋势;相同栽培年限不同栽培环境及地域对胡黄
连含量有一定影响但不显著;胡黄连栽种年限长者质量最优。 结论:在云南丽江目前栽培技术条件及栽培环境
下生产的胡黄连产量较高 、 质量较优且稳定。
关键词:胡黄连;栽培;野生;胡黄连甙Ⅰ ;胡黄连甙Ⅱ;高效液相色谱法
中图分类号:R282.2 文献标识码:A 文章编号:1000— 2723(2009)04— 0037— 03
胡黄连 Neopicrorhizascrophulariflora(Pennel)
Hong为玄参科胡黄连属多年生草本植物 , 为 2005
版国家药典的药材品种 [ 1] , 国家二级保护植物 。
胡黄连性苦 、味寒。归肝 、胃 、大肠经。常用于湿
热泻痢 、黄疸 、 痔疾 、 骨蒸潮热 、 小儿疳热 、 盗
汗 、疳积等症。胡黄连的主要活性成分胡黄连甙Ⅰ
和胡黄连甙 Ⅱ , 具有保肝 、利胆 、抗菌消炎 、 抗乙
肝病毒等作用[ 2, 3] 。也是 《中国药典 》 中胡黄连质
量控制的主要指标 [ 1, 4] 。野生胡黄连原产于西藏及
云南西北部海拔 3 900 ~ 4 500m, 分布区域狭窄 。
由于长期过度采挖 , 野生资源已濒临灭绝 , 无法满
足市场的需求 , 人工种植成为解决胡黄连资源匮乏
的必然选择 。 2005年起我所开展胡黄连人工驯化
栽培及规范化种植关键技术研究。本文用高效液相
色谱法对野生及不同种植条件下胡黄连中的胡黄连
甙 Ⅰ和胡黄连甙 Ⅱ进行了含量测定 , 为胡黄连的人
工高产 、优质种植提供了科学依据 , 以期实现濒危
药用植物资源的保护和可持续利用。
1 药品及仪器
1.1 实验样品
丽江市玉龙县鲁甸乡拉美荣胡黄连种植基地不
同密度及肥料试验 3年生药材及德钦县霞若乡霞
若 、 曲古 (白马雪山南麓)等地采集野生胡黄连
药材 。
1.2 试药与试剂
甲醇为色谱纯 , 水为纯净水 , 其它试剂均为分
析纯。胡黄连甙 Ⅰ 对照品 (批号:1117237 -
200501, 供含量测定用);胡黄连甙 Ⅱ对照品 (批
号:111596-200301, 供含量测定用), 购自中国
药品生物制品鉴定所。
1.3 仪器
美国 Agilent1100高效液相色谱仪 (包括四元
梯度泵 , 自动进样器 , 紫外检测器 , 柱温箱), 美
国 Agilent化学工作站 。 BRANSON83200S-T型超
声仪;电子天平 (型号:METTLERAE260)。
2 实验方法与结果
2.1 样品含量测定
胡黄连样品中胡黄连苷 I和胡黄连苷 I的含量
测定照 《中国药典》 2005年版一部 “胡黄连 ” 项
下 【含量测定】中的检测方法进行测定 [ 1, 4] 。
2.1.1 色谱条件
色谱柱:Shim-packCLC-ODS柱 (4.6 ×
250mm, 5μm);以十八烷基硅烷键合硅胶为填充
剂;柱温:30℃;流动相:甲醇 -水 -磷酸 (35:
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*基金项目:云南省科技攻关项目 (2006SG19)
收稿日期:2009— 01— 13 修回日期:2009— 05— 12
作者简介:杨少华 (1968 ~ ), 男 , 云南永胜人 , 助理研究员 , 主要从事药用植物资源与栽培研究工作。 ■通讯作者:
陈翠 , E-mail:yngsscc@163.com。
2009年 云南中医学院学报 第 32卷
65:0.1);流速:1.000 mL﹒ min-1 , 检测波长:
280nm, 进样量:10μL。理论板数按胡黄连苷 I
峰计算应不低于 3 000, 此条件下胡黄连苷 I和胡
黄连苷 II与其它组分均能达到较好分离 (见图 1-
1及图 1-2)。
2.1.2 对照品溶液的制备
精密称取胡黄连苷 I对照品 、 胡黄连苷 II对照
品各 10mg, 置 50ml量瓶中 , 加甲醇使溶解并稀释
至刻度 , 摇匀 , 精密量取 1mL, 置 5mL量瓶中 ,
加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 , 即得 (每 1mL中含胡
黄连苷 I与胡黄连苷 I各 40μg)。对照品色谱图见
图 1-3及图 1-4。
2.1.3 供试品溶液的制备
取本品干燥粉碎样品 (过三号筛 )约 0.1g,
精密称定 , 置具塞锥形瓶中 , 精密加入甲醇 50mL,
密集 , 称定质量 , 超声处理 (功率 250W, 频率
33kHz)30min, 放冷 , 再称定质量 , 用甲醇补足
减失的质量 , 摇匀 , 用微孔滤膜 (0.45μm)滤过 ,
精密量取续滤液 1mL, 置 5mL量瓶中 , 加甲醇至
刻度 , 摇匀 , 即得 。
2.1.4 测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各
10μL, 注入液相色谱仪 , 测定 , 即得。测定结果
见表 1。
表 1 胡黄连药材水分和含量测定检测结果
批次 批号 产地 海拔(m) 种植方式 采集时间
胡黄连苷Ⅰ
(%)
胡黄连苷Ⅱ
(%)
胡黄连苷Ⅰ +
胡黄连苷Ⅱ (%)
1 XR1 德钦县霞若 4182 野生 06年 9月 0.00 11.92 11.92
2 XR2 德钦县霞若 4122 野生 06年 9月 0.23 11.51 11.74
3 XQ1 德钦县霞若曲古 4058 野生 07年 9月 0.18 16.62 16.80
4 XQ2 德钦县霞若曲古 4263 野生 07年 9月 0.38 12.65 13.03
5 XQ3 德钦县霞若曲古 4126 野生 07年 9月 0.05 16.11 16.16
6 D2 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 栽培 3年 、 黑膜覆盖 08年 10月 0.00 16.49 16.49
7 D1 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 栽培 2年 、 黑膜覆盖 08年 10月 0.41 10.88 11.29
8 F13 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 高密度 、 中肥力水平 08年 10月 0.20 9.88 10.08
9 F4 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 低密度 、 高肥力水平 08年 10月 0.00 9.01 9.01
10 F5 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 中密度 、 中肥力水平 08年 10月 0.52 14.28 14.80
11 F11 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 中密度 、 中肥力水平 08年 10月 0.56 14.13 14.69
12 F16 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 高密度 、 高肥力水平 08年 10月 0.29 12.68 12.97
13 F1 玉龙县鲁甸拉美荣 2880 低密度 、 低肥力水平 08年 10月 0.41 12.52 12.93
*高密度:10 000株 /亩 , 中密度:6 000 ~ 8 000株 /亩 , 低密度:4 000株 /亩。
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第 4期 杨少华 , 等:云南栽培胡黄连与野生胡黄连有效成份分析
3 讨论
通过近五年的胡黄连引种驯化及规范化种植栽
培研究 , 生产的胡黄连产品中胡黄连甙Ⅰ和胡黄连
甙 Ⅱ的含量较高 , 均超出药典要求 [胡黄连苷 Ⅰ
(C24H28O11)与胡黄连苷 Ⅱ (C23H28O13)的总
量不得少于 9.0%] [ 1, 4] , 表明目前丽江胡黄连栽培
及规范种植技术较成熟 , 生产的胡黄连药材质量较
稳定。
数据表明 , 胡黄连规范化种植及野生胡黄连中
胡黄连甙Ⅰ和胡黄连甙Ⅱ的含量高 , 质量最优 。
胡黄连的质量与其栽培年限存在一定关系 , 栽
培年限长的质量相应较好 , 丽江产 3 ~ 4年生的胡
黄连质量较好且稳定 , 但与胡黄连的采收加工及贮
藏相关 。
从多数样品的测定结果看 , 胡黄连苷 Ⅰ含量较
胡黄连苷 Ⅱ的量低 , 但个别样品的胡黄连苷 Ⅰ为
0。
从野生胡黄连含量可以看出 , 胡黄连苷 Ⅰ和胡
黄连苷Ⅱ含量随自然储存时间的增加而降低 。
[参考文献 ]
[ 1] 第八届药典委员会.中华人民共和国药典 (一部)
[ M] .北京:化学工业出版社 , 2005.167.
[ 2] 钱士辉 , 濮社班.中药胡黄连的研究进展 [ J] .中国
野生植物资源 , 2005, 16 (2):11-14.
[ 3] 何薇 , 林江涛.中药胡黄连的化学成分和药理作用的
研究进展 [ J] .中日友好医院学报 , 2005, 1 (6):
369-370.
[ 4] 邬国庆 , 张小茜.胡黄连质量评价方法的研究 [ J] .
中草药 , 2005, (12):1886-1888.
(编辑:岳胜难)
ActiveIngredientsAnalysisofCultivatedand
WildNeo-PicrorhizaScrophulariflora(Pennel)Hong
YANGShao-hua1 , XUZhong-zhi1 , SUNRong2 , GUOCheng-gang1 ,
XUERun-guang2 , KANGPing-de1 , CHENCui1*
(TheAlpineEconomicPlantInstituteofYunnanAcademyofAgriculturalSciences,
LijiangYunnan674100;KunmingTraditionalChineseMedicineFactory, KunmingYunnan650228)
ABSTRACT:TocomparethequalitybetweendiferentconditionscultivatingandwildPicrorhizascrophulari-
ifloraPennel.Methods:ToanalyzethecontentofC24H28O11andC23H28O13 of13batchscultivatingandwild
PicrorhizascrophularifloraPennelbyhighperformanceliquidchromatography.Results:underthesamecultivating
conditions, thecontentofC24H28O11andC23H28O13 wilincreasealongwiththeyears;Theactiveingredients
contentofscrophulariflorafromdiferentregionsshowedsomebutnoremarkablediference.Conclusion:Picrorhiza
scrophularifloraPennelcultivatedunderthepresentconditionsinLijianghasthebestandstableyieldandquality.
KEYWORDS:PicrorhizaScrophularifloraPennel;CultivatingandWild;C24H28O11andC23H28O13;
HighPerformanceLiquidChromatography
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