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苦玄参种子检验技术——发芽试验研究



全 文 :·种子检验 ·
收稿日期:2009-10-10
作者简介:董青松(1971-),女 ,广西天等人;副主任技师 , 主要从事药
用植物种子检验及栽培研究。
通讯作者:马小军 ,研究员 ,博士生导师 ,研究方向:药用植物栽培研究;
E-mail:xjma@public.bta.net.cn。
苦玄参种子检验技术———发芽试验研究
董青松 1 ,  蒙爱东 1 ,  莫长明 1 ,  闫志刚 1 ,  马小军 2
(1.广西药用植物园 ,  南宁 530023; 2.中国医学科学院药用植物研究所 ,  北京 100094)
AssayTechniqueofPicriafel-terraeSeed
DONGQing-song1 , MENGAi-dong1 , MOChang-ming1 , YANZhi-gang1 , MAXiao-jun2
摘要:按《国际种子检验规程 》(ISTA)1996版中发芽试验和
GB/T3543.4-1995《农作物种子检验规程》发芽试验的要求对
苦玄参种子发芽试验的温度 、发芽床 、光照 、试验持续时间 、幼
苗鉴定等进行了研究。初步得出苦玄参种子发芽试验的技术
规程 、幼苗鉴定技术 、幼苗发育类型编码 , 为苦玄参种子检验提
供参考。
关键词: 苦玄参;种子;发芽试验
中图分类号: S339.3   文献标志码: A
文章编号: 1001-4704(2010)01-0112-03
苦玄参 Picriafel-terraeLour.又称苦草 、四环素
草 ,为广西大宗特产药材 。具有清热解毒 、消肿止痛 、
开胃消食的功效 ,用于感冒风热 、咽喉肿痛 、痢疾 、毒蛇
咬伤 、跌打损伤 、胃痛 、消化不良等症 [ 1] 。是广西梧州
制药集团的中药保护品种妇炎净胶囊以及中成药炎肿
化毒片 、炎见宁 、万通炎康片 、消炎灵片等的主要原料 ,
近年的原料枯竭使苦玄参的野生种变家种取得成功 ,
规范化种植研究也取得一定成果 ,在广西区内形成了
较大面积的生产基地 。苦玄参生产上用种子进行繁
殖 ,但因其种子质量检验标准的缺失 ,给种子的生产 、
销售和管理造成困难。因此 ,参照相关种子检验规程
对其种子的发芽试验进行研究 [ 2, 3] ,以期能准确地评
价苦玄参种子质量。
1 材料与方法
1.1 材 料
1.1.1 供试种子
项目组 2007年收集于广西南方天然药物科技有
限公司 ,经净度分析后用于发芽试验 。
1.1.2 仪器及试剂
发芽箱:LRH-400-G光照培养箱 、LRH-250-G光照
培养箱 。
发芽器皿:硬塑发芽盒 。
发芽基质:发芽纸(市售 ,种子发芽专用 , pH6.0 ~
7.5);砂子(pH6.0 ~ 7.5,直径 0.05 ~ 0.8mm,洗净后
160℃高温消毒 2h,使用时用无菌水拌成湿砂)。
1.2 方 法 [ 4, 5]
1.2.1 发芽温度的比较
发芽温度设 15、20、25、30、35、40℃,恒温进行发
芽测定 。最长培养 30d。
1.2.2 不同发芽床的比较
发芽床设纸上(TP):在发芽盒内垫上 3层充分吸
湿的发芽纸 ,将种子均匀置床 ,培养;纸间(BP):将 2
层充分吸湿的发芽纸垫在发芽盒内 ,将种子均匀置床 ,
另外用一层发芽纸松松地盖在种子上 , 培养;砂上
(TS):将拌好的湿砂在发芽盒内铺 20mm厚 ,将种子
均匀压入砂的表层 ,培养;砂中(S):将拌好的湿砂在
发芽盒内铺 20mm厚 ,将种子均匀置床 ,然后加盖 1层
5mm厚的松散湿砂 ,培养 。
1.2.3 光照条件
分为光照 、黑暗 、自然光 3种条件 。光照处理为在
每天光照 2 000lx12h的条件下培养;黑暗处理为将置
床后的发芽盒用 4层黑布包裹 ,放入小木盒中进行发
芽试验 。自然光为将发芽盒置于四周透光但无光照的
恒温培养箱中培养。
1.2.4 幼苗鉴定及试验持续时间
以上试验按 《国际种子检验规程 》(ISTA)1996版
中发芽试验和 GB/T3543.4-1995《农作物种子检验
规程》发芽试验中幼苗鉴定的要求进行计数 ,并通过
观察幼苗发育的规律确定试验持续时间。
以上试验每处理 4次重复 ,每重复 100粒。除了
试验要求的处理条件外 ,其余的发芽条件为:发芽床
TP;培养温度 30℃,光照为每天 2 000lx12h。
试验中 ,胚根突破种皮称为露白 ,露白的种子即可
统计为发芽 。发芽率以正常幼苗和不正常幼苗之和的
平均百分率表示 。
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第 29卷 第 1期 2010年 1月               种 子 (Seed)                Vol.29 No.1 Jan.
DOI :10.16590/j.cnki.1001-4705.2010.01.057
2 结果分析
2.1 不同温度对发芽的影响
从表 1可看出 ,在 35℃以下 ,苦玄参种子的发芽
率随着温度的升高而升高 。显著性差异分析结果表
明 , 30、35℃虽有较高且一致的发芽率和较统一的露
白时间及发芽结束时间 ,但从达 50%发芽的时间看 ,
30℃较 35℃为短 ,说明 30℃的发芽势比 35℃高 ,此
温度更能评价苦玄参种子的生活力 ,是其种子发芽的
适宜温度。
表 1 不同温度发芽情况统计
发芽温度
(℃)
露白时间
(d)
达 50%发芽的时间
(d)
统计发芽率时间
(d)
发芽率
(%)
15 18 — 30 13dD
20 9 — 30 39cC
25 4 10 30 59bB
30 3 6 21 73aA
35 3 11 21 76aA
40 — — 30 0eE
  注:小写字母为 0.05显著水平 ,大写字母为 0.01显著水平。下同。
2.2 不同发芽床对发芽的影响
试验的几种发芽床均为 ISTA1996和 GB/T3543.
4-1995推荐使用 。试验结果表明 , TP的发芽率最
高 ,在 5%显著水平上 ,与 BP略有差异 ,与 TS、S有显
著差异 。因此 , TP为适宜的发芽床 。
表 2 不同发芽床对发芽的影响
发芽床 发芽率(%)
TP 69aA
BP 64abA
TS 58bA
S 1cB
2.3 光照对发芽的影响
不同光照条件下的发芽结果表明 ,在黑暗条件下 ,
苦玄参种子不发芽 ,可见其为需光的光敏性种子。有
光的条件下 ,苦玄参种子能发芽并有较一致的发芽率。
在试验室内检验时 ,不同季节自然光照度不一 ,会对发
芽的结果有影响 ,从标准化的角度出发 ,每天给予固定
光照条件更适合 ,而且还便于鉴定黄化畸形苗 。因此 ,
苦玄参种子的发芽试验以每天给予定时的光照为宜 。
表 3 不同光照条件对发芽的影响
光照条件 发芽率(%)
光照 72aA
黑暗 0bB
自然光 66aA
  苦玄参种子的光敏性也解释了发芽床试验中砂床
几乎不发芽的原因 ,即砂子的覆盖导致其种子缺乏发
芽需要的光照。
2.4 幼苗发育规律及试验持续时间
2.4.1 幼苗发育规律
在固定光照条件下正常发芽的苦玄参种子 ,首先
为胚根(初生根)突破种皮(露白),然后下胚轴伸长 ,
同时胚根进一步伸长 ,可见白色茸状根毛。下胚轴长
到 1 ~ 2mm时 ,子叶脱出种皮或部分脱出种皮 ,下胚
轴和子叶逐渐变成绿色。下胚轴进一步伸长 ,子叶打
开 ,幼苗直立 。胚根进一步伸长 ,有的幼苗有次生根长
出 。在试验持续时间内末见有顶芽发育 ,子叶正常脱
出种皮 、胚根发育不停滞的幼苗通常都能发育成正常
幼苗 ,此时可进行第 1次计数。
以上过程在 30℃培养时 ,通常为 6 ~ 8d。随后子
叶继续长大 ,顶芽发育 ,可见两片对生的真叶。
2.4.2 正常和不正常幼苗
根据苦玄参幼苗的根系 、中轴 、子叶等构造有否缺
陷 ,对其幼苗进行鉴定 。
(1)正常幼苗:苦玄参的正常幼苗分三类:
完整幼苗:根系发育良好 ,初生根细长匀称 ,通常
在发育初期长有白色根毛 ,在规定的时间内长或不长
次生根 。子叶出土型发芽 ,具有伸长的下胚轴 ,在计数
时呈淡绿色;上胚轴在试验持续时间内不出现。子叶
两片 ,绿色。顶芽从打开的子叶间伸出 ,继续生长 ,初
生叶为单叶 ,两片 ,对生 ,绿色 ,但在试验持续时间内未
见顶芽 。
带有轻微缺陷的幼苗:初生根局部损伤 ,或生长稍
迟缓。子叶局部损伤 ,但子叶组织总面积的一半或一
半以上仍保持着正常的功能(采用 50%规则)。
次生感染的幼苗:幼苗已发育 ,但严重腐烂 ,经观
察不是由于种子本身感染引起 ,而是由真菌或细菌侵
害引起的 ,并能确定所有主要构造仍保留着 ,这类幼苗
应列为正常幼苗 。
(2)不正常幼苗:幼苗带有下列缺陷的一种或其
组合列为不正常幼苗 。
初生根:(1)卷缩在种皮内;(2)停滞;(3)由初生
感染所引起的腐烂。
下胚轴:(1)由初生感染所引起的腐烂;(2)下胚
轴缺失 。
子叶:(1)卷缩在种皮内;(2)畸形;(3)由初生感
染所引起的腐烂 。
幼苗:(1)玻璃化;(2)黄化;(3)在试验持续时间
内萎死 。
(下转第 118页)
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种子检验  董青松 等:苦玄参种子检验技术———发芽试验研究
密度以 60 000 ~ 63 000株 /hm2为宜。制种的产量达
到 3 750kg/hm2。父母本的种植比例 1∶5。
2.4 加强管理
2.4.1 加强田间管理
玉米是一种需肥量较大的作物 ,播种前犁耙好生
产地 ,使土壤酥松 、平整;播种时施足底肥施用 15 000
kg/hm2农家肥 , 450 kg/hm2玉米专用复合肥;做到氮
磷钾合理搭配和施用 , 在生长过程中及时追肥 , 5叶
时进行第 1次中耕 ,在苗期施尿素 150kg/hm2 ,喇叭口
期进行中耕 、培土 ,施尿素 225kg/hm2 ,做到肥水充足 ,
为玉米生长提供必要的养料。
2.4.2 加强病虫害防治
玉米自交系苗期生长较弱易遭到地蚕等地下害虫
的危害 ,及时预防喷药 ,确保苗期苗齐 、苗壮。在大喇
叭口期防止玉米螟危害。
2.5 田间去杂去劣 ,割除父本
对父母本进行严格去杂去劣 。第 1次去杂在苗期
进行 ,在间苗时去除长势旺或弱的大小苗 ,留均匀一致
的幼苗;第 2次去杂集中在大喇叭口期和抽雄期 ,凡是
怀疑的植株必须彻底去除 ,以保证种子的质量 ,父本授
粉完后 ,割除父本以利于通风透光。
2.6 母本及时抽雄 确保种子质量
制种中母本去雄干净以否是衡量种子质量的标准
之一 ,黔单 23号的母本抽雄 2 ~ 3d后才开始开花散
粉 ,因此在母本散粉之前必须去除雄花 ,一块制种地从
开始到去雄结束需要 9 ~ 10d完成 ,在母本去雄 90%
以后剩下的三类苗一次性去雄 ,以利于早吐丝授粉增
加产量 。
2.7 人工辅助授粉
在遇到不良天气时 ,辅助授粉是提高制种产量的
重要一环 ,在母本大部分吐丝完毕 ,父本正值散粉高
峰 ,期间进行 1 ~ 2次的人工授粉有利提高结实率 ,确
保制种产量 。
2.8 及时收获 、晾晒 、去劣 、脱粒 、装袋贮存
玉米收获期间 ,严格做到分收 、分晒 ,杜绝与其它
玉米混杂 ,这时可对收获的玉米果穗进行最后一次穗
选 ,可根据母本的穗部特征进行筛选 ,除去杂穗 ,去除
中选穗上的病粒 、破损粒 、畸形粒之后再脱粒 、晾晒 、装
袋 ,确保种子的质量。
(上接第 113页)
2.4.3 试验持续时间
置床并于 30℃培养的苦玄参种子 ,从开始培养到
种子萌发 、长成可计数的正常幼苗通常为 6 ~ 8 d。由
于目前苦玄参野生变家种的历史较短 ,种子的野性还
较强 ,在发芽后期 ,发芽较零星 ,从既能最大限度地体
现其发芽能力而又尽可能地缩短检验时间出发 ,结合
表 4 ,可定末次计数时间为置床培养后 14 d。对于太
小幼苗 ,难以鉴定的 ,可延长 5d。
表 4 逐日发芽粒数记录
温度(℃)
逐日发芽粒数(d)
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
30 2 23 25 9 2 4 2 2 1 0 1 2 0 0
3 小 结
3.1 项目组用以上技术对 2006、2007、2008年收集的
苦玄参种子进行了发芽试验 ,得到比较一致的结果。
通过以上研究 ,苦玄参的发芽技术规定可初步定为:
种(变
种)名 学名 发芽床 温度(℃)初次计数时间 末次计数时间
附加说明 ,包括破除
休眠的建议
苦玄参 Picriafel-teraeLour. TP 30 10 14
3.2 苦玄参的幼苗发育类型编码可定为 A2.1.2.1,
即农业种 ,双子叶植物 ,子叶出土型 ,上胚轴伸长 ,在幼
苗评定时不考虑次生根。
3.3 温度和光照是苦玄参种子发芽的主要影响因子。
试验结果表明 ,苦玄参的适宜发芽温度为 30 ~ 35 ℃,
需光发芽。因此 ,在广西 ,生产上可于天气正常回暖的
清明后播种 ,播后不需覆土 。
3.4 苦玄参人工栽培的年限较短 ,种子的野性较强 ,
发芽不太整齐 ,造成其发芽试验持续时间较长 ,应进行
生活力快速测定与发芽试验结果相关性的研究 ,以简
化检验程序 。
参考文献:
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科学技术出版社 , 1992:22-24.
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北京:中国农业出版社 , 1999.
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检验规程 [ M] .北京:中国标准出版社 , 1995.
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[ 5]董青松 ,蒙爱东 , 欧彪 , 等.广金钱草种子发芽试验的研究
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第 29卷 第 1期 2010年 1月               种 子 (Seed)                Vol.29 No.1 Jan.