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卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔抗氧化活性研究



全 文 :天然产物研究与开发 NatProdResDev2009, 21:470-472
文章编号:1001-6880(2009)03-0470-03
 
 
 收稿日期:2008-05-15   接受日期:2008-07-08
 基金项目:河南省科技厅基础前沿计划(0723004502);河南省教
育厅基础研究计划(2008A360002)
*通讯作者 E-mail:kangweny@hotmail.com
卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔抗氧化活性研究
康文艺 1, 2* ,李彩芳 1, 2 ,张 丽 1, 2
1河南大学天然药物研究所 ,开封 475004;2河南大学药学院 ,开封 475004
摘 要:利用 3种方法 DPPH、ABTS和 FRAP分析两种苦苣苔科植物卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔提取物总抗氧化
作用。在 4种提取物中 , 卷丝苣苔甲醇提取物对 DPPH自由基的清除能力(IC50 =4.92 μg/mL)比阳性对照 BHT
作用强(IC50 =18.79 μg/mL);卷丝苣苔甲醇提取物对 ABTS自由基的清除能力(IC50 =11.10 μg/mL)比 BHT
(IC50 =6.04 μg/mL)略低;卷丝苣苔甲醇提取物还原 Fe3+的能力(FRAP=2403.77±38.05 μmolTE/g)比 BHT
(FRAP=1748.49±3.46 μmolTE/g)高。在 4种提取物中 , 卷丝苣苔甲醇提取物抗氧化能力最高。
关键词:卷丝苣苔;勐醒芒毛苣苔;抗氧化活性;DPPH;ABTS;FRAP
中图分类号:Q946.91;R285 文献标识码:A
AntioxidantactivityofCoralodiscuskingianusand
Aeschynanthusmengxingensis
KANGWen-yi1, 2* , LICai-fang1, 2 , ZHANGLi1, 2
1InstituteofNaturalProducts, HenanUniversity, Kaifeng475004 , China;
2PharmaceuticalColegeofHenanUniversity, Kaifeng475004 , China
Abstract:ThetotalantioxidanteffectofextractsfromCorallodiscuskingianusandAeschynanthusmengxingensiswasas-
sayedbythreemethods, namely, DPPHradicalscavenging, ABTSradicalscavengingandferricreducingantioxidantpow-
er(FRAP)assay.Infourextractsfromtwoplants, themethanolextractfromC.kingianusshowedahigheractiveofDP-
PHradicalscavengingactivitywithIC50 valueof4.92 μg/mLthanthatofpositivecontrolBHTwithIC50 valueof18.79
μg/mL.ThemethanolextractfromC.kingianusshowedalessactiveofABTSradicalscavengingactivitywithIC
50
value
of11.10 μg/mLthanthatofBHTwithIC50 valueof6.04 μg/mL.ThemethanolextractfromC.kingianusexhibited
higheractiveofferricreducingantioxidantpowerswithFRAPvalueof(2403.77±38.05)μmolTE/gthanthatofBHT
withFRAPvalueof(1748.49±3.46)μmolTE/g.ThemethanolextractfromC.kingianusshowedthehighestantioxi-
dantactivityamongthefourextractsofC.kingianusandA.mengxingensis.
Keywords:Coralodiscuskingianus(Craib)Burt;AeschynanthusmengxingensisW.T.Wang;antioxidantactivity;DP-
PH;ABTS;FRAP
  苦苣苔科(Gesneriaceae)植物全世界有 120 ~
140个属 , 2500 ~ 3700种。主要分布在赤道附近 ,部
分分布在欧洲 、中国和日本。我国有 54个属 ,约
438种 ,其中药用植物 100多种 ,主要分布在长江以
南及河南 、河北等省区 。该科植物所含的化学成分
主要类型有黄酮类 、苯乙醇类 、醌类和萜类等 ,具有
显著的抑菌 、抗炎 、抗病毒 、止咳 、祛痰 、平喘及抗蛇
毒活性 [ 1] 。我们在对该科珊瑚苣苔属植物卷丝苣
苔(Coralodiscuskingianus(Craib)Burt)和芒毛苣
苔属植物勐醒芒毛苣苔(Aeschynanthusmengxingen-
sisW.T.Wang)的系统研究中 ,发现抗氧化方面的
作用未见报道。因此 ,我们采用目前普遍应用的
DPPH、ABTS和 FRAP方法 ,对卷丝苣苔和勐醒芒毛
苣苔总抗氧化活性进行研究 。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
卷丝苣苔于 2003年 5月采集于西藏地区 ,勐醒
芒毛苣苔于 2004年 5月采集于云南西双版纳地区 ,
由中科院西双版纳植物园崔景云高级工程师鉴定 ,
标本存于河南大学天然药物研究所。 DPPH(日本
东京化成工业株式会社), BHT、TPTZ(Acrosorgan-
DOI :10.16333/j.1001-6880.2009.03.003
ics), ABTS(Fluka), Trolox(Aldrich)。
1.2 主要仪器
UV-2000型紫外可见分光光度计(尤尼可上海
仪器有限公司);电子天平(梅特勒-托利多仪器有限
公司);CS-H1型混合器(北京博励阳科技公司);各
种移液器及枪头等。
1.3 卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔活性成分提取
卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔全株 ,粉碎 ,分别用氯
仿和甲醇室温下浸泡 7d,连续提取 3次 ,减压回收 ,
分别得到卷丝苣苔氯仿提取物(CKCE)、甲醇提取
物(CKME)和勐醒芒毛苣苔氯仿提取物 (AMCE)、
甲醇提取物(AMME)。
1.4 提取物抗氧化方法
1.4.1 DPPH方法
按照文献 [ 2]方法 , 测定样品及阳性对照品在
515nm处吸光度 ,并计算出对 DPPH清除能力。
1.4.2 ABTS方法
按照文献[ 3]方法 ,测定样品及阳性对照品在 734
nm处吸光度 ,并计算出对 ABTS自由基的清除能力。
1.4.3 FRAP方法
按照文献 [ 4] 方法配制 TPTZ工作液;按照文
献[ 5]方法测定样品及阳性对照品在 593 nm处吸光
度 ,结果以 Trolox当量表示 。当 Trolox浓度在 25 ~
400 μmol/L时 ,有很好线性关系(r2 =0.9990)。
2 结果与讨论
2.1 DPPH方法
结果见表 1和图 1。图 1显示 , 4个提取物中 ,
当抗氧化剂浓度在 55.56 μg/mL时 ,卷丝苣苔甲醇
提取物清除 DPPH自由基的能力(94.97%)最强 ,
勐醒芒毛苣苔甲醇提取物清除 DPPH自由基的能力
(46.46%)次之。
在实验的浓度范围内 ,当卷丝苣苔甲醇浓度在
8.33 μg/mL以下时 ,清除率随浓度增大几乎是呈线
性增加 ,当浓度在 8.33 μg/mL以上时 , 清除率不
变;勐醒芒毛苣苔甲醇提取物清除 DPPH自由基的
能力与其浓度呈线性关系(r=0.9980)。卷丝苣苔
氯仿提取物浓度在 4.17 μg/mL以下时 ,清除率随
浓度增大而增大 ,当浓度在 4.17μg/mL以上时 ,清
除率几乎不变;勐醒芒毛苣苔氯仿提取物随浓度增
加清除率缓慢增大 。
表 1 卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔不同提取物的抗氧化活性
Table1 AntioxidantactivityofdiferentextractsfromC.kingianusandA.mengxingensis
提取物
Extract
DPPH方法
IC50(μg/mL)
ABTS方法
IC50(μg/mL)
FRAP方法
μmolTE/g
CKCE - - 103.32±1.95
CKME 4.92 11.10 2403.77±38.05
AMCE - 66.87 129.26±1.95
AMME - 41.16 304.36±2.59
BHTa 18.79 6.04 1748.49±3.46
  注:aBHT为阳性对照品。 Note:aBHTwasusedaspositivecontrol.
图 1 抗氧化剂浓度对 DPPH自由基的影响
Fig.1 EffectofconcentrationofantioxidantonDPPHfree
radical
  表 1显示 ,卷丝苣苔甲醇提取物对 DPPH自由
基的清除能力最强(IC50 =4.92 μg/mL),比阳性对
照 BHT(IC50 =18.79μg/mL)高。
4个提取物和 BHT对 DPPH自由基的清除能力
顺序为:CKME>BHT>CKCE>AMCE>AMME(抗
氧化剂浓度在实验浓度范围内 16.67 μg/mL以下
时);KME>BHT>AMME>CKCE>AMCE(抗氧化
剂浓度在实验浓度范围内 16.67 μg/mL以上时)。
2.2 ABTS方法
结果见表 1和图 2。图 2显示 , 3个提取物中 ,
卷丝苣苔甲醇提取物对 ABTS自由基的清除能力最
强 ,当其浓度在 25μg/mL以下时 ,清除率随浓度增
大几乎是呈线性增加 ,当浓度在 25 μg/mL以上时 ,
清除率不再变化。在实验浓度范围内 ,勐醒芒毛苣
471Vol.21       康文艺等:卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔抗氧化活性研究  
苔甲醇和氯仿提取物清除 ABTS自由基的能力与其
浓度呈线性关系 (相关系数分别为 0.9873和
0.9827)。卷丝苣苔氯仿提取物浓度在 100 μg/mL
时 , ABTS自由基清除率是 21.76%。
图 2 抗氧化剂浓度对 ABTS自由基的影响
Fig.2 EffectofconcentrationofantioxidantonABTSfreeradi-
cal
  表 1显示 , 4个提取物中 ,卷丝苣苔甲醇提取物
对 ABTS自由基的清除能力最强(IC50 =11.10 μg/
mL),比阳性对照 BHT(IC50 =6.04 μg/mL)的清除
能力略低。 4个提取物和 BHT对 ABTS自由基的清
除能力顺序为:BHT>CKME>AMME>AMCE>
CKCE。
2.3 FRAP(铁离子还原能力)方法
表 1显示 , 4个提取物中 ,卷丝苣苔甲醇提取物
还原 Fe3+的能力最强(FRAP值为 2403.77±38.05
μmolTE/g),比阳性对照 BHT(FRAP值为 1748.49
±3.46 μmolTE/g)高约 27%;卷丝苣苔氯仿提取
物 、勐醒芒毛苣苔甲醇和氯仿提取物均比 BHT还原
Fe3+的能力低。 4个提取物和 BHT对 Fe3+的还原
能力顺序为:CKME>BHT>AMME>AMCE>
CKCE。
3种方法对苦苣苔科植物卷丝苣苔和勐醒芒毛
苣苔的研究结果显示 ,随着极性增大 ,提取物的抗氧
化活性逐渐增大 ,即甲醇部分的抗氧化活性高于氯
仿部分的活性;还可以看出 ,同一方法测定下的同一
提取物 ,卷丝苣苔的抗氧化活性较勐醒芒毛苣苔的活
性高 。同时 ,因反应机制和反应条件的不同 ,这 3种
方法测定样品的抗氧化结果也不同。可以看出 ,植
物的抗氧化活性与植物来源 、提取溶剂的种类和极
性有关 ,也与抗氧化活性测定的体系有关[ 6] 。
3 结论
  本文首次利用 DPPH、ABTS和 FRAP方法对苦
苣苔科植物卷丝苣苔和勐醒芒毛苣苔的体外抗氧化
活性进行了研究 , 发现卷丝苣苔甲醇提取物清除
DPPH自由基和还原 Fe3 +的能力均比阳性对照 BHT
好 ,其清除 ABTS自由基的能力比 BHT略低。研究
结果表明 ,卷丝苣苔甲醇提取物具有较好的抗氧化
能力 。
参考文献
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