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柳叶蜡梅灌肠剂对慢性盆腔炎大鼠子宫病理形态学的影响



全 文 :书·专题报道·
柳叶蜡梅灌肠剂对慢性盆腔炎大鼠
子宫病理形态学的影响*
杨林波1 江伟华1 巴东娇2 贾晓航3
(1 浙江省丽水市中医院·丽水 323000 2 浙江省嘉善县中医院·嘉善 314100 3 浙江省中医院·杭州 310006)
摘 要 目的:观察柳叶蜡梅灌肠剂对慢性盆腔炎大鼠子宫病理形态学的影响。方法:建立混合菌(大肠
杆菌、金黄色葡萄球菌)感染引起的大鼠慢性盆腔炎模型,实验分正常组、模型组、阳性对照(庆大霉素)
组和柳叶蜡梅灌肠剂低、中、高剂量组,分组给药 14 天后处死大鼠。光镜下观察大鼠子宫病理形态学改
变。结果:模型组显示慢性炎症改变,柳叶蜡梅灌肠剂各剂量组及庆大霉素组大鼠子宫病理形态学变化
较模型组均有不同程度的减轻。结论:柳叶蜡梅灌肠剂能够明显减轻盆腔炎模型大鼠病理学改变。
主题词 子宫附件炎 /中医药疗法 柳叶蜡梅灌肠剂 /治疗应用 子宫附件炎 /病理学 大鼠
* 浙江省中医药科技计划项目 No. 2008CB083
慢性盆腔炎(chronic pevlic inflammatory disease,CPID)
是妇科临床常见病、多发病,病情顽固,易反复发作,可导致
不孕症、异位妊娠等并发症,给妇女健康造成严重困扰。柳
叶蜡梅灌肠剂治疗慢性盆腔炎临床疗效确切,本研究在此基
础上,观察了柳叶蜡梅灌肠剂对慢性盆腔炎模型大鼠子宫病
理形态学的影响。
1 实验材料
1. 1 动物 雌性 Wistar 大鼠 48 只,体重(200 ± 20)g,购自
上海斯莱克实验动物有限责任公司,由浙江中医药大学实验
动物中心饲养。
1. 2 药物 柳叶蜡梅灌肠剂药物组成及制备:由柳叶蜡梅
60g、败酱草 50g、白花蛇舌草 50g、玄胡 50g、三棱 20g、赤芍
20g、柴胡 15g等组成,具有清热解毒、理气化瘀、消癥止痛功
效,上述药物经乙醇提取浓缩,加水制备成浓度分别为含生
药 2. 7、5. 4、10. 8g /ml的溶液,由丽水市中医院制剂室制备。
庆大霉素:由上海第一制药厂提供,批号:870401。
1. 3 主要试剂及仪器 大肠杆菌混悬液(菌种:标准
ATCC25922 大肠埃希菌菌株、ATCC25925 金黄色葡萄球菌
菌株) :由浙江省中医院微生物室提供。Olympus BX51 荧光
显微镜:日本 Olympus公司。
2 实验方法
2. 1 大鼠盆腔炎模型的建立 参照文献[1]细菌感染法建立
Wistar大鼠盆腔炎模型。用 0. 4%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉
大鼠(50mg /kg)后,无菌条件下大鼠下腹正中切口约 0. 8 ~
1cm,开腹后暴露并固定子宫,用 1ml注射器抽取 0. 2ml混合
细菌悬液,在注入菌液之前用注射器机械损伤子宫内膜组
织,然后注入 0. 1ml菌液,分层关腹,消毒术区,造模后各鼠
单独笼养。
2. 2 分组和给药 大鼠按体重随机分成 6组,正常对照组,盆
腔炎模型组,阳性对照(庆大霉素)组,高、中、低剂量柳叶蜡梅灌
肠剂组,每组 8只,除对照组外,其余 5组大鼠参照文献[1]造模,
造模后继续饲养 14天,正常对照组和盆腔炎模型组以等体积生
理盐水灌胃,庆大霉素组以庆大霉素(1. 44万 U/kg)灌胃,柳叶
蜡梅灌肠剂组按不同剂量(2. 7、5. 4、10. 8g /kg)灌肠,每日 1次,
每次 2ml,连续 14天,剂量按 50kg成人体表面积折算。大鼠剂
量(g /kg)=人用剂量(g)×0. 018 /200g[2]。
2. 3 病理形态学观察 给药后第 15 天,处死大鼠剖取子
宫,肉眼观察其炎性反应及周围粘连情况。将一侧子宫置于
10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,常规 HE 染色,脱水透明封
固,制成切片(4μm) ,光学显微镜观察。
3 实验结果
3. 1 肉眼观察 正常组大鼠子宫大小形态正常,与周围组
织无粘连;模型组大鼠可见盆腔下部充血,内有明显纤维组
织粘连,部分有肉芽肿,子宫充血明显,宫腔狭窄或积液;高
剂量组无明显改变,子宫腔通畅,部分仅见子宫壁轻微充血,
与正常组相近;中剂量组、庆大组有轻微积液、充血,与周围
组织粘连不明显;低剂量组子宫与周围组织粘连,可见子宫
壁充血、宫腔积液。
3. 2 光镜观察 正常对照组:黏膜上皮完整,肌层、浆膜层
完整、界清,黏膜层内间质细胞分布均匀,腺体完整,未见炎
细胞浸润和纤维结缔组织增生。模型组:子宫壁增厚,正常
结构紊乱,分层不清,伴间质细胞水肿,腺体弯曲或扩张,形
态不规则,内膜上皮细胞变性坏死,黏膜固有层纤维细胞增
生,全层见慢性炎细胞浸润。高剂量组:各层结构恢复正常,
仅见极少量炎细胞浸润,间质细胞无水肿,腺体基本恢复正
常。中剂量组、庆大霉素组:有少量的炎细胞浸润,子宫壁轻
度增厚,伴有间质细胞轻度水肿,腺体轻度扩张及少量纤维
细胞增生。低剂量组:有中等量的炎细胞浸润,子宫壁增厚,
伴有间质细胞水肿、腺体扩张及纤维细胞增生。见图 1 ~
12。
·443· 中国中医药科技 2012 年 7 月第 19 卷第 4 期 July 2012 Vol. 19 No. 4
图 1 正常组(× 10) 图 2 正常组(× 40)
图 3 模型组(× 10) 图 4 模型组(× 40)
图 5 阳性组(× 10) 图 6 阳性组(× 40)
图 7 低剂量组(× 10) 图 8 低剂量组(× 40)
图 9 中剂量组(× 10) 图 10 中剂量组(× 40)
图 11 高剂量组(× 10) 图 12 高剂量组(× 40)
4 讨论
现代医学认为盆腔炎后遗留输卵管、卵巢及腹膜间的粘
连、瘢痕及输卵管堵塞等病理改变是一个较长期的过程。目
前抗生素治疗本病在急性期具有较好疗效,在慢性阶段长期
使用抗生素不但没有达到治疗目的,反而由于耐药性的产生
而使患者更容易发生感染。目前许多妇产科学者已发现慢
性盆腔炎患者多数没有细菌感染的临床证据,但病情仍在继
续进展,其原因显然已不是单纯感染性炎症所能解释,免疫
病理损伤是慢性阶段的主要病理变化,是本病慢性进展的主
要原因,其中顽固的细胞因子活化和伴随而来的组织损伤形
成恶性循环,这是慢性炎症中最难解决的问题,细胞因子与
炎症细胞的渗出、激活炎症病理性损伤、成纤维细胞的增殖
等密切相关,直接或间接影响炎症的发生、发展及预后。
慢性盆腔炎属中医“腹痛”、“癥瘕”、“月经不调”、“不
孕症”、“带下病”等范畴[3]。其主要病因病机是湿热邪毒乘
虚入侵,与气血互结,云集胞脉、胞络,气血瘀滞;或肝经积
郁,气滞血瘀,不通则痛,久则内结成癥。湿、热、瘀常互结为
病为其常见病理因素。
柳叶蜡梅灌肠剂是我院临床应用有效方剂,主药山蜡梅
叶,性味微苦、甘、寒,具有清热解毒、理气化瘀之功效,为君
药;败酱草、白花蛇舌草清热利湿、解毒祛瘀以助君药之力,
为臣药;玄胡、三棱、赤芍活血化瘀、消癥止痛以配合君、臣药
加强治疗作用,为佐药;柴胡引经,领诸药入少腹厥阴之域,
为使药。现代药理研究表明柳叶蜡梅有抑菌、抗炎和解热作
用;[4]蜡梅花能显著增强小鼠巨噬细胞的吞噬百分率和吞
噬指数,对小鼠巨噬细胞功能有显著的促进作用;能提高小
鼠的溶血程度,对体液免疫功能也有显著增强作用[5]。败酱
草、白花蛇舌草具有抗肿瘤、抗菌、抗炎作用;赤芍总苷能有
效调节机体免疫功能,显著提高荷瘤机体 IL - 2 的产生,激
发机体免疫应答,调控癌细胞的凋亡[6]。研究还发现柴胡有
利于人类 T细胞免疫功能的恢复,同时柴胡具有显著的抗炎
作用[7];元胡具有较好的镇痛作用。共奏清热解毒、理气化
瘀、消癥止痛之功效。另外,本方剂采用直肠给药,可使药物
直透病所,使病灶及周围组织保持药物高浓度,充分发挥作
用。动物及临床研究证实直肠给药生物利用度高,吸收快,
避免了胃肠刺激及减少了保持肝脏首过效应,同时防止或减
少药物在肝脏中的代谢以及消化液的 PH 值和消化酶等对
药物有效成分的影响和破坏作用,使药物吸收更充分。因此
直肠给药尤适用于病灶在盆腔又需长期治疗的慢性盆腔疼
痛病症的患者,是本药临床应用的优势。
本实验研究结果显示,柳叶蜡梅灌肠剂能够明显减轻盆
腔炎模型大鼠慢性炎症的损伤,减轻炎症细胞的过度浸润,
减少纤维组织增生;且高剂量组疗效明显,优于西药对照组。
表明柳叶蜡梅灌肠剂对混合菌诱导的慢性盆腔炎动物模型
有较好的治疗作用,且在一定的范围内呈量效关系。
参考文献
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[3] 罗元恺.实用中医妇科学.北京:人民卫生出版社,1994:255.
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·543·中国中医药科技 2012 年 7 月第 19 卷第 4 期 July 2012 Vol. 19 No. 4